丙型肝炎病毒N′-核心蛋白RNA结合区的定位
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沈阳军区第202医院传染科 110003沈阳 关德玉；何长清；武英；黄敦武；路立业；刘碧坚
丙型肝炎病毒|核心蛋白|RNA结合活性
参见附件(67kb)。
沈阳军区第202医院传染科 110003沈阳 关德玉；何长清；武英；黄敦武；路立业；刘碧坚
关键词：丙型肝炎病毒；核心蛋白；RNA结合活性
摘要：目的 对丙型肝炎病毒核心蛋白的RNA结合区进行详细定位 ,为制备缺失RNA结合活性突变体做准备。方法 构建GST融合丙型肝炎病毒核心蛋白不同区域片段表达质粒 ,在大肠杆菌中表达相应蛋白并用glutathionesepharose 4B进行纯化 ,利用二次电泳法检测RNA的结合活性 ,利用时相差电泳法比较不同区域RNA结合活性的强弱。结果 核心蛋白第 1～ 132位氨基酸 (AA)之间的片段得到了良好的表达和纯化 ,表达的蛋白经Westernblot得到确认。二次电泳后的放射自显影结果显示 ,第 1～ 10AA、19～ 45AA、80～ 132AA片段无RNA结合活性 ,而含有 10～ 16AA ,45～ 80AA的片段...
沈阳军区第202医院传染科 110003沈阳 关德玉；何长清；武英；黄敦武；路立业；刘碧坚
关键词：丙型肝炎病毒；核心蛋白；RNA结合活性
摘要：目的 对丙型肝炎病毒核心蛋白的RNA结合区进行详细定位 ,为制备缺失RNA结合活性突变体做准备。方法 构建GST融合丙型肝炎病毒核心蛋白不同区域片段表达质粒 ,在大肠杆菌中表达相应蛋白并用glutathionesepharose 4B进行纯化 ,利用二次电泳法检测RNA的结合活性 ,利用时相差电泳法比较不同区域RNA结合活性的强弱。结果 核心蛋白第 1～ 132位氨基酸 (AA)之间的片段得到了良好的表达和纯化 ,表达的蛋白经Westernblot得到确认。二次电泳后的放射自显影结果显示 ,第 1～ 10AA、19～ 45AA、80～ 132AA片段无RNA结合活性 ,而含有 10～ 16AA ,45～ 80AA的片段...
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