α-2b干扰素对柯萨奇B组病毒抗原清除效应的研究
作者：方 凤 沈 茜* 蒋瑾瑾 蒋玉淮 方超萍
单位：上海第二军医大学附属长海医院(200433) 儿科
关键词：柯萨奇B组病毒；抗原；α-2b干扰素
α 摘要 系统探讨α-2b干扰素在呼吸道感染儿对阳性的柯萨奇B组病毒抗原(CVB-Ag)的消除效应。CVB-Ag阳性呼吸道感染病儿38例，其中上呼吸道感染16例，下呼吸道感染22例，年龄2～10岁，平均4.55+3.81岁，男21例，女17例。分A(18例)，B(20例)2组。CVB-Ag和CVB-IgM测定采用ELISA法。α-2b干扰素，皮下或肌肉注射5～7天，每天100万U。连续3周观测2组CVB-Ag阳性率变化，并分析CVB性心肌炎发生率。结果显示：(1) 用α-2b干扰素后1～2周抗原阳性率明显降低(P<0.05)。(2) 用α-2b干扰素后CVB性心肌炎发病率明显降低(P<0.01)。(3) α-2b干扰素不良反应轻。提示α-2b干扰素有快速消除CVB抗原的功效，并对降低CVB性心肌炎的发病有益。
, 百拇医药
A Study of Interferon α-2b in Eliminating CVB Antigen
Fang Feng, Shen Qian, Jiang Jingjing, et al.
Department of pediatrics, Changhai Hospital, Shanghai 200433
Abstract To study systemically the therapeutical efficacy of interferon α-2b in cosackievirus B(CVB) in children with respiratory infection, 38 with cosackievirus B antigen (CVB-Ag) positive respiratory tract infection cases were divided into two groups: Group A(18 cases), routine treatment and Group B(20 cases), routine treatment plus interferon α-2b. CVB-Ag and CVB-IgM were tested by ELISA method. Interferon α-2b was injected, subcutaneously or intramuscularly for 5～7 days, 1 million U a day. The results showed that (1) the CVB-Ag positive rate was significantly decreased one or two weeks after using interferon α-2b;(2) there was lower incidence of CVB myocarditis in interferon α-2b group; (3) the adverse reaction was mild. Conclusions: Interferon α-2b was demonstrated rapid eliminating effect of CVB-Ag and provided the benefit of lowering the incidence of CVB myocarditis.
, http://www.100md.com
Key words: Cosackievirus B; Antigen; Interferon α-2b
柯萨奇病毒(Coxsackievirus)属小RNA病毒，分为A，B 2组，B组病毒(简称CVB)与病毒性心肌炎，扩张性心肌病密切相关，在此方面我们也做过研究[1～3]，病毒性心肌炎往往有呼吸道感染的病史，如果能打断呼吸道感染发展为病毒性心肌炎的环节，对预防病毒性心肌炎定有意义，因此我们对呼吸道感染儿进行柯萨奇B病毒抗原(CVB-Ag)和抗体(CVB-IgM)同时检测，并重点探讨干扰素对CVB-Ag的清除效应。
资料与方法
1. 临床资料 观察1995年6月至1997年5月住院的呼吸道感染患儿161例，其中CVB-Ag阳性38例，重点观察38例CVB-Ag阳性患儿的临床变化过程。38例中上呼吸道感染16例，下呼吸道感染22例，年龄2～10岁，平均4.55+3.81岁，男21例，女17例。分A(18例)，B(20例)2组，2组间T细胞亚群，NK细胞活性和LAK细胞活性变化无统计学差异。A组常规治疗(维生素C，能量合剂，丹参)；B组常规治疗加干扰素。
, http://www.100md.com
2. 观察项目 每周监测血清柯萨奇B病毒抗原(CVB-Ag)和IgM抗体(CVB-IgM)。CVB-Ag和CVB-IgM测定：采用ELISA法：CVB1-B6可溶性病毒抗原或抗体→4℃过夜→Tris-Hcl洗3次→加入检测样本(1%BAS液将血清等比稀释)37℃，2h→洗3次→加入酶标记的人球蛋白→37℃2h OPD-H2O2底物着色→在492nm波长下测OD值。(OD≥2阴性对照为阳性)
3. 干扰素应用方法 采用美国先灵葆雅公司生产的α-2b干扰素，皮下或肌肉注射，5～7天，每天100万U。
4. 分析方法 (1) α-2b干扰素治疗后连续3周CVB-Ag阳性率，CVB-IgM阳性率；(2) 病毒性心肌炎的发生率，病毒性心肌炎根据九省市小儿病毒性心肌炎协作组制定的诊断标准建立诊断[4]；(3) α-2b干扰素应用的不良反应。统计分析采用卡方检验。
, 百拇医药
结果
1. 治疗1周后A组CVB-Ag阳性人数14例，阳性率为77.78%,CVB-IgM阳性人数9例，阳性率为50.00%；B组CVB-Ag阳性人数9例，阳性率为45.00%，CVB-IgM阳性人数13例，阳性率为65.00%，见表1。
表1 治疗1周后CVB-Ag和CVB-IgM阳性率变化
n
CVB-Ag阳性
CVB-IgM阳性
人数
阳性率
人数
阳性率
, 百拇医药
A组
18
14
77.78
9
50.00
B组
20
9
45.00*
13
65.00
注：*P<0.05
, http://www.100md.com
2. 2周后A组CVB-Ag阳性人数11例，阳性率为61.11%，CVB-IgM阳性人数12例，阳性率为70.06%；B组CVB-Ag阳性人数5例，阳性率为25.00%；CVB-IgM阳性人数15例，阳性率为75.00%，见表2。
表2 治疗2周后CVB-Ag和CVB-IgM阳性率变化
n
CVB-Ag阳性
CVB-IgM阳性
人数
阳性率
人数
阳性率
A组
, 百拇医药
18
11
61.11
12
70.06
B组
20
5
25.00*
15
75.00
注：*P<0.05
3. 3周后A组CVB-Ag阳性人数7例，阳性率为38.89%；CVB-IgM阳性人数13例，阳性率为83.33%；B组CVB-Ag阳性人数4例，阳性率为20.00%；CVB-IgM阳性人数10例，阳性率为50.00%，各参数均无统计学差异。
, 百拇医药
4. 病毒性心肌炎的发生率 161例呼吸道感染患儿中有11例2～3周后出现心脏增大或明显的心电图改变(多发，多源，或联律早搏或ST-T改变)被诊断为病毒性心肌炎，其中CVB-Ag阳性8例(72.72%)。8例中A组7例(87.50%)，B组1例(12.50%)，B组并发病毒性心肌炎比率明显低于A组(P<0.01)。
5. 用药反应 发热6例(30.00%)，体温38～39℃(肛温)，持续1～2天，患儿多能耐受，无需停药。
讨论
α-2b干扰素在临床应用较广泛，但对CVB感染的治疗国内报道尚少[1]，国外在CVB性心肌炎和心肌病中应用α-干扰素治疗后临床症状和预后改善[5～7]，α-干扰素疗程较长，需3～6个月。在CVB性心肌炎时，我们也探讨过α-2b干扰素的应用价值[1]，本文较系统的分析CVB-Ag阳性呼吸道感染病儿应用α-2b干扰素的效应，结果显示：治疗1周后便对CVB抗原有清除效应，第1周和第2周抗原阳性率均明显低于未用α-2b干扰素组，第3周CVB抗原2组间阳性率并无差异。说明机体CVB抗原有自然削减趋势，自身的CVB抗原清除能力与体内T细胞亚群，NK细胞活性和LAK细胞活性状态直接相关[1]，本组在相似的T细胞亚群，NK细胞活性和LAK细胞活性状态时，B组出现前2周CVB抗原阳性率下降速度快，更重要的是B组并发病毒性心肌炎比率明显低于A组，提示体内CVB抗原持续存在，病毒性心肌炎危险性将增加，α-2b干扰素的早期短程应用，有快速清除CVB抗原的功效，可打断呼吸道感染发展为病毒性心肌炎这一环节，对预防病毒性心肌炎很有意义，CVB-IgM阳性率连续3周观察2组间均无统计学差异，表明α-2b干扰素并无加强CVB-IgM产生的证据。第1周和第2周抗原阳性率明显下降，而CVB-IgM产生不增加，说明α-2b干扰素有直接抗CVB的作用。疗程仅5～7天，很有临床推广价值。
, 百拇医药
* 实验诊断科
参考文献
[1] 方凤，沈茜，欧阳建华，等.CVB感染儿细胞免疫状态对干扰素疗效的影响.第二军医大学学报，1997，18(2)：170.
[2] 沈茜，汪美先，章同华，等.实验性小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎自然杀伤细胞活性和干扰素测定.第二军医大学学报，1993，14(4)：344.
[3] 沈茜，汪美先，章同华，等.鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎淋巴细胞亚群及NK细胞的免疫组化研究.中华微生物和免疫学杂志，1992，12(5)：329.
[4] 吴瑞萍，胡亚美，江载芳.心肌疾病.诸福棠实用儿科学(第6版)，北京：人民卫生出版社，1996，1491～1496.
[5] Stille SM, Heim A, Figulla HR. Subclassification of dilated cardiomyopathy and interferon treatment. Eur Heart J， 1995, 16(1) 147～9.
, 百拇医药
[6] Heim A, Brehm C, Stille SM, et al. Cultured human myocardial fibroblasts of pediatric origin: natural human interferon-alpha is more effective than recombinant interferon-alpha 2a in carrier-state coxsackievirus B3 replication. J Mol Cell Cardiol, 1995，27(10)：2199～208.
[7] Heim A, Stille SM, Kandolf R, et al. Enterovirus-induced myocarditis: hemodynamic deterioration with immunosuppressive therapy and successful application of interferon-alpha. Clin Cardiol, 1994, 17(10):563～5.
(1997-08-06收稿)
(1997-12-01修回), 百拇医药(方 凤 沈 茜* 蒋瑾瑾 蒋玉淮 方超萍)
单位：上海第二军医大学附属长海医院(200433) 儿科
关键词：柯萨奇B组病毒；抗原；α-2b干扰素
α 摘要 系统探讨α-2b干扰素在呼吸道感染儿对阳性的柯萨奇B组病毒抗原(CVB-Ag)的消除效应。CVB-Ag阳性呼吸道感染病儿38例，其中上呼吸道感染16例，下呼吸道感染22例，年龄2～10岁，平均4.55+3.81岁，男21例，女17例。分A(18例)，B(20例)2组。CVB-Ag和CVB-IgM测定采用ELISA法。α-2b干扰素，皮下或肌肉注射5～7天，每天100万U。连续3周观测2组CVB-Ag阳性率变化，并分析CVB性心肌炎发生率。结果显示：(1) 用α-2b干扰素后1～2周抗原阳性率明显降低(P<0.05)。(2) 用α-2b干扰素后CVB性心肌炎发病率明显降低(P<0.01)。(3) α-2b干扰素不良反应轻。提示α-2b干扰素有快速消除CVB抗原的功效，并对降低CVB性心肌炎的发病有益。
, 百拇医药
A Study of Interferon α-2b in Eliminating CVB Antigen
Fang Feng, Shen Qian, Jiang Jingjing, et al.
Department of pediatrics, Changhai Hospital, Shanghai 200433
Abstract To study systemically the therapeutical efficacy of interferon α-2b in cosackievirus B(CVB) in children with respiratory infection, 38 with cosackievirus B antigen (CVB-Ag) positive respiratory tract infection cases were divided into two groups: Group A(18 cases), routine treatment and Group B(20 cases), routine treatment plus interferon α-2b. CVB-Ag and CVB-IgM were tested by ELISA method. Interferon α-2b was injected, subcutaneously or intramuscularly for 5～7 days, 1 million U a day. The results showed that (1) the CVB-Ag positive rate was significantly decreased one or two weeks after using interferon α-2b;(2) there was lower incidence of CVB myocarditis in interferon α-2b group; (3) the adverse reaction was mild. Conclusions: Interferon α-2b was demonstrated rapid eliminating effect of CVB-Ag and provided the benefit of lowering the incidence of CVB myocarditis.
, http://www.100md.com
Key words: Cosackievirus B; Antigen; Interferon α-2b
柯萨奇病毒(Coxsackievirus)属小RNA病毒，分为A，B 2组，B组病毒(简称CVB)与病毒性心肌炎，扩张性心肌病密切相关，在此方面我们也做过研究[1～3]，病毒性心肌炎往往有呼吸道感染的病史，如果能打断呼吸道感染发展为病毒性心肌炎的环节，对预防病毒性心肌炎定有意义，因此我们对呼吸道感染儿进行柯萨奇B病毒抗原(CVB-Ag)和抗体(CVB-IgM)同时检测，并重点探讨干扰素对CVB-Ag的清除效应。
资料与方法
1. 临床资料 观察1995年6月至1997年5月住院的呼吸道感染患儿161例，其中CVB-Ag阳性38例，重点观察38例CVB-Ag阳性患儿的临床变化过程。38例中上呼吸道感染16例，下呼吸道感染22例，年龄2～10岁，平均4.55+3.81岁，男21例，女17例。分A(18例)，B(20例)2组，2组间T细胞亚群，NK细胞活性和LAK细胞活性变化无统计学差异。A组常规治疗(维生素C，能量合剂，丹参)；B组常规治疗加干扰素。
, http://www.100md.com
2. 观察项目 每周监测血清柯萨奇B病毒抗原(CVB-Ag)和IgM抗体(CVB-IgM)。CVB-Ag和CVB-IgM测定：采用ELISA法：CVB1-B6可溶性病毒抗原或抗体→4℃过夜→Tris-Hcl洗3次→加入检测样本(1%BAS液将血清等比稀释)37℃，2h→洗3次→加入酶标记的人球蛋白→37℃2h OPD-H2O2底物着色→在492nm波长下测OD值。(OD≥2阴性对照为阳性)
3. 干扰素应用方法 采用美国先灵葆雅公司生产的α-2b干扰素，皮下或肌肉注射，5～7天，每天100万U。
4. 分析方法 (1) α-2b干扰素治疗后连续3周CVB-Ag阳性率，CVB-IgM阳性率；(2) 病毒性心肌炎的发生率，病毒性心肌炎根据九省市小儿病毒性心肌炎协作组制定的诊断标准建立诊断[4]；(3) α-2b干扰素应用的不良反应。统计分析采用卡方检验。
, 百拇医药
结果
1. 治疗1周后A组CVB-Ag阳性人数14例，阳性率为77.78%,CVB-IgM阳性人数9例，阳性率为50.00%；B组CVB-Ag阳性人数9例，阳性率为45.00%，CVB-IgM阳性人数13例，阳性率为65.00%，见表1。
表1 治疗1周后CVB-Ag和CVB-IgM阳性率变化
n
CVB-Ag阳性
CVB-IgM阳性
人数
阳性率
人数
阳性率
, 百拇医药
A组
18
14
77.78
9
50.00
B组
20
9
45.00*
13
65.00
注：*P<0.05
, http://www.100md.com
2. 2周后A组CVB-Ag阳性人数11例，阳性率为61.11%，CVB-IgM阳性人数12例，阳性率为70.06%；B组CVB-Ag阳性人数5例，阳性率为25.00%；CVB-IgM阳性人数15例，阳性率为75.00%，见表2。
表2 治疗2周后CVB-Ag和CVB-IgM阳性率变化
n
CVB-Ag阳性
CVB-IgM阳性
人数
阳性率
人数
阳性率
A组
, 百拇医药
18
11
61.11
12
70.06
B组
20
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25.00*
15
75.00
注：*P<0.05
3. 3周后A组CVB-Ag阳性人数7例，阳性率为38.89%；CVB-IgM阳性人数13例，阳性率为83.33%；B组CVB-Ag阳性人数4例，阳性率为20.00%；CVB-IgM阳性人数10例，阳性率为50.00%，各参数均无统计学差异。
, 百拇医药
4. 病毒性心肌炎的发生率 161例呼吸道感染患儿中有11例2～3周后出现心脏增大或明显的心电图改变(多发，多源，或联律早搏或ST-T改变)被诊断为病毒性心肌炎，其中CVB-Ag阳性8例(72.72%)。8例中A组7例(87.50%)，B组1例(12.50%)，B组并发病毒性心肌炎比率明显低于A组(P<0.01)。
5. 用药反应 发热6例(30.00%)，体温38～39℃(肛温)，持续1～2天，患儿多能耐受，无需停药。
讨论
α-2b干扰素在临床应用较广泛，但对CVB感染的治疗国内报道尚少[1]，国外在CVB性心肌炎和心肌病中应用α-干扰素治疗后临床症状和预后改善[5～7]，α-干扰素疗程较长，需3～6个月。在CVB性心肌炎时，我们也探讨过α-2b干扰素的应用价值[1]，本文较系统的分析CVB-Ag阳性呼吸道感染病儿应用α-2b干扰素的效应，结果显示：治疗1周后便对CVB抗原有清除效应，第1周和第2周抗原阳性率均明显低于未用α-2b干扰素组，第3周CVB抗原2组间阳性率并无差异。说明机体CVB抗原有自然削减趋势，自身的CVB抗原清除能力与体内T细胞亚群，NK细胞活性和LAK细胞活性状态直接相关[1]，本组在相似的T细胞亚群，NK细胞活性和LAK细胞活性状态时，B组出现前2周CVB抗原阳性率下降速度快，更重要的是B组并发病毒性心肌炎比率明显低于A组，提示体内CVB抗原持续存在，病毒性心肌炎危险性将增加，α-2b干扰素的早期短程应用，有快速清除CVB抗原的功效，可打断呼吸道感染发展为病毒性心肌炎这一环节，对预防病毒性心肌炎很有意义，CVB-IgM阳性率连续3周观察2组间均无统计学差异，表明α-2b干扰素并无加强CVB-IgM产生的证据。第1周和第2周抗原阳性率明显下降，而CVB-IgM产生不增加，说明α-2b干扰素有直接抗CVB的作用。疗程仅5～7天，很有临床推广价值。
, 百拇医药
* 实验诊断科
参考文献
[1] 方凤，沈茜，欧阳建华，等.CVB感染儿细胞免疫状态对干扰素疗效的影响.第二军医大学学报，1997，18(2)：170.
[2] 沈茜，汪美先，章同华，等.实验性小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎自然杀伤细胞活性和干扰素测定.第二军医大学学报，1993，14(4)：344.
[3] 沈茜，汪美先，章同华，等.鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎淋巴细胞亚群及NK细胞的免疫组化研究.中华微生物和免疫学杂志，1992，12(5)：329.
[4] 吴瑞萍，胡亚美，江载芳.心肌疾病.诸福棠实用儿科学(第6版)，北京：人民卫生出版社，1996，1491～1496.
[5] Stille SM, Heim A, Figulla HR. Subclassification of dilated cardiomyopathy and interferon treatment. Eur Heart J， 1995, 16(1) 147～9.
, 百拇医药
[6] Heim A, Brehm C, Stille SM, et al. Cultured human myocardial fibroblasts of pediatric origin: natural human interferon-alpha is more effective than recombinant interferon-alpha 2a in carrier-state coxsackievirus B3 replication. J Mol Cell Cardiol, 1995，27(10)：2199～208.
[7] Heim A, Stille SM, Kandolf R, et al. Enterovirus-induced myocarditis: hemodynamic deterioration with immunosuppressive therapy and successful application of interferon-alpha. Clin Cardiol, 1994, 17(10):563～5.
(1997-08-06收稿)
(1997-12-01修回), 百拇医药(方 凤 沈 茜* 蒋瑾瑾 蒋玉淮 方超萍)