培哚普利对慢性缺氧高二氧化碳大鼠肺血管重建的影响
作者：杨鹏麟 喻林升 龚永生 郑绿珍 王 卫 胡良冈
单位：温州医学院附属二院(325003)内科
关键词：缺氧症；血管紧张素转换酶抑制剂；培哚普利；肺动脉高压
心肺血管病杂志990225 摘要 探讨培哚普利对常压缺氧高二氧化碳性肺动脉高压及肺血管重建的影响。采用常压低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠模型，观察肺动脉平均压(mPA)，血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及肺小血管平滑肌，外膜，内膜超微结构的变化，以及培哚普利对以上变化的影响。结果显示缺氧高二氧化碳使mPAP,AngⅡ上升，超微结构发生变化，培哚普利组mPAP，AngⅡ下降，平滑肌超微结构病变减轻。提示缺氧高二氧化碳使肺血管重建，且与AngⅡ有关，培哚普利能减轻肺血管重建。
缺氧性肺动脉高压(HPH)，发生机理尚未完全明了，肾素-血管紧张素及系统(RAS)激活可能是原因之一。不少研究表明转换酶抑制剂(ACEⅠ)在高血压、心肌梗塞后及心力衰竭等方面有肯定疗效。但ACEI防治肺动脉高压方面的研究不多。对肺血管重建的研究甚少。有关培哚普利对常压缺氧高二氧化碳肺动脉高压模型的防治尚未见报道。本研究旨在探讨培哚普利对HPH模型的肺动脉压及肺血管重建的影响。
, 百拇医药
材料与方法
1. 实验动物与模型复制 雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠27只，体重180～260g，随机分成对照组(A)、缺氧高二氧化碳处理组(B)、培哚普利治疗组(C)。采用陈鸣和等[1]报道慢性缺氧高二氧化碳大鼠动物模型。全部动物处于同一室内。除A组放在舱外饲养，B、C组均放入低氧高二氧化碳舱内，每天饲养10h,C组每日以灌胃方式给以培哚普利1mg/kg(Pernidopril,法国施维雅药厂),而A、B组灌等量的生理盐水，共4周。采用右心导管法[2]记录肺动脉平均压(mPAP)。
2. AngⅡ浓度测定 抽取颈总动脉血1.5m1，即注入含EDTA与抑肽酶的塑料离心管中离心
(4℃、10 000rpm\,10 min)后，取上清液-30℃保存。所有操作均在冰水浴中进行。采用放免法(F-2008C自动r免疫计数器，西安262厂生产)测定，AngⅡ试剂盒购自北京北方生物技术研究所。
, 百拇医药
3. 电镜切片制作 在肺门处取1×2×2mm肺组织，用2.5%戊二醛固定，Epon810包埋，700A超薄切片。H600型透射电镜(日本日立牌)观察肺小血管超微结构改变。
4. 统计处理 数据用X±SD表示。先方差齐性检验后做成组比较的t检验。AngⅡ与mPAP作相关分析。
结 果
一、 各组mPAP、AngⅡ变化见表1。
从表1可知，缺氧高二氧二化碳可使mPAP、AngⅡ上升，明显高于对照组。用培哚普利后
mPAP、AngⅡ下降，与缺氧高二氧化碳组比有明显差异，与对照组比则略高但无统计意义。mPAP与AngⅡ相关性较佳，r=0.845(P<0.01)。
表1 各组mPAP与AngⅡ的变化 组别
, 百拇医药
n
mPAP(kPa)
AngⅡ(ng/L)
正常对照组(A)
7
2.30±0.25
39±7
缺氧高二氧化碳组(B)
10
2.90±0.40△△
49±6△△
培哚普利治疗组(C)
, http://www.100md.com
10
2.42±0.43*
41±9**
注：△与A组相比，△△P<0.01；*与B组比较，*P<0.05,**P<0.01
二、 超微结构 A组肺小动脉内膜光滑，内皮细胞单层扁平排列，中膜平滑肌环状排列，外膜少许胶原纤维(图1)。B组肺小动脉内膜粗糙，内皮细胞呈立方形，胞内见水肿空泡形成，内皮下水肿明显，内弹力膜增厚并且弯曲，中膜细胞竖立呈垂直排列，其间见胶原纤维；外膜纤维母细胞增生，内质网扩张，其周胶原纤维密集排列(图2、3)。C组内、外膜改变同B组，中膜平滑肌变成环状排列，面积缩小(图4、5)。
, 百拇医药
图1 A组电镜见平滑肌细胞环形排列(×8000)
图2 B组电镜见内皮细胞竖立，胞内水肿，出现空泡，平滑肌细胞排列紊乱(×8000)
图3 B组电镜见内弹力膜不规则增厚，平滑肌细胞垂直排列，外膜胶原纤维丰富(×8000)
图4 C组电镜内膜见同B组，中膜平滑肌环形排列(×6000)
图5 C组电镜内膜变化同B组，中膜平滑肌环形排列(×6000)
, 百拇医药
讨 论
目前认为肺血管反应性增强和结构重建是HPH的主要病理生理基础，涉及血管内皮，血管活性物质，神经调节等，而AngⅡ在HPH发病中的意义尚有争论。本研究发现血清中AngⅡ浓度升高与mPAP成正相关与文献报道一致[3]，AngⅡ浓度在缺氧时升高的原因可能与肺局部血管紧张素转化酶活性增加有关[4]，AngⅡ是一种生长促进激素可能通过AT1受体而实现，或在缺氧等病理情况下促进内皮素(ET)的释放[5]，ET与AngⅡ一样都有促进血管平滑肌细胞增生，导致血管的重建。本实验缺氧高二氧化碳时，血管平滑肌增多增大，竖立且重新排列，说明血管重建明显。
ACEI自问世以来已成为治疗高血压、充血性心衰的重要药物，证实对心肌梗塞后的心室重建有明显的抑制作用，其一方面通过抑制AngⅠ转变成AngⅡ，使AngⅡ促生长因子生成量减少，另一方面通过抑制激肽酶Ⅱ使缓激肽水解减少[6]，缓激肽作为一种抗生长因子而防止心室重建。但ACEI在治疗肺动脉高压及防止肺血管重建方面相对迟缓，未见有培哚普利在这方面的报道。我们用培哚普利治疗慢性肺动脉高压大鼠，使其肺动脉压下降，AngⅡ下降，阻止了肺血管平滑肌的重建，但培哚普利不能阻止HPH模型血管外膜及内膜的改变。因此，本实验提示AngⅡ在常压高二氧化碳HPH模型中确实参与了肺血管的重建，尤其中膜平滑肌，培哚普利对此模型有降压作用及一定的防治血管重建作用。
, 百拇医药
参考文献
[1]陈鸣和，蔡孔长，蒋仲荪，等.慢性常压缺氧高二氧化碳对大鼠心肺功能与结构的影响.温州医学院学报，1994，24：191.
[2]孙波等,刘文利,右心导管测定大鼠肺动脉压的实验方法.中国医学科学院院报,1994,6:465.
[3]普广斌，段生福.慢性阻塞性肺病患者肾素-血管紧张素-醛固酮系统的变化.中华结核和呼吸杂志，1989，12：256.
[4]蔡闯，邹霞英，辛达临，等.肺动脉血管紧张素转换酶在缺氧性肺动脉高压演进过程中的作用.中华结核和呼吸杂志，1997，20：215.
[5]杨和平，邢德智，汤健，等.血管内皮素和血管系统紧张素Ⅱ释放的相互关系，中国病理生理杂志，1992，8：610.
[6]Konstam MA. Role of angiotensin converting enzyme inhibitors in preventing left ventricular remodeling following myocardial in farction. Eur Heart J, 1995,16:42～48.
(1998-09-09收稿)
(1999-01-20修回), 百拇医药
单位：温州医学院附属二院(325003)内科
关键词：缺氧症；血管紧张素转换酶抑制剂；培哚普利；肺动脉高压
心肺血管病杂志990225 摘要 探讨培哚普利对常压缺氧高二氧化碳性肺动脉高压及肺血管重建的影响。采用常压低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠模型，观察肺动脉平均压(mPA)，血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及肺小血管平滑肌，外膜，内膜超微结构的变化，以及培哚普利对以上变化的影响。结果显示缺氧高二氧化碳使mPAP,AngⅡ上升，超微结构发生变化，培哚普利组mPAP，AngⅡ下降，平滑肌超微结构病变减轻。提示缺氧高二氧化碳使肺血管重建，且与AngⅡ有关，培哚普利能减轻肺血管重建。
缺氧性肺动脉高压(HPH)，发生机理尚未完全明了，肾素-血管紧张素及系统(RAS)激活可能是原因之一。不少研究表明转换酶抑制剂(ACEⅠ)在高血压、心肌梗塞后及心力衰竭等方面有肯定疗效。但ACEI防治肺动脉高压方面的研究不多。对肺血管重建的研究甚少。有关培哚普利对常压缺氧高二氧化碳肺动脉高压模型的防治尚未见报道。本研究旨在探讨培哚普利对HPH模型的肺动脉压及肺血管重建的影响。
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材料与方法
1. 实验动物与模型复制 雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠27只，体重180～260g，随机分成对照组(A)、缺氧高二氧化碳处理组(B)、培哚普利治疗组(C)。采用陈鸣和等[1]报道慢性缺氧高二氧化碳大鼠动物模型。全部动物处于同一室内。除A组放在舱外饲养，B、C组均放入低氧高二氧化碳舱内，每天饲养10h,C组每日以灌胃方式给以培哚普利1mg/kg(Pernidopril,法国施维雅药厂),而A、B组灌等量的生理盐水，共4周。采用右心导管法[2]记录肺动脉平均压(mPAP)。
2. AngⅡ浓度测定 抽取颈总动脉血1.5m1，即注入含EDTA与抑肽酶的塑料离心管中离心
(4℃、10 000rpm\,10 min)后，取上清液-30℃保存。所有操作均在冰水浴中进行。采用放免法(F-2008C自动r免疫计数器，西安262厂生产)测定，AngⅡ试剂盒购自北京北方生物技术研究所。
, 百拇医药
3. 电镜切片制作 在肺门处取1×2×2mm肺组织，用2.5%戊二醛固定，Epon810包埋，700A超薄切片。H600型透射电镜(日本日立牌)观察肺小血管超微结构改变。
4. 统计处理 数据用X±SD表示。先方差齐性检验后做成组比较的t检验。AngⅡ与mPAP作相关分析。
结 果
一、 各组mPAP、AngⅡ变化见表1。
从表1可知，缺氧高二氧二化碳可使mPAP、AngⅡ上升，明显高于对照组。用培哚普利后
mPAP、AngⅡ下降，与缺氧高二氧化碳组比有明显差异，与对照组比则略高但无统计意义。mPAP与AngⅡ相关性较佳，r=0.845(P<0.01)。
表1 各组mPAP与AngⅡ的变化 组别
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n
mPAP(kPa)
AngⅡ(ng/L)
正常对照组(A)
7
2.30±0.25
39±7
缺氧高二氧化碳组(B)
10
2.90±0.40△△
49±6△△
培哚普利治疗组(C)
, http://www.100md.com
10
2.42±0.43*
41±9**
注：△与A组相比，△△P<0.01；*与B组比较，*P<0.05,**P<0.01
二、 超微结构 A组肺小动脉内膜光滑，内皮细胞单层扁平排列，中膜平滑肌环状排列，外膜少许胶原纤维(图1)。B组肺小动脉内膜粗糙，内皮细胞呈立方形，胞内见水肿空泡形成，内皮下水肿明显，内弹力膜增厚并且弯曲，中膜细胞竖立呈垂直排列，其间见胶原纤维；外膜纤维母细胞增生，内质网扩张，其周胶原纤维密集排列(图2、3)。C组内、外膜改变同B组，中膜平滑肌变成环状排列，面积缩小(图4、5)。
, 百拇医药
图1 A组电镜见平滑肌细胞环形排列(×8000)
图2 B组电镜见内皮细胞竖立，胞内水肿，出现空泡，平滑肌细胞排列紊乱(×8000)
图3 B组电镜见内弹力膜不规则增厚，平滑肌细胞垂直排列，外膜胶原纤维丰富(×8000)
图4 C组电镜内膜见同B组，中膜平滑肌环形排列(×6000)
图5 C组电镜内膜变化同B组，中膜平滑肌环形排列(×6000)
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讨 论
目前认为肺血管反应性增强和结构重建是HPH的主要病理生理基础，涉及血管内皮，血管活性物质，神经调节等，而AngⅡ在HPH发病中的意义尚有争论。本研究发现血清中AngⅡ浓度升高与mPAP成正相关与文献报道一致[3]，AngⅡ浓度在缺氧时升高的原因可能与肺局部血管紧张素转化酶活性增加有关[4]，AngⅡ是一种生长促进激素可能通过AT1受体而实现，或在缺氧等病理情况下促进内皮素(ET)的释放[5]，ET与AngⅡ一样都有促进血管平滑肌细胞增生，导致血管的重建。本实验缺氧高二氧化碳时，血管平滑肌增多增大，竖立且重新排列，说明血管重建明显。
ACEI自问世以来已成为治疗高血压、充血性心衰的重要药物，证实对心肌梗塞后的心室重建有明显的抑制作用，其一方面通过抑制AngⅠ转变成AngⅡ，使AngⅡ促生长因子生成量减少，另一方面通过抑制激肽酶Ⅱ使缓激肽水解减少[6]，缓激肽作为一种抗生长因子而防止心室重建。但ACEI在治疗肺动脉高压及防止肺血管重建方面相对迟缓，未见有培哚普利在这方面的报道。我们用培哚普利治疗慢性肺动脉高压大鼠，使其肺动脉压下降，AngⅡ下降，阻止了肺血管平滑肌的重建，但培哚普利不能阻止HPH模型血管外膜及内膜的改变。因此，本实验提示AngⅡ在常压高二氧化碳HPH模型中确实参与了肺血管的重建，尤其中膜平滑肌，培哚普利对此模型有降压作用及一定的防治血管重建作用。
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参考文献
[1]陈鸣和，蔡孔长，蒋仲荪，等.慢性常压缺氧高二氧化碳对大鼠心肺功能与结构的影响.温州医学院学报，1994，24：191.
[2]孙波等,刘文利,右心导管测定大鼠肺动脉压的实验方法.中国医学科学院院报,1994,6:465.
[3]普广斌，段生福.慢性阻塞性肺病患者肾素-血管紧张素-醛固酮系统的变化.中华结核和呼吸杂志，1989，12：256.
[4]蔡闯，邹霞英，辛达临，等.肺动脉血管紧张素转换酶在缺氧性肺动脉高压演进过程中的作用.中华结核和呼吸杂志，1997，20：215.
[5]杨和平，邢德智，汤健，等.血管内皮素和血管系统紧张素Ⅱ释放的相互关系，中国病理生理杂志，1992，8：610.
[6]Konstam MA. Role of angiotensin converting enzyme inhibitors in preventing left ventricular remodeling following myocardial in farction. Eur Heart J, 1995,16:42～48.
(1998-09-09收稿)
(1999-01-20修回), 百拇医药