烟草雾吸入导致慢阻肺机制的实验研究——大鼠Clara细胞结构及其分泌蛋白的变化
作者：迟春花 何冰 汤秀英 张红
单位：北京医科大学第一医院，100034，呼吸科
关键词：肺疾病；阻塞性；非纤毛上皮细胞
心肺血管病杂志000320
摘要 为探讨烟草雾吸入诱导的慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道Clara细胞及其分泌蛋白(又称Clara细胞10kDa蛋白，CC10)表达的变化，采用自制的染毒箱，使大鼠吸入烟草雾制作COPD模型，对Clara细胞进行电镜及免疫组化观察，并测定大鼠气道阻力及呼吸系统总顺应性。COPD大鼠终末及呼吸性细支气管Clara细胞数量减少，胞浆内滑面内质网扩张；终末及呼吸性细支气管上皮细胞CC10表达减少；呼吸功能检查显示气道阻力增加、呼吸系统总顺应性下降；气道上皮细胞CC10阳性细胞百分率与气道阻力呈负相关。COPD大鼠终末及呼吸性细支气管上皮细胞Clara细胞数量减少，气道上皮细胞CC10表达减少，CC10阳性细胞百分率与气道阻力呈负相关、与动态顺应性呈正相关。这可能与大鼠气道阻力增加及呼吸系统总顺应性下降有关。
, 百拇医药
Study on the Pathogenesis of Chronic Obstructive Pulmonary Disease Induced by Tobacco Smoke
——The Changes of Clara Cells' Structure and Clara Cell Secretory Protein in Rats
Chi Chunhua,He Bing,Tang Xiuying,et al.
(Department of Respiratory Medicine,the First Hospital,Beijing Medical university ，100034)
Abstract To study the changes of Clara cells and Clara cell secretory protein (also designated Clara cell 10 kDa protein,CC10) in rats with chronic obstructive pulmonary disease(COPD)induced by tobacco smoke.The rat models of COPD induced by cigarette smoke were made to investigate the Clara cells and the expression of CC10 using electron microscopic and immunohistochemistry.The resistance of airway and the total compliance of respiratory system were measured too.In COPD rats,the proportion of Clara cells in terminal and respiratory bronchioles decreased.The expression of CC10 in terminal and respiratory bronchioles decreased.The percentage of CC10 positive cells in airways correlated negatively with airway resistance and positively with dynamic compliance.In COPD group both the amount of Clara cells and the expression of CC10 in terminal and respiratory bronchioles decreased and the percentage of CC10 positive cells in airways correlated positively with airway resistance.This may correlate with the increasing of airway resistance in COPD.
, 百拇医药
Key words：Lung diseases/obstructive;Clara cell
非纤毛上皮细胞，也称Clara细胞，主要分布于细支气管，具有多种功能，是细支气管上皮的前体细胞，可代谢细胞色素P-450单氨氧化酶，分泌表面活性物质。Clara细胞10kDa蛋白(CC-10)是Clara细胞分泌的重要成分之一，近年来认为它在小气道的防御机制中起重要作用，如：可结合多氯联苯[1]；具有抑制磷脂酶A2、抗蛋白酶活性作用[2，3]。
慢性阻塞性肺病(COPD)是慢性气道炎症性疾病，其特点是小气道阻力增高、肺动态顺应性下降。其发病机理尚未完全清楚。本研究模拟吸烟导致人COPD发生的病生理过程，采用烟草雾吸入诱导COPD大鼠模型，观察COPD发病过程中Clara细胞超微结构变化及小气道CC10表达的变化，并测定气道阻力及呼吸系统总顺应性，进而探讨Clara细胞在COPD发病中的作用。
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材料与方法
1.COPD大鼠模型制作 自制有机玻璃染毒箱，80cm×60cm×50cm，上方有一直径1.2cm的通气孔；吸烟小室3cm×1.5cm×1.5cm，每次吸烟时同时将2支点燃的香烟的过滤嘴部分与吸烟小室相连，烟雾经改良的注射器装置由吸烟小室吸出后注入染毒箱内。香烟采用北京卷烟厂生产的长乐牌过滤嘴香烟，含焦油19mg，尼古丁1.2mg。大鼠每日吸烟3次，每次持续吸入新鲜的香烟烟雾30min，两次吸烟间隔3h。第1天每次吸烟8支，第2、3天每次吸烟10支，第3天以后每次均吸入14支。
实验动物及分组 雄性Wister大鼠18只，体重250±20g，由北京医科大学实验动物中心提供，随机分为3组，每组各6只：(1)对照组，不吸烟，饲养至7周末处死；(2)吸烟3周组，吸烟至第3周末处死；(3)吸烟7周组，吸烟至第7周末处死。
2.呼吸功能测定 采用小动物呼吸功能测定仪(北京宣武医院研制)，测定气道阻力(呼气时)及呼吸系统总顺应性。
, 百拇医药
3.病理标本制作及免疫组化染色 呼吸功能测定结束后腹主动脉放血处死。取右下肺固定于10%福尔马林，进行石蜡切片，部分行常规HE染色，另有一部分标本经常规APES处理后进行免疫组化染色，免疫组化染色使用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶(S-P)方法。试剂采用丹麦DAKO公司生产的人尿蛋白1(hup-1)抗体及福州迈新生物技术有限公司的SP-9706试剂盒。免疫染色阴性对照采用PBS代替一抗。取右上肺新鲜组织立即固定于2.5%戊二醛溶液，按电镜常规行标本制备，半薄切片定位终末细支气管后做超薄切片，醋酸铀及枸橼酸铅双染色，JEM-100CX Ⅱ型透射电镜观察。
4.免疫组化染色结果判定 每例选择4个终末或呼吸性细支气管，记数CC10阳性细胞占支气管上皮细胞的百分率，在高倍镜下(×400)观察。CC10阳性细胞浆顶端呈黄色→棕黄色，根据着色程度将阳性细胞染色强度定为3级：+，浅黄色；++，着色程度界于+和++之间；+++，深棕黄色。+、++、+++分别积1、2、3分。
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5.数据处理及统计学检验 采用SPSS统计软件、秩和检验方法进行统计学处理，P<0.05被认为具有统计学意义。
结 果
1.呼气时气道阻力测定结果 见表1。
表1 各组呼吸功能及CC10表达的比较(
±SE)
气道阻力
(cm H2O/L/s)
肺顺应性
(L/cm H2O)
CC10阳性
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细胞(%)
CC10阳性
细胞积分
对照组
1.680±0.122
0.415±0.042
58.8±2.7
210.7±11.8
吸烟3周组
2.099±0.153
0.345±0.020
39.2±1.6***
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178.4±5.4*
吸烟7周组
2.982±0.654*
0.309±0.047
35.9±1.8**
199.2±9.9
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
2.光镜观察 对照组：气管、支气管及肺泡结构正常。吸烟3周组：支气管上皮增生，部分支气管上皮呈复层排列，支气管壁出现“套袖状”单核细胞浸润，肺泡囊扩张。吸烟7周组：大鼠支气管上皮细胞明显脱落，肺泡结构紊乱，部分肺泡壁变薄、断裂、呈飘带样改变，肺泡融合、肺泡腔扩大。
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3.电镜观察 对照组：大部分细胞呈椭圆形突入管腔，表面有短小微绒毛，为Clara细胞，占细支气管上皮细胞的62%。Clara细胞胞质内见多量有膜包绕的颗粒，呈圆形或椭圆形，电子密度均匀，部分电子密度较低的颗粒周边有空晕或致密核心。少数颗粒见指纹状结构。个别颗粒呈胞吐状态(图1)。Clara细胞内有多量滑面内质网及较多线粒体。纤毛细胞较少，纤毛排列整齐。吸烟3周组：Clara细胞占细支气管上皮细胞的40%，胞质内的颗粒减少，含低电子密度颗粒的Clara细胞较多。吸烟7周组：Clara细胞占细支气管上皮细胞的33%，部分细胞结构模糊，滑面内质网扩张。纤毛细胞增多，纤毛紊乱、脱落，变窄的管腔内充以脱落纤毛及细胞碎片(图2)。
4.免疫组化染色结果见表1及图3、4。
图1 正常组Clara细胞，胞质内含多量圆形颗粒，有膜包绕，中电子密度、均匀，其中一个颗粒呈胞吐状态(箭头)TEM ×20000
, 百拇医药
图2 吸烟7周组终末细支气管，管腔狭窄，纤毛细胞较多。右下见一个Clara细胞(箭头)，胞浆内含有膜包绕的中电
5.气道上皮细胞CC10阳性率与呼吸功能检查的相关性分析显示，气道上皮细胞CC10阳性率与气道阻力呈负相关，r=-0.5715(P<0.01)，与动态呼吸系统总顺应性呈正相关，r=0.6138(P<0.01)。
图3 对照组终末细支气管，阳性细胞胞浆着色深，细胞突入管腔 SP免疫组化染色 ×200
图4 吸烟7周组，终末细支气管阳性细胞减少 SP免疫组化染色 ×200
讨 论
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Clara细胞的功能目前还不十分清楚。Clara细胞除参与表面活性物质的形成外，其分泌的CC10具有抗炎、免疫抑制作用[4]及抗蛋白酶活性。CC10与尿蛋白1及子宫肌蛋白具有同源性。大鼠CC10与人CC10同源性较好。CC10主要分布于Clara细胞分泌颗粒内及内质网系统。有研究发现Clara细胞分泌颗粒可分为三种：低电子密度颗粒、高电子密度颗粒及竿状颗粒，低电子密度颗粒可能是颗粒成熟的一个阶段，而竿状颗粒被认为可能是分解的颗粒碎片。本研究观察到前两种颗粒，并观察到少见的指纹状结构，此种结构的意义有待于进一步研究。
Clara细胞可能是气道吸入有害气体首先受累的靶部位，它又是小气道的干细胞，因此Clara细胞在小气道粘膜损伤后再修复中可能起重要作用。近来的研究发现，短期吸入臭氧(2周)导致Clara细胞损伤、坏死[5]，长期吸入臭氧(20个月)导致大鼠终末细支气管Clara细胞数量增加、Clara细胞颗粒体积增大、胞浆内CC-10含量增加，该变化被认为是气道上皮细胞对氧化剂耐受性的表现[6]。香烟对Clara细胞的影响研究较少。孕鼠吸烟可导致胎鼠肺组织CC10含量及mRNA表达增加[7]。短期吸烟的成年大鼠Clara细胞胞浆中颗粒增大[8]。长期吸烟对Clara细胞的影响还不清楚。临床研究发现，吸烟者气道上皮细胞中Clara细胞数量减少，末梢血CC10含量下降[9]。以上研究提示Clara细胞在COPD发病中可能发挥重要作用。
, 百拇医药
我们模拟吸烟致人COPD的病生理过程，采用烟草雾吸入诱导COPD大鼠模型，发现大鼠长期吸烟可使大鼠出现慢性支气管炎、肺气肿的病理改变，气道阻力增加、动态呼吸系统总顺应性下降；吸烟导致Clara细胞受损，其数量减少，CC10表达下降，电镜观察显示其超微结构也发生了变化，吸烟3周出现气道上皮CC10表达下降，电镜观察显示含低电子密度颗粒的Clara细胞较多，此种变化的意义还不清楚。气道上皮CC10阳性细胞百分率与气道阻力呈负相关、与动态呼吸系统总顺应性呈正相关，说明Clara细胞及其分泌蛋白与COPD病变密切相关。由于Clara细胞参与表面活性物质合成，COPD大鼠Clara细胞数量减少、气道上皮细胞CC10表达下降，可导致小气道内表面活性物质减少、局部抗炎作用减弱，引起气道阻力增高、动态呼吸系统总顺应性下降，导致COPD的发生。
参考文献
1，Lund J,Nordlund L,Gustavsson JA.Partial purification of a binding protein for polychlorinated biphenyls from rat lung cytosol:Physicochemical and immunochemical characterization.Biochemistry,1988,27:7895.
, 百拇医药
2，Miele L,Cordella M E,Facchiano A,et al.Inhibition of phospholipase A2 by uteroglobin and antiflamin peptides.Adv Exp Med Biol,1990,279:137.
3，Miele L,Cordella M E,Facchiano A,et al.Novel anti-inflammatory peptides from the region of highest similarity between uteroglobin and lipocortin I.Nature,1988,335:726.
4，Cute E.Ultrastructure and cytochemistry of Clara cells.Am J Pathol,1971,62:127.
5，Barr BC,Hyde DM,Plopper CG,et al.A comparison of terminal airway remodeling in chronic daily versus episodic ozone exposure.Toxicol Appl Pharmacol,1990,106:384.
, http://www.100md.com
6，Daryn ED,Robert BR,Kent EP,et al.Dose-dependent tolerance to ozone.Ⅲ.Elevation of intracellular Clara 10-kDa protein in central acini of rats exposed for 20 months.Toxicology and applied pharmacology,1994,127:109.
7，Chun-mei J,Fred HR,Uyen T,et al.Maternal exposure to environmemtal tobacco smoke alters Clara cell secretory protein expression in fetal rat lung.Am J Physiol,1998,275:L870.
8，Jones R,Reid L.Secretory cell hyperplasia and modification of intracellular glycoprotein in rat airways induced by short periods of exposure to tobacco smoke,and the effect of the antiinflammatory agent phenylmethoyloxadiazole.Lab Invest,1978,39:41.
9，Shijubo N,Itoh Y,Yamaguchi T,et al.Serum and BAL Clara cell 10 kDa protein (CC10) levels and CC10-positive bronchiolar cells are decreased in smokers.Eur Respor J,1997,10:1108.
2000-02-10收稿，2000-03-20修回, 百拇医药
单位：北京医科大学第一医院，100034，呼吸科
关键词：肺疾病；阻塞性；非纤毛上皮细胞
心肺血管病杂志000320
摘要 为探讨烟草雾吸入诱导的慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道Clara细胞及其分泌蛋白(又称Clara细胞10kDa蛋白，CC10)表达的变化，采用自制的染毒箱，使大鼠吸入烟草雾制作COPD模型，对Clara细胞进行电镜及免疫组化观察，并测定大鼠气道阻力及呼吸系统总顺应性。COPD大鼠终末及呼吸性细支气管Clara细胞数量减少，胞浆内滑面内质网扩张；终末及呼吸性细支气管上皮细胞CC10表达减少；呼吸功能检查显示气道阻力增加、呼吸系统总顺应性下降；气道上皮细胞CC10阳性细胞百分率与气道阻力呈负相关。COPD大鼠终末及呼吸性细支气管上皮细胞Clara细胞数量减少，气道上皮细胞CC10表达减少，CC10阳性细胞百分率与气道阻力呈负相关、与动态顺应性呈正相关。这可能与大鼠气道阻力增加及呼吸系统总顺应性下降有关。
, 百拇医药
Study on the Pathogenesis of Chronic Obstructive Pulmonary Disease Induced by Tobacco Smoke
——The Changes of Clara Cells' Structure and Clara Cell Secretory Protein in Rats
Chi Chunhua,He Bing,Tang Xiuying,et al.
(Department of Respiratory Medicine,the First Hospital,Beijing Medical university ，100034)
Abstract To study the changes of Clara cells and Clara cell secretory protein (also designated Clara cell 10 kDa protein,CC10) in rats with chronic obstructive pulmonary disease(COPD)induced by tobacco smoke.The rat models of COPD induced by cigarette smoke were made to investigate the Clara cells and the expression of CC10 using electron microscopic and immunohistochemistry.The resistance of airway and the total compliance of respiratory system were measured too.In COPD rats,the proportion of Clara cells in terminal and respiratory bronchioles decreased.The expression of CC10 in terminal and respiratory bronchioles decreased.The percentage of CC10 positive cells in airways correlated negatively with airway resistance and positively with dynamic compliance.In COPD group both the amount of Clara cells and the expression of CC10 in terminal and respiratory bronchioles decreased and the percentage of CC10 positive cells in airways correlated positively with airway resistance.This may correlate with the increasing of airway resistance in COPD.
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Key words：Lung diseases/obstructive;Clara cell
非纤毛上皮细胞，也称Clara细胞，主要分布于细支气管，具有多种功能，是细支气管上皮的前体细胞，可代谢细胞色素P-450单氨氧化酶，分泌表面活性物质。Clara细胞10kDa蛋白(CC-10)是Clara细胞分泌的重要成分之一，近年来认为它在小气道的防御机制中起重要作用，如：可结合多氯联苯[1]；具有抑制磷脂酶A2、抗蛋白酶活性作用[2，3]。
慢性阻塞性肺病(COPD)是慢性气道炎症性疾病，其特点是小气道阻力增高、肺动态顺应性下降。其发病机理尚未完全清楚。本研究模拟吸烟导致人COPD发生的病生理过程，采用烟草雾吸入诱导COPD大鼠模型，观察COPD发病过程中Clara细胞超微结构变化及小气道CC10表达的变化，并测定气道阻力及呼吸系统总顺应性，进而探讨Clara细胞在COPD发病中的作用。
, http://www.100md.com
材料与方法
1.COPD大鼠模型制作 自制有机玻璃染毒箱，80cm×60cm×50cm，上方有一直径1.2cm的通气孔；吸烟小室3cm×1.5cm×1.5cm，每次吸烟时同时将2支点燃的香烟的过滤嘴部分与吸烟小室相连，烟雾经改良的注射器装置由吸烟小室吸出后注入染毒箱内。香烟采用北京卷烟厂生产的长乐牌过滤嘴香烟，含焦油19mg，尼古丁1.2mg。大鼠每日吸烟3次，每次持续吸入新鲜的香烟烟雾30min，两次吸烟间隔3h。第1天每次吸烟8支，第2、3天每次吸烟10支，第3天以后每次均吸入14支。
实验动物及分组 雄性Wister大鼠18只，体重250±20g，由北京医科大学实验动物中心提供，随机分为3组，每组各6只：(1)对照组，不吸烟，饲养至7周末处死；(2)吸烟3周组，吸烟至第3周末处死；(3)吸烟7周组，吸烟至第7周末处死。
2.呼吸功能测定 采用小动物呼吸功能测定仪(北京宣武医院研制)，测定气道阻力(呼气时)及呼吸系统总顺应性。
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3.病理标本制作及免疫组化染色 呼吸功能测定结束后腹主动脉放血处死。取右下肺固定于10%福尔马林，进行石蜡切片，部分行常规HE染色，另有一部分标本经常规APES处理后进行免疫组化染色，免疫组化染色使用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶(S-P)方法。试剂采用丹麦DAKO公司生产的人尿蛋白1(hup-1)抗体及福州迈新生物技术有限公司的SP-9706试剂盒。免疫染色阴性对照采用PBS代替一抗。取右上肺新鲜组织立即固定于2.5%戊二醛溶液，按电镜常规行标本制备，半薄切片定位终末细支气管后做超薄切片，醋酸铀及枸橼酸铅双染色，JEM-100CX Ⅱ型透射电镜观察。
4.免疫组化染色结果判定 每例选择4个终末或呼吸性细支气管，记数CC10阳性细胞占支气管上皮细胞的百分率，在高倍镜下(×400)观察。CC10阳性细胞浆顶端呈黄色→棕黄色，根据着色程度将阳性细胞染色强度定为3级：+，浅黄色；++，着色程度界于+和++之间；+++，深棕黄色。+、++、+++分别积1、2、3分。
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5.数据处理及统计学检验 采用SPSS统计软件、秩和检验方法进行统计学处理，P<0.05被认为具有统计学意义。
结 果
1.呼气时气道阻力测定结果 见表1。
表1 各组呼吸功能及CC10表达的比较(
±SE)气道阻力
(cm H2O/L/s)
肺顺应性
(L/cm H2O)
CC10阳性
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细胞(%)
CC10阳性
细胞积分
对照组
1.680±0.122
0.415±0.042
58.8±2.7
210.7±11.8
吸烟3周组
2.099±0.153
0.345±0.020
39.2±1.6***
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178.4±5.4*
吸烟7周组
2.982±0.654*
0.309±0.047
35.9±1.8**
199.2±9.9
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
2.光镜观察 对照组：气管、支气管及肺泡结构正常。吸烟3周组：支气管上皮增生，部分支气管上皮呈复层排列，支气管壁出现“套袖状”单核细胞浸润，肺泡囊扩张。吸烟7周组：大鼠支气管上皮细胞明显脱落，肺泡结构紊乱，部分肺泡壁变薄、断裂、呈飘带样改变，肺泡融合、肺泡腔扩大。
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3.电镜观察 对照组：大部分细胞呈椭圆形突入管腔，表面有短小微绒毛，为Clara细胞，占细支气管上皮细胞的62%。Clara细胞胞质内见多量有膜包绕的颗粒，呈圆形或椭圆形，电子密度均匀，部分电子密度较低的颗粒周边有空晕或致密核心。少数颗粒见指纹状结构。个别颗粒呈胞吐状态(图1)。Clara细胞内有多量滑面内质网及较多线粒体。纤毛细胞较少，纤毛排列整齐。吸烟3周组：Clara细胞占细支气管上皮细胞的40%，胞质内的颗粒减少，含低电子密度颗粒的Clara细胞较多。吸烟7周组：Clara细胞占细支气管上皮细胞的33%，部分细胞结构模糊，滑面内质网扩张。纤毛细胞增多，纤毛紊乱、脱落，变窄的管腔内充以脱落纤毛及细胞碎片(图2)。
4.免疫组化染色结果见表1及图3、4。
图1 正常组Clara细胞，胞质内含多量圆形颗粒，有膜包绕，中电子密度、均匀，其中一个颗粒呈胞吐状态(箭头)TEM ×20000
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图2 吸烟7周组终末细支气管，管腔狭窄，纤毛细胞较多。右下见一个Clara细胞(箭头)，胞浆内含有膜包绕的中电
5.气道上皮细胞CC10阳性率与呼吸功能检查的相关性分析显示，气道上皮细胞CC10阳性率与气道阻力呈负相关，r=-0.5715(P<0.01)，与动态呼吸系统总顺应性呈正相关，r=0.6138(P<0.01)。
图3 对照组终末细支气管，阳性细胞胞浆着色深，细胞突入管腔 SP免疫组化染色 ×200
图4 吸烟7周组，终末细支气管阳性细胞减少 SP免疫组化染色 ×200
讨 论
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Clara细胞的功能目前还不十分清楚。Clara细胞除参与表面活性物质的形成外，其分泌的CC10具有抗炎、免疫抑制作用[4]及抗蛋白酶活性。CC10与尿蛋白1及子宫肌蛋白具有同源性。大鼠CC10与人CC10同源性较好。CC10主要分布于Clara细胞分泌颗粒内及内质网系统。有研究发现Clara细胞分泌颗粒可分为三种：低电子密度颗粒、高电子密度颗粒及竿状颗粒，低电子密度颗粒可能是颗粒成熟的一个阶段，而竿状颗粒被认为可能是分解的颗粒碎片。本研究观察到前两种颗粒，并观察到少见的指纹状结构，此种结构的意义有待于进一步研究。
Clara细胞可能是气道吸入有害气体首先受累的靶部位，它又是小气道的干细胞，因此Clara细胞在小气道粘膜损伤后再修复中可能起重要作用。近来的研究发现，短期吸入臭氧(2周)导致Clara细胞损伤、坏死[5]，长期吸入臭氧(20个月)导致大鼠终末细支气管Clara细胞数量增加、Clara细胞颗粒体积增大、胞浆内CC-10含量增加，该变化被认为是气道上皮细胞对氧化剂耐受性的表现[6]。香烟对Clara细胞的影响研究较少。孕鼠吸烟可导致胎鼠肺组织CC10含量及mRNA表达增加[7]。短期吸烟的成年大鼠Clara细胞胞浆中颗粒增大[8]。长期吸烟对Clara细胞的影响还不清楚。临床研究发现，吸烟者气道上皮细胞中Clara细胞数量减少，末梢血CC10含量下降[9]。以上研究提示Clara细胞在COPD发病中可能发挥重要作用。
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我们模拟吸烟致人COPD的病生理过程，采用烟草雾吸入诱导COPD大鼠模型，发现大鼠长期吸烟可使大鼠出现慢性支气管炎、肺气肿的病理改变，气道阻力增加、动态呼吸系统总顺应性下降；吸烟导致Clara细胞受损，其数量减少，CC10表达下降，电镜观察显示其超微结构也发生了变化，吸烟3周出现气道上皮CC10表达下降，电镜观察显示含低电子密度颗粒的Clara细胞较多，此种变化的意义还不清楚。气道上皮CC10阳性细胞百分率与气道阻力呈负相关、与动态呼吸系统总顺应性呈正相关，说明Clara细胞及其分泌蛋白与COPD病变密切相关。由于Clara细胞参与表面活性物质合成，COPD大鼠Clara细胞数量减少、气道上皮细胞CC10表达下降，可导致小气道内表面活性物质减少、局部抗炎作用减弱，引起气道阻力增高、动态呼吸系统总顺应性下降，导致COPD的发生。
参考文献
1，Lund J,Nordlund L,Gustavsson JA.Partial purification of a binding protein for polychlorinated biphenyls from rat lung cytosol:Physicochemical and immunochemical characterization.Biochemistry,1988,27:7895.
, 百拇医药
2，Miele L,Cordella M E,Facchiano A,et al.Inhibition of phospholipase A2 by uteroglobin and antiflamin peptides.Adv Exp Med Biol,1990,279:137.
3，Miele L,Cordella M E,Facchiano A,et al.Novel anti-inflammatory peptides from the region of highest similarity between uteroglobin and lipocortin I.Nature,1988,335:726.
4，Cute E.Ultrastructure and cytochemistry of Clara cells.Am J Pathol,1971,62:127.
5，Barr BC,Hyde DM,Plopper CG,et al.A comparison of terminal airway remodeling in chronic daily versus episodic ozone exposure.Toxicol Appl Pharmacol,1990,106:384.
, http://www.100md.com
6，Daryn ED,Robert BR,Kent EP,et al.Dose-dependent tolerance to ozone.Ⅲ.Elevation of intracellular Clara 10-kDa protein in central acini of rats exposed for 20 months.Toxicology and applied pharmacology,1994,127:109.
7，Chun-mei J,Fred HR,Uyen T,et al.Maternal exposure to environmemtal tobacco smoke alters Clara cell secretory protein expression in fetal rat lung.Am J Physiol,1998,275:L870.
8，Jones R,Reid L.Secretory cell hyperplasia and modification of intracellular glycoprotein in rat airways induced by short periods of exposure to tobacco smoke,and the effect of the antiinflammatory agent phenylmethoyloxadiazole.Lab Invest,1978,39:41.
9，Shijubo N,Itoh Y,Yamaguchi T,et al.Serum and BAL Clara cell 10 kDa protein (CC10) levels and CC10-positive bronchiolar cells are decreased in smokers.Eur Respor J,1997,10:1108.
2000-02-10收稿，2000-03-20修回, 百拇医药