进口和国产索他洛尔片剂的相对生物利用度研究
作者：陈伟力 夏 琴 李雪宁 沈 熊 仇兴标
单位：(上海医科大学附属中山医院 上海200032)
关键词：索他洛尔；反相高效液相色谱；生物利用度
中国医院药学杂志981102 摘要 目的:本文对进口和国产索他洛尔片剂在12名男性健康志愿者中的药物动力学和相对生物利用度进行了研究。方法:建立了一个检测血清中索他洛尔浓度的反相高效液相色谱-荧光检测法。结果:单剂量口服索他洛尔160 mg后的血药浓度数据用3P87药物动力学程序进行模型拟合,国产片剂AUC、Cmax、Tmax、T1/2分别为16.2±3.6 h.μg.ml-1,1.2±0.2 μg.ml-1,2.1±0.7 h,17.0±7.2 h;进口片剂AUC、Cmax、Tmax、T1/2分别为15.9±3.5 h.μg.ml-1,1.2±0.4 μg.ml-1,2.1±0.6 h,18.6±9.4 h。国产片剂的相对生物利用度为103.5%。结论:两种片剂的所有药动学参数经统计学(SPSS软件)处理差异均无显著性(P>0.05)。
, 百拇医药
Bioavailablity of sotalol in healthy male volunteers
Chen Weili,Xia Qing,Li Xuening,et al
(Zhong Shan Hospital,Shanghai Medical University,Shanghai 200032)
Aim:The bioavailablity of sotalol was studied in 12 healthy male volunteers after a single oral dose of 160 mg.Method:The serum level of sotalol was determined by high performance liquid chromatography with fluorescence detection.Rusults:The oral administration pharmacokinetic model was described as a twocompartment model.The pharmacokinetic parameters of sotalol(SASS) were:AUC 16.2±3.6 h.μg.ml-1,Cmax 1.2±0.2 h.μg.ml-1,Tmax 2.1±0.7 h,T1/2 17.0±7.2 h.The pharmacokinetic parameters of sotalol(U.K.) were:AUC 15.9±3.5 h,Cmax 1.2±0.4 h.μg.ml-1,Tmax 2.1±0.6 h,T1/2 18.6±9.4 h.Conclusion:There were no significant differences in all pharmacokinetic parameters between sample and reference tablets(P>0.05).The test of bioequivalent in the two preparations is the same.
, 百拇医药
Key words sotalol,HPLC,bioavailability
索他洛尔(Sotalol,甲磺胺心定),一种新型的β受体阻滞剂,具有Ⅱ类和Ⅲ类抗心律失常药的性质,兼有延长复极作用,因而具有广谱的抗心律失常活性,可用来治疗室性和室上性心律失常。索他洛尔具有抗室性心律失常疗效高、在心梗后人群中应用不增加死亡率等优点。我们采用反相高效液相色谱-荧光法(HPLC)测定血清中索他洛尔的浓度,研究了进口和国产索他洛尔片剂的相对生物利用度,为国产索他洛尔的应用提供了药物动力学依据。
1 药品与仪器
1.1 药品 国产索他洛尔片由中美上海施贵宝制药有限公司(SASS)生产,每片80 mg,批号:9705081。进口索他洛尔片由百时美施贵宝英国制药有限公司(U.K.)生产,每片80 mg,批号:6L708。索他洛尔标准品由中美上海施贵宝制药有限公司提供,阿替洛尔(Atenolol内标)由上海第二制药厂提供。
, 百拇医药
1.2 试剂 甲醇,乙腈(HPLC纯),三氯甲烷,异丙醇,磷酸,磷酸二氢钾(AR)。
1.3 仪器与色谱条件 Waters HPLC仪:包括Waters 515泵,Waters 474荧光扫描检测器,Lcco-1色谱柱恒温仪,CTO-6A色谱柱箱,CDP-4S积分记录仪。色谱柱:Mackerey-Nagel分析柱4.5×250 mm及Alltech预柱2×30 mm,流速1 ml*min-1,荧光激发波长235 nm,发射波长313 nm,增益100,衰减7。
1.4 流动相及提取液 流动相:甲醇∶0.01 mol.L-1磷酸缓冲液(pH 4.0)(3.5∶96.5)。提取液:三氯甲烷∶异丙醇(4∶1,含内标0.1 mg.L-1)。
2 实验方法
, 百拇医药
2.1 血清样品处理 取含索他洛尔血清0.5 ml,加入5 ml提取液,混旋,离心,将下层有机相转移至尖底试管,在50 ℃水浴氮气流吹干。残留物用300 μl流动相溶解,取20 μl上清液进样。色谱图见图1。
图 1 索他洛尔色谱图
1.索他洛尔 2.内标
2.2 标准曲线及检测限 人空白血清0.5 ml分别加入适量标准液,配成浓度为0.02,0.04,0.2,0.4,1.0,2.0,4.0,5.0 μg.ml-1的血清样品,按上述方法提取后HPLC测定。以索他洛尔浓度(X)对相应的索他洛尔与内标的峰面积比(Y)作线性回归,得回归方程为Y=-0.091 3+2.321 3X,r=0.999 5(n=8)。说明血药浓度在0.02～5.0 μg.ml-1范围内线性关系良好。检测限:0.01 μg.ml-1。
, 百拇医药
2.3 日内及日间回收率和精密度 用空白血清0.5 ml,加入适量的索他洛尔标准液,配成高(2.0 μg.ml-1)、中(1.0 μg.ml-1)、低(0.2 μg.ml-1)三种浓度的标准血样,结果见表1。
表1 血清索他洛尔日内及日间回收率和精密度(n=5) 时间
加入量
μg.ml-1
±s
μg.ml-1
RSD
, 百拇医药
%
回收率
%
日内
0.2
0.20±0.01
4.6
100.9
1
0.99±0.02
1.8
99.2
2
, 百拇医药
2.0±0.1
4.3
101.9
日间
0.2
0.20±0.01
6.4
101.6
1
1.00±0.03
3.3
100.3
2
, 百拇医药
2.0±0.1
5.5
99.5
2.4 实验设计 12名男性健康志愿者,年龄:21.4±1.3岁,身高:175.3±6.1 cm,体重:68±8.2 kg,14 d内所作的筛选结果证实在病史、体检、临 床实验室检查和12导联心电图检查方面均在正常范围内。志愿者精神状态良好,生命体征检查均属正常。志愿者在受试前一月内未服用任何药物,受试期间不饮酒、咖啡和茶,不吸烟。志愿者受试前均被告知试验详情后签署知情同意书。受试者试验当天早、中餐统一进食标准餐。试验前隔夜禁食12 h,次日清晨服药,以200 ml温开水送服,药后3 h进食。给药前和给药后0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0,6.0,8.0,12,24,36,48 h取静脉血3.5 ml。3 数据处理及参数拟合
3.1 药动学参数 本实验所得血药浓度数据用3P87药物动力学程序进行模型拟合,以最佳模型(AIC最小)计算药物动力学参数,药物动力学参数见表2,药-时曲线见图2。
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图 2 索他洛尔在健康志愿者中的药-时曲线
-●- U.K. -□- SASS
3.2 统计分析 实验数据均用±s表示,药物动力学参数经SPSS/PC+3.1统计处理软件表 2 进口和国产索他洛尔片剂在健康志愿者中的药物动力学参数(±s) 样品
A
μg.ml-1
α
h-1
, 百拇医药
B
μg.ml-1
B
h-1
Ka
h-1
Tlag
h
V/F
L
T1/2α
, 百拇医药 h
T1/2β
h
K21
h-1
K10
h-1
K12
h-1
AUC
h.μg.ml-1
, 百拇医药
Cl(s)
L.h-1.kg-1
Tpeak
h
Cmax
μg.ml-1
T1/2ka
h
进
口
, 百拇医药 2.4
±1.3
0.5
±0.4
0.6
±0.3
0.05
±0.02
1.2
±0.5
0.3
±0.2
45.1
, 百拇医药
±18.1
1.9
±0.8
18.6
±9.4
0.2
±0.2
0.12
±0.04
0.2
±0.2
15.9
±3.5
, http://www.100md.com
10.6
±2.5
2.1
±0.6
1.2
±0.4
0.7
±0.3
国
产
3.1
±2.1
0.5
, http://www.100md.com
±0.3
0.6
±0.3
0.05
±0.02
1.2
±0.4
0.3
±0.2
40.9
±12.4
1.7
±0.8
, http://www.100md.com
17.0
±7.2
0.2
±0.1
0.12
±0.03
0.3
±0.3
16.2
±36.6
10.4
±2.4
2.1
, 百拇医药
±0.7
1.2
±0.2
0.7
±0.3
t
1.010
0.310
0.530
0.270
0.150
0.050
0.398
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0.670
0.490
0.180
0.000
1.110
0.200
0.200
0.400
0.010
0.270
P
0.334
0.765
, 百拇医药
0.609
0.791
0.884
0.957
0.223
0.519
0.631
0.860
1.000
0.292
0.844
0.847
0.698
, 百拇医药
0.993
0.794
进行正态性检验,符合正态分布者应用t检验或方差分析进行各变量间的差异显著性检验,显著性标准为P<0.05。4 实验结果和讨论
本研究所建立的改良测定血清索他洛尔的HPLC方法,较之文献报道的其它方法,具有提取步骤简便、经济、灵敏度高、重现性好、专一性强等优点。
单剂量索他洛尔的血药浓度测定结果应用3P87程序进行房室模型拟合,进口和国产两种制剂索他洛尔的血浓度符合开放型二室模型。按开放型二室模型处理数据求出药物动力学参数。药动学参数见表2。两种片剂的吸收、分布、排泄过程基本相似。国产片剂与进口片剂的Cmax分别为1.2±0.2 μg.ml-1与1.2±0.4 μg.ml-1,Tmax分别为2.1±0.7 h与2.1±0.6 h;AUC分别为16.2±36.6 h.μg.ml-1与15.9±3.5 h.μg.ml-1。经Kolmogorov-Smirnov正态性检验,药物动力学各指标均符合正态分布,可直接进行方差分析。结果显示两种制剂间AUC、Tmax和Cmax差异均无显著性(P>0.05)。国产片剂的生物利用度为进口片剂的103.5±20.3%,即两种索他洛尔片剂具有生物等效性。
, 百拇医药
*新疆独山子石化总厂职工医院
参考文献
1 Urech R,Chan L,Duffy P.High-performance liquid chromatographic assay of sotalol:improved procedure and investigation of peak broadening.J Chronatography,1990,534:271
2 Le Coz F,Funck-Brentano,Poirier JM,et al.Prediction of sotalol-induced maximum steady-state QTc prolongation from single-dose administration on healthy volunteers.Clin Pharmacol Ther,1992,52:417
(1997年12月14日收稿), http://www.100md.com
单位：(上海医科大学附属中山医院 上海200032)
关键词：索他洛尔；反相高效液相色谱；生物利用度
中国医院药学杂志981102 摘要 目的:本文对进口和国产索他洛尔片剂在12名男性健康志愿者中的药物动力学和相对生物利用度进行了研究。方法:建立了一个检测血清中索他洛尔浓度的反相高效液相色谱-荧光检测法。结果:单剂量口服索他洛尔160 mg后的血药浓度数据用3P87药物动力学程序进行模型拟合,国产片剂AUC、Cmax、Tmax、T1/2分别为16.2±3.6 h.μg.ml-1,1.2±0.2 μg.ml-1,2.1±0.7 h,17.0±7.2 h;进口片剂AUC、Cmax、Tmax、T1/2分别为15.9±3.5 h.μg.ml-1,1.2±0.4 μg.ml-1,2.1±0.6 h,18.6±9.4 h。国产片剂的相对生物利用度为103.5%。结论:两种片剂的所有药动学参数经统计学(SPSS软件)处理差异均无显著性(P>0.05)。
, 百拇医药
Bioavailablity of sotalol in healthy male volunteers
Chen Weili,Xia Qing,Li Xuening,et al
(Zhong Shan Hospital,Shanghai Medical University,Shanghai 200032)
Aim:The bioavailablity of sotalol was studied in 12 healthy male volunteers after a single oral dose of 160 mg.Method:The serum level of sotalol was determined by high performance liquid chromatography with fluorescence detection.Rusults:The oral administration pharmacokinetic model was described as a twocompartment model.The pharmacokinetic parameters of sotalol(SASS) were:AUC 16.2±3.6 h.μg.ml-1,Cmax 1.2±0.2 h.μg.ml-1,Tmax 2.1±0.7 h,T1/2 17.0±7.2 h.The pharmacokinetic parameters of sotalol(U.K.) were:AUC 15.9±3.5 h,Cmax 1.2±0.4 h.μg.ml-1,Tmax 2.1±0.6 h,T1/2 18.6±9.4 h.Conclusion:There were no significant differences in all pharmacokinetic parameters between sample and reference tablets(P>0.05).The test of bioequivalent in the two preparations is the same.
, 百拇医药
Key words sotalol,HPLC,bioavailability
索他洛尔(Sotalol,甲磺胺心定),一种新型的β受体阻滞剂,具有Ⅱ类和Ⅲ类抗心律失常药的性质,兼有延长复极作用,因而具有广谱的抗心律失常活性,可用来治疗室性和室上性心律失常。索他洛尔具有抗室性心律失常疗效高、在心梗后人群中应用不增加死亡率等优点。我们采用反相高效液相色谱-荧光法(HPLC)测定血清中索他洛尔的浓度,研究了进口和国产索他洛尔片剂的相对生物利用度,为国产索他洛尔的应用提供了药物动力学依据。
1 药品与仪器
1.1 药品 国产索他洛尔片由中美上海施贵宝制药有限公司(SASS)生产,每片80 mg,批号:9705081。进口索他洛尔片由百时美施贵宝英国制药有限公司(U.K.)生产,每片80 mg,批号:6L708。索他洛尔标准品由中美上海施贵宝制药有限公司提供,阿替洛尔(Atenolol内标)由上海第二制药厂提供。
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1.2 试剂 甲醇,乙腈(HPLC纯),三氯甲烷,异丙醇,磷酸,磷酸二氢钾(AR)。
1.3 仪器与色谱条件 Waters HPLC仪:包括Waters 515泵,Waters 474荧光扫描检测器,Lcco-1色谱柱恒温仪,CTO-6A色谱柱箱,CDP-4S积分记录仪。色谱柱:Mackerey-Nagel分析柱4.5×250 mm及Alltech预柱2×30 mm,流速1 ml*min-1,荧光激发波长235 nm,发射波长313 nm,增益100,衰减7。
1.4 流动相及提取液 流动相:甲醇∶0.01 mol.L-1磷酸缓冲液(pH 4.0)(3.5∶96.5)。提取液:三氯甲烷∶异丙醇(4∶1,含内标0.1 mg.L-1)。
2 实验方法
, 百拇医药
2.1 血清样品处理 取含索他洛尔血清0.5 ml,加入5 ml提取液,混旋,离心,将下层有机相转移至尖底试管,在50 ℃水浴氮气流吹干。残留物用300 μl流动相溶解,取20 μl上清液进样。色谱图见图1。
图 1 索他洛尔色谱图
1.索他洛尔 2.内标
2.2 标准曲线及检测限 人空白血清0.5 ml分别加入适量标准液,配成浓度为0.02,0.04,0.2,0.4,1.0,2.0,4.0,5.0 μg.ml-1的血清样品,按上述方法提取后HPLC测定。以索他洛尔浓度(X)对相应的索他洛尔与内标的峰面积比(Y)作线性回归,得回归方程为Y=-0.091 3+2.321 3X,r=0.999 5(n=8)。说明血药浓度在0.02～5.0 μg.ml-1范围内线性关系良好。检测限:0.01 μg.ml-1。
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2.3 日内及日间回收率和精密度 用空白血清0.5 ml,加入适量的索他洛尔标准液,配成高(2.0 μg.ml-1)、中(1.0 μg.ml-1)、低(0.2 μg.ml-1)三种浓度的标准血样,结果见表1。
表1 血清索他洛尔日内及日间回收率和精密度(n=5) 时间
加入量
μg.ml-1
±sμg.ml-1
RSD
, 百拇医药
%
回收率
%
日内
0.2
0.20±0.01
4.6
100.9
1
0.99±0.02
1.8
99.2
2
, 百拇医药
2.0±0.1
4.3
101.9
日间
0.2
0.20±0.01
6.4
101.6
1
1.00±0.03
3.3
100.3
2
, 百拇医药
2.0±0.1
5.5
99.5
2.4 实验设计 12名男性健康志愿者,年龄:21.4±1.3岁,身高:175.3±6.1 cm,体重:68±8.2 kg,14 d内所作的筛选结果证实在病史、体检、临 床实验室检查和12导联心电图检查方面均在正常范围内。志愿者精神状态良好,生命体征检查均属正常。志愿者在受试前一月内未服用任何药物,受试期间不饮酒、咖啡和茶,不吸烟。志愿者受试前均被告知试验详情后签署知情同意书。受试者试验当天早、中餐统一进食标准餐。试验前隔夜禁食12 h,次日清晨服药,以200 ml温开水送服,药后3 h进食。给药前和给药后0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0,6.0,8.0,12,24,36,48 h取静脉血3.5 ml。3 数据处理及参数拟合
3.1 药动学参数 本实验所得血药浓度数据用3P87药物动力学程序进行模型拟合,以最佳模型(AIC最小)计算药物动力学参数,药物动力学参数见表2,药-时曲线见图2。
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图 2 索他洛尔在健康志愿者中的药-时曲线
-●- U.K. -□- SASS
3.2 统计分析 实验数据均用
±s表示,药物动力学参数经SPSS/PC+3.1统计处理软件表 2 进口和国产索他洛尔片剂在健康志愿者中的药物动力学参数(±s) 样品A
μg.ml-1
α
h-1
, 百拇医药
B
μg.ml-1
B
h-1
Ka
h-1
Tlag
h
V/F
L
T1/2α
, 百拇医药 h
T1/2β
h
K21
h-1
K10
h-1
K12
h-1
AUC
h.μg.ml-1
, 百拇医药
Cl(s)
L.h-1.kg-1
Tpeak
h
Cmax
μg.ml-1
T1/2ka
h
进
口
, 百拇医药 2.4
±1.3
0.5
±0.4
0.6
±0.3
0.05
±0.02
1.2
±0.5
0.3
±0.2
45.1
, 百拇医药
±18.1
1.9
±0.8
18.6
±9.4
0.2
±0.2
0.12
±0.04
0.2
±0.2
15.9
±3.5
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10.6
±2.5
2.1
±0.6
1.2
±0.4
0.7
±0.3
国
产
3.1
±2.1
0.5
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±0.3
0.6
±0.3
0.05
±0.02
1.2
±0.4
0.3
±0.2
40.9
±12.4
1.7
±0.8
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17.0
±7.2
0.2
±0.1
0.12
±0.03
0.3
±0.3
16.2
±36.6
10.4
±2.4
2.1
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±0.7
1.2
±0.2
0.7
±0.3
t
1.010
0.310
0.530
0.270
0.150
0.050
0.398
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0.670
0.490
0.180
0.000
1.110
0.200
0.200
0.400
0.010
0.270
P
0.334
0.765
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0.609
0.791
0.884
0.957
0.223
0.519
0.631
0.860
1.000
0.292
0.844
0.847
0.698
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0.993
0.794
进行正态性检验,符合正态分布者应用t检验或方差分析进行各变量间的差异显著性检验,显著性标准为P<0.05。4 实验结果和讨论
本研究所建立的改良测定血清索他洛尔的HPLC方法,较之文献报道的其它方法,具有提取步骤简便、经济、灵敏度高、重现性好、专一性强等优点。
单剂量索他洛尔的血药浓度测定结果应用3P87程序进行房室模型拟合,进口和国产两种制剂索他洛尔的血浓度符合开放型二室模型。按开放型二室模型处理数据求出药物动力学参数。药动学参数见表2。两种片剂的吸收、分布、排泄过程基本相似。国产片剂与进口片剂的Cmax分别为1.2±0.2 μg.ml-1与1.2±0.4 μg.ml-1,Tmax分别为2.1±0.7 h与2.1±0.6 h;AUC分别为16.2±36.6 h.μg.ml-1与15.9±3.5 h.μg.ml-1。经Kolmogorov-Smirnov正态性检验,药物动力学各指标均符合正态分布,可直接进行方差分析。结果显示两种制剂间AUC、Tmax和Cmax差异均无显著性(P>0.05)。国产片剂的生物利用度为进口片剂的103.5±20.3%,即两种索他洛尔片剂具有生物等效性。
, 百拇医药
*新疆独山子石化总厂职工医院
参考文献
1 Urech R,Chan L,Duffy P.High-performance liquid chromatographic assay of sotalol:improved procedure and investigation of peak broadening.J Chronatography,1990,534:271
2 Le Coz F,Funck-Brentano,Poirier JM,et al.Prediction of sotalol-induced maximum steady-state QTc prolongation from single-dose administration on healthy volunteers.Clin Pharmacol Ther,1992,52:417
(1997年12月14日收稿), http://www.100md.com