RP-HPLC法快速测定螺旋藻中β-胡萝卜素
作者：黄宏南
单位：黄宏南(福建省卫生防疫站 350001)
关键词：RP-HPLC，螺旋藻，β-胡萝卜素
海峡药学000122 摘要 本文采用Shim-pack clc-ODS柱(150 mm×6.0 mm id.5 μm) 以100%甲醇为流动相，350 nm为检测波长，用RP-HPLC法测定了螺旋藻中β-胡萝卜素的平均含量为0.098%，RSD为3.72%；平均加样回收率为97.4%，RSD为2.69%。
Quick Determination of β-Carotene in Spirulina by RP-HPLC
Huang Hongnan
(Health and Anti-epidemic center of Fujian Province 350001)
, 百拇医药
Abstract A reverse phase-high performance liquidchromatographic method has beensuccessfully used to determine the content of β-carotene in spirulina.The respense value was linear between 0.04 μg～0.15 μg and r was 0.998.The average recovery was 97.4%(RSD＝2.69%，n＝5)
Key words RP-HPLC，β-Carotene，Spirulina
螺旋藻目前已成为癌症、糖尿病、高血压、高血脂等患者理想的保健食品，而作为其功能成分之一的β-胡萝卜素越来越受到人们的关注，其含量测定方法有分光光度法[1]。本文采用RP-HPLC法测定螺旋藻中β-胡萝卜素的含量，得到满意的结果。本法操作简便快速，结果准确可靠。
, http://www.100md.com
1 仪器与试药
日本岛津LC-4A高效液相色谱仪：SPD-2AS紫外检测器，样品由厦门鹭宁公司提供(对照品系德国MERCK公司产品生化试剂)C40H56M＝536.89 g/mol含量>97.0%熔点176-182℃ EC-NO230-636-6)甲醇、丙酮、石油醚均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：Shim-pack clc-ODS150 mm×6.0 mm id.5 μm；流动相：100%甲醇检测波长350 nm；流速：1.8 ml.min-1。
图1 色谱图
, 百拇医药 3 实验方法与结果
3.1 标准曲线的制备精密称取β-胡萝卜素5.0 mg，先用少量三氯甲烷溶解，再用石油醚溶解并洗涤烧杯数次，溶液转入25.0 ml容量瓶中。用石油醚定容，浓度为0.2 mg.ml-1，冰箱保存。临用时，吸取1.0 ml于10.0 ml容量瓶中，加流动相至刻度，即得20 μg.ml-1。分别进样2，4，6，8，10 μl,按上述色谱条件测定峰面积，以β-胡萝卜素量X(μl)为横坐标，峰面积值Y为纵坐标用最小二乘法进行计算，得回归方程为Y＝57146.9X+20274.7 r＝0.998。结果表明β-胡萝卜素在0.04 μg～0.15 μg具有良好的线性关系。
3.2 回收率试验：精密称取螺旋藻样品0.5 g，分别精密吸取β-胡萝卜素对照品溶液1 ml，2 ml，3 ml，4 ml，5 ml加入按样品测定项下方法制备50 ml供试品溶液5份，精密量取10 μl进样，计算回收率，结果(见表1)。
, 百拇医药
表1 回收率测定结果 测得量mg
回收率%
X-%
RSD%
0.67
97.1
0.88
98.9
1.10
101.0
97.4
2.69
1.23
, 百拇医药
95.3
1.41
94.6
注：原样品含量均为：0.49 mg
3.3 精密度试验：精密吸取上述对照品10 μl，重复进样5次，β-胡萝卜素面积积分值RSD＝3.09%。
3.4 样品测定：称取0.25～1.0 g螺旋藻片研磨，胶囊直接取其粉状内容物于50 ml带塞量筒中，用石油醚和丙酮混合液超声处理10 min，振摇10 min定容至一定体积，静置待提取液略澄清后，吸取上层清液经0.45 μm滤膜过滤或经离心(5000W)即为HPLC分析样液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液5～10μl按上述色谱条件进样3次测定，用标准曲线法计算样品中β-胡萝卜素的含量取平均值，结果(见表2)。
, 百拇医药
表2 样品中β-胡萝卜素含量 批号
X- mg.g-1
RSD %
990505
0.98
3.72
990608
0.96
2.45
990710
0.93
2.90
, 百拇医药
990811
0.97
2.53
990908
0.91
2.11
4 小结
用本法测定螺旋藻中β-胡萝卜素的含量，具有简便快速，准确可靠的特点，且能有效分离有关杂质。
参考文献
[1]中国食品工业标准汇编：中国标准出版社，北京，1997；228
[2]何照范等编著：保健食品化学及其检测技术，北京，中国轻工业出版社，1998；5∶93, 百拇医药
单位：黄宏南(福建省卫生防疫站 350001)
关键词：RP-HPLC，螺旋藻，β-胡萝卜素
海峡药学000122 摘要 本文采用Shim-pack clc-ODS柱(150 mm×6.0 mm id.5 μm) 以100%甲醇为流动相，350 nm为检测波长，用RP-HPLC法测定了螺旋藻中β-胡萝卜素的平均含量为0.098%，RSD为3.72%；平均加样回收率为97.4%，RSD为2.69%。
Quick Determination of β-Carotene in Spirulina by RP-HPLC
Huang Hongnan
(Health and Anti-epidemic center of Fujian Province 350001)
, 百拇医药
Abstract A reverse phase-high performance liquidchromatographic method has beensuccessfully used to determine the content of β-carotene in spirulina.The respense value was linear between 0.04 μg～0.15 μg and r was 0.998.The average recovery was 97.4%(RSD＝2.69%，n＝5)
Key words RP-HPLC，β-Carotene，Spirulina
螺旋藻目前已成为癌症、糖尿病、高血压、高血脂等患者理想的保健食品，而作为其功能成分之一的β-胡萝卜素越来越受到人们的关注，其含量测定方法有分光光度法[1]。本文采用RP-HPLC法测定螺旋藻中β-胡萝卜素的含量，得到满意的结果。本法操作简便快速，结果准确可靠。
, http://www.100md.com
1 仪器与试药
日本岛津LC-4A高效液相色谱仪：SPD-2AS紫外检测器，样品由厦门鹭宁公司提供(对照品系德国MERCK公司产品生化试剂)C40H56M＝536.89 g/mol含量>97.0%熔点176-182℃ EC-NO230-636-6)甲醇、丙酮、石油醚均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：Shim-pack clc-ODS150 mm×6.0 mm id.5 μm；流动相：100%甲醇检测波长350 nm；流速：1.8 ml.min-1。
图1 色谱图
, 百拇医药 3 实验方法与结果
3.1 标准曲线的制备精密称取β-胡萝卜素5.0 mg，先用少量三氯甲烷溶解，再用石油醚溶解并洗涤烧杯数次，溶液转入25.0 ml容量瓶中。用石油醚定容，浓度为0.2 mg.ml-1，冰箱保存。临用时，吸取1.0 ml于10.0 ml容量瓶中，加流动相至刻度，即得20 μg.ml-1。分别进样2，4，6，8，10 μl,按上述色谱条件测定峰面积，以β-胡萝卜素量X(μl)为横坐标，峰面积值Y为纵坐标用最小二乘法进行计算，得回归方程为Y＝57146.9X+20274.7 r＝0.998。结果表明β-胡萝卜素在0.04 μg～0.15 μg具有良好的线性关系。
3.2 回收率试验：精密称取螺旋藻样品0.5 g，分别精密吸取β-胡萝卜素对照品溶液1 ml，2 ml，3 ml，4 ml，5 ml加入按样品测定项下方法制备50 ml供试品溶液5份，精密量取10 μl进样，计算回收率，结果(见表1)。
, 百拇医药
表1 回收率测定结果 测得量mg
回收率%
X-%
RSD%
0.67
97.1
0.88
98.9
1.10
101.0
97.4
2.69
1.23
, 百拇医药
95.3
1.41
94.6
注：原样品含量均为：0.49 mg
3.3 精密度试验：精密吸取上述对照品10 μl，重复进样5次，β-胡萝卜素面积积分值RSD＝3.09%。
3.4 样品测定：称取0.25～1.0 g螺旋藻片研磨，胶囊直接取其粉状内容物于50 ml带塞量筒中，用石油醚和丙酮混合液超声处理10 min，振摇10 min定容至一定体积，静置待提取液略澄清后，吸取上层清液经0.45 μm滤膜过滤或经离心(5000W)即为HPLC分析样液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液5～10μl按上述色谱条件进样3次测定，用标准曲线法计算样品中β-胡萝卜素的含量取平均值，结果(见表2)。
, 百拇医药
表2 样品中β-胡萝卜素含量 批号
X- mg.g-1
RSD %
990505
0.98
3.72
990608
0.96
2.45
990710
0.93
2.90
, 百拇医药
990811
0.97
2.53
990908
0.91
2.11
4 小结
用本法测定螺旋藻中β-胡萝卜素的含量，具有简便快速，准确可靠的特点，且能有效分离有关杂质。
参考文献
[1]中国食品工业标准汇编：中国标准出版社，北京，1997；228
[2]何照范等编著：保健食品化学及其检测技术，北京，中国轻工业出版社，1998；5∶93, 百拇医药