抗敏止痒乳膏动物实验研究
作者：盛国荣 谢勇 杜桂华
单位：盛国荣(江苏省南通市皮肤病防治所 南通226006)；谢勇(江苏省南通市皮肤病防治所 南通226006)；杜桂华(江苏省南通市皮肤病防治所 南通226006)
关键词：抗敏止痒乳膏，动物实验，安全性
海峡药学000116 摘要 对抗敏止痒乳膏进行了动物实验研究，包括急性毒性试验、皮肤刺激性试验和皮肤过敏试验。结果表明：本品无皮肤急性毒性作用，无皮肤过敏反应，对完整皮肤无刺激性反应，对破损皮肤有轻度刺激性，但给药后48 h，这种刺激性消失。
An Animal Experiment of Antipruritic Cream of Antianaphylaxis
Sheng Guorong Xie Yong Du Guihua
, http://www.100md.com
(Dermatology Station of Nantong Jiangsu，226006)
Abstract Experiments of antipruritic cream of antianaphylaxis on animals have been done，including tests of acute toxicity，skin irritation，and cutaneous sensibility.The results show that this cream has no acute toxicity to the skin，no reaction of cutaneous sensibility and no stimulating reaction to non-cut skin，but to the wounded skin there is a mild irritative reaction，which would disappear in 48 hours after the administration of medicine.
, 百拇医药
Key words Antipruritic cream of antianaphylaxis，Animal experiment，Safety
抗敏止痒乳膏[1]系我所研制的一种非激素类皮肤科外用制剂，该制剂由盐酸利多卡因、马来酸氯苯那敏、冰片、氯霉素等药物组成，临床上主要用于治疗神经性皮炎，急慢性湿疹和限局性瘙痒症[2]。为了评估其在皮肤科临床应用中的安全性，我们对抗敏止痒乳膏进行了系列动物实验研究，其实验内容包括急性毒性试验、皮肤刺激性试验和皮肤过敏试验，现将有关实验资料报告如下。
1 实验材料
抗敏止痒乳膏及其空白基质(本所制剂室提供)；2.4-二硝基氯苯(中国医药公司北京分公司提供，将其配成1%的致敏浓度和0.1%激发浓度)；白色豚鼠，体重300 g～400 g，性别：雌雄各半(南通医学院实验动物中心提供，合格证：劳动“环”95059，劳动“质”95011)；实验室温度：25℃±1℃，相对湿度70%。
, 百拇医药
2 实验方法
2.1 急性毒性试验 2.1.1 豚鼠皮肤准备：于给药前24 h在每只豚鼠背部脊柱两侧对称选两处剃毛，面积约40 cm2，去毛后24 h检查去毛皮肤是否受伤，如受伤的皮肤不宜用于完整皮肤的毒性试验。破损皮肤的制作系采用注射针头将去毛皮肤划破，以有渗血为度。实验豚鼠称重。2.1.2 分组：豚鼠共分5组，每组10只，其中1组为对照组(空白基质组)，4组为试验组，即完整皮肤两个剂量组，破损皮肤两个剂量组。2.1.3 剂量设置：与人用量等效时，豚鼠用量为1.73×104 cm2×0.25 g/5 cm2×0.031÷532 cm2＝0.05 g/cm2，式中：1.73×104 cm2为人的体表面积，0.25 g/5 cm2为人使用的推荐剂量，0.031为豚鼠与人按体表面积拆算的等效剂量换算系数，532 cm2为豚鼠体表面积。低剂量组豚鼠给予0.05 g/cm2涂布，高剂量组豚鼠给予0.2 g/cm2涂布，对照组给予0.2 g/cm2空白基质。2.1.4 给药方法与观察：实验时将药物均匀涂于豚鼠背部脱毛区或脱毛破损皮肤区，用消毒纱布和胶布将涂药区覆盖固定，给药24 h后，用温水除去残留的药物，去除药物后1、24、48、72 h至d 7，记录实验豚鼠饮食、皮肤、毛发、眼睛、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等变化以及有否死亡情况等。
, 百拇医药
2.2 皮肤刺激性试验 2.2.1 豚鼠皮肤准备：方法同2.1.1。2.2.2 给药方法与观察：实验采用同体左右自身对比，分为完整皮肤组及破损皮肤组，每组8只豚鼠，左侧去毛区涂抗敏止痒乳膏1 g，右侧涂空白基质作为对照，用消毒纱布和胶布固定，给药24 h后，用温水去除残留药物，去除药物后1、24、48、72 h，肉眼观察和病理组织学检查，记录涂抹处有无红斑和水肿等情况，按文献[3]的皮肤刺激性反应评分标准评判，记录各组受试物和空白基质的平均分值，写出受试物对完整皮肤及破损皮肤的刺激性强度。
2.3 皮肤过敏试验 2.3.1 分组：将豚鼠按体重、性别随机分成3组，每组10只，雌雄各半，第1组给抗敏止痒乳膏，第2组给空白基质，第3组为阳性对照组(1%2.4-二硝基氯苯)，于给药前24 h将豚鼠背部两侧毛去掉，面积每侧约9 cm2。2.3.2 致敏接触：取抗敏止痒乳膏0.1 g涂于豚鼠左侧脱毛区，用1层油纸及2层消毒纱布覆盖，以胶布固定，持续6 h，d 7和d 14以同样方法重复1次，共3次，空白基质与阳性对照组方法同上。2.3.3 激发接触：于末次给药致敏后14 d，将抗敏止痒乳膏0.1 g、空白基质0.1 g和0.1%2.4-二硝基氯苯0.1 ml分别涂于相应动物的右侧脱毛区，6 h后去掉药物，即刻观察，然后于24、48、72 h再次观察皮肤过敏反应情况，参考文献[3]的皮肤过敏反应程度的评分标准给予评分，同时观察豚鼠有否哮喘，站立不稳等全身性过敏反应，并计算致敏反应发生率，公式为：致敏反应发生率＝有过敏反应豚鼠数/豚鼠总数×100%，按致敏发生率推算致敏性。
, http://www.100md.com
3 实验结果
3.1 急性毒性试验结果表明，抗敏止痒乳膏小剂量(2 g/40 cm2)和大剂量(8 g/40 cm2)外用时对完整皮肤和破损皮肤豚鼠的饮食、皮毛光泽、呼吸、行为活动和体重等无任何影响，先后观察7 d，无一豚鼠死亡，均未出现任何急性毒性反应。
3.2 皮肤刺激性试验表明，抗敏止痒乳膏与空白基质分别对完整皮肤以及损伤皮肤的平均反应分值无明显差异，其中对完整皮肤组豚鼠，抗敏止痒乳膏与空白基质的反应分值均为0，表明二者对正常皮肤无刺激性；对破损皮肤组豚鼠，抗敏止痒乳膏与空白基质的平均反应分值在去除药物后1 h和24 h均高于0.5，但低于2，表明二者对破损皮肤有轻度刺激性，但给药后48 h，这种刺激性消失。
3.3 皮肤过敏试验结果表明，阳性对照组动物在激发给药6 h后，有轻度和中度红斑出现，但无水肿形成，72 h后红斑消失，其致敏率为100%，而抗敏止痒乳膏组及空白基质组在激发用药后，均无红斑与水肿形成，致敏率为零，表明抗敏止痒乳膏不产生致敏作用。
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4 结论
抗敏止痒乳膏无皮肤急性毒性作用，无皮肤过敏反应，对完整皮肤无刺激反应，对破损皮肤有轻度刺激性，但用药2 d后，这种刺激性随之消失。
参考文献
[1]盛国荣：抗敏止痒乳膏的研制 海峡药学1999；11(3)∶8
[2]盛国荣等：抗敏止痒乳膏的制备与临床应用 中国药师1999；2(6)：306
[3]中华人民共和国卫生部药政管理局编：中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)，1994；209～212, 百拇医药
单位：盛国荣(江苏省南通市皮肤病防治所 南通226006)；谢勇(江苏省南通市皮肤病防治所 南通226006)；杜桂华(江苏省南通市皮肤病防治所 南通226006)
关键词：抗敏止痒乳膏，动物实验，安全性
海峡药学000116 摘要 对抗敏止痒乳膏进行了动物实验研究，包括急性毒性试验、皮肤刺激性试验和皮肤过敏试验。结果表明：本品无皮肤急性毒性作用，无皮肤过敏反应，对完整皮肤无刺激性反应，对破损皮肤有轻度刺激性，但给药后48 h，这种刺激性消失。
An Animal Experiment of Antipruritic Cream of Antianaphylaxis
Sheng Guorong Xie Yong Du Guihua
, http://www.100md.com
(Dermatology Station of Nantong Jiangsu，226006)
Abstract Experiments of antipruritic cream of antianaphylaxis on animals have been done，including tests of acute toxicity，skin irritation，and cutaneous sensibility.The results show that this cream has no acute toxicity to the skin，no reaction of cutaneous sensibility and no stimulating reaction to non-cut skin，but to the wounded skin there is a mild irritative reaction，which would disappear in 48 hours after the administration of medicine.
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Key words Antipruritic cream of antianaphylaxis，Animal experiment，Safety
抗敏止痒乳膏[1]系我所研制的一种非激素类皮肤科外用制剂，该制剂由盐酸利多卡因、马来酸氯苯那敏、冰片、氯霉素等药物组成，临床上主要用于治疗神经性皮炎，急慢性湿疹和限局性瘙痒症[2]。为了评估其在皮肤科临床应用中的安全性，我们对抗敏止痒乳膏进行了系列动物实验研究，其实验内容包括急性毒性试验、皮肤刺激性试验和皮肤过敏试验，现将有关实验资料报告如下。
1 实验材料
抗敏止痒乳膏及其空白基质(本所制剂室提供)；2.4-二硝基氯苯(中国医药公司北京分公司提供，将其配成1%的致敏浓度和0.1%激发浓度)；白色豚鼠，体重300 g～400 g，性别：雌雄各半(南通医学院实验动物中心提供，合格证：劳动“环”95059，劳动“质”95011)；实验室温度：25℃±1℃，相对湿度70%。
, 百拇医药
2 实验方法
2.1 急性毒性试验 2.1.1 豚鼠皮肤准备：于给药前24 h在每只豚鼠背部脊柱两侧对称选两处剃毛，面积约40 cm2，去毛后24 h检查去毛皮肤是否受伤，如受伤的皮肤不宜用于完整皮肤的毒性试验。破损皮肤的制作系采用注射针头将去毛皮肤划破，以有渗血为度。实验豚鼠称重。2.1.2 分组：豚鼠共分5组，每组10只，其中1组为对照组(空白基质组)，4组为试验组，即完整皮肤两个剂量组，破损皮肤两个剂量组。2.1.3 剂量设置：与人用量等效时，豚鼠用量为1.73×104 cm2×0.25 g/5 cm2×0.031÷532 cm2＝0.05 g/cm2，式中：1.73×104 cm2为人的体表面积，0.25 g/5 cm2为人使用的推荐剂量，0.031为豚鼠与人按体表面积拆算的等效剂量换算系数，532 cm2为豚鼠体表面积。低剂量组豚鼠给予0.05 g/cm2涂布，高剂量组豚鼠给予0.2 g/cm2涂布，对照组给予0.2 g/cm2空白基质。2.1.4 给药方法与观察：实验时将药物均匀涂于豚鼠背部脱毛区或脱毛破损皮肤区，用消毒纱布和胶布将涂药区覆盖固定，给药24 h后，用温水除去残留的药物，去除药物后1、24、48、72 h至d 7，记录实验豚鼠饮食、皮肤、毛发、眼睛、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等变化以及有否死亡情况等。
, 百拇医药
2.2 皮肤刺激性试验 2.2.1 豚鼠皮肤准备：方法同2.1.1。2.2.2 给药方法与观察：实验采用同体左右自身对比，分为完整皮肤组及破损皮肤组，每组8只豚鼠，左侧去毛区涂抗敏止痒乳膏1 g，右侧涂空白基质作为对照，用消毒纱布和胶布固定，给药24 h后，用温水去除残留药物，去除药物后1、24、48、72 h，肉眼观察和病理组织学检查，记录涂抹处有无红斑和水肿等情况，按文献[3]的皮肤刺激性反应评分标准评判，记录各组受试物和空白基质的平均分值，写出受试物对完整皮肤及破损皮肤的刺激性强度。
2.3 皮肤过敏试验 2.3.1 分组：将豚鼠按体重、性别随机分成3组，每组10只，雌雄各半，第1组给抗敏止痒乳膏，第2组给空白基质，第3组为阳性对照组(1%2.4-二硝基氯苯)，于给药前24 h将豚鼠背部两侧毛去掉，面积每侧约9 cm2。2.3.2 致敏接触：取抗敏止痒乳膏0.1 g涂于豚鼠左侧脱毛区，用1层油纸及2层消毒纱布覆盖，以胶布固定，持续6 h，d 7和d 14以同样方法重复1次，共3次，空白基质与阳性对照组方法同上。2.3.3 激发接触：于末次给药致敏后14 d，将抗敏止痒乳膏0.1 g、空白基质0.1 g和0.1%2.4-二硝基氯苯0.1 ml分别涂于相应动物的右侧脱毛区，6 h后去掉药物，即刻观察，然后于24、48、72 h再次观察皮肤过敏反应情况，参考文献[3]的皮肤过敏反应程度的评分标准给予评分，同时观察豚鼠有否哮喘，站立不稳等全身性过敏反应，并计算致敏反应发生率，公式为：致敏反应发生率＝有过敏反应豚鼠数/豚鼠总数×100%，按致敏发生率推算致敏性。
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3 实验结果
3.1 急性毒性试验结果表明，抗敏止痒乳膏小剂量(2 g/40 cm2)和大剂量(8 g/40 cm2)外用时对完整皮肤和破损皮肤豚鼠的饮食、皮毛光泽、呼吸、行为活动和体重等无任何影响，先后观察7 d，无一豚鼠死亡，均未出现任何急性毒性反应。
3.2 皮肤刺激性试验表明，抗敏止痒乳膏与空白基质分别对完整皮肤以及损伤皮肤的平均反应分值无明显差异，其中对完整皮肤组豚鼠，抗敏止痒乳膏与空白基质的反应分值均为0，表明二者对正常皮肤无刺激性；对破损皮肤组豚鼠，抗敏止痒乳膏与空白基质的平均反应分值在去除药物后1 h和24 h均高于0.5，但低于2，表明二者对破损皮肤有轻度刺激性，但给药后48 h，这种刺激性消失。
3.3 皮肤过敏试验结果表明，阳性对照组动物在激发给药6 h后，有轻度和中度红斑出现，但无水肿形成，72 h后红斑消失，其致敏率为100%，而抗敏止痒乳膏组及空白基质组在激发用药后，均无红斑与水肿形成，致敏率为零，表明抗敏止痒乳膏不产生致敏作用。
, http://www.100md.com
4 结论
抗敏止痒乳膏无皮肤急性毒性作用，无皮肤过敏反应，对完整皮肤无刺激反应，对破损皮肤有轻度刺激性，但用药2 d后，这种刺激性随之消失。
参考文献
[1]盛国荣：抗敏止痒乳膏的研制 海峡药学1999；11(3)∶8
[2]盛国荣等：抗敏止痒乳膏的制备与临床应用 中国药师1999；2(6)：306
[3]中华人民共和国卫生部药政管理局编：中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)，1994；209～212, 百拇医药