外加电场固定液相分子快速斑点免疫分析
免疫检测|表面活性剂|dotblot
作者：邹静
单位：邹静(白求恩国际和平医院耳鼻咽喉科，中国人民解放军耳鼻咽喉病中心，河北 石家庄 050082)
关键词：免疫检测；表面活性剂；dot blot
免疫学杂志000518
[摘 要] 目的 建立一种广泛适用于临床上筛选抗体进行疾病诊断和在分子生物学研究中测试各种蛋白表达的快速、简便的检测方法。方法 用一种特殊的多孔滤膜装置同时给多份样品施加电场，将其吸附于NC膜，进行免疫测试，称之为外加电场固定液相分子快速斑点免疫分析。分别进行线性、灵敏度和干扰因素测试。用其筛选自身免疫性疾病患者抗豚鼠内耳抗体和豚鼠内耳bFGF、FGFR、NFκB、IGF1R分子的表达。结果 呈色反应的灰度值与抗体稀释倍数的对数之间具有很好的线性关系，相关系数r＝0.995，P<0.0001。6.4%SDS不影响检测结果，灰度值与SDS浓度之间的相关系数r＝0.455，P>0.05。其检测抗原灵敏度为23 ng，当待检样品中含99.86%杂蛋白时(待检蛋白0.149%)，不能检出该分子。抗内耳抗体，31%(5/16)系统性红斑狼疮患者阳性，5%(1/19)类风湿病和强直性脊柱炎阳性，对照组2%(1/48)阳性。豚鼠内耳表达bFGF、FGFR、NFκB和IGF-IRα等4种分子。结论 外加电场固定液相分子快速斑点免疫分析是一种抗表面活性剂干扰的高效抗原抗体检测方法。
[中图分类号] R392 [文献标识码] A
[文章编号]1000-8861(2000)05-0376-04
Rapid electric field immobilizing liquid phase molecule dot blot analysis
ZOU Jing
(Department of Otolaryngology，Bethune International Peace Hospital，Shijiazhuang 050082，China)
[Abstract] Objectives To establish an anti-surfactant influence，rapid and easy immune test method that can be widely applied in screening antibody clinically and analysing protein expression in basic research.Methods Several samples were quickly absorbed to nitrocellulose(NC)membrane under electric field in a special equipment with filling NC membrane.Then an immune assay was applied to detect the proteins.It was called rapid electric field immobilizing liquid phase molecule dot blot analysis(REILMD).The linear quality ......
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单位：邹静(白求恩国际和平医院耳鼻咽喉科，中国人民解放军耳鼻咽喉病中心，河北 石家庄 050082)
关键词：免疫检测；表面活性剂；dot blot
免疫学杂志000518
[摘 要] 目的 建立一种广泛适用于临床上筛选抗体进行疾病诊断和在分子生物学研究中测试各种蛋白表达的快速、简便的检测方法。方法 用一种特殊的多孔滤膜装置同时给多份样品施加电场，将其吸附于NC膜，进行免疫测试，称之为外加电场固定液相分子快速斑点免疫分析。分别进行线性、灵敏度和干扰因素测试。用其筛选自身免疫性疾病患者抗豚鼠内耳抗体和豚鼠内耳bFGF、FGFR、NFκB、IGF1R分子的表达。结果 呈色反应的灰度值与抗体稀释倍数的对数之间具有很好的线性关系，相关系数r＝0.995，P<0.0001。6.4%SDS不影响检测结果，灰度值与SDS浓度之间的相关系数r＝0.455，P>0.05。其检测抗原灵敏度为23 ng，当待检样品中含99.86%杂蛋白时(待检蛋白0.149%)，不能检出该分子。抗内耳抗体，31%(5/16)系统性红斑狼疮患者阳性，5%(1/19)类风湿病和强直性脊柱炎阳性，对照组2%(1/48)阳性。豚鼠内耳表达bFGF、FGFR、NFκB和IGF-IRα等4种分子。结论 外加电场固定液相分子快速斑点免疫分析是一种抗表面活性剂干扰的高效抗原抗体检测方法。
[中图分类号] R392 [文献标识码] A
[文章编号]1000-8861(2000)05-0376-04
Rapid electric field immobilizing liquid phase molecule dot blot analysis
ZOU Jing
(Department of Otolaryngology，Bethune International Peace Hospital，Shijiazhuang 050082，China)
[Abstract] Objectives To establish an anti-surfactant influence，rapid and easy immune test method that can be widely applied in screening antibody clinically and analysing protein expression in basic research.Methods Several samples were quickly absorbed to nitrocellulose(NC)membrane under electric field in a special equipment with filling NC membrane.Then an immune assay was applied to detect the proteins.It was called rapid electric field immobilizing liquid phase molecule dot blot analysis(REILMD).The linear quality ......
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