人白细胞介素-6cDNA全基因的分离与鉴定
作者：张世馥 周建平 孙晓冬 李翔 沈江波 薛社普
单位：张世馥 周建平 孙晓冬 李翔 沈江波 薛社普(中国医学科学院 中国协和医科大学基础医学研究所 细胞生物室，北京 100005)
关键词：
解剖学报990327
人白细胞介素-6(hIL-6)是一种多功能的细胞因子，该基因定位于人染色体7p21位点，基因结构是由包括28个氨基酸信号肽在内的212个氨基酸组成，含有两个N-连接的糖基化位点，分子量21～26kD。hIL-6基因全长5kb，由5个外显子和4个内含子组成。hIL-6具有不同的生物活性，不但在红系细胞分化过程中起重要作用，如hIL-6可抑制人红白血病K562细胞的生长，而且能诱导K562细胞趋向巨核细胞分化，抑制爆裂型集落的形成(BFU-E)。近期研究结果表明，hIL-6在神经损伤、修复以及神经系统疾病如老年性痴呆、帕金森病的发生过程中也起重要作用，尤其是在疾病发生的早期hIL-6就会出现改变，有可能成为上述疾病早期诊断的重要指征。我们制备了大鼠胚胎肝提取液，经Phast gel电泳分离，切下约22kD的蛋白带免疫小鼠，取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合，按常规半固体细胞培养的方法制备单克隆抗体。用ELISA方法进行筛选，制备出特异性强的单克隆抗体。并以此抗体为探针筛选人骨髓cDNA文库，将筛选的cDNA片段进行DNA序列分析，经过GenBank检索证实为人白细胞介素-6(hIL-6)全cDNA基因序列。其cDNA序列与报道的序列完全一致，而且比其长数10个polyA。为我们拟对hIL-6在红系细胞分化以及在神经系统疾病如老年性痴呆、帕金森病的病理发生过程中的作用机制的研究提供了资料。
收稿1998-11, http://www.100md.com
单位：张世馥 周建平 孙晓冬 李翔 沈江波 薛社普(中国医学科学院 中国协和医科大学基础医学研究所 细胞生物室，北京 100005)
关键词：
解剖学报990327
人白细胞介素-6(hIL-6)是一种多功能的细胞因子，该基因定位于人染色体7p21位点，基因结构是由包括28个氨基酸信号肽在内的212个氨基酸组成，含有两个N-连接的糖基化位点，分子量21～26kD。hIL-6基因全长5kb，由5个外显子和4个内含子组成。hIL-6具有不同的生物活性，不但在红系细胞分化过程中起重要作用，如hIL-6可抑制人红白血病K562细胞的生长，而且能诱导K562细胞趋向巨核细胞分化，抑制爆裂型集落的形成(BFU-E)。近期研究结果表明，hIL-6在神经损伤、修复以及神经系统疾病如老年性痴呆、帕金森病的发生过程中也起重要作用，尤其是在疾病发生的早期hIL-6就会出现改变，有可能成为上述疾病早期诊断的重要指征。我们制备了大鼠胚胎肝提取液，经Phast gel电泳分离，切下约22kD的蛋白带免疫小鼠，取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合，按常规半固体细胞培养的方法制备单克隆抗体。用ELISA方法进行筛选，制备出特异性强的单克隆抗体。并以此抗体为探针筛选人骨髓cDNA文库，将筛选的cDNA片段进行DNA序列分析，经过GenBank检索证实为人白细胞介素-6(hIL-6)全cDNA基因序列。其cDNA序列与报道的序列完全一致，而且比其长数10个polyA。为我们拟对hIL-6在红系细胞分化以及在神经系统疾病如老年性痴呆、帕金森病的病理发生过程中的作用机制的研究提供了资料。
收稿1998-11, http://www.100md.com