净肠茶致畸敏感期毒性实验研究
作者：王晓东 张白嘉 谭正怀 赵军宁
单位：四川省中药研究所药理毒理室 成都 610041
关键词：净肠茶；致畸试验；大鼠
四川生理科学杂志990111
提 要 净肠茶能润肠、通便、降脂，主要用于预防和治疗中老年人便秘和高脂血症。我们在受孕大鼠的胚胎着床后并已开始进入细胞及器官分化期，灌胃给予净肠茶，观察该制剂对大鼠致畸敏感期毒性作用。结果净肠茶3、6和12g(相当于配方原料量)/kg(分别相当于人群推荐剂量的100、200和400倍)三个剂量组，对孕鼠各项指标(孕鼠增重、黄体数、吸收胎数、活胎数、死胎数、窝重)及胎鼠各项指标(雌雄比例、身长、尾长、体重、胎盘重、外观、骨骼、内脏)均无明显影响。
净肠茶是一种由番泻叶、决明子等天然植物组成的新型功能性食品，能润肠、通便、降脂，主要用于预防和治疗中老年人使秘和高脂血症。我们在受孕大鼠的胚胎着床后并已开始进入细胞及器官分化期，灌胃给予净肠茶，观察该制剂对大鼠致畸敏感期毒性作用，现将结果报告如下。
, http://www.100md.com
1 试验材料
1.1 受试药物 净肠茶浸膏，浓度200%(每毫升相当于配方原料2克)，批号960618，本所化学室提供。
1.2 动物 Wistar健康成年大鼠，一级，体重180～220g，雌性80只，雄性40只，由本所动物室提供。
1.3 试剂及其配制 甲醛、冰乙酸、2，4，6-三硝基酚、氢氧化钾、甘油、水合氯醛、茜素红、茜素红储备液(茜素红-s 50%乙酸饱和液5ml，甘油10ml，1%水合氯醛60ml混合)、茜素红应用液(取储备液5ml，用1%氢氧化钾稀释至1000ml)、透明液A(甘油200ml，氢氧化钾10g，蒸馏水790ml混合)、透明液B(甘油与蒸馏水等量混合)、Bouin's固定液(2，4，6-三硝基酚75份，甲醛20份，冰乙酸5份)。
1.4 仪器 生物显微镜、体视显微镜、游标卡尺、电子天平等。
, 百拇医药
2 实验方法[1]
2.1 分组与给药 试验设净肠茶三个剂量组和一个空白对照组。剂量采用3、6和12g(相当于配方原料量)/kg，分别相当于人群荐剂量的100、200和400倍。灌胃容积均为1ml/100g体重。
2.2 孕鼠与胎鼠检查 性成熟雌、雄大鼠按2∶1同笼后，每日早晨显微镜下观察阴道涂片，查出精子即认为该鼠已经交配，当日作为受孕0d。在受孕的第7～16d，分别按照上述剂量每天灌胃净肠茶1次。于妊娠的第20d，麻醉大鼠后剖腹取出子宫称重，记录并检查胚胎、着床数、早期吸收胎、迟死胎及活胎数。对活鼠胎逐一记录胎子体重、体长，检查胎鼠外观有无异常。将每窝1/2的活胎放入95%乙醇固定3周，取出胎仔流水冲洗数分钟后放入2g/100ml的氢氧化钾内72hr，透明后放入茜素红-s应用液染色48hr至头骨染红为止。依次再放入透明液A 2d和透明液B 2d中至软组织基本褪色。用体视显微镜作整体和骨骼检查。每窝的另1/2胎鼠放入Bouin's液中固定两周，用刀片从头到尾逐段横切，观察不同部位断面器官的大小、形状和位置。
, 百拇医药
2.3 统计学处理 各种率用X2检验，孕鼠增重用方差分析，胎鼠身长、体重、窝平均活胎数用T检验。
3 结果与讨论
在受孕大鼠的胚胎着床后并已开始进入细胞及器官分化期，灌胃给予净肠茶3、6和12g(相当于配方原料量)/kg(分别相当于人群推荐剂量的100、200和400倍)三个剂量组孕鼠各项指标(孕鼠增重、黄体数、吸收胎数、活胎数、死胎数、窝重)及胎鼠各项指标(雌雄比例、身长、尾长、体重、胎盘重、外观、骨骼、内脏)检查结果，与空白对照组比较均无统计学显著差异(表1和表2)。故可认为本次试验未发现净肠茶对大鼠有母体毒性、胚胎毒性和致畸性。
表1 孕鼠检查结果 组 别
孕鼠数(只)
剂量
, 百拇医药
(g/kg)
孕鼠增重
(g)
黄体数
吸收数
活胎数
死胎数
窝重(g)
(子宫+胎鼠)
空白组
10
-
74.6±21.0
, 百拇医药
12.2±2.7
0.3±0.2
10.5±3.4
0.9±0.7
75.1±30.0
净肠茶
10
3
65.0±20.8
10.3±2.0
0
10.0±2.9
, 百拇医药 1.1±1.4
74.2±19.9
净肠茶
10
6
58.2±29.4
10.9±2.1
0.1±0.3
11.2±3.3
0.5±1.1
80.4±20.7
净肠茶
, 百拇医药 10
12
87.2±30.5
12.5±2.6
0.3±0.2
10.9±2.7
1.5±1.4
83.1±26.8
表2 胎鼠检查结果 组 别
胎鼠数(只)
剂量
(g/kg)
, 百拇医药
雌/雄比例
身长
(mm)
尾长
(mm)
体重
(g)
胎盘重
(g)
外观 骨骼 内脏
空白组
105
-
, http://www.100md.com
1.02±0.32
44.1±5.3
13.5±1.6
5.19±1.44
0.93±0.12
未见异常
净肠茶
101
3
0.95±0.93
45.8±4.1
14.5±1.7
, 百拇医药
5.34±0.95
0.89±0.15
未见异常
净肠茶
112
6
1.05±0.58
43.7±5.3
13.7±1.6
5.18±1.29
0.84±0.15
未见异常
, 百拇医药
净肠茶
109
12
1.09±0.61
46.7±3.8
14.7±1.4
5.59±0.82
0.83±0.17
未见异常
参考文献
[1] 中华人民共和国国家标准GB15193,14-94致畸试验。, http://www.100md.com
单位：四川省中药研究所药理毒理室 成都 610041
关键词：净肠茶；致畸试验；大鼠
四川生理科学杂志990111
提 要 净肠茶能润肠、通便、降脂，主要用于预防和治疗中老年人便秘和高脂血症。我们在受孕大鼠的胚胎着床后并已开始进入细胞及器官分化期，灌胃给予净肠茶，观察该制剂对大鼠致畸敏感期毒性作用。结果净肠茶3、6和12g(相当于配方原料量)/kg(分别相当于人群推荐剂量的100、200和400倍)三个剂量组，对孕鼠各项指标(孕鼠增重、黄体数、吸收胎数、活胎数、死胎数、窝重)及胎鼠各项指标(雌雄比例、身长、尾长、体重、胎盘重、外观、骨骼、内脏)均无明显影响。
净肠茶是一种由番泻叶、决明子等天然植物组成的新型功能性食品，能润肠、通便、降脂，主要用于预防和治疗中老年人使秘和高脂血症。我们在受孕大鼠的胚胎着床后并已开始进入细胞及器官分化期，灌胃给予净肠茶，观察该制剂对大鼠致畸敏感期毒性作用，现将结果报告如下。
, http://www.100md.com
1 试验材料
1.1 受试药物 净肠茶浸膏，浓度200%(每毫升相当于配方原料2克)，批号960618，本所化学室提供。
1.2 动物 Wistar健康成年大鼠，一级，体重180～220g，雌性80只，雄性40只，由本所动物室提供。
1.3 试剂及其配制 甲醛、冰乙酸、2，4，6-三硝基酚、氢氧化钾、甘油、水合氯醛、茜素红、茜素红储备液(茜素红-s 50%乙酸饱和液5ml，甘油10ml，1%水合氯醛60ml混合)、茜素红应用液(取储备液5ml，用1%氢氧化钾稀释至1000ml)、透明液A(甘油200ml，氢氧化钾10g，蒸馏水790ml混合)、透明液B(甘油与蒸馏水等量混合)、Bouin's固定液(2，4，6-三硝基酚75份，甲醛20份，冰乙酸5份)。
1.4 仪器 生物显微镜、体视显微镜、游标卡尺、电子天平等。
, 百拇医药
2 实验方法[1]
2.1 分组与给药 试验设净肠茶三个剂量组和一个空白对照组。剂量采用3、6和12g(相当于配方原料量)/kg，分别相当于人群荐剂量的100、200和400倍。灌胃容积均为1ml/100g体重。
2.2 孕鼠与胎鼠检查 性成熟雌、雄大鼠按2∶1同笼后，每日早晨显微镜下观察阴道涂片，查出精子即认为该鼠已经交配，当日作为受孕0d。在受孕的第7～16d，分别按照上述剂量每天灌胃净肠茶1次。于妊娠的第20d，麻醉大鼠后剖腹取出子宫称重，记录并检查胚胎、着床数、早期吸收胎、迟死胎及活胎数。对活鼠胎逐一记录胎子体重、体长，检查胎鼠外观有无异常。将每窝1/2的活胎放入95%乙醇固定3周，取出胎仔流水冲洗数分钟后放入2g/100ml的氢氧化钾内72hr，透明后放入茜素红-s应用液染色48hr至头骨染红为止。依次再放入透明液A 2d和透明液B 2d中至软组织基本褪色。用体视显微镜作整体和骨骼检查。每窝的另1/2胎鼠放入Bouin's液中固定两周，用刀片从头到尾逐段横切，观察不同部位断面器官的大小、形状和位置。
, 百拇医药
2.3 统计学处理 各种率用X2检验，孕鼠增重用方差分析，胎鼠身长、体重、窝平均活胎数用T检验。
3 结果与讨论
在受孕大鼠的胚胎着床后并已开始进入细胞及器官分化期，灌胃给予净肠茶3、6和12g(相当于配方原料量)/kg(分别相当于人群推荐剂量的100、200和400倍)三个剂量组孕鼠各项指标(孕鼠增重、黄体数、吸收胎数、活胎数、死胎数、窝重)及胎鼠各项指标(雌雄比例、身长、尾长、体重、胎盘重、外观、骨骼、内脏)检查结果，与空白对照组比较均无统计学显著差异(表1和表2)。故可认为本次试验未发现净肠茶对大鼠有母体毒性、胚胎毒性和致畸性。
表1 孕鼠检查结果 组 别
孕鼠数(只)
剂量
, 百拇医药
(g/kg)
孕鼠增重
(g)
黄体数
吸收数
活胎数
死胎数
窝重(g)
(子宫+胎鼠)
空白组
10
-
74.6±21.0
, 百拇医药
12.2±2.7
0.3±0.2
10.5±3.4
0.9±0.7
75.1±30.0
净肠茶
10
3
65.0±20.8
10.3±2.0
0
10.0±2.9
, 百拇医药 1.1±1.4
74.2±19.9
净肠茶
10
6
58.2±29.4
10.9±2.1
0.1±0.3
11.2±3.3
0.5±1.1
80.4±20.7
净肠茶
, 百拇医药 10
12
87.2±30.5
12.5±2.6
0.3±0.2
10.9±2.7
1.5±1.4
83.1±26.8
表2 胎鼠检查结果 组 别
胎鼠数(只)
剂量
(g/kg)
, 百拇医药
雌/雄比例
身长
(mm)
尾长
(mm)
体重
(g)
胎盘重
(g)
外观 骨骼 内脏
空白组
105
-
, http://www.100md.com
1.02±0.32
44.1±5.3
13.5±1.6
5.19±1.44
0.93±0.12
未见异常
净肠茶
101
3
0.95±0.93
45.8±4.1
14.5±1.7
, 百拇医药
5.34±0.95
0.89±0.15
未见异常
净肠茶
112
6
1.05±0.58
43.7±5.3
13.7±1.6
5.18±1.29
0.84±0.15
未见异常
, 百拇医药
净肠茶
109
12
1.09±0.61
46.7±3.8
14.7±1.4
5.59±0.82
0.83±0.17
未见异常
参考文献
[1] 中华人民共和国国家标准GB15193,14-94致畸试验。, http://www.100md.com