海水淹溺肺水肿兔模型复制的研究
作者：董文度 赵增荣 张敏华 王琰 袁驾南 刘虹 徐根兴
单位：
关键词：
中华劳动卫生职业病杂志980220 在航海医学中，海水淹溺屡有发生[1]。淹溺者一旦发生肺水肿，病情危重、发展迅速、死亡率较高[2]。我们选用纯种新西兰兔为实验动物，向其肺内灌入海水造成急性肺损伤，成功地复制了海水淹溺肺水肿(pulmonary edema after seawater drowning,PE-SWD)的动物模型,为深入研究PE-SWD的发生机制、病理生理变化和临床救治奠定了基础。
一、材料与方法
选用一级纯种雄性新西兰兔14只，用20%氨基甲酸乙酯(1.0 g/kg)耳缘静脉麻醉。气管切开插入“Y”型玻璃套管，左侧颈总动脉插管连接检压计观察记录血压，右侧股动脉插入塑料导管供取血用。(1)模型复制：用20 ml注射器连接20 cm塑料导管，将导管插入玻璃套管内，快速向兔肺内灌入海水4 ml/kg，1分钟内灌完。(2)血气检测：每只兔在灌海水前及灌海水后不同时期分别由股动脉取血0.5 ml。用ABL-Ⅲ型血气分析仪测定动脉血pH、PaO2、PaCO2、血氧饱和度(SO2)、实际碳酸氢盐(AB)和碱剩余(BE)等6项指标。(3)血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)测定：在灌海水前及灌海水后不同时期分别从股动脉取血5 ml，按李氏[3]法处理标本。采用东亚免疫技术研究所生产的TXB2和6-keto-PGF1α放免药盒，使用XH-6010γ放射免疫测定仪定量检测。(4)肺病理学观察：家兔于灌海水后120分钟，静脉注入3.0%戊巴比妥钠(3.0 g/kg)麻醉致死作为实验组，另取4只正常兔按同样方法致死作为对照组。两下肺取材，常规固定、制片，进行光镜、电镜观察。
, http://www.100md.com
各指标测定结果用t检验进行统计学处理。
二、结果
1.呼吸、循环系统指标变化：灌海水后即刻，动物出现呼吸困难、鼻翼煽动，辅助呼吸肌收缩增强，呼吸频率显著增加。随后发绀明显，气管内不断溢出泡沫状液体，两肺布满湿口罗音(表1)。
2.血气和酸碱指标变化：灌海水后30分钟，PaO2明显下降，而后虽有缓慢回升趋势，但始终处于很低水平。PaCO2仅在灌海水后10～30分钟中度升高，在60分后反而低于灌海水前水平(表2)。
3.动脉血浆TXB2和6-keto-PGF1α变化：灌海水后30分钟，动脉血浆TXB2和6-keto-PGF1α显著升高，随后虽呈缓慢下降趋势，但仍处于较高水平(附图)。
, 百拇医药
4.肺病理形态变化：PE-SWD动物肺表面呈淡红色，可见暗红色片状区和出血区；切面呈暗红色，挤压时有粉红色水肿液溢出。光镜见肺组织有局灶性肺泡水肿、肺间质水肿、肺不张、肺充血和肺出血；未受累的肺泡呈代偿性肺气肿改变。电镜观察发现肺泡Ⅰ型和Ⅱ型上皮细胞受损、胞体肿胀、板层小体多被破坏或有排空现象；毛细血管内皮细胞肿胀，细胞膜明显受损，血管基底膜暴露，管腔内有血小板聚集和附壁现象。
表1 灌海水后兔呼吸、循环系统指标(±s,n=14) 实验阶段
呼吸频率(次/分)
血压(kPa)
呼吸困难
肺内湿口罗音
气管内溢出
, 百拇医药 泡沫状液体
发绀
灌海水前
60.29±13.04
14.21±1.10
-
-
-
-
灌海水后(min)
10
196.86±17.88**
13.03±0.76*
, 百拇医药
+
+
+
+
30
184.00±21.14**
11.43±1.36**
+
+
+
+
60
178.57±24.30**
, http://www.100md.com
9.83±0.71**
+
+
+
+
90
173.43±21.53**
8.76±1.01**
+
+
-
+
, http://www.100md.com
120
161.14±23.49**
7.92±1.10**
+
+
-
+
灌海水后与灌海水前比较，*P<0.05,**P<0.01
本课题受中国人民解放军总后勤部科研基金资助
作者单位：210099 南京，海军医学高等专科学校细胞生物学研究室
, 百拇医药
表2 灌海水后兔血气和酸碱指标变化(±s,n=14) 实验阶段
PaO2(kPa)
PaCO2(kPa)
SO2(%)
pH
AB(mmol/L)
BE(mmol/L)
灌海水前
11.19±0.53
5.10±0.21
94.49±1.58
, http://www.100md.com
7.37±0.02
23.37±1.41
-1.66±1.69
灌海水后(min)
10
3.78±0.54**
6.98±0.55**
45.29±12.86**
7.28±0.03**
17.82±2.69**
, http://www.100md.com
-6.84±3.31**
30
3.65±0.47**
6.94±0.33**
40.10±13.77**
7.19±0.04**
15.98±2.79**
-11.68±3.88**
60
4.77±1.16**
, 百拇医药
4.33±0.31**
55.67±13.92**
7.20±0.03**
12.89±2.54**
-14.47±2.83**
90
5.42±0.96**
3.38±0.24**
61.91±12.82**
, 百拇医药
7.19±0.07**
10.63±2.69**
-16.70±3.53**
120
6.38±0.92**
3.23±0.62**
66.61±11.13**
7.16±0.07**
8.29±2.96**
, 百拇医药
-19.61±3.78**
灌海水后与灌海水前比较,**P<0.01
附图 灌海水前、后不同时期兔动脉血浆TXB2和6-Keto-PGF1α变化曲线
三、讨论
海水溺水分为湿性淹溺和干性淹溺(窒息)两种类型，湿性海水淹溺一般均有肺水肿的临床表现和病理生理变化。我们认为：海水淹溺肺水肿与湿性海水淹溺本质是相同的[2]。本实验向兔肺内灌入海水，动物出现明显的呼吸困难，呼吸频率显著增加，两肺布满湿性口罗音，气管内不断溢出泡沫状液体(表1)，PaO2和SO2显著下降，发绀明显，表现出严重的、进行性的低氧血症；动脉血pH、AB和BE降低，酸中毒持续存在(表2)，血压处于较低水平；肺表面可见暗红色片状区和/或出血区，切面可挤出多量的粉红色水肿液。上述变化，符合PE-SWD的诊断标准[4]。
, http://www.100md.com
肺水肿一般分为流体静压性肺水肿和通透性肺水肿两种类型。前者因为肺毛细血管流体静压增高所引起，后者是由于肺泡上皮和/或肺微血管内皮通透性增高所致[5]。PE-SWD属于上述两种因素共同作用而形成的混合性肺水肿。关于PE-SWD发生机制的探讨，另撰文报道。本实验选用纯种新西兰兔复制的PE-SWD动物模型，技术方法简便、症状典型、指标稳定可靠、重复性好、效果满意，与临床所见PE-SWD极为相似，为深入研究PE-SWD提供了一种稳定可靠的动物模型。
参 考 文 献
1 Vaagenes P.Drowning-near drowning.Tidss Kr Nor Laegeforen,1993,113:2673～2699.
2 Cohen DS,Matthay MA,Cogan MG,et al.Pulmonary edema associated with salt water near-drowning.Am Rev Respir Dis,1992,146:794～796.
, 百拇医药
3 李振甲，杨梅芳.激素的放射免疫分析.北京：科学技术文献出版社，1985.138～170.
4 Angerio AD,Kot PA.Pathophysiology of pulmonary edema.Crit Care Nurs Q,1994,17(3):21～23.
5 Takeda A,Okumura S,Miyamoto T,et al.Comparison of extravascular lung water volume with radiographic findings in dogs with experimentally increased permeability pulmonary edema.J Vet Med Sci,1995,57:481～485.
(收稿：1997-03-26 修回：1997-05-20)
, 百拇医药
单位：
关键词：
中华劳动卫生职业病杂志980220 在航海医学中，海水淹溺屡有发生[1]。淹溺者一旦发生肺水肿，病情危重、发展迅速、死亡率较高[2]。我们选用纯种新西兰兔为实验动物，向其肺内灌入海水造成急性肺损伤，成功地复制了海水淹溺肺水肿(pulmonary edema after seawater drowning,PE-SWD)的动物模型,为深入研究PE-SWD的发生机制、病理生理变化和临床救治奠定了基础。
一、材料与方法
选用一级纯种雄性新西兰兔14只，用20%氨基甲酸乙酯(1.0 g/kg)耳缘静脉麻醉。气管切开插入“Y”型玻璃套管，左侧颈总动脉插管连接检压计观察记录血压，右侧股动脉插入塑料导管供取血用。(1)模型复制：用20 ml注射器连接20 cm塑料导管，将导管插入玻璃套管内，快速向兔肺内灌入海水4 ml/kg，1分钟内灌完。(2)血气检测：每只兔在灌海水前及灌海水后不同时期分别由股动脉取血0.5 ml。用ABL-Ⅲ型血气分析仪测定动脉血pH、PaO2、PaCO2、血氧饱和度(SO2)、实际碳酸氢盐(AB)和碱剩余(BE)等6项指标。(3)血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)测定：在灌海水前及灌海水后不同时期分别从股动脉取血5 ml，按李氏[3]法处理标本。采用东亚免疫技术研究所生产的TXB2和6-keto-PGF1α放免药盒，使用XH-6010γ放射免疫测定仪定量检测。(4)肺病理学观察：家兔于灌海水后120分钟，静脉注入3.0%戊巴比妥钠(3.0 g/kg)麻醉致死作为实验组，另取4只正常兔按同样方法致死作为对照组。两下肺取材，常规固定、制片，进行光镜、电镜观察。
, http://www.100md.com
各指标测定结果用t检验进行统计学处理。
二、结果
1.呼吸、循环系统指标变化：灌海水后即刻，动物出现呼吸困难、鼻翼煽动，辅助呼吸肌收缩增强，呼吸频率显著增加。随后发绀明显，气管内不断溢出泡沫状液体，两肺布满湿口罗音(表1)。
2.血气和酸碱指标变化：灌海水后30分钟，PaO2明显下降，而后虽有缓慢回升趋势，但始终处于很低水平。PaCO2仅在灌海水后10～30分钟中度升高，在60分后反而低于灌海水前水平(表2)。
3.动脉血浆TXB2和6-keto-PGF1α变化：灌海水后30分钟，动脉血浆TXB2和6-keto-PGF1α显著升高，随后虽呈缓慢下降趋势，但仍处于较高水平(附图)。
, 百拇医药
4.肺病理形态变化：PE-SWD动物肺表面呈淡红色，可见暗红色片状区和出血区；切面呈暗红色，挤压时有粉红色水肿液溢出。光镜见肺组织有局灶性肺泡水肿、肺间质水肿、肺不张、肺充血和肺出血；未受累的肺泡呈代偿性肺气肿改变。电镜观察发现肺泡Ⅰ型和Ⅱ型上皮细胞受损、胞体肿胀、板层小体多被破坏或有排空现象；毛细血管内皮细胞肿胀，细胞膜明显受损，血管基底膜暴露，管腔内有血小板聚集和附壁现象。
表1 灌海水后兔呼吸、循环系统指标(±s,n=14) 实验阶段
呼吸频率(次/分)
血压(kPa)
呼吸困难
肺内湿口罗音
气管内溢出
, 百拇医药 泡沫状液体
发绀
灌海水前
60.29±13.04
14.21±1.10
-
-
-
-
灌海水后(min)
10
196.86±17.88**
13.03±0.76*
, 百拇医药
+
+
+
+
30
184.00±21.14**
11.43±1.36**
+
+
+
+
60
178.57±24.30**
, http://www.100md.com
9.83±0.71**
+
+
+
+
90
173.43±21.53**
8.76±1.01**
+
+
-
+
, http://www.100md.com
120
161.14±23.49**
7.92±1.10**
+
+
-
+
灌海水后与灌海水前比较，*P<0.05,**P<0.01
本课题受中国人民解放军总后勤部科研基金资助
作者单位：210099 南京，海军医学高等专科学校细胞生物学研究室
, 百拇医药
表2 灌海水后兔血气和酸碱指标变化(±s,n=14) 实验阶段
PaO2(kPa)
PaCO2(kPa)
SO2(%)
pH
AB(mmol/L)
BE(mmol/L)
灌海水前
11.19±0.53
5.10±0.21
94.49±1.58
, http://www.100md.com
7.37±0.02
23.37±1.41
-1.66±1.69
灌海水后(min)
10
3.78±0.54**
6.98±0.55**
45.29±12.86**
7.28±0.03**
17.82±2.69**
, http://www.100md.com
-6.84±3.31**
30
3.65±0.47**
6.94±0.33**
40.10±13.77**
7.19±0.04**
15.98±2.79**
-11.68±3.88**
60
4.77±1.16**
, 百拇医药
4.33±0.31**
55.67±13.92**
7.20±0.03**
12.89±2.54**
-14.47±2.83**
90
5.42±0.96**
3.38±0.24**
61.91±12.82**
, 百拇医药
7.19±0.07**
10.63±2.69**
-16.70±3.53**
120
6.38±0.92**
3.23±0.62**
66.61±11.13**
7.16±0.07**
8.29±2.96**
, 百拇医药
-19.61±3.78**
灌海水后与灌海水前比较,**P<0.01
附图 灌海水前、后不同时期兔动脉血浆TXB2和6-Keto-PGF1α变化曲线
三、讨论
海水溺水分为湿性淹溺和干性淹溺(窒息)两种类型，湿性海水淹溺一般均有肺水肿的临床表现和病理生理变化。我们认为：海水淹溺肺水肿与湿性海水淹溺本质是相同的[2]。本实验向兔肺内灌入海水，动物出现明显的呼吸困难，呼吸频率显著增加，两肺布满湿性口罗音，气管内不断溢出泡沫状液体(表1)，PaO2和SO2显著下降，发绀明显，表现出严重的、进行性的低氧血症；动脉血pH、AB和BE降低，酸中毒持续存在(表2)，血压处于较低水平；肺表面可见暗红色片状区和/或出血区，切面可挤出多量的粉红色水肿液。上述变化，符合PE-SWD的诊断标准[4]。
, http://www.100md.com
肺水肿一般分为流体静压性肺水肿和通透性肺水肿两种类型。前者因为肺毛细血管流体静压增高所引起，后者是由于肺泡上皮和/或肺微血管内皮通透性增高所致[5]。PE-SWD属于上述两种因素共同作用而形成的混合性肺水肿。关于PE-SWD发生机制的探讨，另撰文报道。本实验选用纯种新西兰兔复制的PE-SWD动物模型，技术方法简便、症状典型、指标稳定可靠、重复性好、效果满意，与临床所见PE-SWD极为相似，为深入研究PE-SWD提供了一种稳定可靠的动物模型。
参 考 文 献
1 Vaagenes P.Drowning-near drowning.Tidss Kr Nor Laegeforen,1993,113:2673～2699.
2 Cohen DS,Matthay MA,Cogan MG,et al.Pulmonary edema associated with salt water near-drowning.Am Rev Respir Dis,1992,146:794～796.
, 百拇医药
3 李振甲，杨梅芳.激素的放射免疫分析.北京：科学技术文献出版社，1985.138～170.
4 Angerio AD,Kot PA.Pathophysiology of pulmonary edema.Crit Care Nurs Q,1994,17(3):21～23.
5 Takeda A,Okumura S,Miyamoto T,et al.Comparison of extravascular lung water volume with radiographic findings in dogs with experimentally increased permeability pulmonary edema.J Vet Med Sci,1995,57:481～485.
(收稿：1997-03-26 修回：1997-05-20)
, 百拇医药