维生素B２和C对航海船员DNA氧化损伤防护作用观察
作者：钟进义 邵顺建 孙丰运 钱余生
单位：266021 青岛医学院(钟进义、孙丰运)；解放军第401医院(邵顺建)；青岛海洋运输公司(钱余生)
关键词：
维生素B2和C对航海船员DNA氧化损伤防护作用观察 钟进义 邵顺建 孙丰运 钱余生
据调查，维生素B2和C是我国远洋船员航海期间容易缺乏的两种营养
素[1，2]。为观察航海船员维生素B2和C营养状况对DNA氧化损伤的影响，我们选择青岛远洋运输公司所属的一艘欧洲航线运输轮，以该船的部分船员
为对象，进行了本次观察。
, http://www.100md.com
一、对象与方法
1.观察对象：于轮船刚返航抵港尚在海中停泊待命靠码头时，检查者登船选
择已连续航海4个月以上的20名健康船员，年龄23～45岁，随机分为试验组
和对照组，每组10人，每人采集静脉血样3 ml备检。试验组在采血前24、12
和2小时各口服1次维生素B2 5 mg和维生素C100 mg；对照组给予安慰剂。试
验组和对照组在采血后均立即口服1次维生素B25 mg和维生素C 500 mg，进行
4小时负荷尿试验。
2.检测指标：
, 百拇医药
(1)4小时负荷尿中维生素B2和C含量：试验组和对照组均收集采血后4小时内
全部尿量，用荧光法检测尿中维生素B2含量[3]和用2，4二硝基苯肼法检测[3]
维生素C含量。
(2)白细胞DNA含量分析：采用人血白细胞DNA解螺旋荧光分析方法(FADU)进行
实验。将血样与等量含有10%小牛血清的1640培养基(GLOBE公司)混合，向T、B、P0、P1、P25个管中各加混合血样1.2 ml，置37 ℃培养箱内保温15分
钟。于P1、P2管依次加入H2O2，剂量为10、100 μmol/L，继续保温20分
, 百拇医药
钟诱发DNA损伤。将全部试管取出置0 ℃冰水中，参照Birnboim等建立的方法[4]，经提取与崩解细胞，暴露DNA及荧光染色等步骤，最后用RF540荧光分光光度计
(日本岛津公司)测定各管荧光强度。结果计算根据公式D＝(P-B/T-B)×100
[5]。式中D值为各P管荧光强度值，代表DNA含量。T管为本体系中总荧光强
度。B管为非DNA物质荧光强度。P0管为未加H2O2处理的空白对照，可表示
原发性DNA损伤状况。P0管的D值与P1或P2管D值之差，表示被H2O2损伤
, 百拇医药
的DNA数量。
二、结果
1.尿中维生素B2和C含量：对照组4小时负荷尿中维生素B2和C的平均含量(正常
标准：维生素B2>350 μg,维生素C>3 mg)均低于试验组，差别有显著意义。各
组测定的结果见表1。
表1 航海后船员4小时负荷尿中维生系B2和C含量量(
±s) 组别
, http://www.100md.com
维生素B2含量
(μg)
维生素C含量
(mg)
对照
327.91±84.52
2.43±0.66
试验
404.55±93.82**
3.81±0.75**
与对照组比 **P<0.01
, http://www.100md.com
2.DNA损伤分析：两组各P管D值见表2。与P0管不加H2O2对照比较，试验组P1
管平均D值降低1.83，对照组降低2.35，经t检验，差别均尚无显著意义(P>0.05)。
P2管平均D值，试验组为51.32，对照组为37.93，两者均较P0管明显降低(P<0.01)；
同时两者之间相差非常显著(P<0.01)。
表2 两组船员D值检验结果(±s，n=10) 组别
, 百拇医药
D值检验结果
P0
P1
P2
对照
68.02±2.69
65.67±2.78
37.93±2.88△△
试验
69.11±2.73
67.28±2.91
, http://www.100md.com
51.32±2.65**△△
与对照组比 **P<0.01 与P0管比 △△P<0.01
三、讨论
由表1可见，对照组4小时负荷尿中维生素B2和C的平均含量都低于正常参
考值[6]，表明航海后船员体内维生素B2和C含量不足，膳食营养较差。试验
组经补充维生素制剂后，船员体内维生素B2和C的含量升高，尿中测定结果达
到正常以上，已明显高于对照组。表2的DNA损伤测定结果则显示，试验组和对
, http://www.100md.com
照组空白管(P0)DNA平均含量接近，两者原发性DNA损伤程度无显著性差异，补充维生素B2和C对其无明显影响。血样经H2O2处理后，试验组和对照组的
P1和P2管DNA含量均降低，但与P0管比较，P1管的差别尚无显著性意义，P2管的差别则有非常显著意义。比较两组间P2管DNA含量可见，对照组较试
验组低26.1%，对照组降低的幅度为试验组的1.74倍(t＝8.31 P<0.01)。
本次试验结果提示，船员体内维生素B2和C的含量对DNA氧化损伤有明显
影响。航海后船员体内维生素B2和C的含量不足，经较高浓度H2O2处理后，出现明显DNA损伤，而经补充维生素制剂的试验组，相同剂量的H2O2诱发
, 百拇医药
的DNA损伤程度大大降低；说明补充维生素B2和C对DNA氧化损伤有较好的防
护作用。本试验结果同文献报道正常人群补充维生素B、E及β-胡萝卜素等
抗氧化营养素可降低H2O2诱发的外周血淋巴细胞DNA损伤的结果是一致的[7]。
同时还应注意到，微量氧化剂(H2O2 10 μmol/L)虽然在试验组和对
照组均未诱发出明显DNA损伤，但对照组DNA含量已表现出下降的趋势，其t值
为1.94，已接近t0.05(18)＝2.101的显著性水平。
, 百拇医药
维生素B2和C是体内重要的抗氧化营养素，对清除氧自由基，防止机体
的氧化损伤和肿瘤发生有重要作用[8]，由于维生素B2和C都是水溶性维生
素，体内不能多量贮存。远洋船员航海期间新鲜蔬菜水果摄入量较少，很容
易出现维生素C和B2的缺乏。因而及时适量地补充这些营养素，对保证船员的
合理营养与身体健康是十分必要的。
参 考 文 献
1 季红光，王海明，刘凯基，等.远洋船员营养调查.中华航海医学杂志，1996，3：80-83.
, 百拇医药
2 叶雪梅，周德宏，曹国模；等.远洋近海船员营养调查.
南通医学院学报，1987，(3)：18-19.
3 王喜生，殷太安，刘继鹏，等.人体营养状况评价方法.
天津：天津科技出版社，1987.165-254.
4 Birnboim HC,Jevcak JJ.Flurometric method for rapid detection of
DNA strand breaks in white blood cell produced by low doses of radiation.
Cancer Res,1981,41:1889-1891.
, http://www.100md.com
5 杨业鹏，徐厚恩，南新升.快速检验DNA链断裂的解螺旋荧光分析方法.
卫生毒理学杂志，1994，8：118-119.
6 刘志诚，于守祥.营养与食品卫生学.第2版.北京：人民卫生出版社，1987.51-65.
7 马爱国，Andrew RC,Susan JD,等.抗氧化营养素对DNA损伤的保护作用.
青岛医学院学报，1996，32：95-97.
8 Chen LC,Boissommeault GA,Clauert HF.Vitamin C,Vitamin E and cancer.
Anticancer Res,1988,8:739-741.
(收稿：1997-02-20 修回：1997-05-22), 百拇医药
单位：266021 青岛医学院(钟进义、孙丰运)；解放军第401医院(邵顺建)；青岛海洋运输公司(钱余生)
关键词：
维生素B2和C对航海船员DNA氧化损伤防护作用观察 钟进义 邵顺建 孙丰运 钱余生
据调查，维生素B2和C是我国远洋船员航海期间容易缺乏的两种营养
素[1，2]。为观察航海船员维生素B2和C营养状况对DNA氧化损伤的影响，我们选择青岛远洋运输公司所属的一艘欧洲航线运输轮，以该船的部分船员
为对象，进行了本次观察。
, http://www.100md.com
一、对象与方法
1.观察对象：于轮船刚返航抵港尚在海中停泊待命靠码头时，检查者登船选
择已连续航海4个月以上的20名健康船员，年龄23～45岁，随机分为试验组
和对照组，每组10人，每人采集静脉血样3 ml备检。试验组在采血前24、12
和2小时各口服1次维生素B2 5 mg和维生素C100 mg；对照组给予安慰剂。试
验组和对照组在采血后均立即口服1次维生素B25 mg和维生素C 500 mg，进行
4小时负荷尿试验。
2.检测指标：
, 百拇医药
(1)4小时负荷尿中维生素B2和C含量：试验组和对照组均收集采血后4小时内
全部尿量，用荧光法检测尿中维生素B2含量[3]和用2，4二硝基苯肼法检测[3]
维生素C含量。
(2)白细胞DNA含量分析：采用人血白细胞DNA解螺旋荧光分析方法(FADU)进行
实验。将血样与等量含有10%小牛血清的1640培养基(GLOBE公司)混合，向T、B、P0、P1、P25个管中各加混合血样1.2 ml，置37 ℃培养箱内保温15分
钟。于P1、P2管依次加入H2O2，剂量为10、100 μmol/L，继续保温20分
, 百拇医药
钟诱发DNA损伤。将全部试管取出置0 ℃冰水中，参照Birnboim等建立的方法[4]，经提取与崩解细胞，暴露DNA及荧光染色等步骤，最后用RF540荧光分光光度计
(日本岛津公司)测定各管荧光强度。结果计算根据公式D＝(P-B/T-B)×100
[5]。式中D值为各P管荧光强度值，代表DNA含量。T管为本体系中总荧光强
度。B管为非DNA物质荧光强度。P0管为未加H2O2处理的空白对照，可表示
原发性DNA损伤状况。P0管的D值与P1或P2管D值之差，表示被H2O2损伤
, 百拇医药
的DNA数量。
二、结果
1.尿中维生素B2和C含量：对照组4小时负荷尿中维生素B2和C的平均含量(正常
标准：维生素B2>350 μg,维生素C>3 mg)均低于试验组，差别有显著意义。各
组测定的结果见表1。
表1 航海后船员4小时负荷尿中维生系B2和C含量量(
±s) 组别, http://www.100md.com
维生素B2含量
(μg)
维生素C含量
(mg)
对照
327.91±84.52
2.43±0.66
试验
404.55±93.82**
3.81±0.75**
与对照组比 **P<0.01
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2.DNA损伤分析：两组各P管D值见表2。与P0管不加H2O2对照比较，试验组P1
管平均D值降低1.83，对照组降低2.35，经t检验，差别均尚无显著意义(P>0.05)。
P2管平均D值，试验组为51.32，对照组为37.93，两者均较P0管明显降低(P<0.01)；
同时两者之间相差非常显著(P<0.01)。
表2 两组船员D值检验结果(
±s，n=10) 组别, 百拇医药
D值检验结果
P0
P1
P2
对照
68.02±2.69
65.67±2.78
37.93±2.88△△
试验
69.11±2.73
67.28±2.91
, http://www.100md.com
51.32±2.65**△△
与对照组比 **P<0.01 与P0管比 △△P<0.01
三、讨论
由表1可见，对照组4小时负荷尿中维生素B2和C的平均含量都低于正常参
考值[6]，表明航海后船员体内维生素B2和C含量不足，膳食营养较差。试验
组经补充维生素制剂后，船员体内维生素B2和C的含量升高，尿中测定结果达
到正常以上，已明显高于对照组。表2的DNA损伤测定结果则显示，试验组和对
, http://www.100md.com
照组空白管(P0)DNA平均含量接近，两者原发性DNA损伤程度无显著性差异，补充维生素B2和C对其无明显影响。血样经H2O2处理后，试验组和对照组的
P1和P2管DNA含量均降低，但与P0管比较，P1管的差别尚无显著性意义，P2管的差别则有非常显著意义。比较两组间P2管DNA含量可见，对照组较试
验组低26.1%，对照组降低的幅度为试验组的1.74倍(t＝8.31 P<0.01)。
本次试验结果提示，船员体内维生素B2和C的含量对DNA氧化损伤有明显
影响。航海后船员体内维生素B2和C的含量不足，经较高浓度H2O2处理后，出现明显DNA损伤，而经补充维生素制剂的试验组，相同剂量的H2O2诱发
, 百拇医药
的DNA损伤程度大大降低；说明补充维生素B2和C对DNA氧化损伤有较好的防
护作用。本试验结果同文献报道正常人群补充维生素B、E及β-胡萝卜素等
抗氧化营养素可降低H2O2诱发的外周血淋巴细胞DNA损伤的结果是一致的[7]。
同时还应注意到，微量氧化剂(H2O2 10 μmol/L)虽然在试验组和对
照组均未诱发出明显DNA损伤，但对照组DNA含量已表现出下降的趋势，其t值
为1.94，已接近t0.05(18)＝2.101的显著性水平。
, 百拇医药
维生素B2和C是体内重要的抗氧化营养素，对清除氧自由基，防止机体
的氧化损伤和肿瘤发生有重要作用[8]，由于维生素B2和C都是水溶性维生
素，体内不能多量贮存。远洋船员航海期间新鲜蔬菜水果摄入量较少，很容
易出现维生素C和B2的缺乏。因而及时适量地补充这些营养素，对保证船员的
合理营养与身体健康是十分必要的。
参 考 文 献
1 季红光，王海明，刘凯基，等.远洋船员营养调查.中华航海医学杂志，1996，3：80-83.
, 百拇医药
2 叶雪梅，周德宏，曹国模；等.远洋近海船员营养调查.
南通医学院学报，1987，(3)：18-19.
3 王喜生，殷太安，刘继鹏，等.人体营养状况评价方法.
天津：天津科技出版社，1987.165-254.
4 Birnboim HC,Jevcak JJ.Flurometric method for rapid detection of
DNA strand breaks in white blood cell produced by low doses of radiation.
Cancer Res,1981,41:1889-1891.
, http://www.100md.com
5 杨业鹏，徐厚恩，南新升.快速检验DNA链断裂的解螺旋荧光分析方法.
卫生毒理学杂志，1994，8：118-119.
6 刘志诚，于守祥.营养与食品卫生学.第2版.北京：人民卫生出版社，1987.51-65.
7 马爱国，Andrew RC,Susan JD,等.抗氧化营养素对DNA损伤的保护作用.
青岛医学院学报，1996，32：95-97.
8 Chen LC,Boissommeault GA,Clauert HF.Vitamin C,Vitamin E and cancer.
Anticancer Res,1988,8:739-741.
(收稿：1997-02-20 修回：1997-05-22), 百拇医药