HPLC法测定左氟沙星滴眼液的含量
作者：杨健 赵霞 向仁芝 蔡鸿生
单位：杨健 赵霞 向仁芝 蔡鸿生(湖北医科大学附属第一医院药学部 武汉 430060)
关键词：高效液相色谱法；左氟沙星滴眼液；含量测定
990353
摘 要 采用反相高效液相色谱法测定左氟沙星滴眼液的含量，以环丙沙星为内标，Waters NoVa-PakC18为固定相，10mmol/L KH2PO4-10mmol/L溴化四丁胺—乙腈(45∶45∶10，磷酸调PH至2.8)为流动相，检测波长为293nm，结果准确可靠。
左氟沙星是新一代的喹诺酮类抗生素，具有抗菌谱广、抗菌活性强、副作用小的特点。目前国内仅有注射剂、片剂两种剂型，为丰富其给药途径，我们研制了左氟沙星滴眼液，其含量测定方法国内尚无报道。为建立其质量标准，我们以反相高效液相色谱法测定含量[1]，结果准确，为生产和开发提供了可靠的方法。
, 百拇医药
1 仪器与试药
338高效液相色谱仪(美国Beckman公司)；左氟沙星标准品(100.1%)及原料，由日本第一制药株式会社会提供；环丙沙星对照品，由湖北省药检所提供；左氟沙星滴眼液(0.3%)，乙腈为色谱纯，其它试剂为分析纯。
标准溶液的配制：精密称取左氟沙星15mg,将其置于100ml容量瓶中，用0.1N盐酸溶解定容，摇匀即得。
内标液的配制：精密称取环丙沙星对照品40mg，置于100ml容量瓶中，用0.1N盐酸定容即得。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Waters NoVa-PakC18柱(150mm×3.9mm,4μm)，流动相为10mmol/L KH2PO4-10mmol/L溴化四丁铵—乙腈(45∶45∶10)，磷酸调节PH至2.8，流速为1.0ml/min，检测波长为293nm，柱温为30℃，理论塔板数不低于2500。在此条件下，左氟沙星与环丙沙星(内标)分离度为2.94。
, 百拇医药
2.2 标准曲线的制备
精密称取标准溶液1，2，3，4，5，6ml分别置于50ml容量瓶中，再各精密加入内标液2ml，用0.1N盐酸加至刻度，摇匀，分别精密称取10ml进样，以左氟沙星与内标峰面积比对左氟沙星浓度进行回归分析，得其回归方程为Y=-0.02562+0.3056C,r=0.9998。上述结果表明两者在3～18μg/ml浓度范围内线性关系良好。
2.3 回收率实验
模拟处方比制备阴性样品(不含左氟沙星)，向其中加入精取左氟沙星标准液，配制9μg/ml，12μg/ml,15μg/ml三种浓度样液，每种浓度样液备5份，按样品含量测定方法进行，结果见表1。
表1 回收率测定结果(n=5) 加入量
(μg/ml)
, 百拇医药
平均实测值
(μg/ml)
平均回收率
(%)
RSD(%)
9
8.988
99.87
1.65
12
11.918
99.32
1.89
, http://www.100md.com
15
15.084
100.56
2.14
2.4 重现性实验
取同一批号样品5份，按样品含量测定方法操作，分别考察日内精密度与日间重复性，结果如下：日内 X=98.42%,RSD=1.84%;日间 X=98.86%,RSD=2.08%(n=5)。
2.5 稳定性实验
取同一批号样品溶液分别在1，2，4，8，12，24小时取样，按样品含量测定方法测其含量，结果为RSD=2.13%，表明样品溶液在1天内基本稳定。
2.6 样品含量测定
, 百拇医药
精密取样品溶液5ml于50ml容量瓶中，加0.1N盐酸至刻度，摇匀，再精密取2ml至50ml容量瓶中，加入精密量取的内标2ml，加0.1N盐酸至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进样10μl测定，结果见表2。表2 样品测定结果(n=5) 批号
相当于标示量(%)
RSD(%)
980514
100.56
1.25
980608
99.64
0.95
980618
, http://www.100md.com
98.84
1.46
3 讨论
本实验采用的色谱条件使左氟沙星与内标环丙沙星在同一色谱柱上得到良好分离，分离度为2.94，峰形好，未见杂质干扰，样品处理简便，易操作，便于生产质量控制。
参考文献
1 雷嘉川，张如鸿，罗顺德等.反相高效液相色谱法测定洛氟沙星血药浓度.药物分析，1997，17(5)：295.
收稿日期：1999-02-03, http://www.100md.com
单位：杨健 赵霞 向仁芝 蔡鸿生(湖北医科大学附属第一医院药学部 武汉 430060)
关键词：高效液相色谱法；左氟沙星滴眼液；含量测定
990353
摘 要 采用反相高效液相色谱法测定左氟沙星滴眼液的含量，以环丙沙星为内标，Waters NoVa-PakC18为固定相，10mmol/L KH2PO4-10mmol/L溴化四丁胺—乙腈(45∶45∶10，磷酸调PH至2.8)为流动相，检测波长为293nm，结果准确可靠。
左氟沙星是新一代的喹诺酮类抗生素，具有抗菌谱广、抗菌活性强、副作用小的特点。目前国内仅有注射剂、片剂两种剂型，为丰富其给药途径，我们研制了左氟沙星滴眼液，其含量测定方法国内尚无报道。为建立其质量标准，我们以反相高效液相色谱法测定含量[1]，结果准确，为生产和开发提供了可靠的方法。
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1 仪器与试药
338高效液相色谱仪(美国Beckman公司)；左氟沙星标准品(100.1%)及原料，由日本第一制药株式会社会提供；环丙沙星对照品，由湖北省药检所提供；左氟沙星滴眼液(0.3%)，乙腈为色谱纯，其它试剂为分析纯。
标准溶液的配制：精密称取左氟沙星15mg,将其置于100ml容量瓶中，用0.1N盐酸溶解定容，摇匀即得。
内标液的配制：精密称取环丙沙星对照品40mg，置于100ml容量瓶中，用0.1N盐酸定容即得。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Waters NoVa-PakC18柱(150mm×3.9mm,4μm)，流动相为10mmol/L KH2PO4-10mmol/L溴化四丁铵—乙腈(45∶45∶10)，磷酸调节PH至2.8，流速为1.0ml/min，检测波长为293nm，柱温为30℃，理论塔板数不低于2500。在此条件下，左氟沙星与环丙沙星(内标)分离度为2.94。
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2.2 标准曲线的制备
精密称取标准溶液1，2，3，4，5，6ml分别置于50ml容量瓶中，再各精密加入内标液2ml，用0.1N盐酸加至刻度，摇匀，分别精密称取10ml进样，以左氟沙星与内标峰面积比对左氟沙星浓度进行回归分析，得其回归方程为Y=-0.02562+0.3056C,r=0.9998。上述结果表明两者在3～18μg/ml浓度范围内线性关系良好。
2.3 回收率实验
模拟处方比制备阴性样品(不含左氟沙星)，向其中加入精取左氟沙星标准液，配制9μg/ml，12μg/ml,15μg/ml三种浓度样液，每种浓度样液备5份，按样品含量测定方法进行，结果见表1。
表1 回收率测定结果(n=5) 加入量
(μg/ml)
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平均实测值
(μg/ml)
平均回收率
(%)
RSD(%)
9
8.988
99.87
1.65
12
11.918
99.32
1.89
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15
15.084
100.56
2.14
2.4 重现性实验
取同一批号样品5份，按样品含量测定方法操作，分别考察日内精密度与日间重复性，结果如下：日内 X=98.42%,RSD=1.84%;日间 X=98.86%,RSD=2.08%(n=5)。
2.5 稳定性实验
取同一批号样品溶液分别在1，2，4，8，12，24小时取样，按样品含量测定方法测其含量，结果为RSD=2.13%，表明样品溶液在1天内基本稳定。
2.6 样品含量测定
, 百拇医药
精密取样品溶液5ml于50ml容量瓶中，加0.1N盐酸至刻度，摇匀，再精密取2ml至50ml容量瓶中，加入精密量取的内标2ml，加0.1N盐酸至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进样10μl测定，结果见表2。表2 样品测定结果(n=5) 批号
相当于标示量(%)
RSD(%)
980514
100.56
1.25
980608
99.64
0.95
980618
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98.84
1.46
3 讨论
本实验采用的色谱条件使左氟沙星与内标环丙沙星在同一色谱柱上得到良好分离，分离度为2.94，峰形好，未见杂质干扰，样品处理简便，易操作，便于生产质量控制。
参考文献
1 雷嘉川，张如鸿，罗顺德等.反相高效液相色谱法测定洛氟沙星血药浓度.药物分析，1997，17(5)：295.
收稿日期：1999-02-03, http://www.100md.com