HPLC法测定盐酸土霉素的含量
作者：刘玉英 李兰忠
单位：刘玉英(山东济宁市药品检验所 济宁272145)；李兰忠(山东济宁市药品检验所 济宁272145)
关键词：盐酸土霉素；HPLC法；含量测定
数理医药学杂志000533
摘 要： 采用HPLC法测定盐酸土霉素的含量，样品平均回收率为99.5%，RSD %=0.8%(n=6)。结果表明，该方法准确、灵敏、重现性好。
中图分类号： R 978.1+4 文献标识码： A 文章编号：1004-4337(2000)05-0442-01
盐酸土霉素为四环素类抗生素，抗菌谱广，其抗菌谱与金霉素相似。《卫生部药品标准》采用微生物效价法进行测定，方法繁琐。本文采用HPLC法测定其含量，方法简便快捷，与微生物效价法比较两种方法结果一致。
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1 仪器与试药
LC-5A高效液相色谱仪，SP-2AM紫外检测器，CR-3A数据处理机。盐酸土霉素对照品由中国药品生物检定所提供；原料药、辅料及盐酸土霉素片均由鲁抗医药集团公司提供；其它试剂均为分析纯。
2 实验条件
2.1 色谱条件 色谱柱ODS柱(0.15m×6.0)；流动相：乙睛-0.1mol/L 枸椽酸(15∶85)；检测波长：353nm。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取盐酸土霉素对照品17.0mg，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
2.3 样品溶液的制备 精密称取盐酸土霉素片10片，研细，精密称取适量(约相当于盐酸土霉素17.0mg)置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，滤过，精密吸取续滤液5ml，置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
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2.4 空白溶液的制备 按处方量精密称取辅料(相当于17.0mg盐酸土霉素配比量)，照样品溶液制备项下操作制备空白溶液。
3 结果与分析
3.1 线性实验 精密称取盐酸土霉素对照品17.6mg置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，分别精密量取2、4、5、6、8、10ml分置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，进样10μl，记录色谱图，以色谱峰面积为纵座标，对照品溶液浓度(ug/ml)为横座标，得回归方程y=-176.86+217.99x，r=0.9997，表明盐酸土霉素在25.6～128.1ug/ml范围内，线性关系良好。
3.2 精密度试验 取对照品溶液，连续进样5次，相对标准偏差0.9%。
3.3 稳定性试验 取对照品溶液，隔6小时进样，峰面积保持稳定。
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3.4 空白试验 取空白溶液，滤过，进样10μl，在土霉素色谱峰处无吸收峰，证明无干扰。
3.5 回收率试验 精密称取盐酸土霉素对照品约17.0mg按处方量加入辅料，照样品溶液制备项下操作进样10μl，记录色谱图。测得平均回收率为99.5%，RSD %=0.8%，结果见表1。
表1 加样回收率测定结果 (n=3) 序号
加入量(g)
测得量(g)
回收率(%)
1
0.0148
0.01472
, 百拇医药
99.46
2
0.0149
0.01492
100.13
3
0.0167
0.01674
100.27
4
0.0160
0.01598
99.88
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5
0.0156
0.01537
98.53
6
0.0157
0.01548
98.60
3.6 样品测定 取样品溶液，滤过，进样10μl，测得峰面积，计算含量，结果见表2。表2 盐酸土霉素片含量测定结果 (n=3) 批 号
HPLC法(%)
微生物效价法(%)
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990501
95.04
96.2
990453
98.03
98.2
990457
96.21
97.7
4 小结
4.1 本法与微生物效价法测定结果进行比较，无显著性差异，说明该方法准确、可靠、快速。
4.2 在甲醇溶液中，盐酸土霉素6小时内保持稳定，故检验时应尽快操作。
参 考 文 献
1，郭成明等.盐酸土霉素HPLC测定方法的研究.中国抗生素杂志，1997，22(1)：76.
2，何海霞等.高效液相色谱法测定人血清中二甲胺四环素的浓度及药代动力学研究.中国药房，1997，8(1)：26.
3，卫生部药品标准.抗生素药品，第一册，1989，3.
收稿日期：2000-04-10, 百拇医药
单位：刘玉英(山东济宁市药品检验所 济宁272145)；李兰忠(山东济宁市药品检验所 济宁272145)
关键词：盐酸土霉素；HPLC法；含量测定
数理医药学杂志000533
摘 要： 采用HPLC法测定盐酸土霉素的含量，样品平均回收率为99.5%，RSD %=0.8%(n=6)。结果表明，该方法准确、灵敏、重现性好。
中图分类号： R 978.1+4 文献标识码： A 文章编号：1004-4337(2000)05-0442-01
盐酸土霉素为四环素类抗生素，抗菌谱广，其抗菌谱与金霉素相似。《卫生部药品标准》采用微生物效价法进行测定，方法繁琐。本文采用HPLC法测定其含量，方法简便快捷，与微生物效价法比较两种方法结果一致。
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1 仪器与试药
LC-5A高效液相色谱仪，SP-2AM紫外检测器，CR-3A数据处理机。盐酸土霉素对照品由中国药品生物检定所提供；原料药、辅料及盐酸土霉素片均由鲁抗医药集团公司提供；其它试剂均为分析纯。
2 实验条件
2.1 色谱条件 色谱柱ODS柱(0.15m×6.0)；流动相：乙睛-0.1mol/L 枸椽酸(15∶85)；检测波长：353nm。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取盐酸土霉素对照品17.0mg，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
2.3 样品溶液的制备 精密称取盐酸土霉素片10片，研细，精密称取适量(约相当于盐酸土霉素17.0mg)置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，滤过，精密吸取续滤液5ml，置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
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2.4 空白溶液的制备 按处方量精密称取辅料(相当于17.0mg盐酸土霉素配比量)，照样品溶液制备项下操作制备空白溶液。
3 结果与分析
3.1 线性实验 精密称取盐酸土霉素对照品17.6mg置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，分别精密量取2、4、5、6、8、10ml分置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，进样10μl，记录色谱图，以色谱峰面积为纵座标，对照品溶液浓度(ug/ml)为横座标，得回归方程y=-176.86+217.99x，r=0.9997，表明盐酸土霉素在25.6～128.1ug/ml范围内，线性关系良好。
3.2 精密度试验 取对照品溶液，连续进样5次，相对标准偏差0.9%。
3.3 稳定性试验 取对照品溶液，隔6小时进样，峰面积保持稳定。
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3.4 空白试验 取空白溶液，滤过，进样10μl，在土霉素色谱峰处无吸收峰，证明无干扰。
3.5 回收率试验 精密称取盐酸土霉素对照品约17.0mg按处方量加入辅料，照样品溶液制备项下操作进样10μl，记录色谱图。测得平均回收率为99.5%，RSD %=0.8%，结果见表1。
表1 加样回收率测定结果 (n=3) 序号
加入量(g)
测得量(g)
回收率(%)
1
0.0148
0.01472
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99.46
2
0.0149
0.01492
100.13
3
0.0167
0.01674
100.27
4
0.0160
0.01598
99.88
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5
0.0156
0.01537
98.53
6
0.0157
0.01548
98.60
3.6 样品测定 取样品溶液，滤过，进样10μl，测得峰面积，计算含量，结果见表2。表2 盐酸土霉素片含量测定结果 (n=3) 批 号
HPLC法(%)
微生物效价法(%)
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990501
95.04
96.2
990453
98.03
98.2
990457
96.21
97.7
4 小结
4.1 本法与微生物效价法测定结果进行比较，无显著性差异，说明该方法准确、可靠、快速。
4.2 在甲醇溶液中，盐酸土霉素6小时内保持稳定，故检验时应尽快操作。
参 考 文 献
1，郭成明等.盐酸土霉素HPLC测定方法的研究.中国抗生素杂志，1997，22(1)：76.
2，何海霞等.高效液相色谱法测定人血清中二甲胺四环素的浓度及药代动力学研究.中国药房，1997，8(1)：26.
3，卫生部药品标准.抗生素药品，第一册，1989，3.
收稿日期：2000-04-10, 百拇医药