84消毒液浓度及作用时间对其灭菌效果的影响*
作者：许莲华 李秀珍 张镇静
单位：许莲华(南京医科大学第一附属医院， 南京 210029)；李秀珍(南京医科大学第一附属医院， 南京 210029)；张镇静(南京医科大学第一附属医院， 南京 210029)
关键词：84消毒液；体温计；灭菌
护理学杂志000103
摘 要：为探讨84消毒液对日常医疗器械消毒的最佳浓度及放置时间，以确保其消毒效果，将84消毒液配制成0.5%、1.0%、1.5%、2.0% 4种浓度，检测不同时间消毒液中的氯含量及细菌培养阳性数，同时采用酶联免疫吸附法检测4种浓度对HBsAg的杀灭力。结果，4种浓度的84消毒液随时间延长有效氯含量下降；24 h后，0.5%、1.0%组检测细菌阳性数逐渐增多；2.0%对HBsAg杀灭力最强。提示2.0% 84消毒液浸泡消毒体温计，72 h更换1次，可达到灭菌效果。
, http://www.100md.com
Effect of the Concentration and Action Time of 84 Disinfectant on Sterilization
Xu Lianhua Li Xiuzhen Zhang Zhenjing
(The First Affiliated Hospital, Nanjing Medical University, Nanjing 210029)
Abstract：To investigate the appropriate concentration and storage duration of 84 disinfectant for routine medical equipment, 84 disinfectant was made four concentrations of 0.5 %, 1.0 %, 1.5 % and 2.0 %. The chloride content and amount of bacterial culture in the disinfectant were measured during different action time points. At the same time, the killing activity of the disinfectant to HBsAg was detected by using ELISA. The results showed that the chloride content in 84 disinfectant was decreased with the prolongation of action time for 4 concentrations of 84 disinfectant. 24 h later, the amount of bacteria in 0.5 % or 1.0 % 84 disinfectant was increased. The killing activity of 84 disinfectant to HBsAg was strongest in the concentration of 2.0 %. It was suggested that 84 disinfectant of 2.0 % could effectively kill the bacteria and HBsAg on the thermometer under the disinfectant changed every 72 h.
, 百拇医药
Key words：84 disinfectant thermometer sterilization▲
84消毒液是一种含氯的消毒剂，目前较广泛应用于临床器械的消毒灭菌。为了探讨其有效消毒浓度与有效消毒时间，我们将护理器材中常用的体温计作为检测对象，将84消毒液配制成不同浓度，观察其不同时间的有效成份和消毒灭菌效果，旨在为临床使用84消毒液提供依据。
1 材料
84消毒液原液由江苏爱特福药物保健品有限公司生产，批号980110。消毒样本为本院血液科、消化科、呼吸科、心脏科住院病人使用中的体温计。
2 方法
2.1 消毒体温计的浸泡液阳性率检测
沸水冷却后，由笔者将84消毒液配制成浓度为0.5%、1.0%、1.5%、2.0%的消毒液，立即进行检测，时间为0 h。按我院临床使用常规，将每种浓度的消毒液各盛于2个无菌有盖方盘中，方盘1盛200 ml，方盘2盛500 ml，置阴凉避光处。体温计使用频数按常规4 h 1次、24 h 6次、48 h 12次、72 h 18次。每次每个方盘中消毒体温计35～40支(为病区单位每次使用的数量)。体温计从病人口中取出后立即放入方盘1中浸泡30 min，然后放入方盘2中进行终末消毒30 min。分别于0、4、24、48、72 h在无菌操作下吸取方盘2浸泡液，每个标本1 ml。在以上各病区每次取3个标本，每个标本做3个培养基，4个病区每个时间段共培养36个标本，采用火焰灭菌法放入无菌试管内送细菌室进行细菌培养，作菌落计数[1]。
, 百拇医药
2.2 有效氯含量测定
吸取方盘2浸泡液10 ml置碘量瓶中，加硫酸、碘化钾混匀，加盖避光放置5 min，用硫代硫酸钠标准液边滴边摇匀，呈淡黄色时加淀粉酶滴至终点。读取硫代硫酸钠消耗数×3.545÷10×1000=mg/L(氯含量)[2]。
2.3 HBsAg检测
采用酶联免疫吸附法检测HBsAg，试剂盒由上海实业科华生物技术有限公司提供。①采取方盘2中样本检测HBsAg，样本数、时间段同细菌检测。②对4种浓度的84消毒液各放入HBsAg 250 ng，30 min后分别取36个样本，共144个样本。检测30 min、24 h、48 h、72 h的HBsAg残余量(OD值)和样本阳性数。
3 结果
3.1 4种浓度84消毒液氯含量变化与杀菌效果见表1
, 百拇医药
表1 4种浓度84消毒液氯含量变化与杀菌效果 (
±s，mg/L) 浓度
(%)
n
0 h
4 h
24 h
48 h
72 h
氯含量
阳性数
氯含量
, 百拇医药
阳性数
氯含量
阳性数
氯含量
阳性数
氯含量
阳性数
0.5
36
435±0
0
430±0
0
, 百拇医药
380±0.6
6
330±0.2
9
270±0.9
9
1.0
36
768±0.2
0
760±0.2
0
640±0.1
, http://www.100md.com
3
590±0.5
9
550±0.7
9*
1.5
36
1 386±0.2
0
1 370±0.2
0
1 190±1.2
0
, http://www.100md.com
1 050±2.1
0
970±0.4
0△
2.0
36
1 612±0.4
0
1 590±0.4
0
1 540±0.3
0
1 490±0.4
, 百拇医药
0
1 370±0.2
0△
经χ2检验：各浓度组间细菌阳性数比较，P<0.01； △与0.5%组比较，P<0.05
* 与1.5%、2.0%组比较，P<0.05
表1示，随时间的延长，各浓度的84消毒液中氯含量均呈下降趋势。其中0.5%、1.0% 84消毒液细菌阳性数则随氯含量的下降而上升。1.5%、2.0%浓度组细菌检测阳性数均为0。
3.2 4种浓度84消毒液对HBsAg的杀灭作用
3.2.1 临床应用中各浓度组及各时段HBsAg检测结果：均为阴性。
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3.2.2 各浓度组加入HBsAg后对其的杀灭作用：见表2。表2 4种浓度的84消毒液对HBsAg的杀灭效果比较 (±s) 浓度
(%)
n
HBsAg
加入量
(ng)
30 min
24 h
48 h
72 h
, 百拇医药
OD值*
阳性数△
OD值
阳性数
OD值
阳性数
OD值
阳性数
0.5
36
250
2.54±0.001**
, 百拇医药
36△△
0.02±0.001
0
0.01±0.001
0
0.01±0.001
0
1.0
36
250
0.62±0.002**
36△△
, 百拇医药
0.02±0.001
0
0.01±0.001
0
0.01±0.001
0
1.5
36
250
0.08±0.001**
36△△
0.02±0.001
, 百拇医药
0
0.01±0.001
0
0.01±0.001
0
2.0
36
250
0.02±0.001
0
0.01±0.001
0
0
, 百拇医药
0
0
0
* 30 min时各组间平均OD值比较，经F检验，P<0.01；** 与2.0%组比较，P<0.01
△30 min时各组间HBsAg阳性数比较，经χ2检验，P<0.01； △△ 与2.0%组比较，P<0.01
4 讨论
84消毒液是一种含氯消毒剂，其杀菌主要依赖于次氯酸的氧化作用。次氯酸可侵入细胞内与蛋白质发生氧化作用或破坏其磷酸脱氢酶，使糖代谢失调而致细菌死亡，从而达到对体温计的灭菌效果。
, 百拇医药
体温计是护理工作中最常用的器材之一，常选择口腔、腋下和直肠测温法。如体温计消毒灭菌达不到预期的效果，细菌、病毒将通过粘膜及破损皮肤侵入人体，从而使人体感染。因而选择最佳浓度及作用时间对体温计的消毒灭菌尤为重要，是预防医院感染的措施之一。
结合表1、表2进行分析，4 h时体温计使用频数为1次，4种浓度84消毒液检测细菌为阴性，在24、48、72 h时，1.5%、2.0% 84消毒液检样仍为阴性，0.5%、1.0%组则随氯含量的下降，细菌阳性数逐渐上升。说明在低浓度状态下随着时间的延长，使用频率增加，氯含量明显下降，细菌检测阳性数上升，同时说明有效氯含量越高，杀菌效果越强。临床使用中各浓度组的84消毒液各时段均未检出HBsAg，可能原因为标本来自未染HBsAg的一般内科病人。为了证实84消毒液杀灭HBsAg的最佳浓度与时间，对各浓度组每个样本中加入250 ng HBsAg。结果，2.0% 84消毒液在30 min时即大量杀灭HBsAg，36个样本均为阴性，而其余3组各36个样本均为阳性。提示2.0%84消毒液杀灭HBsAg效果最好。浸泡消毒体温计，72 h更换1次，可达到较理想的灭菌效果。■
* 南京医科大学科研基金资助项目(No.NY.97062)参考文献：
[1]李影林主编.临床微生物及检验.北京：人民卫生出版社，1995.47～48
[2]薛广波主编.灭菌.消毒.防腐.保藏.北京：人民卫生出版社，1993.253～261
收稿日期：1999-06-07
修回日期：1999-10-08, 百拇医药
单位：许莲华(南京医科大学第一附属医院， 南京 210029)；李秀珍(南京医科大学第一附属医院， 南京 210029)；张镇静(南京医科大学第一附属医院， 南京 210029)
关键词：84消毒液；体温计；灭菌
护理学杂志000103
摘 要：为探讨84消毒液对日常医疗器械消毒的最佳浓度及放置时间，以确保其消毒效果，将84消毒液配制成0.5%、1.0%、1.5%、2.0% 4种浓度，检测不同时间消毒液中的氯含量及细菌培养阳性数，同时采用酶联免疫吸附法检测4种浓度对HBsAg的杀灭力。结果，4种浓度的84消毒液随时间延长有效氯含量下降；24 h后，0.5%、1.0%组检测细菌阳性数逐渐增多；2.0%对HBsAg杀灭力最强。提示2.0% 84消毒液浸泡消毒体温计，72 h更换1次，可达到灭菌效果。
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Effect of the Concentration and Action Time of 84 Disinfectant on Sterilization
Xu Lianhua Li Xiuzhen Zhang Zhenjing
(The First Affiliated Hospital, Nanjing Medical University, Nanjing 210029)
Abstract：To investigate the appropriate concentration and storage duration of 84 disinfectant for routine medical equipment, 84 disinfectant was made four concentrations of 0.5 %, 1.0 %, 1.5 % and 2.0 %. The chloride content and amount of bacterial culture in the disinfectant were measured during different action time points. At the same time, the killing activity of the disinfectant to HBsAg was detected by using ELISA. The results showed that the chloride content in 84 disinfectant was decreased with the prolongation of action time for 4 concentrations of 84 disinfectant. 24 h later, the amount of bacteria in 0.5 % or 1.0 % 84 disinfectant was increased. The killing activity of 84 disinfectant to HBsAg was strongest in the concentration of 2.0 %. It was suggested that 84 disinfectant of 2.0 % could effectively kill the bacteria and HBsAg on the thermometer under the disinfectant changed every 72 h.
, 百拇医药
Key words：84 disinfectant thermometer sterilization▲
84消毒液是一种含氯的消毒剂，目前较广泛应用于临床器械的消毒灭菌。为了探讨其有效消毒浓度与有效消毒时间，我们将护理器材中常用的体温计作为检测对象，将84消毒液配制成不同浓度，观察其不同时间的有效成份和消毒灭菌效果，旨在为临床使用84消毒液提供依据。
1 材料
84消毒液原液由江苏爱特福药物保健品有限公司生产，批号980110。消毒样本为本院血液科、消化科、呼吸科、心脏科住院病人使用中的体温计。
2 方法
2.1 消毒体温计的浸泡液阳性率检测
沸水冷却后，由笔者将84消毒液配制成浓度为0.5%、1.0%、1.5%、2.0%的消毒液，立即进行检测，时间为0 h。按我院临床使用常规，将每种浓度的消毒液各盛于2个无菌有盖方盘中，方盘1盛200 ml，方盘2盛500 ml，置阴凉避光处。体温计使用频数按常规4 h 1次、24 h 6次、48 h 12次、72 h 18次。每次每个方盘中消毒体温计35～40支(为病区单位每次使用的数量)。体温计从病人口中取出后立即放入方盘1中浸泡30 min，然后放入方盘2中进行终末消毒30 min。分别于0、4、24、48、72 h在无菌操作下吸取方盘2浸泡液，每个标本1 ml。在以上各病区每次取3个标本，每个标本做3个培养基，4个病区每个时间段共培养36个标本，采用火焰灭菌法放入无菌试管内送细菌室进行细菌培养，作菌落计数[1]。
, 百拇医药
2.2 有效氯含量测定
吸取方盘2浸泡液10 ml置碘量瓶中，加硫酸、碘化钾混匀，加盖避光放置5 min，用硫代硫酸钠标准液边滴边摇匀，呈淡黄色时加淀粉酶滴至终点。读取硫代硫酸钠消耗数×3.545÷10×1000=mg/L(氯含量)[2]。
2.3 HBsAg检测
采用酶联免疫吸附法检测HBsAg，试剂盒由上海实业科华生物技术有限公司提供。①采取方盘2中样本检测HBsAg，样本数、时间段同细菌检测。②对4种浓度的84消毒液各放入HBsAg 250 ng，30 min后分别取36个样本，共144个样本。检测30 min、24 h、48 h、72 h的HBsAg残余量(OD值)和样本阳性数。
3 结果
3.1 4种浓度84消毒液氯含量变化与杀菌效果见表1
, 百拇医药
表1 4种浓度84消毒液氯含量变化与杀菌效果 (
±s，mg/L) 浓度(%)
n
0 h
4 h
24 h
48 h
72 h
氯含量
阳性数
氯含量
, 百拇医药
阳性数
氯含量
阳性数
氯含量
阳性数
氯含量
阳性数
0.5
36
435±0
0
430±0
0
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380±0.6
6
330±0.2
9
270±0.9
9
1.0
36
768±0.2
0
760±0.2
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640±0.1
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3
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9
550±0.7
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1.5
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1 386±0.2
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0
1 190±1.2
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1 050±2.1
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970±0.4
0△
2.0
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1 612±0.4
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经χ2检验：各浓度组间细菌阳性数比较，P<0.01； △与0.5%组比较，P<0.05
* 与1.5%、2.0%组比较，P<0.05
表1示，随时间的延长，各浓度的84消毒液中氯含量均呈下降趋势。其中0.5%、1.0% 84消毒液细菌阳性数则随氯含量的下降而上升。1.5%、2.0%浓度组细菌检测阳性数均为0。
3.2 4种浓度84消毒液对HBsAg的杀灭作用
3.2.1 临床应用中各浓度组及各时段HBsAg检测结果：均为阴性。
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3.2.2 各浓度组加入HBsAg后对其的杀灭作用：见表2。表2 4种浓度的84消毒液对HBsAg的杀灭效果比较 (
±s) 浓度(%)
n
HBsAg
加入量
(ng)
30 min
24 h
48 h
72 h
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OD值*
阳性数△
OD值
阳性数
OD值
阳性数
OD值
阳性数
0.5
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2.54±0.001**
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* 30 min时各组间平均OD值比较，经F检验，P<0.01；** 与2.0%组比较，P<0.01
△30 min时各组间HBsAg阳性数比较，经χ2检验，P<0.01； △△ 与2.0%组比较，P<0.01
4 讨论
84消毒液是一种含氯消毒剂，其杀菌主要依赖于次氯酸的氧化作用。次氯酸可侵入细胞内与蛋白质发生氧化作用或破坏其磷酸脱氢酶，使糖代谢失调而致细菌死亡，从而达到对体温计的灭菌效果。
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体温计是护理工作中最常用的器材之一，常选择口腔、腋下和直肠测温法。如体温计消毒灭菌达不到预期的效果，细菌、病毒将通过粘膜及破损皮肤侵入人体，从而使人体感染。因而选择最佳浓度及作用时间对体温计的消毒灭菌尤为重要，是预防医院感染的措施之一。
结合表1、表2进行分析，4 h时体温计使用频数为1次，4种浓度84消毒液检测细菌为阴性，在24、48、72 h时，1.5%、2.0% 84消毒液检样仍为阴性，0.5%、1.0%组则随氯含量的下降，细菌阳性数逐渐上升。说明在低浓度状态下随着时间的延长，使用频率增加，氯含量明显下降，细菌检测阳性数上升，同时说明有效氯含量越高，杀菌效果越强。临床使用中各浓度组的84消毒液各时段均未检出HBsAg，可能原因为标本来自未染HBsAg的一般内科病人。为了证实84消毒液杀灭HBsAg的最佳浓度与时间，对各浓度组每个样本中加入250 ng HBsAg。结果，2.0% 84消毒液在30 min时即大量杀灭HBsAg，36个样本均为阴性，而其余3组各36个样本均为阳性。提示2.0%84消毒液杀灭HBsAg效果最好。浸泡消毒体温计，72 h更换1次，可达到较理想的灭菌效果。■
* 南京医科大学科研基金资助项目(No.NY.97062)参考文献：
[1]李影林主编.临床微生物及检验.北京：人民卫生出版社，1995.47～48
[2]薛广波主编.灭菌.消毒.防腐.保藏.北京：人民卫生出版社，1993.253～261
收稿日期：1999-06-07
修回日期：1999-10-08, 百拇医药