利用单克隆抗体技术及金标免疫分析法制备吗啡快速检测试纸
作者：陈实平 金淑敏 宋朝锦* 董红艳 程 凯 张大明* 陈克铨
单位：中国医学科学院 中国协和医科大学 基础医学研究所， 北京100005
关键词：吗啡；单克隆抗体；金标免疫分析法
中图号 R971 中图号 R971.+2 R392.11
吗啡是主要毒品之一，在反毒禁毒斗争中，需要一种适合于查禁人员现场使用的快速准确检测吸毒者体内微量吗啡的检测用品，本研究利用单克隆抗体(简称单抗)技术和胶体金标记免疫分析技术研制出吗啡快速检测试纸。
吗啡分子量很小，是半抗原，为了制备单抗必须将吗啡与载体蛋白连接形成抗原，本研究采用混合酸酐法制备吗啡抗原获得成功。然后用合成的吗啡抗原免疫小鼠，免疫5次。细胞融合按常规方法进行，融合后的细胞接种于甲基纤维素半固体培养基上，经过转移克隆、筛选等步骤，最终获得8株抗吗啡单克隆抗体细胞株。经鉴定，这8株单抗均为IgG1类，亲和常数在2×108～1×109 L/mol之间，与吗啡的代谢物、可待因等物质有不同程度的交叉反应。最后利用金标免疫分析法制备快速检测试纸。先将抗体以胶体金标记，再根据竞争法原理，选择适当的浓度将竞争性抗原和金标抗体分别固定于不同的载体上，经粘合、切割等步骤制备成检测试纸。试纸的灵敏度为250 ng/ml，反应时间3～5 min，可在常温下储存1年。经有关部门鉴定和办案试用，主要技术指标已达到国际先进水平，可满足现场筛查的要求。
*北京市法医检验鉴定中心
(1998-09-04收稿), 百拇医药(陈实平 金淑敏 宋朝锦* 董红艳 程 凯 张大明* 陈克铨)
单位：中国医学科学院 中国协和医科大学 基础医学研究所， 北京100005
关键词：吗啡；单克隆抗体；金标免疫分析法
中图号 R971 中图号 R971.+2 R392.11
吗啡是主要毒品之一，在反毒禁毒斗争中，需要一种适合于查禁人员现场使用的快速准确检测吸毒者体内微量吗啡的检测用品，本研究利用单克隆抗体(简称单抗)技术和胶体金标记免疫分析技术研制出吗啡快速检测试纸。
吗啡分子量很小，是半抗原，为了制备单抗必须将吗啡与载体蛋白连接形成抗原，本研究采用混合酸酐法制备吗啡抗原获得成功。然后用合成的吗啡抗原免疫小鼠，免疫5次。细胞融合按常规方法进行，融合后的细胞接种于甲基纤维素半固体培养基上，经过转移克隆、筛选等步骤，最终获得8株抗吗啡单克隆抗体细胞株。经鉴定，这8株单抗均为IgG1类，亲和常数在2×108～1×109 L/mol之间，与吗啡的代谢物、可待因等物质有不同程度的交叉反应。最后利用金标免疫分析法制备快速检测试纸。先将抗体以胶体金标记，再根据竞争法原理，选择适当的浓度将竞争性抗原和金标抗体分别固定于不同的载体上，经粘合、切割等步骤制备成检测试纸。试纸的灵敏度为250 ng/ml，反应时间3～5 min，可在常温下储存1年。经有关部门鉴定和办案试用，主要技术指标已达到国际先进水平，可满足现场筛查的要求。
*北京市法医检验鉴定中心
(1998-09-04收稿), 百拇医药(陈实平 金淑敏 宋朝锦* 董红艳 程 凯 张大明* 陈克铨)