猴开角青光眼模型的制作*
作者：周雄武 刘金华 杜蜀华 李国彦
单位：周雄武、刘金华、杜蜀华：同济医科大学附属同济医院眼科，武汉 430030；李国彦：武汉市第一医院眼科，武汉430022
关键词：青光眼，开角；模型
同济医科大学学报990524 摘要 用氩激光激射恒河猴眼功能小梁网制作开角青光眼模型。取6只猴12只眼用于模型制作。激射部位是小梁网的后半部即功能小梁网区，相邻两激射点的烧灼斑相连接，范围是360°。两周后重复激射，共3至5次。激光参数是：光斑直径50 μm，能量800 mW，时间0.5～1.0 s。每次激射前及最后一次激射之后平均38 d(21～97 d)进行眼压测量，眼底杯盘比值测量及房角观察。有4只猴8只眼激射后眼压持续升高，眼底杯盘比值增大，激射后房角仍为宽角。实验表明猴开角青光眼模型的制作是成功的。
中图法分类号 R454.2， R775.2
, http://www.100md.com
Development of Primate Open-angle Glaucoma Model in Rhesus Monkey
Zhou Xiongwu, Liu Jinhua, Du Shuhua et al
Department of Ophthalmology, Tongji Hospital, Tongji Medical University, Wuhan 430030
Abstract Primate open-angle glaucoma model was developed in 6 rhesus monkeys (12 eyes) by photocoagulating the functional trabecular meshwork (TM) with argon laser. The laser spot was moved on the posterior portion of the TM (the functional portion) confluently and circumferentially. Each eye was photocoagulated 3 to 5 times at an interval of 2 weeks. Laser settings were as follows: 50 μm, 800 mW, 0.5 to 1.0 s. Tonography, goniography and optic disc examination were made before each photocoagulation and average 38 days (21 to 97 days) later after the last photocoagulation. The results showed that 8 eyes of 4 monkeys had persistent intraocular hypertension with enlarged C/D values and open anterior chamber angle. Open angle glaucoma model in rhesus monkey was made successfully.
, http://www.100md.com
Key words laser； glaucoma； model
目前对开角型青光眼的认识还远远不够清楚，而开角型青光眼发病的隐匿性以及对视功能损害的不可逆性又迫使人们需要对该病有更深的认识。制作恰当的开角型青光眼的动物模型以供实验研究是很有意义的。我们参考国外的报道[1]并结合自己的体会，用氩激光激射功能小梁网制作了猴开角型青光眼模型。
1 材料和方法
1.1 材料
动物：云南野生动物所售出的恒河猴，雌雄不拘，体重7.5～11 kg，本实验取6只猴12只眼进行模型制作。氩激光机：德国产蔡氏氩激光机。日本产眼底照相机。房角镜。修兹眼压计及药品。
1.2 方法
, http://www.100md.com ① 动物麻醉：氯胺酮10 mg/kg，混以氯丙嗪12.5 mg，肌肉注射，眼局部用5 g/L Dicaine表面麻醉。② 模型制作：在房角镜下将激光瞄准光置于功能小梁网区进行激射。每次激射要求使激射区小梁组织发白或稍变黄，相邻两个激射点的烧灼斑相连续，如此行360°范围激射。两周后重复1次，共3～5次。激光参数是：光斑直径50 μm，能量800 mW，时间0.5～1.0 s。③ 眼压测量：每次激光激射前由专人用修兹眼压计测量眼压并记录。末次激射后最短21d，最长97 d(平均38 d)再次测眼压。④ 眼底照相及杯盘比值计算：初次激射之前及末次测量眼压前行眼底照相，依照片对视盘垂直径线的杯盘比值进行测量。⑤每次激射前及最后一次激射后观察房角。⑥ 数据采用配对t检验。
2 结果
2.1 眼底变化
6只猴中的4只猴8只眼眼底视盘凹陷较激射前明显扩大，呈青光眼性视盘凹陷外观，即垂直方向扩大明显，并可见血管在盘沿呈屈膝状改变。12只眼激射前后垂直径线杯盘比值进行统计分析可见差异有显著性(P<0.01)。此外，部分猴眼视盘颞上及颞下区网膜尚可见梳状或楔形视神经纤维缺失。有2只猴4只眼眼底未见明显改变。
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2.2 眼压变化
对所有猴的12只眼激射前及最后一次的眼压进行统计学分析可见差异有显著性意义(P<0.01)。从测量的表观数字上看，眼压在激射后是明显上升的，但有2只猴4只眼则例外，且它们的眼底亦无明显可见的变化。
2.3 房角变化
所有猴共12只眼激射前后的房角均为宽角。表明激射未导致房角关闭或变窄。
附表 第一次及末次杯盘比值(C/D)及眼压值
眼球
编号
初 值
末 次 值
, 百拇医药
眼压(kPa)
C/D
眼压(kPa)
C/D
1
1.943
0.3
4.603
0.5
2
1.943
0.2
7.288
, http://www.100md.com
0.7
3
2.909
0.1
5.517
0.8
4
2.307
0.3
5.517
0.5
5
2.740
, http://www.100md.com
0.3
4.133
0.7
6
2.740
0.2
6.613
0.7
7
1.943
0.4
2.307
0.4
, 百拇医药
8
1.365
0.3
2.740
0.3
9
3.251
0.4
3.863
0.6
10
3.251
0.3
, 百拇医药
3.863
0.6
11
3.251
0.3
3.863
0.3
12
3.251
0.3
2.515
0.3
激射前后眼压值行配对t检验，P<0.01
, 百拇医药
激射前后C/D值行配对t检验，P<0.01
3 讨论
从上述结果可以看出：猴眼受激光激射后能形成持续稳定的高眼压，产生了与眼压水平一致的眼底杯盘比值以及视神经纤维层缺失。开角型青光眼的模型是成功的。国外文献报道[2]，一次激射通常只能形成短暂的高眼压状态，为此本实验采取多次激射并缩短两次激射的时间间隔，这样就可以在短时间内制成持续稳定的高眼压模型。通过本实验，我们认为间隔2周行3次激射即可形成持续稳定的高眼压模型。若3次激射后眼压及眼底无明显变化，继续重复激射亦恐难以制成高眼压模型。关于两次激射的时间间隔到底以多长为宜，目前尚无实验证据，从我们的实验情况看，2周的间隔是可行的。
该模型的制作过程中最关键的是激射部位一定要准确。氩激光小梁成形术的临床病理研究[3]表明：激射后可导致初期的小梁组织细胞崩解以及后续的小梁组织的增殖及纤维化。可以推测本实验中氩激光激射后同样可以导致上述改变，只是因为激射部位不同，所以对眼压的影响亦不相同。小梁成形术激射非功能小梁网，小梁组织的纤维化导致功能小梁网受牵拉而导致持续的降眼压效果。而本实验激射区为功能小梁网，而且激射能量明显高于激光小梁成形术，可以推测其纤维化将更加严重。该处纤维化只会增加房水流出阻力，从而导致持续性高眼压。也因为本模型是通过破坏功能小梁网组织来获得的，因此本模型不能用于研究开角型青光眼小梁网的变化情况，这是本模型的一个缺憾。
, http://www.100md.com
目前被应用的青光眼模型很多，但多为急性高眼压模型，慢性高眼压模型则较少，而且猴作为亚人灵长类，其房角解剖结构与人眼相似，对开角青光眼的研究来说，猴的激光致青光眼模型是目前最理想的模型，但其所需费用较大。
*国家自然科学基金资助项目(No.39270709)
作者简介：周雄武，男，1966年生，医学硕士。
参考文献
1 Radius R L, Pederson J E. Laser-induced primate glaucoma II. Histopathology. Arch Ophthalmol, 1984, 102:1693
2 Pederson J E, Gaasterland D E. Laser-induced primate glaucoma I. Progression of cuping. Arch Ophthalmol, 1984, 102:1689
3 Francis A, L'esperance J R. Ophthmic lasers.3rd ed. St. Louis: The C.V. Mosby Company, 1989.690～692
收稿日期：1998-09-02, http://www.100md.com
单位：周雄武、刘金华、杜蜀华：同济医科大学附属同济医院眼科，武汉 430030；李国彦：武汉市第一医院眼科，武汉430022
关键词：青光眼，开角；模型
同济医科大学学报990524 摘要 用氩激光激射恒河猴眼功能小梁网制作开角青光眼模型。取6只猴12只眼用于模型制作。激射部位是小梁网的后半部即功能小梁网区，相邻两激射点的烧灼斑相连接，范围是360°。两周后重复激射，共3至5次。激光参数是：光斑直径50 μm，能量800 mW，时间0.5～1.0 s。每次激射前及最后一次激射之后平均38 d(21～97 d)进行眼压测量，眼底杯盘比值测量及房角观察。有4只猴8只眼激射后眼压持续升高，眼底杯盘比值增大，激射后房角仍为宽角。实验表明猴开角青光眼模型的制作是成功的。
中图法分类号 R454.2， R775.2
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Development of Primate Open-angle Glaucoma Model in Rhesus Monkey
Zhou Xiongwu, Liu Jinhua, Du Shuhua et al
Department of Ophthalmology, Tongji Hospital, Tongji Medical University, Wuhan 430030
Abstract Primate open-angle glaucoma model was developed in 6 rhesus monkeys (12 eyes) by photocoagulating the functional trabecular meshwork (TM) with argon laser. The laser spot was moved on the posterior portion of the TM (the functional portion) confluently and circumferentially. Each eye was photocoagulated 3 to 5 times at an interval of 2 weeks. Laser settings were as follows: 50 μm, 800 mW, 0.5 to 1.0 s. Tonography, goniography and optic disc examination were made before each photocoagulation and average 38 days (21 to 97 days) later after the last photocoagulation. The results showed that 8 eyes of 4 monkeys had persistent intraocular hypertension with enlarged C/D values and open anterior chamber angle. Open angle glaucoma model in rhesus monkey was made successfully.
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Key words laser； glaucoma； model
目前对开角型青光眼的认识还远远不够清楚，而开角型青光眼发病的隐匿性以及对视功能损害的不可逆性又迫使人们需要对该病有更深的认识。制作恰当的开角型青光眼的动物模型以供实验研究是很有意义的。我们参考国外的报道[1]并结合自己的体会，用氩激光激射功能小梁网制作了猴开角型青光眼模型。
1 材料和方法
1.1 材料
动物：云南野生动物所售出的恒河猴，雌雄不拘，体重7.5～11 kg，本实验取6只猴12只眼进行模型制作。氩激光机：德国产蔡氏氩激光机。日本产眼底照相机。房角镜。修兹眼压计及药品。
1.2 方法
, http://www.100md.com ① 动物麻醉：氯胺酮10 mg/kg，混以氯丙嗪12.5 mg，肌肉注射，眼局部用5 g/L Dicaine表面麻醉。② 模型制作：在房角镜下将激光瞄准光置于功能小梁网区进行激射。每次激射要求使激射区小梁组织发白或稍变黄，相邻两个激射点的烧灼斑相连续，如此行360°范围激射。两周后重复1次，共3～5次。激光参数是：光斑直径50 μm，能量800 mW，时间0.5～1.0 s。③ 眼压测量：每次激光激射前由专人用修兹眼压计测量眼压并记录。末次激射后最短21d，最长97 d(平均38 d)再次测眼压。④ 眼底照相及杯盘比值计算：初次激射之前及末次测量眼压前行眼底照相，依照片对视盘垂直径线的杯盘比值进行测量。⑤每次激射前及最后一次激射后观察房角。⑥ 数据采用配对t检验。
2 结果
2.1 眼底变化
6只猴中的4只猴8只眼眼底视盘凹陷较激射前明显扩大，呈青光眼性视盘凹陷外观，即垂直方向扩大明显，并可见血管在盘沿呈屈膝状改变。12只眼激射前后垂直径线杯盘比值进行统计分析可见差异有显著性(P<0.01)。此外，部分猴眼视盘颞上及颞下区网膜尚可见梳状或楔形视神经纤维缺失。有2只猴4只眼眼底未见明显改变。
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2.2 眼压变化
对所有猴的12只眼激射前及最后一次的眼压进行统计学分析可见差异有显著性意义(P<0.01)。从测量的表观数字上看，眼压在激射后是明显上升的，但有2只猴4只眼则例外，且它们的眼底亦无明显可见的变化。
2.3 房角变化
所有猴共12只眼激射前后的房角均为宽角。表明激射未导致房角关闭或变窄。
附表 第一次及末次杯盘比值(C/D)及眼压值
眼球
编号
初 值
末 次 值
, 百拇医药
眼压(kPa)
C/D
眼压(kPa)
C/D
1
1.943
0.3
4.603
0.5
2
1.943
0.2
7.288
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0.7
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2.909
0.1
5.517
0.8
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0.3
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2.740
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0.3
4.133
0.7
6
2.740
0.2
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0.7
7
1.943
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2.307
0.4
, 百拇医药
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0.3
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3.863
0.6
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3.251
0.3
3.863
0.3
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3.251
0.3
2.515
0.3
激射前后眼压值行配对t检验，P<0.01
, 百拇医药
激射前后C/D值行配对t检验，P<0.01
3 讨论
从上述结果可以看出：猴眼受激光激射后能形成持续稳定的高眼压，产生了与眼压水平一致的眼底杯盘比值以及视神经纤维层缺失。开角型青光眼的模型是成功的。国外文献报道[2]，一次激射通常只能形成短暂的高眼压状态，为此本实验采取多次激射并缩短两次激射的时间间隔，这样就可以在短时间内制成持续稳定的高眼压模型。通过本实验，我们认为间隔2周行3次激射即可形成持续稳定的高眼压模型。若3次激射后眼压及眼底无明显变化，继续重复激射亦恐难以制成高眼压模型。关于两次激射的时间间隔到底以多长为宜，目前尚无实验证据，从我们的实验情况看，2周的间隔是可行的。
该模型的制作过程中最关键的是激射部位一定要准确。氩激光小梁成形术的临床病理研究[3]表明：激射后可导致初期的小梁组织细胞崩解以及后续的小梁组织的增殖及纤维化。可以推测本实验中氩激光激射后同样可以导致上述改变，只是因为激射部位不同，所以对眼压的影响亦不相同。小梁成形术激射非功能小梁网，小梁组织的纤维化导致功能小梁网受牵拉而导致持续的降眼压效果。而本实验激射区为功能小梁网，而且激射能量明显高于激光小梁成形术，可以推测其纤维化将更加严重。该处纤维化只会增加房水流出阻力，从而导致持续性高眼压。也因为本模型是通过破坏功能小梁网组织来获得的，因此本模型不能用于研究开角型青光眼小梁网的变化情况，这是本模型的一个缺憾。
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目前被应用的青光眼模型很多，但多为急性高眼压模型，慢性高眼压模型则较少，而且猴作为亚人灵长类，其房角解剖结构与人眼相似，对开角青光眼的研究来说，猴的激光致青光眼模型是目前最理想的模型，但其所需费用较大。
*国家自然科学基金资助项目(No.39270709)
作者简介：周雄武，男，1966年生，医学硕士。
参考文献
1 Radius R L, Pederson J E. Laser-induced primate glaucoma II. Histopathology. Arch Ophthalmol, 1984, 102:1693
2 Pederson J E, Gaasterland D E. Laser-induced primate glaucoma I. Progression of cuping. Arch Ophthalmol, 1984, 102:1689
3 Francis A, L'esperance J R. Ophthmic lasers.3rd ed. St. Louis: The C.V. Mosby Company, 1989.690～692
收稿日期：1998-09-02, http://www.100md.com