敌敌畏生殖毒性及小柴胡汤拮抗作用的实验研究
作者：李春英
单位：李春英(山西医科大学汾阳学院药理室 汾阳 032200)
关键词：有机磷化合物；敌敌畏；小柴胡汤；遗传学，医学；兔
山西医科大学学报000118
摘要： 目的 研究敌敌畏对雄性青紫蓝兔的生殖毒性及小柴胡汤对其毒性的拮抗作用。方法 连续10周给雄性青紫蓝兔饲喂 0.4 mg/kg敌敌畏并对部分动物灌服1.65 g/kg 小柴胡汤，观察睾丸，附睾组织形态学变化，检测精子活力，精子体外活动时间，初级精母细胞数/高倍视野。结果 长期饲喂敌敌畏的青紫蓝兔睾丸，附睾组织形态学发生异常，精子活力明显下降，精子体外活动时间明显缩短，初级精母细胞数/高倍视野减少，合用小柴胡汤组青紫蓝兔上述指标明显好于敌敌畏组。结论 敌敌畏慢性中毒对青紫蓝兔生殖系统具有一定损害，小柴胡汤对此损害有拮抗作用。
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中图分类号： R994.6 文献标识码： A
文章编号： 1007-6611(2000)01-0039-02
有机磷酸酯类是工农业生产和国防中被广泛使用的难逆性抗胆碱酯酶药，因其脂溶性高和极易挥发，故中毒比较常见。而有机磷酸酯对生殖器官及生殖功能是否具有损害作用，目前未见这方面的报道。本文以家兔为例，研究了敌敌畏的生殖毒性及小柴胡汤对其毒性的拮抗作用。
1 材料与方法
1.1 材料 敌敌畏乳油，500 g/L，江苏梅兰电化厂，批号98083101，用前配成2 g/L的溶液，小柴胡汤，由柴胡10 g，黄芩12 g，党参9 g，炙甘草6 g，半夏 9 g， 生姜 9 g，红枣 4 枚组成，购于汾阳市药材公司，加适量水煎两次，每次约30 min，合并两次药液经双层纱布过滤后置2 ℃冰箱中保存。
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1.2 动物 青紫蓝兔24只，体重(2.60±0.41) kg，雄性，购于山西医科大学实验动物中心，随机分为 3 组，每组8只。A：敌敌畏组，0.4 mg/kg拌入饲料中，B：敌敌畏+小柴胡汤组，敌敌畏同A，小柴胡汤1.65 g生药/kg灌胃给药，C：给等容量生理盐水。每日 1 次，连续给药 10 周，实验期间 3 组动物自由饮水及摄食，其他条件相同，每周测体重 3 次。
1.3 标本制备及观察方法 第 11 周将动物处死，分离一侧附睾，用剪刀在其尾部剪一十字切口，置盛有生理盐水的小烧杯中，放置10 min后，取生理盐水 1 滴于玻片上，置显微镜下观察精子活动情况，全部精子停止活动时间[1]，同时取另一侧睾丸，附睾称重，计算脏器系数，然后用固定液固定，作石蜡切片，HE染色，观察曲细精管和间质细胞有无形态变化[2]，油镜下随机记录 3 个视野中的初级精母细胞数取平均值。
1.4 统计学处理 对实验数据行配对t检验。
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2 结果
2.1 一般情况 小柴胡汤组除1只动物在给药后第5周死亡外，其他动物与NS组活动良好，无色光亮。敌敌畏组动物活动减少，毛色晦暗无光泽。3组动物体重变化见图1。
图1 3 组动物体重变化图
2.2 组织形态学变化 小柴胡汤组与NS组镜下可见：曲细精管管壁结构完整，各级生精细胞排列整齐，间质细胞排列规则。敌敌畏组镜下可见：曲细精管明显受损，管壁结构不完整，生精细胞疏松杂乱，间质细胞排列紊乱不规则。
2.3 睾丸、附睾系数、精子活力、全部精子停止活动时间，初级精母细胞数/高倍视野见表1。 表1 敌敌畏组与合用小柴胡汤组生殖毒性比较
组别
, 百拇医药
睾丸附睾
系数(%)
精子
活力
全部精子停止
活动时间(min)
初级精母
细胞数/高倍
视野
敌敌畏组
0.14 3
Ⅱ、Ⅲ级
10～30①
, 百拇医药
6.34±3.21①
敌敌畏+
小柴胡汤组
0.150 8
Ⅲ、Ⅳ级
>20～60②
15.00±5.20②
Ns组
0.140 0
Ⅳ级
>40
16.66±2.52
, 百拇医药
①与NS组比较：P<0.01； ②与①比较：P<0.05
3 讨论
精子是在睾丸的曲细精管中由生殖细胞经过精原细胞、初级、次级精母细胞阶段而发育成的，一定数量，一定活力的正常形态的精子才能实现生殖功能。随着人口剧增，工业化程度的提高，人类赖以生存的自然环境遭到越来越严重的破坏，环境污染对人类生殖的影响已十分明显。而有机磷酸酯经空气、水、土壤甚至各种农作物，畜产品等饮食的“毒”聚是“环境毒”的重要来源[3]。本实验结果表明敌敌畏慢性中毒对青紫蓝兔生殖系统具有一定损害作用，能明显减少睾丸曲细精管中的初级精母细胞数，使精子生成减少，明显抑制精子的活动能力和缩短体外活动时间。矢数道明(日)报道日本常使用小柴胡汤治疗男女生殖系统疾病如睾丸炎、附睾炎、女子附件炎等[4]。本文中给敌敌畏同时合用小柴胡汤的青紫蓝兔初级精母细胞数/高倍视野，精子活动能力、精子体外活动时间明显好于敌敌畏组，表明该方能减轻敌敌畏引起的生殖毒性，改善生殖功能，为临床治疗此类原因引起的不孕提供了实验依据。
, 百拇医药
作者简介： 李春英，女，1966年4月，本科，讲师
参考文献：
[1] 徐叔云.药理实验方法学.第2版[M].北京：人民卫生出版社，1991.1311.
[2] 方福德，周吕，丁廉，等.现代医学实验技巧全书(下)[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社， 1995. 417.
[3] 姜良铎.试论“环境毒”[J].中国中医基础医学杂志， 1999， 5 (9)： 4.
[4] 矢数道明(日)，李文瑞译.临床应用汉方处方解说[M].北京：人民卫生出版社，1987. 204.
[收稿日期： 1999-09-09], 百拇医药
单位：李春英(山西医科大学汾阳学院药理室 汾阳 032200)
关键词：有机磷化合物；敌敌畏；小柴胡汤；遗传学，医学；兔
山西医科大学学报000118
摘要： 目的 研究敌敌畏对雄性青紫蓝兔的生殖毒性及小柴胡汤对其毒性的拮抗作用。方法 连续10周给雄性青紫蓝兔饲喂 0.4 mg/kg敌敌畏并对部分动物灌服1.65 g/kg 小柴胡汤，观察睾丸，附睾组织形态学变化，检测精子活力，精子体外活动时间，初级精母细胞数/高倍视野。结果 长期饲喂敌敌畏的青紫蓝兔睾丸，附睾组织形态学发生异常，精子活力明显下降，精子体外活动时间明显缩短，初级精母细胞数/高倍视野减少，合用小柴胡汤组青紫蓝兔上述指标明显好于敌敌畏组。结论 敌敌畏慢性中毒对青紫蓝兔生殖系统具有一定损害，小柴胡汤对此损害有拮抗作用。
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中图分类号： R994.6 文献标识码： A
文章编号： 1007-6611(2000)01-0039-02
有机磷酸酯类是工农业生产和国防中被广泛使用的难逆性抗胆碱酯酶药，因其脂溶性高和极易挥发，故中毒比较常见。而有机磷酸酯对生殖器官及生殖功能是否具有损害作用，目前未见这方面的报道。本文以家兔为例，研究了敌敌畏的生殖毒性及小柴胡汤对其毒性的拮抗作用。
1 材料与方法
1.1 材料 敌敌畏乳油，500 g/L，江苏梅兰电化厂，批号98083101，用前配成2 g/L的溶液，小柴胡汤，由柴胡10 g，黄芩12 g，党参9 g，炙甘草6 g，半夏 9 g， 生姜 9 g，红枣 4 枚组成，购于汾阳市药材公司，加适量水煎两次，每次约30 min，合并两次药液经双层纱布过滤后置2 ℃冰箱中保存。
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1.2 动物 青紫蓝兔24只，体重(2.60±0.41) kg，雄性，购于山西医科大学实验动物中心，随机分为 3 组，每组8只。A：敌敌畏组，0.4 mg/kg拌入饲料中，B：敌敌畏+小柴胡汤组，敌敌畏同A，小柴胡汤1.65 g生药/kg灌胃给药，C：给等容量生理盐水。每日 1 次，连续给药 10 周，实验期间 3 组动物自由饮水及摄食，其他条件相同，每周测体重 3 次。
1.3 标本制备及观察方法 第 11 周将动物处死，分离一侧附睾，用剪刀在其尾部剪一十字切口，置盛有生理盐水的小烧杯中，放置10 min后，取生理盐水 1 滴于玻片上，置显微镜下观察精子活动情况，全部精子停止活动时间[1]，同时取另一侧睾丸，附睾称重，计算脏器系数，然后用固定液固定，作石蜡切片，HE染色，观察曲细精管和间质细胞有无形态变化[2]，油镜下随机记录 3 个视野中的初级精母细胞数取平均值。
1.4 统计学处理 对实验数据行配对t检验。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 一般情况 小柴胡汤组除1只动物在给药后第5周死亡外，其他动物与NS组活动良好，无色光亮。敌敌畏组动物活动减少，毛色晦暗无光泽。3组动物体重变化见图1。
图1 3 组动物体重变化图
2.2 组织形态学变化 小柴胡汤组与NS组镜下可见：曲细精管管壁结构完整，各级生精细胞排列整齐，间质细胞排列规则。敌敌畏组镜下可见：曲细精管明显受损，管壁结构不完整，生精细胞疏松杂乱，间质细胞排列紊乱不规则。
2.3 睾丸、附睾系数、精子活力、全部精子停止活动时间，初级精母细胞数/高倍视野见表1。 表1 敌敌畏组与合用小柴胡汤组生殖毒性比较
组别
, 百拇医药
睾丸附睾
系数(%)
精子
活力
全部精子停止
活动时间(min)
初级精母
细胞数/高倍
视野
敌敌畏组
0.14 3
Ⅱ、Ⅲ级
10～30①
, 百拇医药
6.34±3.21①
敌敌畏+
小柴胡汤组
0.150 8
Ⅲ、Ⅳ级
>20～60②
15.00±5.20②
Ns组
0.140 0
Ⅳ级
>40
16.66±2.52
, 百拇医药
①与NS组比较：P<0.01； ②与①比较：P<0.05
3 讨论
精子是在睾丸的曲细精管中由生殖细胞经过精原细胞、初级、次级精母细胞阶段而发育成的，一定数量，一定活力的正常形态的精子才能实现生殖功能。随着人口剧增，工业化程度的提高，人类赖以生存的自然环境遭到越来越严重的破坏，环境污染对人类生殖的影响已十分明显。而有机磷酸酯经空气、水、土壤甚至各种农作物，畜产品等饮食的“毒”聚是“环境毒”的重要来源[3]。本实验结果表明敌敌畏慢性中毒对青紫蓝兔生殖系统具有一定损害作用，能明显减少睾丸曲细精管中的初级精母细胞数，使精子生成减少，明显抑制精子的活动能力和缩短体外活动时间。矢数道明(日)报道日本常使用小柴胡汤治疗男女生殖系统疾病如睾丸炎、附睾炎、女子附件炎等[4]。本文中给敌敌畏同时合用小柴胡汤的青紫蓝兔初级精母细胞数/高倍视野，精子活动能力、精子体外活动时间明显好于敌敌畏组，表明该方能减轻敌敌畏引起的生殖毒性，改善生殖功能，为临床治疗此类原因引起的不孕提供了实验依据。
, 百拇医药
作者简介： 李春英，女，1966年4月，本科，讲师
参考文献：
[1] 徐叔云.药理实验方法学.第2版[M].北京：人民卫生出版社，1991.1311.
[2] 方福德，周吕，丁廉，等.现代医学实验技巧全书(下)[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社， 1995. 417.
[3] 姜良铎.试论“环境毒”[J].中国中医基础医学杂志， 1999， 5 (9)： 4.
[4] 矢数道明(日)，李文瑞译.临床应用汉方处方解说[M].北京：人民卫生出版社，1987. 204.
[收稿日期： 1999-09-09], 百拇医药