二氧二茂钛原料药的稳定性研究
作者：李云兰 赵大龙 白小红 李青山
单位：李云兰(山西医科大学药学系药物分析教研室 太原 030001)；赵大龙(山西医科大学药学系药物分析教研室 太原 030001)；白小红(山西医科大学药学系药物分析教研室 太原 030001)；李青山(山西医科大学药学系药物分析教研室 太原 030001)
关键词：二氯二茂钛；分光光度法，紫外线；药物稳定性
山西医科大学学报000115 摘要： 利用紫外分光光度计对二氯二茂钛进行含量测定。回归方程为：Y＝0.988 1 X-0.909 0×10-3(Y：吸光度；X：浓度，mg/L)，相关系数 r＝0.999 9，线性范围为 13.6～81.6 mg/L。模拟试验 3 份，回收率为 98.45%～101.33%，相对标准偏差为 0.14%～0.33%。本实验研究了原料药二氯二茂钛的稳定性，结果表明不同的湿度、温度等条件对二氯二茂钛的稳定性有一定影响。
, 百拇医药
中图分类号： R927.2 文献标识码： A
文章编号： 1007-6611(2000)01-0034-02
Stability of bis (cyclopentadienyl) titanium dichloride
Li Yunlan, Zhao Dalong, Bai Xiaohong, et al
(Dept. of Pharmacy, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001)
Abstract: UV spectrophotometric method was used for determining the concentration of bis(cyclopen-tadienyl) titanium dichloride. The linear regression equation was Y=0.988 1 X-9.090×10-4 (Y:absorbance;X:concentration,mg/L). Correlation coefficient(r) was 0.999 9. The linearity between absorbance and content was obtained form 13.6 to 81.6 mg/L.Simulation experiment was tested 3 times. The recovery was 96%～98%. The Rs was within the range of 0.14%～0.33%. The stability of bis(cyclopentadienyl) titanium dichlorude was exmined, indicating that various humidity and temperature condituons have effects on the stability of bis(cyclopentadienyl) titanium dichloride.
, 百拇医药
Key words: bis(cyclopentadienyl)titanium dichloride; spectrophotometry, ultraviolet; drug stability
自 70 年代初顺铂成功应用于临床以来，国内外已合成了大量金属类抗癌化合物，其中，二氯二茂钛(Cp2TiCl2)是一种过渡金属的茂夹心化合物，具有较高的抗肿瘤活性，有很高的临床使用价值。稳定性试验是新药申报审批过程中的一个重要环节，其含量测定方法曾有许多文献报道，如差示分光光度法[1]，分光光度法[2，3，4]、电势滴定法[1]、氧瓶燃烧法[5]等。重量法是测定常量金属化合物含量的经典方法，但该法操作繁琐，分析时间长，误差也大。本文采用紫外分光光度法对二氯二茂钛进行含量测定和稳定性试验。方法简便、快速、准确度高、重现性好，为该药的质量评价和新药审批提供了实验依据。
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1 仪器与试剂
Shimadzu UV-260 紫外分光光度计(日本岛津公司)；TG 328 A 分析天平(上海天平仪器厂)；电热恒温干燥器(湖北黄石医疗器械厂)；玻璃干燥器(山西太原)；二氯二茂钛标准品(德国进口，含量大于97%)；二氯二茂钛样品(本室合成)；氯仿、氯化钠、硝酸钾均为分析纯。
2 测量方法与结果
2.1 吸收光谱及测定波长的选择 称取二氯二茂钛标准品适量，置于 25 ml 容量瓶中，用氯仿定容。用 UV-260 紫外分光光度计在 220～400 nm 范围内进行波长扫描。测得的吸收光谱有两个吸收峰，λ1＝255 nm，λ2＝391 nm。前者灵敏度高于后者，但干扰多，重现性差，故选择 λmax＝391 nm 为最佳测定波长。
2.2 样品溶液的稳定性 精密称取二氯二茂钛样品 0.015 7 g 于 25 ml 容量瓶中，用氯仿定容。再取 1 ml 于 10 ml 容量瓶中，用氯仿稀释至刻度。在 391 nm 外测定 2 h 内的吸光度 A。测定结果见表1。
, 百拇医药
表1 样品溶液的稳定性 放置时间(min)
0
30
60
90
120
吸光度
0.614
0.614
0.614
0.615
0.616
Rs(%)
, 百拇医药
0.146
由上表可见，样品溶液在 120 min 内吸光度值基本不变，故其在 2 h 内是稳定的。
2.3 标准曲线 精密称取二氯二茂钛标准品 17.0 mg 于 25 ml 容量瓶中，用氯仿定容。分别取 0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 ml 于 7 个 10 ml 容量瓶中，用氯仿稀释至刻度(浓度分别为 13.6，27.2，40.8，54.4，68.0 和 81.6 mg/L)。在 391 nm 外测定吸光度 A，以浓度-吸光度进行回归计算，平行试验 5 次。结果线性关系良好，回归方程：Y＝0.988 1 X-0.909 0 ×10-3，相关系数 r＝0.999 9。线性范围较宽。
2.4 实验方法回收率 精密称取二氯二茂钛标准品 11.3，14.2，17.0 mg，同前法分别配制 45.2，56.8，68.0 mg/L 的样品溶液，测定吸光度，计算回收率和相对标准偏差。结果见表2。表2 不同样品的回收率(n=5) 样品
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编号
加入量
(mg/L)
测得量
(mg/L)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
Rs(%)
平均
Rs(%)
1
, http://www.100md.com
45.2
45.9
101.54
0.27
2
56.8
55.9
98.44
99.75
0.26
0.263 3
3
68.0
, http://www.100md.com
67.5
99.28
0.26
2.5 稳定性试验
2.5.1 高温试验。取 2 个玻璃干燥器，分别放置饱和 NaCl 水溶液(相对湿度为 75%)和饱和 KNO3 水溶液(相对湿度为 92.5%)。精密称取二氯二茂钛样品 17.0 mg 于不同湿度的干燥器中分别放置 0，1，3，5 和 10 d。同前法配成 68.0 mg/L 的样品溶液进行含量测定。结果见表3。表3 不同湿度的稳定性试验(t＝25℃，n=4) 湿度(%)
时间(d)
样品含量(%)
Rs(%)
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0
99.94
0.14
92.5
75
1
99.85
99.90
0.24
0.20
92.5
75
3
, 百拇医药
99.58
99.58
0.12
0.21
92.5
75
5
98.89
97.25
0.27
0.13
92.5
75
, http://www.100md.com
10
97.11
96.67
0.20
0.30
2.5.2 高温试验。取 3 个温度恒定为 40，60，80 ℃的电热恒温箱，同前法进行稳定性试验。样品浓度为 68.0 mg/L。结果见表4。表4 不同温度的稳定性试验(n=4) 温度(℃)
时间(d)
样品含量(%)
Rs(%)
0
99.96
, 百拇医药
0.14
40
96.43
0.14
60
1
95.40
0.32
80
95.74
0.33
40
95.88
, 百拇医药
0.20
60
3
94.98
0.20
80
94.70
0.20
40
95.77
0.15
60
5
, 百拇医药
95.06
0.25
80
94.95
0.29
40
95.47
0.15
60
10
94.36
0.15
80
, http://www.100md.com
94.47
0.26
2.5.3 室温留样试验。精密称取室温留样样品 17.0 mg，配制 68.0 mg/L 的样品溶液测定其含量。结果见表5。表5 室温留样试验(t＝25℃，n=4) 留样时间(月)
样品含量(%)
Rs
0
99.94
0.14
3
99.99
0.32
, 百拇医药
5
98.76
0.40
12
95.54
0.35
3 讨论
3.1 稳定性试验表明：二氯二茂钛在不同湿度放置 1 d，含量基本不变，而 10 d 后，含量降低 3.5%左右；高温放置 10 d 后，含量降低 4.0 % 左右，其后降低速度减慢，10 d 后含量降低 5% 左右；室温留样 1 年后其含量降低 4% 左右。故二氯二茂钛应在室温下密闭干燥保存。
3.2 建议以后用 HPLC 进行二氯二茂钛的稳定性研究，该法可避免样品中微量杂质的干扰，专属性好。
, 百拇医药
作者简介： 李云兰，女，1971年11月生，硕士
参考文献：
[1] 李文郁，杨玉，李滔滔，等.二氯二茂钛的合成及钛氯含量的测定[J].化学试剂， 1983， 5 (6)： 363.
[2] 沈含熙，王振青，岳亮.非离子表面活性剂——水杨基荧光酮分光光度法测定微量钛[J].化学通报， 1983， 10： 23.
[3] 李祖碧，王加林，徐其亭.磷钼钛酸-耐尔蓝-聚乙烯醇体系光度法测定痕量钛[J].分析化学， 1994， 22 (2)： 150.
[4] 曹洪科，铬天青 S-3，3-二溴邻苯三酚红-CTMAB 多元络合物显色体系测定微量钛研究[J].分析试验室， 1987， 6 (2)： 10.
[5] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(II部)[M]. 北京：化学工业出版社，人民卫生出版社，1990.附录 38.
[收稿日期： 1999-08-13], 百拇医药
单位：李云兰(山西医科大学药学系药物分析教研室 太原 030001)；赵大龙(山西医科大学药学系药物分析教研室 太原 030001)；白小红(山西医科大学药学系药物分析教研室 太原 030001)；李青山(山西医科大学药学系药物分析教研室 太原 030001)
关键词：二氯二茂钛；分光光度法，紫外线；药物稳定性
山西医科大学学报000115 摘要： 利用紫外分光光度计对二氯二茂钛进行含量测定。回归方程为：Y＝0.988 1 X-0.909 0×10-3(Y：吸光度；X：浓度，mg/L)，相关系数 r＝0.999 9，线性范围为 13.6～81.6 mg/L。模拟试验 3 份，回收率为 98.45%～101.33%，相对标准偏差为 0.14%～0.33%。本实验研究了原料药二氯二茂钛的稳定性，结果表明不同的湿度、温度等条件对二氯二茂钛的稳定性有一定影响。
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中图分类号： R927.2 文献标识码： A
文章编号： 1007-6611(2000)01-0034-02
Stability of bis (cyclopentadienyl) titanium dichloride
Li Yunlan, Zhao Dalong, Bai Xiaohong, et al
(Dept. of Pharmacy, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001)
Abstract: UV spectrophotometric method was used for determining the concentration of bis(cyclopen-tadienyl) titanium dichloride. The linear regression equation was Y=0.988 1 X-9.090×10-4 (Y:absorbance;X:concentration,mg/L). Correlation coefficient(r) was 0.999 9. The linearity between absorbance and content was obtained form 13.6 to 81.6 mg/L.Simulation experiment was tested 3 times. The recovery was 96%～98%. The Rs was within the range of 0.14%～0.33%. The stability of bis(cyclopentadienyl) titanium dichlorude was exmined, indicating that various humidity and temperature condituons have effects on the stability of bis(cyclopentadienyl) titanium dichloride.
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Key words: bis(cyclopentadienyl)titanium dichloride; spectrophotometry, ultraviolet; drug stability
自 70 年代初顺铂成功应用于临床以来，国内外已合成了大量金属类抗癌化合物，其中，二氯二茂钛(Cp2TiCl2)是一种过渡金属的茂夹心化合物，具有较高的抗肿瘤活性，有很高的临床使用价值。稳定性试验是新药申报审批过程中的一个重要环节，其含量测定方法曾有许多文献报道，如差示分光光度法[1]，分光光度法[2，3，4]、电势滴定法[1]、氧瓶燃烧法[5]等。重量法是测定常量金属化合物含量的经典方法，但该法操作繁琐，分析时间长，误差也大。本文采用紫外分光光度法对二氯二茂钛进行含量测定和稳定性试验。方法简便、快速、准确度高、重现性好，为该药的质量评价和新药审批提供了实验依据。
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1 仪器与试剂
Shimadzu UV-260 紫外分光光度计(日本岛津公司)；TG 328 A 分析天平(上海天平仪器厂)；电热恒温干燥器(湖北黄石医疗器械厂)；玻璃干燥器(山西太原)；二氯二茂钛标准品(德国进口，含量大于97%)；二氯二茂钛样品(本室合成)；氯仿、氯化钠、硝酸钾均为分析纯。
2 测量方法与结果
2.1 吸收光谱及测定波长的选择 称取二氯二茂钛标准品适量，置于 25 ml 容量瓶中，用氯仿定容。用 UV-260 紫外分光光度计在 220～400 nm 范围内进行波长扫描。测得的吸收光谱有两个吸收峰，λ1＝255 nm，λ2＝391 nm。前者灵敏度高于后者，但干扰多，重现性差，故选择 λmax＝391 nm 为最佳测定波长。
2.2 样品溶液的稳定性 精密称取二氯二茂钛样品 0.015 7 g 于 25 ml 容量瓶中，用氯仿定容。再取 1 ml 于 10 ml 容量瓶中，用氯仿稀释至刻度。在 391 nm 外测定 2 h 内的吸光度 A。测定结果见表1。
, 百拇医药
表1 样品溶液的稳定性 放置时间(min)
0
30
60
90
120
吸光度
0.614
0.614
0.614
0.615
0.616
Rs(%)
, 百拇医药
0.146
由上表可见，样品溶液在 120 min 内吸光度值基本不变，故其在 2 h 内是稳定的。
2.3 标准曲线 精密称取二氯二茂钛标准品 17.0 mg 于 25 ml 容量瓶中，用氯仿定容。分别取 0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 ml 于 7 个 10 ml 容量瓶中，用氯仿稀释至刻度(浓度分别为 13.6，27.2，40.8，54.4，68.0 和 81.6 mg/L)。在 391 nm 外测定吸光度 A，以浓度-吸光度进行回归计算，平行试验 5 次。结果线性关系良好，回归方程：Y＝0.988 1 X-0.909 0 ×10-3，相关系数 r＝0.999 9。线性范围较宽。
2.4 实验方法回收率 精密称取二氯二茂钛标准品 11.3，14.2，17.0 mg，同前法分别配制 45.2，56.8，68.0 mg/L 的样品溶液，测定吸光度，计算回收率和相对标准偏差。结果见表2。表2 不同样品的回收率(n=5) 样品
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编号
加入量
(mg/L)
测得量
(mg/L)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
Rs(%)
平均
Rs(%)
1
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45.2
45.9
101.54
0.27
2
56.8
55.9
98.44
99.75
0.26
0.263 3
3
68.0
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67.5
99.28
0.26
2.5 稳定性试验
2.5.1 高温试验。取 2 个玻璃干燥器，分别放置饱和 NaCl 水溶液(相对湿度为 75%)和饱和 KNO3 水溶液(相对湿度为 92.5%)。精密称取二氯二茂钛样品 17.0 mg 于不同湿度的干燥器中分别放置 0，1，3，5 和 10 d。同前法配成 68.0 mg/L 的样品溶液进行含量测定。结果见表3。表3 不同湿度的稳定性试验(t＝25℃，n=4) 湿度(%)
时间(d)
样品含量(%)
Rs(%)
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0
99.94
0.14
92.5
75
1
99.85
99.90
0.24
0.20
92.5
75
3
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99.58
99.58
0.12
0.21
92.5
75
5
98.89
97.25
0.27
0.13
92.5
75
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10
97.11
96.67
0.20
0.30
2.5.2 高温试验。取 3 个温度恒定为 40，60，80 ℃的电热恒温箱，同前法进行稳定性试验。样品浓度为 68.0 mg/L。结果见表4。表4 不同温度的稳定性试验(n=4) 温度(℃)
时间(d)
样品含量(%)
Rs(%)
0
99.96
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0.14
40
96.43
0.14
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95.40
0.32
80
95.74
0.33
40
95.88
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0.20
60
3
94.98
0.20
80
94.70
0.20
40
95.77
0.15
60
5
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95.06
0.25
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94.95
0.29
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95.47
0.15
60
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94.36
0.15
80
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0.26
2.5.3 室温留样试验。精密称取室温留样样品 17.0 mg，配制 68.0 mg/L 的样品溶液测定其含量。结果见表5。表5 室温留样试验(t＝25℃，n=4) 留样时间(月)
样品含量(%)
Rs
0
99.94
0.14
3
99.99
0.32
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98.76
0.40
12
95.54
0.35
3 讨论
3.1 稳定性试验表明：二氯二茂钛在不同湿度放置 1 d，含量基本不变，而 10 d 后，含量降低 3.5%左右；高温放置 10 d 后，含量降低 4.0 % 左右，其后降低速度减慢，10 d 后含量降低 5% 左右；室温留样 1 年后其含量降低 4% 左右。故二氯二茂钛应在室温下密闭干燥保存。
3.2 建议以后用 HPLC 进行二氯二茂钛的稳定性研究，该法可避免样品中微量杂质的干扰，专属性好。
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作者简介： 李云兰，女，1971年11月生，硕士
参考文献：
[1] 李文郁，杨玉，李滔滔，等.二氯二茂钛的合成及钛氯含量的测定[J].化学试剂， 1983， 5 (6)： 363.
[2] 沈含熙，王振青，岳亮.非离子表面活性剂——水杨基荧光酮分光光度法测定微量钛[J].化学通报， 1983， 10： 23.
[3] 李祖碧，王加林，徐其亭.磷钼钛酸-耐尔蓝-聚乙烯醇体系光度法测定痕量钛[J].分析化学， 1994， 22 (2)： 150.
[4] 曹洪科，铬天青 S-3，3-二溴邻苯三酚红-CTMAB 多元络合物显色体系测定微量钛研究[J].分析试验室， 1987， 6 (2)： 10.
[5] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(II部)[M]. 北京：化学工业出版社，人民卫生出版社，1990.附录 38.
[收稿日期： 1999-08-13], 百拇医药