妊娠早期人体胎盘中单胺氧化酶活性的测定
作者：徐宏伟 杜 卫 王秀丽 张爱青 张崇理
单位：徐宏伟 杜 卫 王秀丽 青岛医学院生物化学教研室(青岛 266021)；张爱青 青岛医学院附属医院妇产科；张崇理 中科院动物所计划生育生殖生物学国家重点实验室
关键词：单胺氧化酶；胎盘绒毛；人
青岛医学院学报990116 【摘要】 ①目的 探讨妊娠早期人体胎盘中单胺氧化酶(MAO-A)活性与早期妊娠的关系。②方法 应用分光光度法检测了妊娠5～9周人体胎盘绒毛中MAO-A活性。③结果 随妊娠周数的增加，MAO-A活性增加。第8，9周胎盘绒毛中MAO-A活性明显高于第5周(F＝5.44，q＝3.73，5.54，P<0.05，0.01)和第6周(q＝3.07，4.83，P<0.05，0.01)。其他各组间比较，差异无显著性(q=0.10～2.69,P>0.05)。④结论 妊娠早期人体胎盘绒毛中MAO-A活性的变化，可能与妊娠过程神经递质或激素的合成和释放有关。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R714.14
DETERMINATION OF MAO-A ACTIVITY IN HUMAN PLACENTA AT EARLY STAGE
Xu Hongwei,Du Wei, Wang Xiuli, et al
Department of Biochemistry, Qingdao Medical College, Qingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To study the activity of MAO-A in human placenta at early pregnant stage and its relationship with pregnancy. Methods Spectrophotometric method was performed to estimate the activity of MAO-A in villous chorion of human placenta during 5th-9th pregnant weeks. Results The activity of MAO-A increased along with the pregnant period. The activity of MAO-A between 8th and 9th week was significantly higher than that of 5th week(F=5.44, q=3.73, 5.54, P<0.01) and 6th week(q=3.07, 4.83, P<0.05, 0.01). Conclusion MAO-A existed in the villous chorion of human placenta. The changes of its activity was related to the biosynthesis and release of neurotransmitters or hormones during pregnancy.
, 百拇医药
【KEY WORDS】 MAO-A; villous chorion of placenta; human
单胺氧化酶(MAO-A)含有尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(FAD)，附着于线粒体外膜上，催化各种胺类脱氨生成相应的醛，在生物胺代谢中起着重要作用〔1〕。人胎盘中MAO-A活性较高，与去甲肾上腺素(NE)和肾上腺素的灭活有关〔2〕。胎盘中的MAO-A对维持妊娠起着重要作用〔3〕，但这些研究多在晚期胎盘中进行。有研究报道，人胎盘绒毛中确有NE和多巴胺(DA)的存在〔4〕，并能在体外合成和释放NE〔5〕.为进一步探讨儿茶酚胺类神经递质在胎盘中的变化情况及人妊娠早期胎盘中MAO-A的作用机理，我们对人妊娠早期胎盘中MAO-A的活性进行了测定，现报告如下。
1 材料和方法
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1.1 材料
35例5～9周人胎盘绒毛取自青岛医学院附属医院妇产科。
1.2 试剂
5-羟色胺购自美国Sigma公司，其他试剂为国产分析纯。
1.3 方法
1.3.1 MAO-A的制备 取人妊娠早期胎盘绒毛，测质量，按1∶3(m∶m)加入预冷的0.32mol/L蔗糖和0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)，匀浆后，4℃下离心10min (15 000r/min)，弃沉淀,取上清液(MAO酶液)待测。
1.3.2 酶活性的测定 反应系统总体积为1mL，其中磷酸盐缓冲液(pH7.4)600μL，MAO酶液200μL，37°C下预温10min，然后加入0.02mol/L 5-羟色胺200μL，保温20min，加入1mol/L HCl溶液200μL终止反应，对照管在预温之前加入1mol/L HCl溶液200μL.各管分别加入3mL乙酸丁酯振荡 4min，4℃下放置 3 h，测定280nm波长处吸光度。
, 百拇医药
1.3.3 蛋白质含量测定 按Lowry〔6〕法测定，以人血清白蛋白为标准品。
1.4 统计学处理
实验数据经方差分析处理。
2 结 果
随妊娠周数的增加，MAO活性增加，第8，9周胎盘绒毛中MAO-A活性明显高于第5周(F＝5.44，q＝3.73, 5.54，P<0.05, 0.01)和第6周(q＝3.07,4.83，P<0.05,0.01)。其他各组间差异无显著性(q＝0.10～3.69, P>0.05)。见表1.
表1 妊娠6～9周人体胎盘绒毛中MAO-A活性的变化(ξ/μ mol.s-1.L-1,
) 妊娠周数
, http://www.100md.com
n
MAO-A
5
6
21.07±4.89
6
6
24.71±9.80
7
6
37.92±5.87
8
7
, http://www.100md.com
42.21±23.59*△
9
10
49.96±19.90*△
与5周比较，*F=5.44, q=3.73,5.54,P<0.05,0.01;与6周比较，△ q=3.07,4.8,P<0.05,0.01
3 讨 论
胎盘是联系胎儿与母亲的重要器官,它含有大量的多种类型的神经递质、激素、神经肽等活性物质,在妊娠过程中起着重要的调节作用。研究表明，人类胎盘为一种相对独立极其复杂的神经内分泌器官〔7〕。用HPLC结合电化学检测仪，检测到人早期胎盘存在NE和DA等〔5〕，用免疫组织化学法证明了在胎盘绒毛滋养层细胞中DA和NE及其受体的分布〔4〕。本实验结果显示，在人妊娠早期胎盘绒毛中存在着MAO-A，并可能参与妊娠维持。
, http://www.100md.com
妊娠5～9周，人胎盘绒毛中MAO-A活性增高，提示在妊娠早期随着妊娠周数的增加，儿茶酚胺类的分解有所增强。MAO-A对儿茶酚胺类的代谢意义极为重要，它通过降解儿茶酚胺而调节体内儿茶酚胺的水平。DA和NE与性激素的合成及分泌密切相关，能刺激胎盘中孕酮的合成及促性腺激素的分泌〔4〕，故妊娠早期胎盘中MAO-A的增加可能对妊娠的维持具有重要的作用。
本文为中科院动物所计划生育生殖生物学国家重点实验室课题
参考文献
1 Weyler W， Salach JL. Purifcation and properties of mitochondrial monoamine oxidase type A from human placenta.J Biol Chen， 1985，260(24): 13199
, http://www.100md.com 2 Saurikosk S.Effect of oestrogens and progesterone on the metabolic inactivation of noradrenaline in the human placenta.Placenta，1988，9:507
3 Kono H. Gossypol effects on monoamine oxidase (MAO) activity in several organs of term rats.Tohoku J Exp Med，1991，163: 149
4 石 佳，黄威权,张崇理，等.人早期胎盘绒毛中去甲肾上腺素和多巴胺的免疫组织化学研究.科学通报，1994，39(8):750
5 Zhang JL, Cheng LR，Wang H.Neuropeptides and neurotransmitters in human placental vill.Neuroendocrinology，1991，53(Suppl):77
6 Lowry OH.Protein measurement with the folin phenol reagent.J Biol Chen，1951，193:265
7 张荣庆，石 佳，唐美仪，等.多巴胺和去甲肾上腺素抗独特型抗体的制备与鉴定.动物学报，1995，41(1):109
(1998-06-22收稿 1999-01-10修回), 百拇医药
单位：徐宏伟 杜 卫 王秀丽 青岛医学院生物化学教研室(青岛 266021)；张爱青 青岛医学院附属医院妇产科；张崇理 中科院动物所计划生育生殖生物学国家重点实验室
关键词：单胺氧化酶；胎盘绒毛；人
青岛医学院学报990116 【摘要】 ①目的 探讨妊娠早期人体胎盘中单胺氧化酶(MAO-A)活性与早期妊娠的关系。②方法 应用分光光度法检测了妊娠5～9周人体胎盘绒毛中MAO-A活性。③结果 随妊娠周数的增加，MAO-A活性增加。第8，9周胎盘绒毛中MAO-A活性明显高于第5周(F＝5.44，q＝3.73，5.54，P<0.05，0.01)和第6周(q＝3.07，4.83，P<0.05，0.01)。其他各组间比较，差异无显著性(q=0.10～2.69,P>0.05)。④结论 妊娠早期人体胎盘绒毛中MAO-A活性的变化，可能与妊娠过程神经递质或激素的合成和释放有关。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R714.14
DETERMINATION OF MAO-A ACTIVITY IN HUMAN PLACENTA AT EARLY STAGE
Xu Hongwei,Du Wei, Wang Xiuli, et al
Department of Biochemistry, Qingdao Medical College, Qingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To study the activity of MAO-A in human placenta at early pregnant stage and its relationship with pregnancy. Methods Spectrophotometric method was performed to estimate the activity of MAO-A in villous chorion of human placenta during 5th-9th pregnant weeks. Results The activity of MAO-A increased along with the pregnant period. The activity of MAO-A between 8th and 9th week was significantly higher than that of 5th week(F=5.44, q=3.73, 5.54, P<0.01) and 6th week(q=3.07, 4.83, P<0.05, 0.01). Conclusion MAO-A existed in the villous chorion of human placenta. The changes of its activity was related to the biosynthesis and release of neurotransmitters or hormones during pregnancy.
, 百拇医药
【KEY WORDS】 MAO-A; villous chorion of placenta; human
单胺氧化酶(MAO-A)含有尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(FAD)，附着于线粒体外膜上，催化各种胺类脱氨生成相应的醛，在生物胺代谢中起着重要作用〔1〕。人胎盘中MAO-A活性较高，与去甲肾上腺素(NE)和肾上腺素的灭活有关〔2〕。胎盘中的MAO-A对维持妊娠起着重要作用〔3〕，但这些研究多在晚期胎盘中进行。有研究报道，人胎盘绒毛中确有NE和多巴胺(DA)的存在〔4〕，并能在体外合成和释放NE〔5〕.为进一步探讨儿茶酚胺类神经递质在胎盘中的变化情况及人妊娠早期胎盘中MAO-A的作用机理，我们对人妊娠早期胎盘中MAO-A的活性进行了测定，现报告如下。
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料
35例5～9周人胎盘绒毛取自青岛医学院附属医院妇产科。
1.2 试剂
5-羟色胺购自美国Sigma公司，其他试剂为国产分析纯。
1.3 方法
1.3.1 MAO-A的制备 取人妊娠早期胎盘绒毛，测质量，按1∶3(m∶m)加入预冷的0.32mol/L蔗糖和0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)，匀浆后，4℃下离心10min (15 000r/min)，弃沉淀,取上清液(MAO酶液)待测。
1.3.2 酶活性的测定 反应系统总体积为1mL，其中磷酸盐缓冲液(pH7.4)600μL，MAO酶液200μL，37°C下预温10min，然后加入0.02mol/L 5-羟色胺200μL，保温20min，加入1mol/L HCl溶液200μL终止反应，对照管在预温之前加入1mol/L HCl溶液200μL.各管分别加入3mL乙酸丁酯振荡 4min，4℃下放置 3 h，测定280nm波长处吸光度。
, 百拇医药
1.3.3 蛋白质含量测定 按Lowry〔6〕法测定，以人血清白蛋白为标准品。
1.4 统计学处理
实验数据经方差分析处理。
2 结 果
随妊娠周数的增加，MAO活性增加，第8，9周胎盘绒毛中MAO-A活性明显高于第5周(F＝5.44，q＝3.73, 5.54，P<0.05, 0.01)和第6周(q＝3.07,4.83，P<0.05,0.01)。其他各组间差异无显著性(q＝0.10～3.69, P>0.05)。见表1.
表1 妊娠6～9周人体胎盘绒毛中MAO-A活性的变化(ξ/μ mol.s-1.L-1,
) 妊娠周数, http://www.100md.com
n
MAO-A
5
6
21.07±4.89
6
6
24.71±9.80
7
6
37.92±5.87
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42.21±23.59*△
9
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49.96±19.90*△
与5周比较，*F=5.44, q=3.73,5.54,P<0.05,0.01;与6周比较，△ q=3.07,4.8,P<0.05,0.01
3 讨 论
胎盘是联系胎儿与母亲的重要器官,它含有大量的多种类型的神经递质、激素、神经肽等活性物质,在妊娠过程中起着重要的调节作用。研究表明，人类胎盘为一种相对独立极其复杂的神经内分泌器官〔7〕。用HPLC结合电化学检测仪，检测到人早期胎盘存在NE和DA等〔5〕，用免疫组织化学法证明了在胎盘绒毛滋养层细胞中DA和NE及其受体的分布〔4〕。本实验结果显示，在人妊娠早期胎盘绒毛中存在着MAO-A，并可能参与妊娠维持。
, http://www.100md.com
妊娠5～9周，人胎盘绒毛中MAO-A活性增高，提示在妊娠早期随着妊娠周数的增加，儿茶酚胺类的分解有所增强。MAO-A对儿茶酚胺类的代谢意义极为重要，它通过降解儿茶酚胺而调节体内儿茶酚胺的水平。DA和NE与性激素的合成及分泌密切相关，能刺激胎盘中孕酮的合成及促性腺激素的分泌〔4〕，故妊娠早期胎盘中MAO-A的增加可能对妊娠的维持具有重要的作用。
本文为中科院动物所计划生育生殖生物学国家重点实验室课题
参考文献
1 Weyler W， Salach JL. Purifcation and properties of mitochondrial monoamine oxidase type A from human placenta.J Biol Chen， 1985，260(24): 13199
, http://www.100md.com 2 Saurikosk S.Effect of oestrogens and progesterone on the metabolic inactivation of noradrenaline in the human placenta.Placenta，1988，9:507
3 Kono H. Gossypol effects on monoamine oxidase (MAO) activity in several organs of term rats.Tohoku J Exp Med，1991，163: 149
4 石 佳，黄威权,张崇理，等.人早期胎盘绒毛中去甲肾上腺素和多巴胺的免疫组织化学研究.科学通报，1994，39(8):750
5 Zhang JL, Cheng LR，Wang H.Neuropeptides and neurotransmitters in human placental vill.Neuroendocrinology，1991，53(Suppl):77
6 Lowry OH.Protein measurement with the folin phenol reagent.J Biol Chen，1951，193:265
7 张荣庆，石 佳，唐美仪，等.多巴胺和去甲肾上腺素抗独特型抗体的制备与鉴定.动物学报，1995，41(1):109
(1998-06-22收稿 1999-01-10修回), 百拇医药