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编号:10265649
十堰地区气传真菌调查研究
http://www.100md.com 《郧阳医学院学报》 1999年第3期
     作者:刘克英 徐剑刚 陈 平 刘桂华

    单位:郧阳医学院教学医院十堰市人民医院急诊科 十堰 442000

    关键词:真菌;流行病学;十堰;超敏反应

    郧阳医学院学报990303摘 要 目的:调查十堰地区气传真菌的种类、数 量,了解优势菌群与过敏性疾病的关系。方法:采用全国统一标准 方法曝片法和曝皿法。结果:(1)曝片法共收集真菌孢子24 523个, 计39个种属。(2)曝皿法共收集真菌孢子516个,计32个种属。(3)十堰地区优势气传真菌为 锈菌、交链孢菌、枝孢芽枝菌、黑粉菌、青霉菌等。其高繁殖期与季节、气温、湿度相关。 结论:气传真菌与某些过敏性疾病的高发季节相一致,可能为某些 过敏性疾病的致敏源。

    中国图书资料分类法分类号 R181.34

    A Survey of Airborne Fungi in Shiyan Area
, 百拇医药
    Liu Keying, Xu Jiangang, Chen Ping, et al

    (The Department of Emergency, the People's Hospital of Shiyan, Shiya n 442000)

    Abstract Objective:To identify airborne fungi in Shiyan area and study the relationships between airborne fungi and allergic diseases.Methods:Airborne fungi were isolated and identified by using gravit ational precipitation method (sheet Glass and culture plate of exposure).Results:The 24523 airborne Fungi spores gathered (sheet glass of expo sure)were of 39 species, and the 516 airborne fungi spores collected (culture pl ate of exposure)fell into 32 species. Among the dominant species were: uredinale s, alternaria, cladosporium, cladosporium, ustilagiuales, penicillium.C onclusion:The airborne fungi may be important sensitizing allergens fo r some allergic diseases.
, http://www.100md.com
    Key words fungi; epidemiology; Shiyan; hypersensitivity

    为探明十堰地区气传真致敏菌的种类、数量与气温、湿度以及过敏性疾病 的关系,我们与1997年5月1日至1998年4月30日连续曝片,曝皿一年进行调查,对真菌过敏性 疾病的诊治有指导意义。

    1 调查器材与试剂

    1.1 调查器材

    显微镜、显微照相器材、温箱、冰箱、伞蓬吊式孢子取样器、酒精灯、玻璃器皿、载玻片(2 5 mm×75 mm)、盖玻片(22 mm×22 cm)、试管及试管架、接种针

    1.2 试剂

    软性凡士林粘附剂(北凡士林75 g,石蜡油25 ml混匀备用),碱性复红染色剂(琼脂5g,水2 00 ml,甘油,碱性复红饱和液),乳酸棉篮染液(酚20g,浓乳酸20ml,甘油40ml,水20 ml混合加热,微热后加入棉篮0.05g即可,储存瓶内备用);蛋白胨-葡萄糖琼脂培养基(蛋 白胨10g,葡萄糖40g,琼脂25 g,水1000ml,加热混匀脱脂棉过滤)。
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    2 调查方法

    2.1 曝片调查法

    采用定点取样调查法,具体操作:将涂有凡士林,甘油粘附剂载玻片一张,每天上午10点放 在取样器上(取样器放在室外五楼顶层,周围无高大建筑,无施工工地),连续24h,第2d再放相同玻片一张,同时将前一天玻片取下,用碱性复红染色剂染色,加盖玻片后进行镜检 ,鉴定记录各种真菌孢子种类和数量,共365 d。

    2.2 曝皿调查法

    每月中旬上午制作蛋白胨-葡萄糖培养基,下午4点消毒培养基取回,在无菌室内分倒入6个 平 皿中自然放凉后打开平皿盖置于室外3个,室内3个(不定点),曝皿3min,春秋放在室温下 ,夏季稍放阴暗凉处,冬季放入温箱中避光培养,每日进行观察,记录菌落生长情况及菌落 量,待菌种成熟后作镜下鉴定,遇有不能鉴别的菌种分别接种至盛有培养基的试管中,以待 日后鉴定。此调查每月1次,共12次。
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    3 结果

    全年共收集曝片365张(除4张破碎外),还存留361张,一年共检出真菌孢子总数24 523个, 计32个种属。主要真菌有锈菌8 258个/年(33.7%),交链孢霉5 250个/年(21.4%),枝孢 芽枝菌2 301个/年(9.3%),大孢枝孢菌2 285个/年(9.3%),黑粉菌1 844个/年(7.5%)。 此前5位的结果与国内部分做过气传真菌调查结果基本一致,除已知的真菌外,尚检出45个 未知真菌孢子(详见表1)。

    表1 十堰气传致敏真菌分布(曝片法调查) 月份

    1

    2

    3

    4

    5
, http://www.100md.com
    6

    7

    8

    9

    10

    11

    12

    小结

    锈菌(Uredinales)

    44

    248

    267

    6415
, 百拇医药
    173

    64

    156

    233

    233

    310

    35

    80

    8258

    交链孢霉(Alternaria)

    83

    151

    193
, http://www.100md.com
    330

    676

    739

    597

    320

    1256

    509

    279

    117

    5250

    枝孢芽枝菌(Cladospoum)

    2

    16
, http://www.100md.com
    4

    266

    610

    105

    186

    18

    522

    29

    12

    531

    2301

    大孢枝孢菌

    (Cladosporm macrocarpum)
, 百拇医药
    1

    6

    37

    122

    1596

    420

    34

    18

    28

    16

    6

    1

    2285

    黑粉菌(Ustilagiuales)
, http://www.100md.com
    16

    44

    88

    294

    328

    55

    208

    17 4

    524

    74

    22

    17

    1844

, 百拇医药     球壳孢菌(Hendersouia)

    14

    785

    102

    158

    26

    3

    12

    16

    68

    26

    2

    472
, 百拇医药
    1684

    蠕孢菌(Helminthosporinum)

    18

    13

    80

    5

    34

    41

    21

    21

    181

    44

    16
, http://www.100md.com
    7

    481

    有色二孢菌(Diplodia)

    7

    13

    34

    44

    7

    17

    36

    22

    68

    18
, 百拇医药
    14

    6

    286

    疣蠕孢菌(Hetuosporium)

    11

    14

    7

    22

    54

    23

    25

    20

    5 7
, 百拇医药
    31

    7

    9

    280

    小球腔菌(Leptosphaeria)

    1

    2

    4

    8

    15

    15

    87

    37
, 百拇医药
    29

    13

    1

    5

    217

    短蠕孢菌(Brachysporium)

    6

    3

    20

    3

    19

    14

    28
, http://www.100md.com
    25

    30

    17

    6

    2

    173

    黑孢子菌(Niqrospora)

    0

    0

    16

    4

    0

    0

, 百拇医药     1

    43

    13

    51

    2

    20

    150

    葡萄状穗菌(Stachybotys)

    6

    126

    0

    4

    0

, 百拇医药     0

    0

    0

    2

    0

    0

    4

    142

    匍柄霉(Stemphylium)

    4

    1

    1

    10

    16
, 百拇医药
    37

    16

    1

    0

    7

    5

    5

    103

    荚孢腔菌(Sporormia)

    7

    6

    4

    7

    2
, 百拇医药
    0

    35

    10

    6

    10

    0

    2

    89

    顶套菌(Acrothecirm)

    0

    0

    5

    4

, 百拇医药     9

    4

    26

    4

    19

    5

    6

    0

    82

    腊叶芽枝菌

    (Cladosporirm Herbarum)

    0

    0
, http://www.100md.com
    0

    26

    53

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    79

    弯孢菌(Curvularia)

    2

    0
, 百拇医药
    4

    4

    2

    5

    20

    12

    13

    8

    1

    1

    72

    镰刀菌(Fusarium)

    1

    0
, 百拇医药
    0

    4

    3

    0

    23

    10

    12

    6

    2

    4

    65

    尾孢菌(Cercospora)

    6

    2
, 百拇医药
    9

    9

    6

    0

    0

    5

    19

    7

    0

    2

    65

    棒孢菌(Coryuespora)

    6

    2
, 百拇医药
    4

    5

    3

    0

    1

    5

    11

    9

    3

    8

    57

    多孢菌(Pleospora)

    12

    0
, 百拇医药
    0

    18

    0

    0

    1

    2

    1

    1

    2

    10

    47

    黑附球菌(Epicoccum)

    3

    0
, http://www.100md.com
    0

    15

    0

    0

    0

    0

    1

    10

    1

    7

    37

    壳蠕孢菌(Heudersouia)

    2

, 百拇医药     2

    0

    4

    0

    0

    0

    5

    12

    3

    0

    1

    29

    粪壳菌(Sordaria)

    0
, 百拇医药
    0

    1

    15

    0

    0

    0

    0

    0

    6

    0

    1

    23

    阜孢菌(Papusaria)

    0
, 百拇医药
    0

    3

    0

    0

    0

    0

    1

    6

    1

    0

    0

    11

    田字孢菌(Dictyoarthr)

    0
, 百拇医药
    1

    0

    1

    0

    0

    0

    2

    1

    2

    0

    4

    11

    梨孢菌(Pyricularia)

    2
, 百拇医药
    1

    0

    4

    0

    0

    0

    3

    0

    0

    0

    0

    10

    粉红单端孢菌(richothecium)

, 百拇医药     0

    1

    0

    5

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    7

    四绺孢菌(Tetraploa)
, 百拇医药
    0

    0

    1

    0

    0

    0

    3

    0

    1

    0

    0

    1

    6

    伞卷霉菌(Circinella Umbellata)
, http://www.100md.com
    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    5

    0

    0

    0

    0

    5

    单头孢霉(Mouotospora)
, http://www.100md.com
    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    1

    菌丝碎片
, 百拇医药
    6

    16

    31

    8

    65

    29

    14

    16

    67

    25

    44

    7

    328

    未知
, http://www.100md.com
    0

    0

    1

    3

    22

    0

    6

    3

    9

    0

    0

    1

    45

    总计
, http://www.100md.com
    260

    1453

    916

    7817

    3719

    1571

    1536

    1033

    3189

    1238

    466

    1325

    24523
, 百拇医药
    曝皿全年72个,室外36个,室内36个,共培养出真菌菌落516个,计32个种属。主要真菌有 青霉菌74个/年(14.3%),交链孢菌70个/年(13.7%),枝孢芽枝菌61个/年(11.8%),无孢 群59个年(11.4%),木霉53个/年(10.3%),白地霉39个/年(7.8%)。其中室内以青霉(64个 ),木霉(50个),曲霉(48个)为主;室外则以交链孢霉(68个),芽枝菌(55个),白地霉(39个 )为主,显示出室内外真菌分布的明显差异性(详见表2)。

    表2 曝皿培养法调查 月份

    1

    2

    3

    4

    5

, http://www.100md.com     6

    7

    8

    9

    10

    11

    12

    合计

    青霉(Penicillium)

    1

    5

    16

    4

    38
, 百拇医药
    3

    2

    2

    0

    0

    2

    1

    74

    交链孢霉(Alteznaria)

    3

    3

    1

    8

    17
, 百拇医药
    8

    1

    2

    15

    4

    5

    3

    70

    枝孢芽枝菌

    (Cladosporium Cladosperieiles)

    7

    5

    5
, http://www.100md.com
    3

    14

    0

    22

    1

    2

    0

    1

    1

    61

    无孢群(Mycelia saerilia)

    2

    1

, 百拇医药     8

    6

    27

    2

    5

    2

    4

    1

    0

    1

    59

    白地霉(Geotrichrm audidrm)

    4

, 百拇医药     9

    2

    3

    0

    0

    0

    0

    6

    10

    3

    2

    39

    食串珠菌(Monilia sitophlia)

, 百拇医药     0

    2

    5

    4

    0

    1

    5

    10

    6

    3

    0

    2

    38

    绿色木霉(Trichoderma uiride)
, http://www.100md.com
    1

    1

    0

    0

    1

    8

    4

    6

    8

    1

    3

    1

    34

    康氏木霉(hicoderma kouingi)
, 百拇医药
    0

    0

    0

    1

    1

    0

    0

    2

    5

    6

    3

    1

    19

    宗曲霉(Aspergillus ochraceus)
, 百拇医药
    0

    0

    0

    0

    1

    6

    4

    5

    0

    0

    3

    0

    19

    黄曲霉(Aspergillus flavus)
, 百拇医药
    5

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    2

    5

    0

    1

    3

    17

    烟曲霉(Aspergillus fumigatus)
, 百拇医药
    1

    0

    1

    0

    0

    0

    2

    2

    0

    0

    7

    1

    14

    出芽短梗霉
, 百拇医药
    (Aureobasidiun puliulaus)

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    7

    6

    0

    0

    0
, http://www.100md.com
    13

    杂色曲霉

    (Aspergillus versicoler)

    0

    0

    0

    0

    0

    2

    2

    0

    1

    0
, 百拇医药
    2

    3

    10

    总状共头霉(Sycephalastrum)

    0

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    7

    0

, 百拇医药     0

    0

    1

    9

    大孢枝孢菌

    (Cladosporium macrocarlpum)

    0

    0

    0

    3

    3

    0

    0
, 百拇医药
    0

    0

    0

    0

    0

    6

    有色二孢菌(Aiplodia)

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    0
, 百拇医药
    1

    1

    0

    3

    0

    6

    总状毛霉(Mucor racemosus)

    0

    0

    0

    0

    0

    4

, 百拇医药     1

    0

    0

    0

    0

    0

    5

    腊叶芽枝菌

    (Cladosporium hazbarum)

    0

    0

    2

    0

, http://www.100md.com     0

    3

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    5

    蓝色犁头霉(Absidia coerulea)

    0

    0

    0

    1
, 百拇医药
    1

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    3

    粉红单端孢霉

    (Thichothecium roseum)

    1

    0
, 百拇医药
    0

    10

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    2

    构巢曲霉(Aspergillus nidulaus)

    0
, 百拇医药
    0

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    1

    2

    葡枝报霉(Rhizopus stolonifez)
, 百拇医药
    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    2

    2

    葡柄霉(Stemphylium)
, 百拇医药
    0

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    1

    黑葡萄穗霉(Stachybotrgs)
, 百拇医药
    0

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    1

    黑附球菌(Epicoccum)
, 百拇医药
    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    1

    砖红轮枝孢菌
, http://www.100md.com
    (Verticillium laterifium)

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0
, http://www.100md.com
    1

    单头孢霉(Monotosporu)

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0
, 百拇医药
    1

    壳二孢菌(Ascochyta)

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0
, http://www.100md.com
    1

    镰刀菌(Fusarium)

    0

    0

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0

    0

    0

    0
, http://www.100md.com
    1

    犁头霉(Absidia)

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0
, 百拇医药
    1

    顶套菌(Acrothecium)

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    0

    1

    0

    0

    0
, http://www.100md.com
    1

    合计

    26

    28

    41

    35

    107

    39

    48

    42

    63

    31

    3323

    516
, 百拇医药
    1

    4 讨论

    通过一年的观察初步了解到十堰地区的优势真菌的种类,曝片结果依次为锈菌、交链孢霉 、枝孢芽枝、大孢枝孢菌、黑粉菌。曝皿结果是青霉、交链孢霉、枝孢芽枝菌等。其种类与部分做过气传真菌调查的地区基本相似。空气中优势真菌有明显季节性,以4~10月份飘散较多,其中又以4~5月及9~10月为高峰,其优势菌如锈菌出现的高峰明显集中在4月,交链孢菌的高峰在9月,仅黑粉菌、芽枝菌集中在5月和9月,这与其它地区[1,2]6~10月 为最高峰略有差异。这可能与本地区春秋季节温度、湿度、风力适宜真菌生长及大量飘散。 6~8月份太阳光的直射及过高的温度不适宜真菌生长,冬季寒冷干燥也不利于真菌生长。用曝片和曝皿两种互相补充的调查方法,可检得在人工培养基上不生长的真菌如锈菌、黑粉菌。 曝皿则可检出因孢子微小而在曝片上难于发现的真菌如青霉、毛霉、曲霉、木霉等。故认为本结果较能准确地代表本地区真菌飘散情况。
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    从本次曝片曝皿情况看,本地区优势真菌以4~5月及9~10月达高峰,特别是抗原性较强的 交链孢霉及芽枝菌较多[1],而这个季节门诊过敏性支气管哮喘及结膜炎发病率增 高,又有报告[3]交链孢霉是呼吸道变态反应的常见的主要致病菌,也可引起过敏 性结膜炎。法国的Hense[4]分析,有15%哮喘病人对从病人环境中收集来的交链 孢霉及青霉抗原皮试阳性,给其中一部分病人吸入交链孢霉或青霉孢子即可诱发哮喘。由此 推测过敏性哮喘及结膜炎等真菌过敏病人的过敏原可能为这些优势菌,从而进一步可采用真 菌变应原进行特异性脱敏治疗,对当地临床防治真菌变态反应性疾病提供科学依据。

    (致谢:本研究得到刘少文、王国维院长和遗传研究所张昌军及检验科邱方成等几位主任的大力帮助,在此谨表谢意。)

    作者简介:刘克英,女,1947年生,主任医师

    参考文献

    1 张丽萍,巫 毅.常春市气传真菌调查.白求恩医科大学学报,1994,20(2):212

    2 蒋新伟,任伟景,杨秉佑.长沙市东区气传真菌的初步调查.湖南医科大学学报, 1994,19(2):326

    3 叶世泰,乔秉善.中国气传致敏真菌调查.北京:科学出版社,1995.9~12

    4 叶世泰,乔秉善.中国气传致敏真菌调查.北京: 科学出版社,1995.3~6

    (1998-10-12 收稿), http://www.100md.com