两种抗弓形虫抗体的检测与临床应用
作者：许晓红 邓松华
单位：许晓红 合肥市妇婴保健院检验科，合肥 230001；邓松华 安徽医科大学病理生理教研室，合肥 230032
关键词：弓形虫病；免疫学；IgG；IgM；酶联免疫吸附测定；流产
安徽医科大学学报990329 摘要 目的 探讨自然流产与弓形虫感染的关系。方法 用酶联免疫吸附试验检测了49例自然流产妇女和75例妊娠8个月以上的健康孕妇血清特异性IgG和IgM抗体。结果 流产组IgG和IgM抗体阳性率(34.7%和18.4%)均明显高于健康对照组(9.3%和3.1%)，并随流产次数的增加，两种抗体阳性呈逐渐升高的趋势。另外，两种抗体阳性率还随患者年龄增加而逐渐增高。结论 弓形虫感染与孕妇流产有一定关系。IgM抗体检测有助于孕妇感染弓形虫的早期诊断与治疗。
中国图书资料分类法分类号 R531.8；R714.21
, http://www.100md.com
Detection of IgG and IgM antibodies against toxoplasma
in spontaneous abortion women
Xu Xiaohong, Deng Songhua
(Medical Laboratary,Hefei Maternal and Child Health Hospital,Hefei 230001)
Abstracts Objective To clarify the relationship of toxoplasmatic infection and spontaneous abortion. Methods Specific IgG and IgM antibodies of 49 abortion cases and 75 health pregnant women were detected using enzym-linked immune sorbent assay. Results IgG and IgM positive rates of abortion group were significantly higher than those of healthy control, and the more times the abortion, the higher the antibodies positive rates. Conclusion Relationship was found between toxoplamatic infection and spontaneous abortion. IgM detection may be useful for early diagnosis and treatment of tox oplasmatic infection in pregnant women
, 百拇医药
MeSH toxoplasmosis/immunol; IgG; IgM; enzym-linked immunosorbent assay abortion
弓形虫感染可造成孕妇流产、死产或早产，增加妊娠合并症〔1〕。目前，国内对弓形虫感染的实验室诊断，主要是检测血清中IgG类抗体。我们建立了抗弓形虫抗体两种Ig的ELISA检测法，对有自然流产史妇女进行了检测，并探讨两类抗体与患者年龄及流产次数的关系，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 检测对象 正常对照组75例为怀孕8个月以上的健康孕妇，年龄23～29岁；流产组49例为婚后自然流产2～5次的妇女，年龄24～42岁。两组经本院妇产科和不孕症门诊检查，未发现器质性病变。均静脉采血分离血清，-20℃保存待查。
1.2 弓形虫抗原制备方法 见文献〔2〕。
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1.3 酶标记抗体 羊抗人IgG、IgM辣根过氧化物酶结合物(羊抗人IgG-HRP，羊抗人IgM-HRP)均为上海生物制品研究所产品，批号97-8和97-6，工作浓度分别为1∶400和1∶300。
1.4 IgG和IgM检测 ELISA间接法检测IgG和IgM类Ab于聚苯乙烯反应板上进行。弓形虫抗原(1∶100)包被，4℃过夜后，常规洗涤，用含10%(体积分数，下同)小牛血清的10 mmol.L-1 PBS-T (pH 7.4)封闭，37℃ 1 h后洗涤；按1∶50稀释待测血清(包括阳性与阴性对照)一式四份，37℃ 1 h后洗涤；分别加工作浓度的羊抗人IgG-HRP、羊抗人IgM-HRP各两孔，37℃ 1 h后洗涤；加底物(OPD-H2O2)溶液，室温反应20 min,用2 mol.L-1 H2SO4终止反应。用酶标仪测490 nm处吸光度值，定P/N≥2.1为阳性。
, 百拇医药
2 结果
2.1 流产组IgG、IgM类Ab检出率 两者分别为34.7%、18.4%，均显著高于正常对照组(9.3%、3.1%)，P<0.01。
2.2 流产次数与两种Ig类别Ab的关系 见表1。
表1 流产次数与两类Ab的关系 流产次数
n
Ab阳性例数(%)
IgG
IgM
2
19
3(15.8)
, http://www.100md.com
2(10.5)
3
14
5(35.7)
2(14.3)
4
12
6(50.0)
3(25.0)
5次以上
4
3(75.0)
2(50.0)
, http://www.100md.com
随流产次数的增加，两类Ab呈逐渐升高趋势。经χ2检验有显著差异(P<0.05)
2.3 流产妇女年龄与两类Ab的关系 见表2。可见随着患者年龄增加，Ab阳性率逐渐率高。经χ2检验有显著差异(P<0.05)
表2 流产妇女年龄与两类Ab的关系 年龄(岁)
n
Ab阳性例数(%)
IgG
IgM
24～27
5
0(0)
, 百拇医药
0(0)
28～32
20
5(25.0)
2(10.0)
33～36
16
6(37.5)
3(18.8)
37岁以上
8
6(75.0)
4(50.0)
, 百拇医药
3 讨论
3.1 弓形虫是一种细胞内寄生的原虫。弓形虫感染是导致早产、流产不可忽视的重要原因〔3〕。本研究对有自然流产史妇女进行特异性IgG、IgM抗体检测，发现随流产次数增加，两类抗体呈逐渐升高趋势(P<0.05)，且随流产妇女年龄的增加，两类Ab阳性率也逐渐升高(P<0.05)，说明弓形虫感染与孕妇流产有一定关系。
3.2 弓形虫感染后，血清中可出现抗弓形虫特异性Ab，早期为IgM类Ab，逐渐为IgG类Ab所替代，检出特异性IgM-Ab说明患者近期曾有弓形虫感染。本文报告同时检测两种Ig类Ab，即IgG、IgM抗体，可提高弓形虫感染的检出率。其中，IgM抗体的检测有助于孕妇感染弓形虫的早期诊断和治疗，值得进一步深入研究。
作者简介：许晓红，女，35岁，检验师；
邓松华，男，45岁，教授，硕士生导师
参考文献
1 于恩庶主编. 弓形虫病学. 福州：福建科学技术出版社，1992：1～3
2 郭小华，陈观今，徐秉锟等. 弓形虫感染的循环抗原检测的研究. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1991；9(3)：178～179
3 闵玉梅. 异常妊娠与弓形虫病的关系探讨. 实验用妇产科杂志，1998；14(6)：309～311
1998-12-10收稿，1999-05-15修回, 百拇医药
单位：许晓红 合肥市妇婴保健院检验科，合肥 230001；邓松华 安徽医科大学病理生理教研室，合肥 230032
关键词：弓形虫病；免疫学；IgG；IgM；酶联免疫吸附测定；流产
安徽医科大学学报990329 摘要 目的 探讨自然流产与弓形虫感染的关系。方法 用酶联免疫吸附试验检测了49例自然流产妇女和75例妊娠8个月以上的健康孕妇血清特异性IgG和IgM抗体。结果 流产组IgG和IgM抗体阳性率(34.7%和18.4%)均明显高于健康对照组(9.3%和3.1%)，并随流产次数的增加，两种抗体阳性呈逐渐升高的趋势。另外，两种抗体阳性率还随患者年龄增加而逐渐增高。结论 弓形虫感染与孕妇流产有一定关系。IgM抗体检测有助于孕妇感染弓形虫的早期诊断与治疗。
中国图书资料分类法分类号 R531.8；R714.21
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Detection of IgG and IgM antibodies against toxoplasma
in spontaneous abortion women
Xu Xiaohong, Deng Songhua
(Medical Laboratary,Hefei Maternal and Child Health Hospital,Hefei 230001)
Abstracts Objective To clarify the relationship of toxoplasmatic infection and spontaneous abortion. Methods Specific IgG and IgM antibodies of 49 abortion cases and 75 health pregnant women were detected using enzym-linked immune sorbent assay. Results IgG and IgM positive rates of abortion group were significantly higher than those of healthy control, and the more times the abortion, the higher the antibodies positive rates. Conclusion Relationship was found between toxoplamatic infection and spontaneous abortion. IgM detection may be useful for early diagnosis and treatment of tox oplasmatic infection in pregnant women
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MeSH toxoplasmosis/immunol; IgG; IgM; enzym-linked immunosorbent assay abortion
弓形虫感染可造成孕妇流产、死产或早产，增加妊娠合并症〔1〕。目前，国内对弓形虫感染的实验室诊断，主要是检测血清中IgG类抗体。我们建立了抗弓形虫抗体两种Ig的ELISA检测法，对有自然流产史妇女进行了检测，并探讨两类抗体与患者年龄及流产次数的关系，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 检测对象 正常对照组75例为怀孕8个月以上的健康孕妇，年龄23～29岁；流产组49例为婚后自然流产2～5次的妇女，年龄24～42岁。两组经本院妇产科和不孕症门诊检查，未发现器质性病变。均静脉采血分离血清，-20℃保存待查。
1.2 弓形虫抗原制备方法 见文献〔2〕。
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1.3 酶标记抗体 羊抗人IgG、IgM辣根过氧化物酶结合物(羊抗人IgG-HRP，羊抗人IgM-HRP)均为上海生物制品研究所产品，批号97-8和97-6，工作浓度分别为1∶400和1∶300。
1.4 IgG和IgM检测 ELISA间接法检测IgG和IgM类Ab于聚苯乙烯反应板上进行。弓形虫抗原(1∶100)包被，4℃过夜后，常规洗涤，用含10%(体积分数，下同)小牛血清的10 mmol.L-1 PBS-T (pH 7.4)封闭，37℃ 1 h后洗涤；按1∶50稀释待测血清(包括阳性与阴性对照)一式四份，37℃ 1 h后洗涤；分别加工作浓度的羊抗人IgG-HRP、羊抗人IgM-HRP各两孔，37℃ 1 h后洗涤；加底物(OPD-H2O2)溶液，室温反应20 min,用2 mol.L-1 H2SO4终止反应。用酶标仪测490 nm处吸光度值，定P/N≥2.1为阳性。
, 百拇医药
2 结果
2.1 流产组IgG、IgM类Ab检出率 两者分别为34.7%、18.4%，均显著高于正常对照组(9.3%、3.1%)，P<0.01。
2.2 流产次数与两种Ig类别Ab的关系 见表1。
表1 流产次数与两类Ab的关系 流产次数
n
Ab阳性例数(%)
IgG
IgM
2
19
3(15.8)
, http://www.100md.com
2(10.5)
3
14
5(35.7)
2(14.3)
4
12
6(50.0)
3(25.0)
5次以上
4
3(75.0)
2(50.0)
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随流产次数的增加，两类Ab呈逐渐升高趋势。经χ2检验有显著差异(P<0.05)
2.3 流产妇女年龄与两类Ab的关系 见表2。可见随着患者年龄增加，Ab阳性率逐渐率高。经χ2检验有显著差异(P<0.05)
表2 流产妇女年龄与两类Ab的关系 年龄(岁)
n
Ab阳性例数(%)
IgG
IgM
24～27
5
0(0)
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0(0)
28～32
20
5(25.0)
2(10.0)
33～36
16
6(37.5)
3(18.8)
37岁以上
8
6(75.0)
4(50.0)
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3 讨论
3.1 弓形虫是一种细胞内寄生的原虫。弓形虫感染是导致早产、流产不可忽视的重要原因〔3〕。本研究对有自然流产史妇女进行特异性IgG、IgM抗体检测，发现随流产次数增加，两类抗体呈逐渐升高趋势(P<0.05)，且随流产妇女年龄的增加，两类Ab阳性率也逐渐升高(P<0.05)，说明弓形虫感染与孕妇流产有一定关系。
3.2 弓形虫感染后，血清中可出现抗弓形虫特异性Ab，早期为IgM类Ab，逐渐为IgG类Ab所替代，检出特异性IgM-Ab说明患者近期曾有弓形虫感染。本文报告同时检测两种Ig类Ab，即IgG、IgM抗体，可提高弓形虫感染的检出率。其中，IgM抗体的检测有助于孕妇感染弓形虫的早期诊断和治疗，值得进一步深入研究。
作者简介：许晓红，女，35岁，检验师；
邓松华，男，45岁，教授，硕士生导师
参考文献
1 于恩庶主编. 弓形虫病学. 福州：福建科学技术出版社，1992：1～3
2 郭小华，陈观今，徐秉锟等. 弓形虫感染的循环抗原检测的研究. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1991；9(3)：178～179
3 闵玉梅. 异常妊娠与弓形虫病的关系探讨. 实验用妇产科杂志，1998；14(6)：309～311
1998-12-10收稿，1999-05-15修回, 百拇医药