恶性肿瘤患者血NO和MAD水平测定及临床意义
作者：沈 莉 杨 林 杨家湘 陈志武 方 明 吴黎明
单位：沈 莉 杨 林 杨家湘 吴黎明安徽医科大学第一附属医院放射肿瘤科，合肥 230022；陈志武 方 明 安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032
关键词：肿瘤；血液；一氧化氮；血液；丙二醛；血液
安徽医科大学学报990317 摘要 目的 了解恶性肿瘤患者血一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的变化及临床意义。方法 以Green硫代巴比妥酸法测定了64例不同病期恶性肿瘤患者血NO及MDA含量。结果 恶性肿瘤患者血NO和MDA较对照组高(P<0.01，P<0.05)，各肿瘤组间NO及MDA差异无显著性，而Ⅳ期肿瘤患者NO和MDA低于Ⅱ、Ⅲ期患者(P<0.01)。结论 NO和MDA可能参与了肿瘤发生发展过程，而晚期肿瘤患者血NO和MDA下降趋势有可能成为预后不良的临床指标。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R73
Measurement of serum nitric oxide and malondiadehyde
in patients with cancer and its clinical value
Shen Li, Yang Ling, Yang Jiaxiang et al
(Dept of Medical Oncology, First Affiliated Hospital of Anhui Medical University,Hefei 230022)
Abstract Objective To further understand the change of nitric oxide (NO) and malondiadehyde(MDA) in the serum of patients with cancer and its clinical value. Methods We measure the quantity of NO and MDA in the serum of 64 cases with different kind of cancer and at different period respectively with Greens method and thiabarbituric acid method. Results The concentration of serum NO and MDA of cancer group was significantly higher than that of normal control (P<0.05；P<0.01), and the concentration of serum NO and MDA of Ⅵ period group was lower than that of Ⅱ and Ⅲ period subgroups(P<0.01). The difference of NO and MDA serum concentration between different kind of cancer subgroups was not significant enough. Conclusion There is some measurable changes in serum NO and MDA of cancer patients and a decreasing trend in that of Ⅵ period patients. It is possible that NO and MDA are involved in the pathological procedure of cancer and the decreasing trend in NO and MDA may be a clinical indicator of poor prognosis.
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MeSH neoplasms/blood; nitric oxide; malondialdehyde/blood
一氧化氮(NO)参与了体内的多种病理生理过程，由于NO合酶(NOS)广泛存在于各种肿瘤细胞中〔1〕，NO与肿瘤发生发展的关系已日益受到关注。自由基是一类化学性质活跃的物质，它可使生物膜脂质过氧化，蛋白质变性、细胞坏死，有研究表明自由基引发的脂质过氧化又参与肿瘤基因启动和肿瘤发生过程〔2〕。我们对64例恶性肿瘤患者血NO及自由基引发的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)进行了测定，以了解其在恶性肿瘤患者血中的变化以及这些指标变化的临床意义。
1 材料与方法
1.1 临床资料 恶性肿瘤组64例，均为经临床、影像学以及病理细胞学诊断的恶性肿瘤患者。男35例，女29例，年龄38～70岁，平均54.8岁。其中肺癌15例，食管癌20例，鼻咽癌15例，乳腺癌14例。根据国际抗癌联盟恶性肿瘤TNM分类法〔3〕分期：其中Ⅱ期组19例，Ⅲ期组24例，Ⅳ期组21例。健康对照组30例，为健康献血员，男18例，女12例，平均年龄38.6岁。
, http://www.100md.com
1.2 方法 所有血标本均于清晨空腹采静脉血5 ml，抗凝，4 h内离心3 000 r.min-1×10 min，分离血浆。
1.2.1 NO测定 按Green法测定〔4〕，血浆0.5 ml加2.0 ml 75 mmol.L-1硫酸摇匀3 000 r.min-1×10 min离心，取上清2 ml加1 ml酸化的10 g.L-1对氨苯磺酸和1 ml酸化的10 g.L-1萘乙胺，37℃下反应10 min，紫外751分光光度仪545 nm处测定NO含量。
1.2.2 MDA测定 按硫代巴比妥酸法，以四氧甲基丙烷为标准，在535 nm处测定MDA含量。
, 百拇医药 1.3 统计处理 组间以t检验。
2 结果
2.1 恶性肿瘤患者与正常对照组血NO与MDA测定结果 见表1。结果表明恶性肿瘤组血NO与MDA含量高于正常对照组，两组差别均有显著性。
表1 64例恶性肿瘤与正常对照组血
NO、MDA(μmol.L-1)比较(
±s) 组 别
n
NO
MDA
正常对照组
, http://www.100md.com
30
34.73±8.80
3.61±1.09
恶性肿瘤组
64
43.72±9.41**
4.19±1.30*
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.012.2 不同肿瘤组与对照组NO和MDA测定结果 见表2。结果提示各肿瘤组血NO含量高于正常对照组(P<0.01，P<0.05)，而MDA与对照组差异无显著性，各肿瘤组间血NO及MDA差异均无显著性。
, http://www.100md.com 表2 不同肿瘤和正常对照组血NO、MDA(μmol.L-1)比较(±s) 组 别
n
NO
MDA
正常对照组
30
34.73±8.80
3.61±1.09
肺癌组
15
, http://www.100md.com 41.27±8.94*
2.10±1.08
食管癌组
20
45.22±9.11**
4.14±1.14
鼻咽癌组
15
43.22±9.52**
4.23±1.07
乳腺癌组
, 百拇医药 14
44.73±9.02**
4.20±1.08
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.012.3 不同分期恶性肿瘤组血NO和MDA测定结果 见表3。结果显示，Ⅱ期、Ⅲ期组血NO、MDA高于对照组(P<0.01，P<0.05)，Ⅳ期组血NO、MDA与正常对照组差异无显著性，却低于Ⅲ期或(和)Ⅱ期组，差异有显著性(P<0.01)。
表3 不同期别恶性肿瘤和正常对照组
血NO、MDA(μmol.L-1)比较(±s) 组 别
, http://www.100md.com
n
NO
MDA
正常对照组
30
34.73±8.80
3.61±1.09
Ⅱ期组
19
42.10±9.81*
4.39±1.24*
Ⅲ期组
, 百拇医药
24
48.21±7.45**
4.48±1.36*
Ⅳ期组
21
40.08±10.21△△++
3.69±1.34△△++
与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01；
与Ⅱ组比较：+P<0.05，++P<0.01；
, 百拇医药
与Ⅲ组比较：△△P<0.013 讨论
恶性肿瘤原因极其复杂，最近人们注意到NO、自由基与癌症的关系。
NO是一种分子量小、结构简单的气体分子，在体内主要由构成型或诱导型NOS(cNOS,iNOS)合成，NO的作用除了扩张血管平滑肌外，主要参与介导巨噬细胞的细胞毒性作用和免疫调节作用，同时它是细胞外信息传递体，从而可能参与肿瘤的发生与发展过程。目前认为，NO在持续合适浓度下，扩张血管，传递细胞生长信息，从而有利于肿瘤生长；另外一方面，NO可以通过结合肿瘤细胞代谢有关酶的活性部分Fe-S，破坏酶活性，或激活巨噬细胞杀伤肿瘤细胞而抑制肿瘤的生长〔1，5〕。
本研究结果显示，恶性肿瘤组血NO高于对照组，不同肿瘤组血NO亦高于对照组，提示NO可能直接参与了肿瘤生长机制。以往研究表明晚期肿瘤患者的免疫功能和巨噬细胞功能明显下降。本组Ⅳ期肿瘤患者的NO呈明显下降趋势，可能是导致晚期肿瘤的免疫功能低下的重要机制之一，它提示着临床预后不良。
, 百拇医药
氧代谢过程中产生了自由基，引起细胞生物膜破坏，蛋白质变性，从而导致细胞老化、死亡。在体内自由基主要由SOD清除，然而自由基引发的脂质过氧化又参与了肿瘤基因的启动以及肿瘤的发生发展过程，因此自由基参与肿瘤生长机制也是双向的。本研究通过检验MDA，间接反映肿瘤患者血中的自由基水平，结果显示，恶性肿瘤组MDA高于正常对照组，为自由基参与肿瘤发生机制提供了临床依据。本研究中不同肿瘤组血MDA与对照组差异无显著性，可能与各组病例数过少有关。而晚期肿瘤Ⅳ期组MDA明显低于Ⅱ、Ⅲ期组(P<0.01)。Emannel〔6〕报道肿瘤早、中期自由基升高，晚期肿瘤患者自由基降至正常，本研究结果与其相符。又有研究表明晚期肿瘤SOD明显升高〔8〕，因此Ⅳ期组MDA下降趋势，可能与肿瘤氧代谢旺盛、SOD代偿性升高相关。
本研究结果提示NO、MDA可能参与了肿瘤的发生发展过程，而晚期肿瘤患者血清指标的下降趋势可能成为预后不良的临床指标。
, 百拇医药 作者简介：沈 莉，女，34岁，主治医师
杨家湘，女，57岁，教授，主任医师
参考文献
1 刘 健，胥 彬. 一氧化氮与肿瘤. 肿瘤研究与临床， 1997；9(1)：62～64
2 Vace CE， Withelm J, Hamns M et al. Interaction of lipid peroxidation products with DNA： A review. Mutation Res, 1988;195:137～139
3 梅慰德. 国际抗癌联盟恶性肿瘤TNM分类. 合肥：安徽科技出版社，1991：10
4 Green LC, Tannenbaum SR, Goldman P. Nitrate Synthesis in the Gerfree and conventional rat. Science, 1981;21:56～61
5 Erick A. Nitric Oxide： Mediator, muderer, and medicine. Lancet, 1994;343:1199～1214
6 许新华， 胡 珊， 李传琼等. 红细胞SOD活力、血清LPO含量对恶性肿瘤的诊断价值及预后探讨. 肿瘤防治研究， 1988；25(3)：189～190
1999-01-08收稿，1999-04-28修回, 百拇医药
单位：沈 莉 杨 林 杨家湘 吴黎明安徽医科大学第一附属医院放射肿瘤科，合肥 230022；陈志武 方 明 安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032
关键词：肿瘤；血液；一氧化氮；血液；丙二醛；血液
安徽医科大学学报990317 摘要 目的 了解恶性肿瘤患者血一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的变化及临床意义。方法 以Green硫代巴比妥酸法测定了64例不同病期恶性肿瘤患者血NO及MDA含量。结果 恶性肿瘤患者血NO和MDA较对照组高(P<0.01，P<0.05)，各肿瘤组间NO及MDA差异无显著性，而Ⅳ期肿瘤患者NO和MDA低于Ⅱ、Ⅲ期患者(P<0.01)。结论 NO和MDA可能参与了肿瘤发生发展过程，而晚期肿瘤患者血NO和MDA下降趋势有可能成为预后不良的临床指标。
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中国图书资料分类法分类号 R73
Measurement of serum nitric oxide and malondiadehyde
in patients with cancer and its clinical value
Shen Li, Yang Ling, Yang Jiaxiang et al
(Dept of Medical Oncology, First Affiliated Hospital of Anhui Medical University,Hefei 230022)
Abstract Objective To further understand the change of nitric oxide (NO) and malondiadehyde(MDA) in the serum of patients with cancer and its clinical value. Methods We measure the quantity of NO and MDA in the serum of 64 cases with different kind of cancer and at different period respectively with Greens method and thiabarbituric acid method. Results The concentration of serum NO and MDA of cancer group was significantly higher than that of normal control (P<0.05；P<0.01), and the concentration of serum NO and MDA of Ⅵ period group was lower than that of Ⅱ and Ⅲ period subgroups(P<0.01). The difference of NO and MDA serum concentration between different kind of cancer subgroups was not significant enough. Conclusion There is some measurable changes in serum NO and MDA of cancer patients and a decreasing trend in that of Ⅵ period patients. It is possible that NO and MDA are involved in the pathological procedure of cancer and the decreasing trend in NO and MDA may be a clinical indicator of poor prognosis.
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MeSH neoplasms/blood; nitric oxide; malondialdehyde/blood
一氧化氮(NO)参与了体内的多种病理生理过程，由于NO合酶(NOS)广泛存在于各种肿瘤细胞中〔1〕，NO与肿瘤发生发展的关系已日益受到关注。自由基是一类化学性质活跃的物质，它可使生物膜脂质过氧化，蛋白质变性、细胞坏死，有研究表明自由基引发的脂质过氧化又参与肿瘤基因启动和肿瘤发生过程〔2〕。我们对64例恶性肿瘤患者血NO及自由基引发的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)进行了测定，以了解其在恶性肿瘤患者血中的变化以及这些指标变化的临床意义。
1 材料与方法
1.1 临床资料 恶性肿瘤组64例，均为经临床、影像学以及病理细胞学诊断的恶性肿瘤患者。男35例，女29例，年龄38～70岁，平均54.8岁。其中肺癌15例，食管癌20例，鼻咽癌15例，乳腺癌14例。根据国际抗癌联盟恶性肿瘤TNM分类法〔3〕分期：其中Ⅱ期组19例，Ⅲ期组24例，Ⅳ期组21例。健康对照组30例，为健康献血员，男18例，女12例，平均年龄38.6岁。
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1.2 方法 所有血标本均于清晨空腹采静脉血5 ml，抗凝，4 h内离心3 000 r.min-1×10 min，分离血浆。
1.2.1 NO测定 按Green法测定〔4〕，血浆0.5 ml加2.0 ml 75 mmol.L-1硫酸摇匀3 000 r.min-1×10 min离心，取上清2 ml加1 ml酸化的10 g.L-1对氨苯磺酸和1 ml酸化的10 g.L-1萘乙胺，37℃下反应10 min，紫外751分光光度仪545 nm处测定NO含量。
1.2.2 MDA测定 按硫代巴比妥酸法，以四氧甲基丙烷为标准，在535 nm处测定MDA含量。
, 百拇医药 1.3 统计处理 组间以t检验。
2 结果
2.1 恶性肿瘤患者与正常对照组血NO与MDA测定结果 见表1。结果表明恶性肿瘤组血NO与MDA含量高于正常对照组，两组差别均有显著性。
表1 64例恶性肿瘤与正常对照组血
NO、MDA(μmol.L-1)比较(
±s) 组 别n
NO
MDA
正常对照组
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30
34.73±8.80
3.61±1.09
恶性肿瘤组
64
43.72±9.41**
4.19±1.30*
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.012.2 不同肿瘤组与对照组NO和MDA测定结果 见表2。结果提示各肿瘤组血NO含量高于正常对照组(P<0.01，P<0.05)，而MDA与对照组差异无显著性，各肿瘤组间血NO及MDA差异均无显著性。
, http://www.100md.com 表2 不同肿瘤和正常对照组血NO、MDA(μmol.L-1)比较(
±s) 组 别n
NO
MDA
正常对照组
30
34.73±8.80
3.61±1.09
肺癌组
15
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2.10±1.08
食管癌组
20
45.22±9.11**
4.14±1.14
鼻咽癌组
15
43.22±9.52**
4.23±1.07
乳腺癌组
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44.73±9.02**
4.20±1.08
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.012.3 不同分期恶性肿瘤组血NO和MDA测定结果 见表3。结果显示，Ⅱ期、Ⅲ期组血NO、MDA高于对照组(P<0.01，P<0.05)，Ⅳ期组血NO、MDA与正常对照组差异无显著性，却低于Ⅲ期或(和)Ⅱ期组，差异有显著性(P<0.01)。
表3 不同期别恶性肿瘤和正常对照组
血NO、MDA(μmol.L-1)比较(
±s) 组 别, http://www.100md.com
n
NO
MDA
正常对照组
30
34.73±8.80
3.61±1.09
Ⅱ期组
19
42.10±9.81*
4.39±1.24*
Ⅲ期组
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24
48.21±7.45**
4.48±1.36*
Ⅳ期组
21
40.08±10.21△△++
3.69±1.34△△++
与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01；
与Ⅱ组比较：+P<0.05，++P<0.01；
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与Ⅲ组比较：△△P<0.013 讨论
恶性肿瘤原因极其复杂，最近人们注意到NO、自由基与癌症的关系。
NO是一种分子量小、结构简单的气体分子，在体内主要由构成型或诱导型NOS(cNOS,iNOS)合成，NO的作用除了扩张血管平滑肌外，主要参与介导巨噬细胞的细胞毒性作用和免疫调节作用，同时它是细胞外信息传递体，从而可能参与肿瘤的发生与发展过程。目前认为，NO在持续合适浓度下，扩张血管，传递细胞生长信息，从而有利于肿瘤生长；另外一方面，NO可以通过结合肿瘤细胞代谢有关酶的活性部分Fe-S，破坏酶活性，或激活巨噬细胞杀伤肿瘤细胞而抑制肿瘤的生长〔1，5〕。
本研究结果显示，恶性肿瘤组血NO高于对照组，不同肿瘤组血NO亦高于对照组，提示NO可能直接参与了肿瘤生长机制。以往研究表明晚期肿瘤患者的免疫功能和巨噬细胞功能明显下降。本组Ⅳ期肿瘤患者的NO呈明显下降趋势，可能是导致晚期肿瘤的免疫功能低下的重要机制之一，它提示着临床预后不良。
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氧代谢过程中产生了自由基，引起细胞生物膜破坏，蛋白质变性，从而导致细胞老化、死亡。在体内自由基主要由SOD清除，然而自由基引发的脂质过氧化又参与了肿瘤基因的启动以及肿瘤的发生发展过程，因此自由基参与肿瘤生长机制也是双向的。本研究通过检验MDA，间接反映肿瘤患者血中的自由基水平，结果显示，恶性肿瘤组MDA高于正常对照组，为自由基参与肿瘤发生机制提供了临床依据。本研究中不同肿瘤组血MDA与对照组差异无显著性，可能与各组病例数过少有关。而晚期肿瘤Ⅳ期组MDA明显低于Ⅱ、Ⅲ期组(P<0.01)。Emannel〔6〕报道肿瘤早、中期自由基升高，晚期肿瘤患者自由基降至正常，本研究结果与其相符。又有研究表明晚期肿瘤SOD明显升高〔8〕，因此Ⅳ期组MDA下降趋势，可能与肿瘤氧代谢旺盛、SOD代偿性升高相关。
本研究结果提示NO、MDA可能参与了肿瘤的发生发展过程，而晚期肿瘤患者血清指标的下降趋势可能成为预后不良的临床指标。
, 百拇医药 作者简介：沈 莉，女，34岁，主治医师
杨家湘，女，57岁，教授，主任医师
参考文献
1 刘 健，胥 彬. 一氧化氮与肿瘤. 肿瘤研究与临床， 1997；9(1)：62～64
2 Vace CE， Withelm J, Hamns M et al. Interaction of lipid peroxidation products with DNA： A review. Mutation Res, 1988;195:137～139
3 梅慰德. 国际抗癌联盟恶性肿瘤TNM分类. 合肥：安徽科技出版社，1991：10
4 Green LC, Tannenbaum SR, Goldman P. Nitrate Synthesis in the Gerfree and conventional rat. Science, 1981;21:56～61
5 Erick A. Nitric Oxide： Mediator, muderer, and medicine. Lancet, 1994;343:1199～1214
6 许新华， 胡 珊， 李传琼等. 红细胞SOD活力、血清LPO含量对恶性肿瘤的诊断价值及预后探讨. 肿瘤防治研究， 1988；25(3)：189～190
1999-01-08收稿，1999-04-28修回, 百拇医药