增效如意金黄膏的质量研究
作者：吴献群 刘小平
单位：湖北中医学院附属医院 430061
关键词：增效如意金黄膏；黄柏总生物碱；甲氧；氨嘧啶；含量测定
湖北中医学院学报990316
中国图书分类号 R285.6
Abstract
The total phellodendrine content in the Synergy RUYI GOLD Plaster was determined at the wavelength of 415 μm by using acidic dye colorimetric method and the trimethoprim(TMP)content of the same was determined at the wavelength of 271 μ m by using ultraviolet spectrophotmetry.This test method features simple and easy operation and good reappearance.It can be used for quality control of the said preparation.
, http://www.100md.com
Key words:Synergy RUYI GOLD plaster Total phellodendrine
Trimethoprim(TMP) Content determination
如意金黄散始见于明*陈实功《外科正宗》，由姜黄、黄柏、大黄、天花粉等10味药物组成，具有清热解毒，消肿止痛之功效，临床上用于痈疽发背、疮疡肿痛、丹毒流注、跌打损伤等[1]。现代研究表明其具有抑菌、消散肿疡、抗肉芽囊炎症作用及增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力等[2]。为方便患者应用，提高如意金黄散的临床疗效，我们在原处方的基础上加入了具有促透皮吸收作用的氮酮和抗菌增效剂甲氧氨嘧啶，研制了增效如意金黄膏。为控制该制剂的质量，本文对方中主药黄柏的有效成分黄柏总生物碱(以小檗碱计算)以及抗菌增效剂甲氧氨嘧啶进行了含量测定。
1 黄柏总生物碱的含量测定
, 百拇医药
1.1 仪器与试液
1.1.1 DU-640紫外分光光度计(美国Beckman仪器公司)。
1.1.2 0.1%溴麝香草酚蓝溶液 称取无水碳酸钠0.5g，加适量水溶解，再加入溴麝香草酚蓝0.5g，加水溶解，最后加水至500ml，摇匀。
1.1.3 磷酸缓冲液 按文献[3]方法配制，pH为7.0。其余试剂均为分析纯。
1.2 测定条件的选择
1.2.1 吸收波长 量取4ml标准液，按标准曲线项操作，在波长350nm～450nm处扫描测定，结果在波长415nm处有最大吸收，结果见附图。
1.2.2 缓冲液pH值 精密量取5ml标准液，按标准曲线项操作，分别加入不同pH的缓冲液，于波长415nm处测定pH值在6.0～8.0范围内的吸收度，结果在pH7.0处有最大吸收。见表1。
, 百拇医药
表1 不同pH值时的吸收度(n=3) pH
6.0
6.2
6.6
7.0
7.4
7.8
8.0
吸收度
0.3354
0.3404
0.3421
0.3440
, 百拇医药
0.3421
0.3387
0.3376
附图 吸收曲线图
1.2.3 氯仿一次性萃取试验 精密量取5ml标准液，按标准曲线项操作，得待测液Ⅰ；在水层中再加入氯仿10ml，振摇，放置使分层，分取氯仿层，得待测液Ⅱ。以空白作对照，于波长415nm处测定吸收度。结果：Ⅰ=0.3443；Ⅱ=0。实验表明，经氯仿一次性萃取后，可将小檗碱提尽。
1.3 标准曲线
精密称取105°C干燥至恒重的盐酸小檗碱0.0020g，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，使成每ml等于20μg。精密量取配制好的标准液1、2、3、4、5ml，分别加水4、3、2、1、0ml，加入缓冲液5ml，0.1%溴麝香草酚蓝1ml，精密加入氯仿10ml，振摇1分钟，放置使分层，分取氯仿层；另取5ml水以同样操作作空白对照，于波长415nm处测定吸收度。根据测定结果绘制成吸收度浓度标准曲线，并求出其回归方程为：A=0.00327+0.06874C；相关系数：r=0.9999(n=5)。
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1.4 回收率测定
在已知含量的样品液中，分别加入一定量的标准溶液，按标准曲线项操作测定吸收度，并根据回归方程求算测定含量，计算加样回收率，结果见表2。
表2 回收率试验(n=3) 序号
加入量
(μg)
测得量
(μg)
回收率
(%)
平均值
(%)
, http://www.100md.com
RSD
(%)
1
40
39.48
98.70
2
50
50.39
100.78
3
60
59.46
, 百拇医药
99.10
99.05
1.05
4
70
69.01
98.59
5
80
78.45
98.06
1.5 总生物碱测定
称取样品1.0g，精密称定。加水适量，加热微沸2分钟，趁热过滤，热水洗涤2次，放冷，加水至100ml；精密量取1ml，加水4ml，以下按标准曲线项操作，测定吸收度，并按回归方程计算样品中总生物碱含量(以小檗碱计算)，结果见表3。表3 样品中总生物碱的含量(n=3) 批号
, http://www.100md.com
含量(mg%g)
RSD%
980418
143.44
0.25
980521
144.22
0.26
980530
166.52
0.25
980615
153.27
, 百拇医药
0.29
2 甲氧氨嘧啶的测定[4]
称取本品1.5g，精密称定。加硫酸液(0.05mol/L)60ml，加热使溶，趁热过滤，热硫酸液(0.05mol/L)洗涤2次，置100ml量瓶中，放冷，加碘化钾试液6ml，用硫酸液(0.05mol/L)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液50ml，置分液漏斗中，加浓氨水3ml，摇匀，用氯仿振摇提取2次(50ml、20ml)，每次15分钟，合并氯仿液于另一分液漏斗中，用硫酸液(0.05mol/L)60ml振摇提取15分钟，弃去氯仿层，将酸层用滤纸滤入100ml量瓶中，分液漏斗及滤器用硫酸液(0.05mol/L)分次洗涤；洗液并入量瓶中，用硫酸液(0.05mol/L)稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置50ml量瓶中，用硫酸液(0.05mol/L)稀释至刻度，摇匀，照分光光度法(中国药典1995年版二部附录)，在271nm的波长处测定吸收度，按C14H15N4O3的吸收系数(E1%1cm)为204计算，即得。结果见表4。表4 样品中甲氧氨嘧啶的含量(n=3) 批号
, http://www.100md.com
含量(mg/g)
RSD%
980418
16.94
0.63
980521
17.05
0.51
980530
17.11
0.56
980615
17.32
, 百拇医药
0.50
3 小结
3.1 增效如意金黄膏中黄柏为主药之一，其所含的主要有效成分为小檗碱。因此，本文以小檗碱为标准测定黄柏总生物碱的含量是可行的。本测定方法快速简便，重现性好，可用于该制剂的质量控制。
3.2 增效如意金黄膏中甲氧氨嘧啶的测定方法系参照北京市药品标准中增效黄连素片(胶囊)的测定方法进行的，方法简单、准确、可靠。
作者简介：吴献群，女，1956年，副主任医师
参考文献
1 吴献群，刘小平.如意金黄散的临床及实验研究.时珍国医国药，1998，9(6)：573
2 刘云，何光星.金黄散药理作用及其应用.华西药学杂志，1992，7(1)：56
3 中国科学院上海药物研究所.中草药有效成分提取与分离.第二版.上海：上海科学技术出版社，1983.450
4 北京市卫生局编.北京市药品标准1996年版，北京：化学工业出版社，1996.348
收稿日期：1999-04-16, 百拇医药
单位：湖北中医学院附属医院 430061
关键词：增效如意金黄膏；黄柏总生物碱；甲氧；氨嘧啶；含量测定
湖北中医学院学报990316
中国图书分类号 R285.6
Abstract
The total phellodendrine content in the Synergy RUYI GOLD Plaster was determined at the wavelength of 415 μm by using acidic dye colorimetric method and the trimethoprim(TMP)content of the same was determined at the wavelength of 271 μ m by using ultraviolet spectrophotmetry.This test method features simple and easy operation and good reappearance.It can be used for quality control of the said preparation.
, http://www.100md.com
Key words:Synergy RUYI GOLD plaster Total phellodendrine
Trimethoprim(TMP) Content determination
如意金黄散始见于明*陈实功《外科正宗》，由姜黄、黄柏、大黄、天花粉等10味药物组成，具有清热解毒，消肿止痛之功效，临床上用于痈疽发背、疮疡肿痛、丹毒流注、跌打损伤等[1]。现代研究表明其具有抑菌、消散肿疡、抗肉芽囊炎症作用及增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力等[2]。为方便患者应用，提高如意金黄散的临床疗效，我们在原处方的基础上加入了具有促透皮吸收作用的氮酮和抗菌增效剂甲氧氨嘧啶，研制了增效如意金黄膏。为控制该制剂的质量，本文对方中主药黄柏的有效成分黄柏总生物碱(以小檗碱计算)以及抗菌增效剂甲氧氨嘧啶进行了含量测定。
1 黄柏总生物碱的含量测定
, 百拇医药
1.1 仪器与试液
1.1.1 DU-640紫外分光光度计(美国Beckman仪器公司)。
1.1.2 0.1%溴麝香草酚蓝溶液 称取无水碳酸钠0.5g，加适量水溶解，再加入溴麝香草酚蓝0.5g，加水溶解，最后加水至500ml，摇匀。
1.1.3 磷酸缓冲液 按文献[3]方法配制，pH为7.0。其余试剂均为分析纯。
1.2 测定条件的选择
1.2.1 吸收波长 量取4ml标准液，按标准曲线项操作，在波长350nm～450nm处扫描测定，结果在波长415nm处有最大吸收，结果见附图。
1.2.2 缓冲液pH值 精密量取5ml标准液，按标准曲线项操作，分别加入不同pH的缓冲液，于波长415nm处测定pH值在6.0～8.0范围内的吸收度，结果在pH7.0处有最大吸收。见表1。
, 百拇医药
表1 不同pH值时的吸收度(n=3) pH
6.0
6.2
6.6
7.0
7.4
7.8
8.0
吸收度
0.3354
0.3404
0.3421
0.3440
, 百拇医药
0.3421
0.3387
0.3376
附图 吸收曲线图
1.2.3 氯仿一次性萃取试验 精密量取5ml标准液，按标准曲线项操作，得待测液Ⅰ；在水层中再加入氯仿10ml，振摇，放置使分层，分取氯仿层，得待测液Ⅱ。以空白作对照，于波长415nm处测定吸收度。结果：Ⅰ=0.3443；Ⅱ=0。实验表明，经氯仿一次性萃取后，可将小檗碱提尽。
1.3 标准曲线
精密称取105°C干燥至恒重的盐酸小檗碱0.0020g，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，使成每ml等于20μg。精密量取配制好的标准液1、2、3、4、5ml，分别加水4、3、2、1、0ml，加入缓冲液5ml，0.1%溴麝香草酚蓝1ml，精密加入氯仿10ml，振摇1分钟，放置使分层，分取氯仿层；另取5ml水以同样操作作空白对照，于波长415nm处测定吸收度。根据测定结果绘制成吸收度浓度标准曲线，并求出其回归方程为：A=0.00327+0.06874C；相关系数：r=0.9999(n=5)。
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1.4 回收率测定
在已知含量的样品液中，分别加入一定量的标准溶液，按标准曲线项操作测定吸收度，并根据回归方程求算测定含量，计算加样回收率，结果见表2。
表2 回收率试验(n=3) 序号
加入量
(μg)
测得量
(μg)
回收率
(%)
平均值
(%)
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RSD
(%)
1
40
39.48
98.70
2
50
50.39
100.78
3
60
59.46
, 百拇医药
99.10
99.05
1.05
4
70
69.01
98.59
5
80
78.45
98.06
1.5 总生物碱测定
称取样品1.0g，精密称定。加水适量，加热微沸2分钟，趁热过滤，热水洗涤2次，放冷，加水至100ml；精密量取1ml，加水4ml，以下按标准曲线项操作，测定吸收度，并按回归方程计算样品中总生物碱含量(以小檗碱计算)，结果见表3。表3 样品中总生物碱的含量(n=3) 批号
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含量(mg%g)
RSD%
980418
143.44
0.25
980521
144.22
0.26
980530
166.52
0.25
980615
153.27
, 百拇医药
0.29
2 甲氧氨嘧啶的测定[4]
称取本品1.5g，精密称定。加硫酸液(0.05mol/L)60ml，加热使溶，趁热过滤，热硫酸液(0.05mol/L)洗涤2次，置100ml量瓶中，放冷，加碘化钾试液6ml，用硫酸液(0.05mol/L)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液50ml，置分液漏斗中，加浓氨水3ml，摇匀，用氯仿振摇提取2次(50ml、20ml)，每次15分钟，合并氯仿液于另一分液漏斗中，用硫酸液(0.05mol/L)60ml振摇提取15分钟，弃去氯仿层，将酸层用滤纸滤入100ml量瓶中，分液漏斗及滤器用硫酸液(0.05mol/L)分次洗涤；洗液并入量瓶中，用硫酸液(0.05mol/L)稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置50ml量瓶中，用硫酸液(0.05mol/L)稀释至刻度，摇匀，照分光光度法(中国药典1995年版二部附录)，在271nm的波长处测定吸收度，按C14H15N4O3的吸收系数(E1%1cm)为204计算，即得。结果见表4。表4 样品中甲氧氨嘧啶的含量(n=3) 批号
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含量(mg/g)
RSD%
980418
16.94
0.63
980521
17.05
0.51
980530
17.11
0.56
980615
17.32
, 百拇医药
0.50
3 小结
3.1 增效如意金黄膏中黄柏为主药之一，其所含的主要有效成分为小檗碱。因此，本文以小檗碱为标准测定黄柏总生物碱的含量是可行的。本测定方法快速简便，重现性好，可用于该制剂的质量控制。
3.2 增效如意金黄膏中甲氧氨嘧啶的测定方法系参照北京市药品标准中增效黄连素片(胶囊)的测定方法进行的，方法简单、准确、可靠。
作者简介：吴献群，女，1956年，副主任医师
参考文献
1 吴献群，刘小平.如意金黄散的临床及实验研究.时珍国医国药，1998，9(6)：573
2 刘云，何光星.金黄散药理作用及其应用.华西药学杂志，1992，7(1)：56
3 中国科学院上海药物研究所.中草药有效成分提取与分离.第二版.上海：上海科学技术出版社，1983.450
4 北京市卫生局编.北京市药品标准1996年版，北京：化学工业出版社，1996.348
收稿日期：1999-04-16, 百拇医药