深部痰液粒细胞集落刺激因子测定对细菌性毛细支气管炎的诊断价值
作者：陈小芳 郑凤秀 李孟荣 王国健 李迎春 陈晓冰 吴荣熙
单位：(温州医学院附属儿童医院 儿科研究室，浙江 温州 325027)
关键词：毛细支气管炎；痰液；G-CSF；细菌培养；病原学检测
温州医学院学报000209 [摘 要] 目的:探讨深部痰液粒细胞集落刺激因子(G-CSF)测定对毛细支气管炎合并细菌感染的诊断价值。 方法:采用双抗体夹心ELISA法，检测74例单纯毛细支气管炎和27例毛细支气管炎合并细菌感染患儿的深部痰液G-CSF阳性率，并对两组患儿进行痰细菌学培养和病毒病原学检测。 结果:两组G-CSF阳性率和细菌培养阳性率差异均有显著性(P<0.01和P<0.05),病毒病原学检出率无统计学意义。结论:痰液G-CSF检测是毛细支气管炎并发细菌感染的敏感性指标。
[中图分类号] R725.6 [文献标识码] A [文章编号] 1000-2138(2000)02-0112-02
, 百拇医药
The diagnostic value of G-CSF in the nasopharyngeal secretions of bronchiolitis complicated with bacterial infection in infancy
CHEN Xiao-fang ZHENG Feng-xiu LI Meng-rong
(Institute of Pediatrics,Affiliated Children's Hospital , Wenzhou Medical College, Wenzhou Zhejiang 325027)
Abstract： Objective：To explore the diagnostic value of granulocyte-colony stimulating factor(G-CSF) in the nasopharyngeal secretions (NPS) of bronchiolitis complicated with bacterial infection in infancy.Methods：The level of G-CSF in NPS was determined by ELISA in 74 cases of bronchiolitis without complications and 27 comlicated with bacterial infection.Bacterial culture and viral detection were performed in 50 randomly selected cases.Results：The positive rate of G-CSF and bacterial culture in bronchiolitis complicated group was apparently higher than that the group without comlication (P<0.01 and P<0.05,respectively) and the viral detection rate showed no statistical significance between two groups (P>0.05).Conclusion：G-CSF in NPS is a sensitive and feasible index to evaluate the bronchiolitis complicated with bacterial infection.
, 百拇医药
Key words： bronchiolitis； nasopharyngeal secretions； granulocyte-colony stimulating factor； bacterial culture； viral detection
毛细支气管炎(简称毛支)是婴幼儿时期最常见的急性下呼吸道感染性疾病[1]。呼吸道合胞病毒是本病最常见的病原体。临床上部分患儿可能并发细菌感染，但诊断尚缺乏客观指标。为此，本研究室对毛支患儿作深部痰液的G-CSF测定，旨在探讨G-CSF测定对毛支并感染的诊断价值，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 研究对象 1999年1～10月本院收治毛支患儿101例，其中男77例，女 24例，年龄 40天～24个月，平均5.92±4.31个月。根据毛细支气管炎是否合并细菌感染分为单纯毛支组(74例)和毛支合并细菌感染组(27例)，毛支临床诊断标准参照张梓荆主编的《小儿病毒性呼吸道感染与病毒性肺炎》[2]。毛支合并细菌感染的临床诊断指标为：①X线胸片：在毛支的胸片特点之外，尚见有斑片状阴影、结节状浸润阴影或胸腔积液、液气胸、肺大泡等异常表现；②高热超过39℃；③湿性咳嗽，多痰；④病情重、病程进展迅速；⑤周围血象提示白细胞总数明显升高，分类显示中性粒细胞百分比值升高或见有核左移和中毒颗粒；⑥C反应蛋白(CRP)值升高。如果患儿具有上述临床资料的四项以上，就认为毛支合并细菌感染。
, 百拇医药
1.2 方法 患儿入院后48小时内，使用抗生素前，常规清洗鼻腔，用8号鼻咽管自鼻腔插至咽喉部(约8cm)[3,4]，负压吸引，留取痰液 0.3ml左右，作细菌学培养及鉴定(鉴定仪器为法国生产的VITEK32型全自动微生物分析仪)，余下的痰液加入约2倍量0.01mol/L、pH7.2的磷酸盐缓冲液(简称PBS)，再加入抗粘液剂2～3滴，用滴管反复吹打至粘液稀薄(约3～5分钟)，2000r/min离心5～10分钟，留取上清液，置-70℃冰箱待测G-CSF；沉淀物用
0.01mol/L、pH7.2的 PBS洗两次，取沉淀细胞涂片，风扇吹干后丙酮固定，待干后进行病毒病原学检测。G-CSF测定采用双抗体夹心ELISA法检测，试剂盒由北京邦定泰克生物有限公司提供；病毒病原学检测采用桥联酶标法(简称 APAAP)，试剂盒购自中国人民解放军262 医院实验科，具体操作均按说明书进行。
1.3 统计学处理 用SPSS 8.0统计软件进行χ2检验。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 单纯毛支组G-CSF阳性11例，占14.9%，毛支合并细菌感染组G-CSF阳性12例，占44.4%，两组差异有显著统计学意义(χ2=9.842，P<
0.01)。
2.2 在上述101例毛支患儿中，随机抽取50例进行痰病毒病原学检测和细菌学培养。痰病毒病原学检测阳性的为32例，其中10例合并有细菌培养阳性，并以此分为病毒病原学检测确诊的单纯毛支组(22例)和毛支合并细菌感染组(10例)，两组的G-CSF阳性率分别为18.2%和70.0%，经校正χ2检验，两组差异有显著性意义(χ2=6.047，P<0.05)。
3 讨论
毛支为病毒感染引起，临床以抗病毒、对症治疗为主，一般不主张使用抗生素。毛支患儿伴发细菌感染，临床上尚属多见，但尚无敏感、快速、方便、安全的诊断方法。G-CSF具有调节粒细胞的干细胞存活、增殖、分化，加强成熟粒细胞功能的作用。目前已证实，G-CSF的产生主要受细菌及其产物包括内毒素等的调节，在抗感染的非特异性免疫中起极重要的作用。正常人体内G-CSF水平很低，本法测定均为阴性，当人体被细菌感染后明显升高，甚至可以迅速上升千倍，而在感染控制后则又明显下降，是反映细菌感染的可靠指标[5,6]。深部痰液是毛支患儿最直接的分泌物，较客观地反映呼吸道炎症情况，因此深部痰液G-CSF水平的测定比血清G-CSF水平的测定更具意义，且有取材方便、快速、病人易接受等优点。
, 百拇医药
本实验结果显示，毛支并发细菌感染患儿组深部痰液G-CSF阳性率和细菌培养阳性率均明显高于单纯毛支组(P<0.01，P<0.05)，说明深部痰液G-CSF的测定、细菌培养结果均可作为毛支是否并发细菌感染的诊断指标，对抗生素的应用具有指导作用。与细菌培养相比，G-CSF的测定具有方便、快速、灵敏等优点，但G-CSF是一种细胞因子，它的产生和分泌可能受TNF-α等其他细胞因子影响 [7] 。
作者简介：陈小芳(1970-)，女，浙江文成人，助理实验师。
参考文献
[1] Sibble Y,Reynolds HY. Macrophages and polymorphonuclear neutrophils in lung defense and injury[J]. Am Rev Respir Dis,1990,141:471-501.
, 百拇医药
[2] 张梓荆主编.小儿病毒性呼吸道感染与病毒性肺炎[M].北京：中国医药科技出版社，1990.113.
[3] Garofolo R,Kimpen JLL,Welliver RC,et al.Eosinophil degra-
nulation in the respiratory tract during naturally acquired respiratory syncytial virus infection[J].J Pediatr,1992,120:29.
[4] 孙波，张灵恩，樊绍曾.小儿呼吸急救[M].上海：上海医科大学出版社，1997.25.
[5] 李太生，王爱霞，郭小清.用单克隆抗体建立酶联免疫吸附法测定粒细胞集落刺激因子的临床应用[J].中华医学杂志，1993,73(4):226.
[6] 和小清，陈积梅.检测粒细胞集落刺激因子鉴别有无细菌感染[J].中华医学检验杂志,1995,18(4):248.
[7] 李孟荣，黄达枢，方水富，等.儿童哮喘粒细胞集落刺激因子与肿瘤坏死因子的关系[J].温州医学院学报，1997, 27(3):133.
收稿日期：1999-09-06
修回日期：2000-03-06, 百拇医药
单位：(温州医学院附属儿童医院 儿科研究室，浙江 温州 325027)
关键词：毛细支气管炎；痰液；G-CSF；细菌培养；病原学检测
温州医学院学报000209 [摘 要] 目的:探讨深部痰液粒细胞集落刺激因子(G-CSF)测定对毛细支气管炎合并细菌感染的诊断价值。 方法:采用双抗体夹心ELISA法，检测74例单纯毛细支气管炎和27例毛细支气管炎合并细菌感染患儿的深部痰液G-CSF阳性率，并对两组患儿进行痰细菌学培养和病毒病原学检测。 结果:两组G-CSF阳性率和细菌培养阳性率差异均有显著性(P<0.01和P<0.05),病毒病原学检出率无统计学意义。结论:痰液G-CSF检测是毛细支气管炎并发细菌感染的敏感性指标。
[中图分类号] R725.6 [文献标识码] A [文章编号] 1000-2138(2000)02-0112-02
, 百拇医药
The diagnostic value of G-CSF in the nasopharyngeal secretions of bronchiolitis complicated with bacterial infection in infancy
CHEN Xiao-fang ZHENG Feng-xiu LI Meng-rong
(Institute of Pediatrics,Affiliated Children's Hospital , Wenzhou Medical College, Wenzhou Zhejiang 325027)
Abstract： Objective：To explore the diagnostic value of granulocyte-colony stimulating factor(G-CSF) in the nasopharyngeal secretions (NPS) of bronchiolitis complicated with bacterial infection in infancy.Methods：The level of G-CSF in NPS was determined by ELISA in 74 cases of bronchiolitis without complications and 27 comlicated with bacterial infection.Bacterial culture and viral detection were performed in 50 randomly selected cases.Results：The positive rate of G-CSF and bacterial culture in bronchiolitis complicated group was apparently higher than that the group without comlication (P<0.01 and P<0.05,respectively) and the viral detection rate showed no statistical significance between two groups (P>0.05).Conclusion：G-CSF in NPS is a sensitive and feasible index to evaluate the bronchiolitis complicated with bacterial infection.
, 百拇医药
Key words： bronchiolitis； nasopharyngeal secretions； granulocyte-colony stimulating factor； bacterial culture； viral detection
毛细支气管炎(简称毛支)是婴幼儿时期最常见的急性下呼吸道感染性疾病[1]。呼吸道合胞病毒是本病最常见的病原体。临床上部分患儿可能并发细菌感染，但诊断尚缺乏客观指标。为此，本研究室对毛支患儿作深部痰液的G-CSF测定，旨在探讨G-CSF测定对毛支并感染的诊断价值，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 研究对象 1999年1～10月本院收治毛支患儿101例，其中男77例，女 24例，年龄 40天～24个月，平均5.92±4.31个月。根据毛细支气管炎是否合并细菌感染分为单纯毛支组(74例)和毛支合并细菌感染组(27例)，毛支临床诊断标准参照张梓荆主编的《小儿病毒性呼吸道感染与病毒性肺炎》[2]。毛支合并细菌感染的临床诊断指标为：①X线胸片：在毛支的胸片特点之外，尚见有斑片状阴影、结节状浸润阴影或胸腔积液、液气胸、肺大泡等异常表现；②高热超过39℃；③湿性咳嗽，多痰；④病情重、病程进展迅速；⑤周围血象提示白细胞总数明显升高，分类显示中性粒细胞百分比值升高或见有核左移和中毒颗粒；⑥C反应蛋白(CRP)值升高。如果患儿具有上述临床资料的四项以上，就认为毛支合并细菌感染。
, 百拇医药
1.2 方法 患儿入院后48小时内，使用抗生素前，常规清洗鼻腔，用8号鼻咽管自鼻腔插至咽喉部(约8cm)[3,4]，负压吸引，留取痰液 0.3ml左右，作细菌学培养及鉴定(鉴定仪器为法国生产的VITEK32型全自动微生物分析仪)，余下的痰液加入约2倍量0.01mol/L、pH7.2的磷酸盐缓冲液(简称PBS)，再加入抗粘液剂2～3滴，用滴管反复吹打至粘液稀薄(约3～5分钟)，2000r/min离心5～10分钟，留取上清液，置-70℃冰箱待测G-CSF；沉淀物用
0.01mol/L、pH7.2的 PBS洗两次，取沉淀细胞涂片，风扇吹干后丙酮固定，待干后进行病毒病原学检测。G-CSF测定采用双抗体夹心ELISA法检测，试剂盒由北京邦定泰克生物有限公司提供；病毒病原学检测采用桥联酶标法(简称 APAAP)，试剂盒购自中国人民解放军262 医院实验科，具体操作均按说明书进行。
1.3 统计学处理 用SPSS 8.0统计软件进行χ2检验。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 单纯毛支组G-CSF阳性11例，占14.9%，毛支合并细菌感染组G-CSF阳性12例，占44.4%，两组差异有显著统计学意义(χ2=9.842，P<
0.01)。
2.2 在上述101例毛支患儿中，随机抽取50例进行痰病毒病原学检测和细菌学培养。痰病毒病原学检测阳性的为32例，其中10例合并有细菌培养阳性，并以此分为病毒病原学检测确诊的单纯毛支组(22例)和毛支合并细菌感染组(10例)，两组的G-CSF阳性率分别为18.2%和70.0%，经校正χ2检验，两组差异有显著性意义(χ2=6.047，P<0.05)。
3 讨论
毛支为病毒感染引起，临床以抗病毒、对症治疗为主，一般不主张使用抗生素。毛支患儿伴发细菌感染，临床上尚属多见，但尚无敏感、快速、方便、安全的诊断方法。G-CSF具有调节粒细胞的干细胞存活、增殖、分化，加强成熟粒细胞功能的作用。目前已证实，G-CSF的产生主要受细菌及其产物包括内毒素等的调节，在抗感染的非特异性免疫中起极重要的作用。正常人体内G-CSF水平很低，本法测定均为阴性，当人体被细菌感染后明显升高，甚至可以迅速上升千倍，而在感染控制后则又明显下降，是反映细菌感染的可靠指标[5,6]。深部痰液是毛支患儿最直接的分泌物，较客观地反映呼吸道炎症情况，因此深部痰液G-CSF水平的测定比血清G-CSF水平的测定更具意义，且有取材方便、快速、病人易接受等优点。
, 百拇医药
本实验结果显示，毛支并发细菌感染患儿组深部痰液G-CSF阳性率和细菌培养阳性率均明显高于单纯毛支组(P<0.01，P<0.05)，说明深部痰液G-CSF的测定、细菌培养结果均可作为毛支是否并发细菌感染的诊断指标，对抗生素的应用具有指导作用。与细菌培养相比，G-CSF的测定具有方便、快速、灵敏等优点，但G-CSF是一种细胞因子，它的产生和分泌可能受TNF-α等其他细胞因子影响 [7] 。
作者简介：陈小芳(1970-)，女，浙江文成人，助理实验师。
参考文献
[1] Sibble Y,Reynolds HY. Macrophages and polymorphonuclear neutrophils in lung defense and injury[J]. Am Rev Respir Dis,1990,141:471-501.
, 百拇医药
[2] 张梓荆主编.小儿病毒性呼吸道感染与病毒性肺炎[M].北京：中国医药科技出版社，1990.113.
[3] Garofolo R,Kimpen JLL,Welliver RC,et al.Eosinophil degra-
nulation in the respiratory tract during naturally acquired respiratory syncytial virus infection[J].J Pediatr,1992,120:29.
[4] 孙波，张灵恩，樊绍曾.小儿呼吸急救[M].上海：上海医科大学出版社，1997.25.
[5] 李太生，王爱霞，郭小清.用单克隆抗体建立酶联免疫吸附法测定粒细胞集落刺激因子的临床应用[J].中华医学杂志，1993,73(4):226.
[6] 和小清，陈积梅.检测粒细胞集落刺激因子鉴别有无细菌感染[J].中华医学检验杂志,1995,18(4):248.
[7] 李孟荣，黄达枢，方水富，等.儿童哮喘粒细胞集落刺激因子与肿瘤坏死因子的关系[J].温州医学院学报，1997, 27(3):133.
收稿日期：1999-09-06
修回日期：2000-03-06, 百拇医药