夹脊穴和足三里穴埋线刺激对老年大鼠不同脑区单胺类神经递质含量的影响1
作者：刘 琦 马晓明 朱笛霓
单位：陕西省中医药研究院，西安 710003
关键词：穴位；神经递质；衰老
中国老年学杂志/990120 摘 要 老年大鼠性腺内分泌及生殖功能衰退主要与下丘脑释放GnRH的能力下降有关。而GnRH释放减少又与下丘脑CA类神经递质(NA、DA)含量下降，CA/5-HT比值下降有关。在老年大鼠夹脊穴和足三里穴埋线四次，刺激40 d后，用荧光法测定海马、下丘脑和中脑内5-HT、NA、DA含量。发现老年大鼠5-HT、DA、NA含量都降低，以NA、DA降低尤为明显。穴位刺激后5-HT、NA、DA含量升高，其中DA、5-HT升高显著。已知肾俞穴埋线可以不同程度激活下丘脑内侧视前区、蓝斑和中缝核神经元兴奋性，增加蓝斑对下丘脑内侧视前区激活效应，减少老年大鼠皮层、下丘脑、蓝斑中脂褐质颗粒沉积，缩短老年雌鼠性周期长度，延缓老年雄鼠性腺衰老发生。所以长期慢性刺激夹脊穴和足三里穴可通过调节脑内单胺类神经递质而产生抗衰老作用。
, http://www.100md.com
Effect of catgut embedding stimulation at Jiaji and
Zhusanli on monoaminergic neurotransmitter at
different brain area in old rats
Liu Qi,Ma Xiaomin Zhu Dini
Shanxi Academy of Traditional Chinese Medicine,Xi'an 710003
Objectve The relationship between stimulation points and catecholamine(CA)and serotonine(5-HT) contents in central nervous system in old rats were studied and the mechanism of antisenility by acupuncture was analyzed.Metheods The catguts were embedded for 4 times during 40 days at Jiaji and Zhusanli,and the contents of 5-HT、norepinephrine(NE)、dopamine(DA)were determined with fluorometry at hippocampus,hypothalamus and mesencephalon area of the old rats.Result The contents of 5-HT、NA and DA were increased in the points stimulation group,especiall 5-HT and DA were singificant higher in the points stimulation group than that in the control group.Conclusion The antisenility could be induced by stimulation Jiaji and Zhusanli points and the mechanism was through modulation of monoaminergic neurotransmitter levels in brain.
, 百拇医药
Key words Point Neurotransmitter Senility
国内外大量文献表明，随着年龄老化性腺衰竭，性激素水平低落，同时中枢神经递质含量发生明显变化。其中去甲肾上腺素(NA)和多巴胺(DA)的活性和转换率降低，5-羟色胺(5-HT)水平略高或不变〔1〕，下丘脑神经内分泌功能明显衰退。有学者报道，改变中枢神经递质水平可以延缓衰老，恢复老年鼠性周期活动〔2〕。实践证明，针灸可延年益寿。推测针灸抗衰老机理与中枢单胺类神经递质水平有关。本实验在老年大鼠夹脊穴和足三里穴埋线刺激，观察其对中枢不同脑区单胺类神经递质含量的影响。
1 材料与方法
1.1 材料 18～20月龄SD老年大鼠，雌雄不限(本院动物房供应)。实验用试剂皆为市售分析纯试剂。5-HT为Sigma产品，DA、NA为中国药品生物制品检定所产品。
, 百拇医药
1.2 方法 动物随机分成穴位埋线组和对照组。埋线组动物在乙醚麻醉下，俯卧位固定，常规消毒后在双侧夹脊穴和足三里穴，经直径为0.9mm的注射针头埋入1～1.5 cm长的肠线，每10天一次，共4次。40 d后进行脑内5-HT、NA、DA含量测定。对照组动物除不埋入肠线外，处理同实验组。
实验日，动物断头处死，迅速取脑置0 ℃生理盐水中清洗，除去脑膜、血液后置冰上，解剖出下丘脑、中脑、海马用于测定。用酸性正丁醇抽提脑组织内单胺类神经递质5-HT、NA、DA，用荧光分光光度计测定各物质含量〔3〕，测定所得全部数据计算为ng/g湿脑重后经t检验处理。
2 结 果
2.1 老年埋线组大鼠海马、下丘脑、中脑5-HT含量与对照组大鼠相比含量明显升高(P<0.01)，见表1。
表1 老年埋线组大鼠与对照组大鼠5-HT含量(ng/g湿重，
±s) 组别
, 百拇医药
n
海马
下丘脑
中脑
老年对照组
9
73.44±15.25
181.08±12.41
159.57±11.6
老年埋线组
10
113.94±14.341)
, http://www.100md.com
289.84±39.251)
241.02±23.541)
1)P<0.01，下表同
2.2 老年埋线组大鼠海马、下丘脑和中脑NA含量与对照组大鼠相比有升高趋势但无明显差异，见表2。
表2 老年埋线组大鼠与对照组大鼠NA含量(ng/g湿重) 组别
n
海马
下丘脑
中脑
老年对照组
, http://www.100md.com
9
16.59±2.07
27.70±2.25
25.23±3.89
老年埋线组
10
16.31±1.97
29.24±4.49
23.59±7.19
2.3 老年埋线组大鼠海马、下丘脑、中脑DA含量与对照组大鼠相比含量升高，其中下丘脑和中脑DA含量明显高于对照组(P<0.01)，见表3。表3 老年埋线组大鼠与对照组大鼠DA含量(ng/g湿重) 组别
, 百拇医药
海马
下丘脑
中脑
老年对照组
10.04±1.79
10.91±0.95
10.92±1.13
老年埋线组
11.31±1.6
13.87±1.601)
13.44±1.461)
结果表明老年动物不仅脑内5-HT、NA、DA含量比生殖期大鼠脑内含量下降，而且CA/5-HT比值增大。穴位埋线刺激后能使脑内单胺类神经递质含量增加。
, 百拇医药
3 讨 论
神经内分泌研究资料表明，老年大鼠性腺内分泌及生殖功能衰竭主要与下丘脑释放促性腺激素释放激素(GnRH)的能力下降有关〔3〕。后者又与下丘脑儿茶酚胺(CA)类神经递质(NA、DA)含量下降，导致CA/5-HT比值下降有关〔1〕。老年期下丘脑NA转换率下降30%～50%，L-酪氨酸和L-多巴向DA、NA的转化也有相应改变，而且下丘脑的DA再摄取也受到抑制，进一步使CA活性下降〔5〕。本试验中老年大鼠海马、下丘脑、中脑5-HT、NA、DA含量与青年大鼠相比〔6〕均有不同程度的降低，其中DA、NA的含量降低尤为明显。此结果与以往我们曾见到老年大鼠下丘脑、皮层神经元数量明显减少〔7〕，脑干-下丘脑NA通路的兴奋性明显低下的结果基本一致。
有资料表明，只要提高老龄动物脑内CA/5-HT的比值，就可延长下丘脑的正常内分泌功能。如通过脑室给老龄无动情周期大鼠注射DA或喂食L-多巴、麦角以及其他增加脑内CA的药物，可使动物下丘脑GnRH释放量增加，动情期恢复。某些老年性肿瘤和垂体瘤的发病率降低。我们以往的工作见到〔7〕，肾俞穴埋线刺激可不同程度的缩短老年雌鼠性周期长度，延缓老年雄鼠性腺衰老发生，减少老年鼠皮层、下丘脑和蓝斑中脂褐质颗粒沉积，并能不同程度地激活老年鼠下丘脑内侧视前区、蓝斑和中缝核神经元兴奋性，增加蓝斑对下丘脑内侧视前区的激活效应。本试验见到肾俞、足三里等穴位埋线刺激，在提高老年大鼠有关脑区5-HT含量的同时能明显增加下丘脑、中脑DA含量。已知下丘脑DA水平能控制垂体的内分泌，特别是促性腺激素的分泌。推测肾俞、足三里等穴位长期慢性刺激能调节脑内单胺类递质水平，从而达到抗衰老作用。
, 百拇医药
韩济生等〔8〕见到穴位刺激过程中，NA的合成和利用均有加速。这可能是本试验见到穴位刺激使下丘脑NA含量有增加趋势，却无统计学差异的原因。
1 本课题受陕西省卫生厅科研基金资助
作者简介：刘 琦，女，54岁，副研究员，从事脑内神经递质的受体研究
参考文献
1 Meites J.Neuroendocrinology of Aging.New York and London.
Plenum Press，1983：
2 Meites J.Neuroendocrine Biomarkers of Aging in the Rat.Exp Gerontol,1988；23：349
, 百拇医药
3 中医研究院针灸经络研究所生化组.脑组织中5-羟色胺、5-羟吲哚醋酸、去甲肾上腺素和多巴胺的同时提取和荧光分光光度测定法.中医药研究参考，1975；7：38
4 刘吉生，赵增翰.神经内分泌系统与衰老.国外医学*老年医学分册，1984；5：5
5 刘树铮.老年神经内分泌的调节.国外医学*老年医学分册，1981；2：49
6 刘 琦，韩 苇，赵建础.加压素在针刺镇痛中的作用及其与中枢单胺类神经递质和脑啡肽含量变化的关系.针刺研究，1988；3：239
7 李春敏，朱笛霓.肾俞穴刺激对老年大鼠生殖功能的影响.中国老年学杂志，1995；15(专刊)：11
8 韩济生，关新民，徐晋刚.大鼠电针镇痛过程中中枢去甲肾上腺素更新率的研究.生理学报，1979；31：11
〔1997-07-04收稿 1998-09-07修回〕, http://www.100md.com
单位：陕西省中医药研究院，西安 710003
关键词：穴位；神经递质；衰老
中国老年学杂志/990120 摘 要 老年大鼠性腺内分泌及生殖功能衰退主要与下丘脑释放GnRH的能力下降有关。而GnRH释放减少又与下丘脑CA类神经递质(NA、DA)含量下降，CA/5-HT比值下降有关。在老年大鼠夹脊穴和足三里穴埋线四次，刺激40 d后，用荧光法测定海马、下丘脑和中脑内5-HT、NA、DA含量。发现老年大鼠5-HT、DA、NA含量都降低，以NA、DA降低尤为明显。穴位刺激后5-HT、NA、DA含量升高，其中DA、5-HT升高显著。已知肾俞穴埋线可以不同程度激活下丘脑内侧视前区、蓝斑和中缝核神经元兴奋性，增加蓝斑对下丘脑内侧视前区激活效应，减少老年大鼠皮层、下丘脑、蓝斑中脂褐质颗粒沉积，缩短老年雌鼠性周期长度，延缓老年雄鼠性腺衰老发生。所以长期慢性刺激夹脊穴和足三里穴可通过调节脑内单胺类神经递质而产生抗衰老作用。
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Effect of catgut embedding stimulation at Jiaji and
Zhusanli on monoaminergic neurotransmitter at
different brain area in old rats
Liu Qi,Ma Xiaomin Zhu Dini
Shanxi Academy of Traditional Chinese Medicine,Xi'an 710003
Objectve The relationship between stimulation points and catecholamine(CA)and serotonine(5-HT) contents in central nervous system in old rats were studied and the mechanism of antisenility by acupuncture was analyzed.Metheods The catguts were embedded for 4 times during 40 days at Jiaji and Zhusanli,and the contents of 5-HT、norepinephrine(NE)、dopamine(DA)were determined with fluorometry at hippocampus,hypothalamus and mesencephalon area of the old rats.Result The contents of 5-HT、NA and DA were increased in the points stimulation group,especiall 5-HT and DA were singificant higher in the points stimulation group than that in the control group.Conclusion The antisenility could be induced by stimulation Jiaji and Zhusanli points and the mechanism was through modulation of monoaminergic neurotransmitter levels in brain.
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Key words Point Neurotransmitter Senility
国内外大量文献表明，随着年龄老化性腺衰竭，性激素水平低落，同时中枢神经递质含量发生明显变化。其中去甲肾上腺素(NA)和多巴胺(DA)的活性和转换率降低，5-羟色胺(5-HT)水平略高或不变〔1〕，下丘脑神经内分泌功能明显衰退。有学者报道，改变中枢神经递质水平可以延缓衰老，恢复老年鼠性周期活动〔2〕。实践证明，针灸可延年益寿。推测针灸抗衰老机理与中枢单胺类神经递质水平有关。本实验在老年大鼠夹脊穴和足三里穴埋线刺激，观察其对中枢不同脑区单胺类神经递质含量的影响。
1 材料与方法
1.1 材料 18～20月龄SD老年大鼠，雌雄不限(本院动物房供应)。实验用试剂皆为市售分析纯试剂。5-HT为Sigma产品，DA、NA为中国药品生物制品检定所产品。
, 百拇医药
1.2 方法 动物随机分成穴位埋线组和对照组。埋线组动物在乙醚麻醉下，俯卧位固定，常规消毒后在双侧夹脊穴和足三里穴，经直径为0.9mm的注射针头埋入1～1.5 cm长的肠线，每10天一次，共4次。40 d后进行脑内5-HT、NA、DA含量测定。对照组动物除不埋入肠线外，处理同实验组。
实验日，动物断头处死，迅速取脑置0 ℃生理盐水中清洗，除去脑膜、血液后置冰上，解剖出下丘脑、中脑、海马用于测定。用酸性正丁醇抽提脑组织内单胺类神经递质5-HT、NA、DA，用荧光分光光度计测定各物质含量〔3〕，测定所得全部数据计算为ng/g湿脑重后经t检验处理。
2 结 果
2.1 老年埋线组大鼠海马、下丘脑、中脑5-HT含量与对照组大鼠相比含量明显升高(P<0.01)，见表1。
表1 老年埋线组大鼠与对照组大鼠5-HT含量(ng/g湿重，
±s) 组别, 百拇医药
n
海马
下丘脑
中脑
老年对照组
9
73.44±15.25
181.08±12.41
159.57±11.6
老年埋线组
10
113.94±14.341)
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289.84±39.251)
241.02±23.541)
1)P<0.01，下表同
2.2 老年埋线组大鼠海马、下丘脑和中脑NA含量与对照组大鼠相比有升高趋势但无明显差异，见表2。
表2 老年埋线组大鼠与对照组大鼠NA含量(ng/g湿重) 组别
n
海马
下丘脑
中脑
老年对照组
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9
16.59±2.07
27.70±2.25
25.23±3.89
老年埋线组
10
16.31±1.97
29.24±4.49
23.59±7.19
2.3 老年埋线组大鼠海马、下丘脑、中脑DA含量与对照组大鼠相比含量升高，其中下丘脑和中脑DA含量明显高于对照组(P<0.01)，见表3。表3 老年埋线组大鼠与对照组大鼠DA含量(ng/g湿重) 组别
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海马
下丘脑
中脑
老年对照组
10.04±1.79
10.91±0.95
10.92±1.13
老年埋线组
11.31±1.6
13.87±1.601)
13.44±1.461)
结果表明老年动物不仅脑内5-HT、NA、DA含量比生殖期大鼠脑内含量下降，而且CA/5-HT比值增大。穴位埋线刺激后能使脑内单胺类神经递质含量增加。
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3 讨 论
神经内分泌研究资料表明，老年大鼠性腺内分泌及生殖功能衰竭主要与下丘脑释放促性腺激素释放激素(GnRH)的能力下降有关〔3〕。后者又与下丘脑儿茶酚胺(CA)类神经递质(NA、DA)含量下降，导致CA/5-HT比值下降有关〔1〕。老年期下丘脑NA转换率下降30%～50%，L-酪氨酸和L-多巴向DA、NA的转化也有相应改变，而且下丘脑的DA再摄取也受到抑制，进一步使CA活性下降〔5〕。本试验中老年大鼠海马、下丘脑、中脑5-HT、NA、DA含量与青年大鼠相比〔6〕均有不同程度的降低，其中DA、NA的含量降低尤为明显。此结果与以往我们曾见到老年大鼠下丘脑、皮层神经元数量明显减少〔7〕，脑干-下丘脑NA通路的兴奋性明显低下的结果基本一致。
有资料表明，只要提高老龄动物脑内CA/5-HT的比值，就可延长下丘脑的正常内分泌功能。如通过脑室给老龄无动情周期大鼠注射DA或喂食L-多巴、麦角以及其他增加脑内CA的药物，可使动物下丘脑GnRH释放量增加，动情期恢复。某些老年性肿瘤和垂体瘤的发病率降低。我们以往的工作见到〔7〕，肾俞穴埋线刺激可不同程度的缩短老年雌鼠性周期长度，延缓老年雄鼠性腺衰老发生，减少老年鼠皮层、下丘脑和蓝斑中脂褐质颗粒沉积，并能不同程度地激活老年鼠下丘脑内侧视前区、蓝斑和中缝核神经元兴奋性，增加蓝斑对下丘脑内侧视前区的激活效应。本试验见到肾俞、足三里等穴位埋线刺激，在提高老年大鼠有关脑区5-HT含量的同时能明显增加下丘脑、中脑DA含量。已知下丘脑DA水平能控制垂体的内分泌，特别是促性腺激素的分泌。推测肾俞、足三里等穴位长期慢性刺激能调节脑内单胺类递质水平，从而达到抗衰老作用。
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韩济生等〔8〕见到穴位刺激过程中，NA的合成和利用均有加速。这可能是本试验见到穴位刺激使下丘脑NA含量有增加趋势，却无统计学差异的原因。
1 本课题受陕西省卫生厅科研基金资助
作者简介：刘 琦，女，54岁，副研究员，从事脑内神经递质的受体研究
参考文献
1 Meites J.Neuroendocrinology of Aging.New York and London.
Plenum Press，1983：
2 Meites J.Neuroendocrine Biomarkers of Aging in the Rat.Exp Gerontol,1988；23：349
, 百拇医药
3 中医研究院针灸经络研究所生化组.脑组织中5-羟色胺、5-羟吲哚醋酸、去甲肾上腺素和多巴胺的同时提取和荧光分光光度测定法.中医药研究参考，1975；7：38
4 刘吉生，赵增翰.神经内分泌系统与衰老.国外医学*老年医学分册，1984；5：5
5 刘树铮.老年神经内分泌的调节.国外医学*老年医学分册，1981；2：49
6 刘 琦，韩 苇，赵建础.加压素在针刺镇痛中的作用及其与中枢单胺类神经递质和脑啡肽含量变化的关系.针刺研究，1988；3：239
7 李春敏，朱笛霓.肾俞穴刺激对老年大鼠生殖功能的影响.中国老年学杂志，1995；15(专刊)：11
8 韩济生，关新民，徐晋刚.大鼠电针镇痛过程中中枢去甲肾上腺素更新率的研究.生理学报，1979；31：11
〔1997-07-04收稿 1998-09-07修回〕, http://www.100md.com