脑梗死患者血浆内皮素-1和降钙素基因相关肽含量改变及其意义
作者：高晨 李美琳
单位：北京医科大学第三医院神经科，北京 100083
关键词：
990322 内皮素-1(endothelin-1,ET-1)是目前已知最强的内源性血管收缩物质[1]，降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)是具有强大扩张血管作用的肽类物质[2]，二者均在脑循环的调节中起重要作用。为进一步了解ET-1和CGRP在脑梗死发病中的作用，本研究对脑梗死患者血浆ET-1和CGRP含量进行检测，以观察二者对脑梗死的发生、发展和预后的影响。
1 对象与方法
1.1 研究对象
, http://www.100md.com
脑梗死组32例，其中男性23例，女性9例，平均年龄62岁(39～77岁)，合并高血压病10例、冠心病3例。诊断由临床表现及头颅CT确定，其中颈内动脉系统梗死30例，椎-基底动脉系统梗死2例。临床表现采用加拿大神经评分(Canadian Neurological Scale)[3]进行评定，满分10分，为神经系统无缺损，最低分为0分。根据神经功能改善情况，分为好转组(即发病4周内，神经功能评分提高大于2.5分，n=5)和无好转组(即发病4周内评分提高少于0.5分或评分下降，n=10)。发病早期及病后2周分别做头颅CT，以确定梗死面积。32例患者中，大面积梗死(梗死面积大于20 cm2)12例，其中死亡4例，存活8例；中小面积梗死(小于20cm2)20例，无1例死亡。所有患者均未出现严重心、肺、肝、肾等合并症。
对照组：由16名健康成人组成，其中男性8例，女性8例。平均年龄51岁(25～67岁)。
, 百拇医药
1.2 标本采集、处理
脑梗死患者于病后3d内、1周末、2周末、3周末晨起空腹采肘静脉血5ml，注入预冷的玻璃试管，加入抑肽酶60μl，100g.L-1EDTA二钠80μl混匀,4℃、3000r.min-1离心15min，吸取血浆，-40℃冰冻保存待测。
1.3 血浆ET-1、CGRP的测定
采用放射免疫分析法(radioimmunoassay, RIA)。ET-1和CGRP放免药盒由北京东亚免疫技术研究所提供，采用非平衡法，按药盒说明操作。ET-1药盒灵敏度为5ng.L-1,批内变异<10%，批间变异<15%；CGRP药盒灵敏度为15ng.L-1，批内变异<7%，批间变异<12%。
, 百拇医药
1.4 数据计算和统计分析
血浆ET-1 浓度以ng.L-1表示，一组数据以
±s表示。显著性检验采用两样本均数比较的t检验(方差不齐时用t'检验)，以P<0.05 作为差别有统计学意义。
2 结果
脑梗死病人血浆ET-1含量升高，在病后3 d内[(64±28) ng.L-1, n=32]、1周末[(64±28)ng.L-1,n=25]及3周末时[(69±30)ng.L-1,n=13]均高于对照组[(47±11)ng.L-1,n=16],P<0.05。2周末时有增高趋势[(65±28)ng.L-1, n=18]，但差别无显著性(P>0.05)。血浆CGRP的总体水平在发病各时期与对照组比较无变化。在大面积梗死患者中，存活组血浆CGRP[(119±32)ng.L-1,n=8]高于对照组[(86±23)ng.L-1, n=16]，P<0.01；死亡组血浆CGRP[(53±21)ng.L-1,n=4]低于对照组，P<0.05；存活组血浆CGRP水平显著高于死亡组，P<0.01。临床症状好转组血浆CGRP水平在病后1周内增高,为(137±36)ng.L-1(n=5),与对照组比较P<0.05，ET-1水平无显著变化；无好转组血浆ET-1升高，为(75±24)ng.L-1(n=10),与对照组比较P<0.05，而CGRP水平无变化。
, 百拇医药
3 讨论
本文结果显示，脑梗死病人发病早期血浆ET-1水平即升高，到第3周末仍保持在较高水平。血浆CGRP水平从总体上看无改变，但与病情转归有关，表现在大面积梗死存活组及临床症状好转组中，CGRP水平显著升高，而ET-1水平无明显变化。相反，大面积梗死死亡组及临床症状无好转组中，CGRP水平明显降低或无改变，而ET-1水平升高。由此可见，在脑梗死的发病中，血浆ET-1 升高、CGRP降低与病情变化、预后不良有相关性，而CGRP 增高则与症状好转及预后良好相关联。
CGRP在脑内储存于三叉神经感觉纤维末梢，分布于脑动脉周围，是调节脑循环的重要物质[2]。已知在缺血的脑组织中，脑血管会因为局部缺氧、高碳酸、低血流等原因而扩张，还可能由于释放内源性的扩张血管物质，如CGRP 。Jeremy等[4]报告向大脑中动脉阻塞的大鼠静脉输注CGRP可显著增加缺血侧的脑血流量，减小梗死面积。因此，我们推测，大面积梗死患者血浆CGRP 升高是由于CGRP在脑血管周围过度释放所致，这是一种自我保护的代偿功能，其发挥的好坏将影响病人的预后。
, http://www.100md.com
ET-1是1988年发现的由21个氨基酸组成的肽类物质，它由血管内皮细胞产生[1]。血浆ET-1的增加可能与脑梗死的发病密切相关[5，6]。ET-1 能强烈而持久地收缩脑动脉，在实验动物的脑部引起缺血病灶[7，8]。ET-1不仅通过收缩血管加重缺血，它还可能直接作用于神经细胞，增加细胞内Ca2+浓度，发挥其神经毒性作用[9]。
在脑梗死的发病中，血管活性物质ET-1 和CGRP 共同参与这一病理生理过程。Giuffrida 等[10]报告，在实验动物脑缺血早期，脑组织中ET-1、CGRP、ANP(心钠素)和NPY(神经肽Y)的免疫染色均增多，而到脑缺血晚期，只有ET-1 的免疫染色增多，并伴有脑组织大面积变性，这说明在脑缺血中，扩张血管物质与收缩血管物质在一定范围内保持平衡，一旦平衡打破，收缩血管的作用占优势，神经组织就会变性，发生不可逆的变化。本研究从临床角度证明，ET-1 和CGRP会共同影响脑梗死的发病、进展及预后。这一发现提示，临床检测血浆ET-1 和CGRP水平有助于我们判断病情，估计预后，从而采取相应的治疗措施。临床应用ET-1 拮抗药物和外源性补充CGRP对脑梗死病人可能有潜在治疗意义。
, http://www.100md.com
参考文献
1 Yanagisawa M, Kurihara H, Kimura S， et al. A novel potent vasoconstrictor peptide produced by vascular endothelial cells. Nature, 1988，332:411-415
2 Mcculloch J. Calcitonin gene-related peptide: functional role in cerebrovascular regulation. Proc Natl Acad Sci USA, 1986, 83:5731-5735
3 Cote R, Hachinski VC, Shurvell BL, et al. The Canadian Neurological Scale: A preliminary study in acute stroke. Stroke, 1986,17:731-737
, 百拇医药
4 Jeremy PH, Simon GC, William AS, et al. Calcitonin gene-related peptide reduces brain injury in a rat model of focal cerebral ischemia. Stroke, 1994,25:2055-2059
5 Ziv I, Fleminger G, Djaldetti R, et al. Increased plasma endothelin-1 in acute ischemic stroke. Stroke, 1992, 23:1014-1016
6 魏岗之，张 津，盛树力，等.脑梗死患者血浆内皮素水平的增加及其临床意义.中华内科杂志，1994,33：388-390
7 Fuxe K, Kurosawa N, Cintra A, et al. Involvement of local ischemia in endothelin-1 induced lesions of the neostriatum of the anaesthetized rat. Exp Brain Res, 1992,88:131-139
, http://www.100md.com
8 Macrae IM, Robinson MJ, Graham DI, et al. Endothelin-1-induce reductions in cerebral bloodflow: dose dependency, time course, and neuropathological consequences. J Cereb Blood Flow Metab, 1993,13:276-284
9 Greenberg DA, Chan J, Sampson HA. Endothelins and the nervous system. Neurology, 1992，42:25-31
10 Giuffrida R, Bellomo M, Polizzi G, et al. Ischemia-induced changes in the immunoreactivity for endothelin and other vasoactive peptides in the brain of the Mongolian gerbil. J Cardiovas Pharmacol, 1992, 20(Suppl 12)S41-S44
(1998-08-26收稿), http://www.100md.com
单位：北京医科大学第三医院神经科，北京 100083
关键词：
990322 内皮素-1(endothelin-1,ET-1)是目前已知最强的内源性血管收缩物质[1]，降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)是具有强大扩张血管作用的肽类物质[2]，二者均在脑循环的调节中起重要作用。为进一步了解ET-1和CGRP在脑梗死发病中的作用，本研究对脑梗死患者血浆ET-1和CGRP含量进行检测，以观察二者对脑梗死的发生、发展和预后的影响。
1 对象与方法
1.1 研究对象
, http://www.100md.com
脑梗死组32例，其中男性23例，女性9例，平均年龄62岁(39～77岁)，合并高血压病10例、冠心病3例。诊断由临床表现及头颅CT确定，其中颈内动脉系统梗死30例，椎-基底动脉系统梗死2例。临床表现采用加拿大神经评分(Canadian Neurological Scale)[3]进行评定，满分10分，为神经系统无缺损，最低分为0分。根据神经功能改善情况，分为好转组(即发病4周内，神经功能评分提高大于2.5分，n=5)和无好转组(即发病4周内评分提高少于0.5分或评分下降，n=10)。发病早期及病后2周分别做头颅CT，以确定梗死面积。32例患者中，大面积梗死(梗死面积大于20 cm2)12例，其中死亡4例，存活8例；中小面积梗死(小于20cm2)20例，无1例死亡。所有患者均未出现严重心、肺、肝、肾等合并症。
对照组：由16名健康成人组成，其中男性8例，女性8例。平均年龄51岁(25～67岁)。
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1.2 标本采集、处理
脑梗死患者于病后3d内、1周末、2周末、3周末晨起空腹采肘静脉血5ml，注入预冷的玻璃试管，加入抑肽酶60μl，100g.L-1EDTA二钠80μl混匀,4℃、3000r.min-1离心15min，吸取血浆，-40℃冰冻保存待测。
1.3 血浆ET-1、CGRP的测定
采用放射免疫分析法(radioimmunoassay, RIA)。ET-1和CGRP放免药盒由北京东亚免疫技术研究所提供，采用非平衡法，按药盒说明操作。ET-1药盒灵敏度为5ng.L-1,批内变异<10%，批间变异<15%；CGRP药盒灵敏度为15ng.L-1，批内变异<7%，批间变异<12%。
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1.4 数据计算和统计分析
血浆ET-1 浓度以ng.L-1表示，一组数据以
±s表示。显著性检验采用两样本均数比较的t检验(方差不齐时用t'检验)，以P<0.05 作为差别有统计学意义。2 结果
脑梗死病人血浆ET-1含量升高，在病后3 d内[(64±28) ng.L-1, n=32]、1周末[(64±28)ng.L-1,n=25]及3周末时[(69±30)ng.L-1,n=13]均高于对照组[(47±11)ng.L-1,n=16],P<0.05。2周末时有增高趋势[(65±28)ng.L-1, n=18]，但差别无显著性(P>0.05)。血浆CGRP的总体水平在发病各时期与对照组比较无变化。在大面积梗死患者中，存活组血浆CGRP[(119±32)ng.L-1,n=8]高于对照组[(86±23)ng.L-1, n=16]，P<0.01；死亡组血浆CGRP[(53±21)ng.L-1,n=4]低于对照组，P<0.05；存活组血浆CGRP水平显著高于死亡组，P<0.01。临床症状好转组血浆CGRP水平在病后1周内增高,为(137±36)ng.L-1(n=5),与对照组比较P<0.05，ET-1水平无显著变化；无好转组血浆ET-1升高，为(75±24)ng.L-1(n=10),与对照组比较P<0.05，而CGRP水平无变化。
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3 讨论
本文结果显示，脑梗死病人发病早期血浆ET-1水平即升高，到第3周末仍保持在较高水平。血浆CGRP水平从总体上看无改变，但与病情转归有关，表现在大面积梗死存活组及临床症状好转组中，CGRP水平显著升高，而ET-1水平无明显变化。相反，大面积梗死死亡组及临床症状无好转组中，CGRP水平明显降低或无改变，而ET-1水平升高。由此可见，在脑梗死的发病中，血浆ET-1 升高、CGRP降低与病情变化、预后不良有相关性，而CGRP 增高则与症状好转及预后良好相关联。
CGRP在脑内储存于三叉神经感觉纤维末梢，分布于脑动脉周围，是调节脑循环的重要物质[2]。已知在缺血的脑组织中，脑血管会因为局部缺氧、高碳酸、低血流等原因而扩张，还可能由于释放内源性的扩张血管物质，如CGRP 。Jeremy等[4]报告向大脑中动脉阻塞的大鼠静脉输注CGRP可显著增加缺血侧的脑血流量，减小梗死面积。因此，我们推测，大面积梗死患者血浆CGRP 升高是由于CGRP在脑血管周围过度释放所致，这是一种自我保护的代偿功能，其发挥的好坏将影响病人的预后。
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ET-1是1988年发现的由21个氨基酸组成的肽类物质，它由血管内皮细胞产生[1]。血浆ET-1的增加可能与脑梗死的发病密切相关[5，6]。ET-1 能强烈而持久地收缩脑动脉，在实验动物的脑部引起缺血病灶[7，8]。ET-1不仅通过收缩血管加重缺血，它还可能直接作用于神经细胞，增加细胞内Ca2+浓度，发挥其神经毒性作用[9]。
在脑梗死的发病中，血管活性物质ET-1 和CGRP 共同参与这一病理生理过程。Giuffrida 等[10]报告，在实验动物脑缺血早期，脑组织中ET-1、CGRP、ANP(心钠素)和NPY(神经肽Y)的免疫染色均增多，而到脑缺血晚期，只有ET-1 的免疫染色增多，并伴有脑组织大面积变性，这说明在脑缺血中，扩张血管物质与收缩血管物质在一定范围内保持平衡，一旦平衡打破，收缩血管的作用占优势，神经组织就会变性，发生不可逆的变化。本研究从临床角度证明，ET-1 和CGRP会共同影响脑梗死的发病、进展及预后。这一发现提示，临床检测血浆ET-1 和CGRP水平有助于我们判断病情，估计预后，从而采取相应的治疗措施。临床应用ET-1 拮抗药物和外源性补充CGRP对脑梗死病人可能有潜在治疗意义。
, http://www.100md.com
参考文献
1 Yanagisawa M, Kurihara H, Kimura S， et al. A novel potent vasoconstrictor peptide produced by vascular endothelial cells. Nature, 1988，332:411-415
2 Mcculloch J. Calcitonin gene-related peptide: functional role in cerebrovascular regulation. Proc Natl Acad Sci USA, 1986, 83:5731-5735
3 Cote R, Hachinski VC, Shurvell BL, et al. The Canadian Neurological Scale: A preliminary study in acute stroke. Stroke, 1986,17:731-737
, 百拇医药
4 Jeremy PH, Simon GC, William AS, et al. Calcitonin gene-related peptide reduces brain injury in a rat model of focal cerebral ischemia. Stroke, 1994,25:2055-2059
5 Ziv I, Fleminger G, Djaldetti R, et al. Increased plasma endothelin-1 in acute ischemic stroke. Stroke, 1992, 23:1014-1016
6 魏岗之，张 津，盛树力，等.脑梗死患者血浆内皮素水平的增加及其临床意义.中华内科杂志，1994,33：388-390
7 Fuxe K, Kurosawa N, Cintra A, et al. Involvement of local ischemia in endothelin-1 induced lesions of the neostriatum of the anaesthetized rat. Exp Brain Res, 1992,88:131-139
, http://www.100md.com
8 Macrae IM, Robinson MJ, Graham DI, et al. Endothelin-1-induce reductions in cerebral bloodflow: dose dependency, time course, and neuropathological consequences. J Cereb Blood Flow Metab, 1993,13:276-284
9 Greenberg DA, Chan J, Sampson HA. Endothelins and the nervous system. Neurology, 1992，42:25-31
10 Giuffrida R, Bellomo M, Polizzi G, et al. Ischemia-induced changes in the immunoreactivity for endothelin and other vasoactive peptides in the brain of the Mongolian gerbil. J Cardiovas Pharmacol, 1992, 20(Suppl 12)S41-S44
(1998-08-26收稿), http://www.100md.com