血清抗精子抗体对体外受精-胚胎移植结局的影响
作者：田秀珠 张丽珠 杨池荪 吴燕 刘平 姜彦彬 王振红
单位：100083 北京医科大学第三临床医院妇产科[田秀珠(现在山西医科大学附属第一医院妇产科)，张丽珠，杨池荪，吴燕，刘平，姜彦彬，王振红]
关键词：
中华妇产科杂志980617
妇女血清内抗精子抗体的存在，是造成免疫性不孕的原因之一。人们对该抗体与不孕之间的关系做了大量研究发现，存在于患者宫颈粘液与输卵管内的抗精子抗体可以通过干扰精子运行、精子顶体反应以及精卵融合而造成不孕[1]，体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术采用体外培养体系，使卵细胞在体外受精、卵裂，从而避免了上述不利因素的影响。但也有学者报道，女性血清抗精子抗体可以干扰IVF-ET中卵细胞的体外受精、卵裂以及胚胎着床与发育[2]。本研究测定我院1995年11月至1996年11月IVF-ET患者血清抗精子抗体，并观察其受精卵的卵裂率、临床妊娠率与流产率，进一步明确女性血清抗精子抗体与IVF-ET结局的关系。
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一、资料与方法
(一)资料来源
随机选取1995年11月至1996年11月在我院因输卵管因素行IVF-ET手术治疗的150例患者的150个周期，测定该周期中女性血清抗精子抗体，根据检测结果分为两组：抗精子抗体阳性组，44个周期，占全部周期的29.3%；抗精子抗体阴性组, 106个周期，两组患者的年龄、不孕时间、注射hCG前子宫内膜厚度、移植胚胎数、胚胎累积评分相似(P>0.05)。夫妇双方身体健康，丈夫精液化验基本正常。
(二)研究方法
1.IVF-ET过程：促排卵方案采用外源性促性腺激素(卵泡刺激素/绝经期促性腺激素/绒毛膜促性腺激素)促超排卵，阴道B超下监测卵泡发育并穿刺取卵。体外培养体系采用生殖细胞培养液(GPM)加10%供者血清，精液洗涤上游，于卵子取出后6～8小时加入卵培养皿中使之体外受精，16～18小时后观察有无受精，24小时观察卵细胞卵裂情况，48小时将分裂为2～8个细胞的胚胎移植入宫腔。移植术后12～16天留晨尿查β-hCG，如果β-hCG>25 IU，初步诊断为妊娠，于停经7～8周行腹部B超检查，宫腔内有胎囊者诊断为临床妊娠。
, 百拇医药
2.抗精子抗体的测定：于IVF-ET治疗的前个月经周期的黄体期抽取静脉血3 ml，分离血清-20℃备存待检，采用酶联免疫吸附试验间接法进行测定，所有标本均测双复孔。
3.统计学分析：所有数据均以±s表示，各组之间的显著性比较采用χ2与t检验。
二、结果
血清抗精子抗体阳性组中，卵细胞在体外培养中的卵裂率为64.2%，明显低于抗精子抗体阴性组的84.8%(P<0.001)。两组获卵数相似(P>0.05)。6例卵细胞体外培养失败，其中的4例为抗精子抗体阳性，此6例患者获卵数为5～10个。临床妊娠率抗精子抗体阳性组为31.8%，高于抗精子抗体阴性组的21.7%，但两组间差异无显著性(P>0.25)。两组的流产率基本相近(P>0.50)。见附表。
三、讨论
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同种抗精子抗体可以干扰精子运行、精卵相互作用而引起不孕。过去对此类患者多采用避孕套、免疫抑制剂以及宫腔内人工授精等方法治疗，但疗效不佳，近年来采用IVF-ET技术治疗此类不孕患者。
目前，对女性血清抗精子抗体与IVF-ET结局的关系观点不一，多数学者认为在IVF-ET治疗中，采用供者血清或脐带血清体外培养体系，则可使此抗体阳性患者IVF-ET结局不受影响[3]。本研究表明，尽管采取供者血清体外培养体系，抗精子抗体阳性组其受精卵在体外的卵裂率明显低于抗体阴性组，说明体外培养体系中可能存在抗精子抗体，干扰了受精卵的早期发育，其机理可能是抗精子抗体同时存在于卵泡液、卵丘和放射冠的颗粒细胞上，使受精卵在体外的早期发育受到不利影响[4]。
胚胎移植后，血清抗精子抗体对胚胎的着床率、临床妊娠率有无影响，报道不一致。动物实验发现，在早期胚胎表面存在精子抗原，引起母体免疫反应，而干扰胚胎早期发育。在人类也有血清抗精子抗体与习惯性流产相关的报道。本研究发现，抗精子抗体阳性组的临床妊娠率不低于抗体阴性组，两组的流产率相近，说明，抗精子抗体对IVF-ET中胚胎着床、以及胚胎着床后在宫腔的早期发育无不良影响，此结果与Daiton等[5]的报道相似。有关抗精子抗体对IVF-ET结局的影响机理，仍需进一步研究。
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女性血清抗精子抗体对IVF-ET胚胎着床率与临床妊娠率均无影响，采取IVF-ET技术是治疗抗精子抗体引起的免疫不孕的有效手段，对此类患者行IVF-ET治疗时应采取供者血清体外培养体系，提高卵细胞体外受精及发育的质量，从而提高其临床妊娠率。 附表 两组血清抗精子抗体与IVF-ET结局的关系(x±s) 组别
总周期
(个)
获卵数
(个)
卵裂率
(%)
临床妊娠率
(%)
, http://www.100md.com 流产率
(%)
抗精子抗体阳性组
44
11.3±6.5
64.2±32.1
31.8
7.1
抗精子抗体阴性组
106
10.2±7.5
84.8±18.7
21.7
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8.7
参考文献
1 Bronson R, Cooper G, Rosenfeld D. Sperm antibodies: their role in infertility. Fertil Steril, 1984, 42:171-183.
2 Clark GN, Lopata A, Johnston WIH, et al. Effect of sperm antibodies in females on human in vitro fertilization. Fertil Steril, 1986, 6:435-441.
3 Kamada M, Daitoh T, Hasebe H, et al. Blocking of human fertilization in vitro by sera with sperm antibody. Am J Obstet Gynecol, 1985, 153:328-331.
, http://www.100md.com
4 Clark GN, Mcbain JC, Lapata A, In vitro fertilization results for women with sperm antibo-dies in plasma and follicular fluid. Am J Reprod Immunol, 1985, 8:130-137.
5 Dation T, Kamada M, Yamano S, et al. High implantation rate and consequently high pregnancy rate by in vitro fertilzation-embryo transfer treatment in infertile women with antisperm antibody. Fertil Steril, 1995, 63:87-91.
(收稿：1997-10-30 修回：1998-03-10), 百拇医药
单位：100083 北京医科大学第三临床医院妇产科[田秀珠(现在山西医科大学附属第一医院妇产科)，张丽珠，杨池荪，吴燕，刘平，姜彦彬，王振红]
关键词：
中华妇产科杂志980617
妇女血清内抗精子抗体的存在，是造成免疫性不孕的原因之一。人们对该抗体与不孕之间的关系做了大量研究发现，存在于患者宫颈粘液与输卵管内的抗精子抗体可以通过干扰精子运行、精子顶体反应以及精卵融合而造成不孕[1]，体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术采用体外培养体系，使卵细胞在体外受精、卵裂，从而避免了上述不利因素的影响。但也有学者报道，女性血清抗精子抗体可以干扰IVF-ET中卵细胞的体外受精、卵裂以及胚胎着床与发育[2]。本研究测定我院1995年11月至1996年11月IVF-ET患者血清抗精子抗体，并观察其受精卵的卵裂率、临床妊娠率与流产率，进一步明确女性血清抗精子抗体与IVF-ET结局的关系。
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一、资料与方法
(一)资料来源
随机选取1995年11月至1996年11月在我院因输卵管因素行IVF-ET手术治疗的150例患者的150个周期，测定该周期中女性血清抗精子抗体，根据检测结果分为两组：抗精子抗体阳性组，44个周期，占全部周期的29.3%；抗精子抗体阴性组, 106个周期，两组患者的年龄、不孕时间、注射hCG前子宫内膜厚度、移植胚胎数、胚胎累积评分相似(P>0.05)。夫妇双方身体健康，丈夫精液化验基本正常。
(二)研究方法
1.IVF-ET过程：促排卵方案采用外源性促性腺激素(卵泡刺激素/绝经期促性腺激素/绒毛膜促性腺激素)促超排卵，阴道B超下监测卵泡发育并穿刺取卵。体外培养体系采用生殖细胞培养液(GPM)加10%供者血清，精液洗涤上游，于卵子取出后6～8小时加入卵培养皿中使之体外受精，16～18小时后观察有无受精，24小时观察卵细胞卵裂情况，48小时将分裂为2～8个细胞的胚胎移植入宫腔。移植术后12～16天留晨尿查β-hCG，如果β-hCG>25 IU，初步诊断为妊娠，于停经7～8周行腹部B超检查，宫腔内有胎囊者诊断为临床妊娠。
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2.抗精子抗体的测定：于IVF-ET治疗的前个月经周期的黄体期抽取静脉血3 ml，分离血清-20℃备存待检，采用酶联免疫吸附试验间接法进行测定，所有标本均测双复孔。
3.统计学分析：所有数据均以±s表示，各组之间的显著性比较采用χ2与t检验。
二、结果
血清抗精子抗体阳性组中，卵细胞在体外培养中的卵裂率为64.2%，明显低于抗精子抗体阴性组的84.8%(P<0.001)。两组获卵数相似(P>0.05)。6例卵细胞体外培养失败，其中的4例为抗精子抗体阳性，此6例患者获卵数为5～10个。临床妊娠率抗精子抗体阳性组为31.8%，高于抗精子抗体阴性组的21.7%，但两组间差异无显著性(P>0.25)。两组的流产率基本相近(P>0.50)。见附表。
三、讨论
, http://www.100md.com
同种抗精子抗体可以干扰精子运行、精卵相互作用而引起不孕。过去对此类患者多采用避孕套、免疫抑制剂以及宫腔内人工授精等方法治疗，但疗效不佳，近年来采用IVF-ET技术治疗此类不孕患者。
目前，对女性血清抗精子抗体与IVF-ET结局的关系观点不一，多数学者认为在IVF-ET治疗中，采用供者血清或脐带血清体外培养体系，则可使此抗体阳性患者IVF-ET结局不受影响[3]。本研究表明，尽管采取供者血清体外培养体系，抗精子抗体阳性组其受精卵在体外的卵裂率明显低于抗体阴性组，说明体外培养体系中可能存在抗精子抗体，干扰了受精卵的早期发育，其机理可能是抗精子抗体同时存在于卵泡液、卵丘和放射冠的颗粒细胞上，使受精卵在体外的早期发育受到不利影响[4]。
胚胎移植后，血清抗精子抗体对胚胎的着床率、临床妊娠率有无影响，报道不一致。动物实验发现，在早期胚胎表面存在精子抗原，引起母体免疫反应，而干扰胚胎早期发育。在人类也有血清抗精子抗体与习惯性流产相关的报道。本研究发现，抗精子抗体阳性组的临床妊娠率不低于抗体阴性组，两组的流产率相近，说明，抗精子抗体对IVF-ET中胚胎着床、以及胚胎着床后在宫腔的早期发育无不良影响，此结果与Daiton等[5]的报道相似。有关抗精子抗体对IVF-ET结局的影响机理，仍需进一步研究。
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女性血清抗精子抗体对IVF-ET胚胎着床率与临床妊娠率均无影响，采取IVF-ET技术是治疗抗精子抗体引起的免疫不孕的有效手段，对此类患者行IVF-ET治疗时应采取供者血清体外培养体系，提高卵细胞体外受精及发育的质量，从而提高其临床妊娠率。 附表 两组血清抗精子抗体与IVF-ET结局的关系(x±s) 组别
总周期
(个)
获卵数
(个)
卵裂率
(%)
临床妊娠率
(%)
, http://www.100md.com 流产率
(%)
抗精子抗体阳性组
44
11.3±6.5
64.2±32.1
31.8
7.1
抗精子抗体阴性组
106
10.2±7.5
84.8±18.7
21.7
, http://www.100md.com
8.7
参考文献
1 Bronson R, Cooper G, Rosenfeld D. Sperm antibodies: their role in infertility. Fertil Steril, 1984, 42:171-183.
2 Clark GN, Lopata A, Johnston WIH, et al. Effect of sperm antibodies in females on human in vitro fertilization. Fertil Steril, 1986, 6:435-441.
3 Kamada M, Daitoh T, Hasebe H, et al. Blocking of human fertilization in vitro by sera with sperm antibody. Am J Obstet Gynecol, 1985, 153:328-331.
, http://www.100md.com
4 Clark GN, Mcbain JC, Lapata A, In vitro fertilization results for women with sperm antibo-dies in plasma and follicular fluid. Am J Reprod Immunol, 1985, 8:130-137.
5 Dation T, Kamada M, Yamano S, et al. High implantation rate and consequently high pregnancy rate by in vitro fertilzation-embryo transfer treatment in infertile women with antisperm antibody. Fertil Steril, 1995, 63:87-91.
(收稿：1997-10-30 修回：1998-03-10), 百拇医药