自然流产和产科特异感染的关系
作者：杨宾烈 李英勇
单位：524001 湛江，广东医学院附属医院妇产科
关键词：
中华妇产科杂志990116 近年来，产科特异感染对妊娠结局的不良影响日益受到国内外学者的关注。文献报道，弓型体(TOX)、风疹病毒(RUV)、单纯疱疹病毒(HSV)、人巨细胞病毒(HCMV)、人乳头瘤病毒(HPV)等感染均可引起死胎、畸胎、流产及胎儿其他异常[1，2]。但关于自然流产胚胎与这些病原体感染的关系未见报道。为探讨自然流产与产科特异感染的关系，本研究应用聚合酶链反应(PCR)技术检测50例自然流产和50例正常妊娠人工流产、引产的绒毛组织中TOX、HCMV、HSV、HPV、淋病双球菌(NG)、解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染情况，现报道如下。
一、资料与方法
, 百拇医药
1.研究对象与分组：自然流产组：1995年9月至1996年11月在我院住院或门诊就诊治疗妊娠7～20周原因不明自然流产者，50例；人工流产组：为50例同期正常妊娠在我院行人工流产或引产者，其中孕7～13周34例，孕13～20周16例(均为先天性心脏病避孕失败者)。
2.方法：(1)绒毛DNA提取：取绒毛0.5 g生理盐水清洗后，加磷酸缓冲液1 ml，匀浆后常规行蛋白酶K消化，苯酚-氯仿-异戊醇抽提，乙醇沉淀，干燥后加50 μl去离子水，68℃溶解DNA，室温冷却后取2μl作为PCR模板；(2)PCR引物及混合物：TOX、HCMV、HSV、HPV、NG、UU及CT引物及PCR反应混合物均为华美生物工程公司提供的试剂盒，其0.5 ml反应管中反应体系为50 μl，内含引物各0.5 μmol/L，taq酶2.5 U，扩增片段长度为：TOX 200 bp、HCMV 430 bp、HSV 300 bp、HPV 300 bp、NG 400 bp、UU 400 bp、CT 470 bp；(3)PCR循环及产物检测：DNA扩增仪为美国产AMPLITRON II，DNA扩增过程按说明书操作，反应程序为94℃预变性5分钟后进入循环，94℃45秒、55℃45秒、72℃45秒，35个循环后72℃延伸5分钟。取12 μl产物在浓度为15%的琼脂糖中电泳，溴乙啶染色，紫外灯上观察。标准DNA分子量为加入DNA/EcoR I+Hind Ⅲ。在相应的点样孔前出现目的DNA条带为阳性，未见目的条带为阴性。均设阴阳性对照。
, 百拇医药
3.统计学方法：采用χ2检验。
二、结果
TOX、HCMV、HSV、HPV、NG和CT检出率，自然流产组TOX、HCMV、HSV、UU及CT 5种病原体的检出率均显著高于人工流产组(P<0.05)，HPV和NG检出率相似，两组总检出率差异亦有显著性(P>0.05)。见表1。
表1 两组病原体检出情况 组别
总例数
TOX检出
HCMV检出
HSV检出
HPV检出
, 百拇医药
NG检出
UU检出
CT检出
总检出率
(%)
例
数
率
(%)
例
数
率
(%)
例
, 百拇医药
数
率
(%)
例
数
率
(%)
例
数
率
(%)
例
数
率
, 百拇医药
(%)
例
数
率
(%)
自然流产组
50
16
32
12
24
20
40
2
, 百拇医药
4
1
2
5
10
6
12
84*
人工流产组
50
2
4
3
, 百拇医药 6
2
4
1
2
1
2
1
2
2
4
18**
P值
<0.05
, 百拇医药
<0.05
<0.05
>0.05
>0.05
<0.05
<0.05
<0.05
*有20例重复感染**有3例重复感染 两组中早期妊娠(孕7～12周)和中期妊娠(孕13～20周)绒毛组织中病原体检出情况见表2。两组早期妊娠和中期妊娠病原体检出率差异均无显著性(P>0.05)。
表2 两组不同孕周病原体检出情况 组别
孕周
, http://www.100md.com
例数
阳性
例数
率(%)
自然流产组
7～12
34
29
85
13～20
16
13
87
, 百拇医药 人工流产组
7～12
34
6
18
13～20
16
3
18
三、讨论
1.产科特异感染对胚胎和胎儿的影响：产科特异感染是一组可感染宫内胎儿，并引起流产、死胎、畸胎和其他不良妊娠结局的病原体。但自然流产与产科特异感染情况及其临床意义未见报道。本研究显示，自然流产组TOX、HCMV、HSV、UU、及CT感染率均较人工流产组高(P<0.05)，两组HPV和NG感染率无显著差异(P>0.05)，进一步说明产科特异感染可损害宫内胎儿，使流产率升高。产科特异感染的病理改变因各种病原体不同而不同，概括讲主要有：(1)绒毛炎症、变性、水肿及成熟障碍，功能降低或消失、母儿间物质交换障碍，胎儿缺乏氧和营养物质；(2)绒毛产生hCG减少、内源性孕酮水平降低、子宫激惹性升高、产生强烈收缩；(3)胎儿主要脏器发育障碍产生致死性畸形[3，4]。这些均可致胎儿死亡。
, 百拇医药
2.产科特异感染和自然流产的关系：本研究应用PCR技术检测50例自然流产和50例人工流产或引产绒毛组织的产科特异感染情况，结果显示，自然流产组5种病原体检出率均较人工流产组高(P<0.05)，自然流产组总检出率亦显著高于人工流产组(P<0.05)。但两组中早期妊娠和中期妊娠的检出率差异无显著性(P>0.05)。提示，产科特异感染和自然流产密切相关，是自然流产的主要病因之一，但随孕周增加感染率无明显增加。预防和治疗这些病原体感染对优生优育、防止流产有重要意义。
参考文献
[1] 乐杰.产科特异感染及其检测.中华妇产科杂志，1995，30：451-453.
[2] 黄丹桂，张光，王德志，等.宫内感染.中国实用妇科与产科杂志，1995，13：130.
[3] 刘伯宁，陶文琪，刘德莉，等.胎儿生长迟缓胎盘病理检查与病原体检查的对比研究.中华妇产科杂志，1996，31：90-92.
[4] 刘伯宁.病毒感染的胎盘胎儿病理.中国实用妇科与产科杂志，1995，13：147.
(收稿：1997-12-25 修回：1998-09-14), 百拇医药
单位：524001 湛江，广东医学院附属医院妇产科
关键词：
中华妇产科杂志990116 近年来，产科特异感染对妊娠结局的不良影响日益受到国内外学者的关注。文献报道，弓型体(TOX)、风疹病毒(RUV)、单纯疱疹病毒(HSV)、人巨细胞病毒(HCMV)、人乳头瘤病毒(HPV)等感染均可引起死胎、畸胎、流产及胎儿其他异常[1，2]。但关于自然流产胚胎与这些病原体感染的关系未见报道。为探讨自然流产与产科特异感染的关系，本研究应用聚合酶链反应(PCR)技术检测50例自然流产和50例正常妊娠人工流产、引产的绒毛组织中TOX、HCMV、HSV、HPV、淋病双球菌(NG)、解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染情况，现报道如下。
一、资料与方法
, 百拇医药
1.研究对象与分组：自然流产组：1995年9月至1996年11月在我院住院或门诊就诊治疗妊娠7～20周原因不明自然流产者，50例；人工流产组：为50例同期正常妊娠在我院行人工流产或引产者，其中孕7～13周34例，孕13～20周16例(均为先天性心脏病避孕失败者)。
2.方法：(1)绒毛DNA提取：取绒毛0.5 g生理盐水清洗后，加磷酸缓冲液1 ml，匀浆后常规行蛋白酶K消化，苯酚-氯仿-异戊醇抽提，乙醇沉淀，干燥后加50 μl去离子水，68℃溶解DNA，室温冷却后取2μl作为PCR模板；(2)PCR引物及混合物：TOX、HCMV、HSV、HPV、NG、UU及CT引物及PCR反应混合物均为华美生物工程公司提供的试剂盒，其0.5 ml反应管中反应体系为50 μl，内含引物各0.5 μmol/L，taq酶2.5 U，扩增片段长度为：TOX 200 bp、HCMV 430 bp、HSV 300 bp、HPV 300 bp、NG 400 bp、UU 400 bp、CT 470 bp；(3)PCR循环及产物检测：DNA扩增仪为美国产AMPLITRON II，DNA扩增过程按说明书操作，反应程序为94℃预变性5分钟后进入循环，94℃45秒、55℃45秒、72℃45秒，35个循环后72℃延伸5分钟。取12 μl产物在浓度为15%的琼脂糖中电泳，溴乙啶染色，紫外灯上观察。标准DNA分子量为加入DNA/EcoR I+Hind Ⅲ。在相应的点样孔前出现目的DNA条带为阳性，未见目的条带为阴性。均设阴阳性对照。
, 百拇医药
3.统计学方法：采用χ2检验。
二、结果
TOX、HCMV、HSV、HPV、NG和CT检出率，自然流产组TOX、HCMV、HSV、UU及CT 5种病原体的检出率均显著高于人工流产组(P<0.05)，HPV和NG检出率相似，两组总检出率差异亦有显著性(P>0.05)。见表1。
表1 两组病原体检出情况 组别
总例数
TOX检出
HCMV检出
HSV检出
HPV检出
, 百拇医药
NG检出
UU检出
CT检出
总检出率
(%)
例
数
率
(%)
例
数
率
(%)
例
, 百拇医药
数
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(%)
例
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(%)
例
数
率
(%)
例
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, 百拇医药
(%)
例
数
率
(%)
自然流产组
50
16
32
12
24
20
40
2
, 百拇医药
4
1
2
5
10
6
12
84*
人工流产组
50
2
4
3
, 百拇医药 6
2
4
1
2
1
2
1
2
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4
18**
P值
<0.05
, 百拇医药
<0.05
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>0.05
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*有20例重复感染**有3例重复感染 两组中早期妊娠(孕7～12周)和中期妊娠(孕13～20周)绒毛组织中病原体检出情况见表2。两组早期妊娠和中期妊娠病原体检出率差异均无显著性(P>0.05)。
表2 两组不同孕周病原体检出情况 组别
孕周
, http://www.100md.com
例数
阳性
例数
率(%)
自然流产组
7～12
34
29
85
13～20
16
13
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, 百拇医药 人工流产组
7～12
34
6
18
13～20
16
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三、讨论
1.产科特异感染对胚胎和胎儿的影响：产科特异感染是一组可感染宫内胎儿，并引起流产、死胎、畸胎和其他不良妊娠结局的病原体。但自然流产与产科特异感染情况及其临床意义未见报道。本研究显示，自然流产组TOX、HCMV、HSV、UU、及CT感染率均较人工流产组高(P<0.05)，两组HPV和NG感染率无显著差异(P>0.05)，进一步说明产科特异感染可损害宫内胎儿，使流产率升高。产科特异感染的病理改变因各种病原体不同而不同，概括讲主要有：(1)绒毛炎症、变性、水肿及成熟障碍，功能降低或消失、母儿间物质交换障碍，胎儿缺乏氧和营养物质；(2)绒毛产生hCG减少、内源性孕酮水平降低、子宫激惹性升高、产生强烈收缩；(3)胎儿主要脏器发育障碍产生致死性畸形[3，4]。这些均可致胎儿死亡。
, 百拇医药
2.产科特异感染和自然流产的关系：本研究应用PCR技术检测50例自然流产和50例人工流产或引产绒毛组织的产科特异感染情况，结果显示，自然流产组5种病原体检出率均较人工流产组高(P<0.05)，自然流产组总检出率亦显著高于人工流产组(P<0.05)。但两组中早期妊娠和中期妊娠的检出率差异无显著性(P>0.05)。提示，产科特异感染和自然流产密切相关，是自然流产的主要病因之一，但随孕周增加感染率无明显增加。预防和治疗这些病原体感染对优生优育、防止流产有重要意义。
参考文献
[1] 乐杰.产科特异感染及其检测.中华妇产科杂志，1995，30：451-453.
[2] 黄丹桂，张光，王德志，等.宫内感染.中国实用妇科与产科杂志，1995，13：130.
[3] 刘伯宁，陶文琪，刘德莉，等.胎儿生长迟缓胎盘病理检查与病原体检查的对比研究.中华妇产科杂志，1996，31：90-92.
[4] 刘伯宁.病毒感染的胎盘胎儿病理.中国实用妇科与产科杂志，1995，13：147.
(收稿：1997-12-25 修回：1998-09-14), 百拇医药