p16与细胞周期素D1蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义
作者：王敏 江森 李冠群
单位：110003 沈阳，中国医科大学第二临床学院妇产科(王敏)，病理科(李冠群)；山东医科大学附属医院妇产科(江森)
关键词：
中华妇产科杂志990322 近年来研究发现,细胞周期失控，是细胞增殖失控而导致癌变的重要原因。p16和细胞周期素蛋白(cyclin D1 protein, CD1P)是目前公认最重要的两种细胞周期调节因子,其在卵巢肿瘤中的表达目前存有争议[2-5]。本研究应用免疫组化法，对55份卵巢组织标本进行p16及CD1P蛋白检测,探索其相互关系及与卵巢浆液性肿瘤发生、发展的关系。
一、材料与方法
1.标本与来源:收集中国医科大学第一、二临床学院1996年4月至1997年9月，手术切除的55份新鲜组织标本,分为4组:(1)正常卵巢组织8份；(2)卵巢良性浆液性瘤组织10份；(3)卵巢交界性浆液性瘤组织4份；(4)卵巢浆液性癌组织33份，其中Ⅰ期5例、Ⅱ期2例、Ⅲ期22例、Ⅳ期4例。组织学分级1级8例、2级18例、3级7例。伴有腹水者17例，伴有癌瘤播散者25例,伴有淋巴结转移者8例。
, http://www.100md.com
2.检测方法:冰冻切片进行免疫组化ABC染色,p16和CD1P抗体的免疫产物均采用3-氨基-9-乙基卞唑显色。鼠抗人CD1P单克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品。
3.结果判定及统计学处理:阳性染色为红色颗粒,按Shimizu等[1]的方法,综合染色强度和分布范围判定结果。率的比较采用四格表确切概率法。
二、结果
1.不同组织中p16、CD1P的表达:p16、CD1P阳性表达在卵巢浆液性癌与良性浆液性瘤及正常卵巢组织比较,差异均有显著性(P<0.05),但在卵巢浆液性癌与交界性浆液性瘤,交界性浆液性瘤与良性浆液性瘤比较，差异均无显著性(P>0.05)。见表1。
表1 不同卵巢组织标本中p16、CD1P的表达情况 类 别
, http://www.100md.com 标本
总数
p16阳性
CD1P阳性
标本数
百分率(%)
标本数
百分率(%)
正常卵巢
8
8
8/8*△
0
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0*
卵巢良性浆液性瘤
10
9
90.0*
0
0*
卵巢交界性浆液性瘤
4
2
2/4**△
1
, 百拇医药
1/4**△
卵巢浆液性癌
33
14
42.4
15
45.5
注:*浆液性癌与良性浆液性瘤及正常卵巢比较，P<0.05 **浆液性癌与交界性浆液性瘤与交界性浆液性瘤与良性浆液性瘤比较，P>0.05 △ 例数少于10例，不计算百分率(表2，3同)
2.卵巢浆液性癌组织中p16、CD1P表达与临床分期、病理分级关系:早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)中，6例p16表达阳性高于晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)30.8%(8/26),差异有显著性(P<0.05)。但CD1P的阳性表达率在早、晚期卵巢癌比较，差异无显著性(P>0.05)。p16在卵巢浆液癌1级与2、3级中的阳性表达，差异有显著性(P<0.05),CD1P在各级中的表达，差异则无显著性(P>0.05)，见表2。
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表2 卵巢浆液性癌组织标本中p16、CD1P表达与临床分期、病理分级的关系 分类
标本
总数
p16阳性
CD1P阳性
标本数
百分率(%)
标本数
百分率(%)
临床分期
33
14
, http://www.100md.com
42.4
15
45.5
Ⅰ、Ⅱ期
7
6
6/7*△
2
2/7**△
Ⅲ、Ⅳ期
26
8
30.8
, http://www.100md.com
13
50.0
病理分级
33
14
42.4
15
45.5
1级
8
6
6/8*△
1
, 百拇医药
6/8△
2级
18
7
38.9**
8
44.4**
3级
7
1
1/7△
6
, http://www.100md.com
6/7△
注:*Ⅲ、Ⅳ期与Ⅰ、Ⅱ期比较及1级与2、3级比较，P<0.05 **Ⅲ、Ⅳ期与Ⅰ、Ⅱ期比较及2级与3级比较，P>0.05
3.卵巢浆液性癌组织中p16、CD1P表达与腹水、癌瘤播散及淋巴结转移3项指标的关系：p16、CD1P阳性表达，淋巴结转移者和无淋巴结转移者比较，差异均有显著性(P<0.05);有腹水和无腹水比较，差异均无显著性(P>0.05);癌瘤播散和无播散者p16阳性表达，差异也有显著性(P<0.05),而CD1P阳性表达，差异则无显著性(P>0.05)。见表3。
表3 卵巢浆液性癌p16、CD1P表达与腹水、癌瘤播散及淋巴结转移的关系 类别
标本
总数
, 百拇医药
p16阳性
CD1P阳性
标本数
百分率(%)
P值
标本数
百分率(%)
P值
腹水
有
17
6
35.3
, http://www.100md.com
>0.05
8
47.1
>0.05
无
16
8
50.0
7
43.8
癌瘤播散
有
25
, http://www.100md.com 7
28.0
<0.05
13
52.0
>0.05
无
8
7
7/8△
2/8△
25.0
淋巴结转移
, 百拇医药
有
8
0
0/8△
<0.05
7
7/8△
<0.05
无
25
14
56.0
8
, 百拇医药
32.0
4.p16和CD1P协同表达情况：33例卵巢浆液性癌中,p16和CD1P均异常表达即协同表达12例,占36.4%。其中7例淋巴结转移,11例癌瘤播散,7例腹水,均为晚期癌及中、低分化癌。p16和CD1P均无异常表达11例,占33.3%。均无淋巴结转移,其中6例癌瘤播散,7例腹水,晚期癌7例。中、低分化癌6例。两组淋巴结转移率,1级与2、3级比较，差异均有显著性(P<0.05)。
三、讨论
p16基因又称多肿瘤抑制基因1,CD1P由CyclinD1基因(又称CND1,BCL1,PRAD1或D11S128基因)编码,促进细胞生长和分裂。因此,无论是CD1P的过度表达还是p16的缺失，都将促使细胞恶变。
1.p16、CD1P在卵巢上皮性浆液性肿瘤组织中的表达及意义：本研究根据p16、CD1P阳性表达及阴性表达，分别与卵巢浆液性癌的临床分期、病理分级、腹水、癌瘤播散及淋巴结转移多因素进行比较、分析,结果与杨红等[2]和Ichikawa等[3]在p16基因表达的研究结论一致。即p16基因表达的量与细胞的生物学行为有关,正常组织表达较高,恶性增生的表达较低。在卵巢浆液性癌中,p16阳性表达者生物学行为较好,转移率低,而表达阴性者则相反。CD1P表达也与癌瘤的恶性程度及其生物学行为有密切关系。随恶性程度的增加、淋巴结转移的出现,其表达率也明显增加,此结果与Barbieri等[4]和Worsley等[5]的报道一致。
, 百拇医药
2.p16和CD1P协同表达及意义：现代研究证明，肿瘤的发生是多因素、多步骤、多阶段、多种癌基因和抑癌基因参与的复杂病理过程。本研究也支持上述观点，p16和CD1P在卵巢浆液性癌中的表达具有多样性。33例卵巢浆液性癌中,p16和CD1P协同异常表达者12例(36.4%),均正常表达者11例(33.3%),中、低分化癌前者12例,后者6例。提示，多种基因异常可预示卵巢浆液性癌的转移潜能和预后不良。 参考文献
1 Shimizu M,Saitch Y,Itoh H. Imm-unohistochemical staining of Ha-ras oncoge product in normal,benigh,and malignant human pancreatic tissues. Hum Pathol,1990,21:607-612.
2 杨红,郑维国,辛晓燕. 卵巢肿瘤中p16抑癌基因的表达及其意义. 第四军医大学学报,1996,17:287-288.
, 百拇医药
3 Ichikawa Y,Yoshidas S,Koyama Y,et al. Alteration of the p16 gene in differrent histological types and clinical stage of primary ovarian tumors. Int J Cancer,1996,69:466-470.
4 Barbieri F,Cagnoli M,Ragni N,et al.Expression of Cyclin D1 correlates with malignancy in human ovarian tumors. Br J Cancer,1997,75:1236-1238.
5 Worsley SD,Ponder BAJ, Davies BR. Overexpression of Cyclin D1 in epithelial ovarian cancers.Gynecol Oncol,1997,64:189-195.
(收稿：1998-05-01 修回：1999-01-09), http://www.100md.com
单位：110003 沈阳，中国医科大学第二临床学院妇产科(王敏)，病理科(李冠群)；山东医科大学附属医院妇产科(江森)
关键词：
中华妇产科杂志990322 近年来研究发现,细胞周期失控，是细胞增殖失控而导致癌变的重要原因。p16和细胞周期素蛋白(cyclin D1 protein, CD1P)是目前公认最重要的两种细胞周期调节因子,其在卵巢肿瘤中的表达目前存有争议[2-5]。本研究应用免疫组化法，对55份卵巢组织标本进行p16及CD1P蛋白检测,探索其相互关系及与卵巢浆液性肿瘤发生、发展的关系。
一、材料与方法
1.标本与来源:收集中国医科大学第一、二临床学院1996年4月至1997年9月，手术切除的55份新鲜组织标本,分为4组:(1)正常卵巢组织8份；(2)卵巢良性浆液性瘤组织10份；(3)卵巢交界性浆液性瘤组织4份；(4)卵巢浆液性癌组织33份，其中Ⅰ期5例、Ⅱ期2例、Ⅲ期22例、Ⅳ期4例。组织学分级1级8例、2级18例、3级7例。伴有腹水者17例，伴有癌瘤播散者25例,伴有淋巴结转移者8例。
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2.检测方法:冰冻切片进行免疫组化ABC染色,p16和CD1P抗体的免疫产物均采用3-氨基-9-乙基卞唑显色。鼠抗人CD1P单克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品。
3.结果判定及统计学处理:阳性染色为红色颗粒,按Shimizu等[1]的方法,综合染色强度和分布范围判定结果。率的比较采用四格表确切概率法。
二、结果
1.不同组织中p16、CD1P的表达:p16、CD1P阳性表达在卵巢浆液性癌与良性浆液性瘤及正常卵巢组织比较,差异均有显著性(P<0.05),但在卵巢浆液性癌与交界性浆液性瘤,交界性浆液性瘤与良性浆液性瘤比较，差异均无显著性(P>0.05)。见表1。
表1 不同卵巢组织标本中p16、CD1P的表达情况 类 别
, http://www.100md.com 标本
总数
p16阳性
CD1P阳性
标本数
百分率(%)
标本数
百分率(%)
正常卵巢
8
8
8/8*△
0
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0*
卵巢良性浆液性瘤
10
9
90.0*
0
0*
卵巢交界性浆液性瘤
4
2
2/4**△
1
, 百拇医药
1/4**△
卵巢浆液性癌
33
14
42.4
15
45.5
注:*浆液性癌与良性浆液性瘤及正常卵巢比较，P<0.05 **浆液性癌与交界性浆液性瘤与交界性浆液性瘤与良性浆液性瘤比较，P>0.05 △ 例数少于10例，不计算百分率(表2，3同)
2.卵巢浆液性癌组织中p16、CD1P表达与临床分期、病理分级关系:早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)中，6例p16表达阳性高于晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)30.8%(8/26),差异有显著性(P<0.05)。但CD1P的阳性表达率在早、晚期卵巢癌比较，差异无显著性(P>0.05)。p16在卵巢浆液癌1级与2、3级中的阳性表达，差异有显著性(P<0.05),CD1P在各级中的表达，差异则无显著性(P>0.05)，见表2。
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表2 卵巢浆液性癌组织标本中p16、CD1P表达与临床分期、病理分级的关系 分类
标本
总数
p16阳性
CD1P阳性
标本数
百分率(%)
标本数
百分率(%)
临床分期
33
14
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42.4
15
45.5
Ⅰ、Ⅱ期
7
6
6/7*△
2
2/7**△
Ⅲ、Ⅳ期
26
8
30.8
, http://www.100md.com
13
50.0
病理分级
33
14
42.4
15
45.5
1级
8
6
6/8*△
1
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6/8△
2级
18
7
38.9**
8
44.4**
3级
7
1
1/7△
6
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6/7△
注:*Ⅲ、Ⅳ期与Ⅰ、Ⅱ期比较及1级与2、3级比较，P<0.05 **Ⅲ、Ⅳ期与Ⅰ、Ⅱ期比较及2级与3级比较，P>0.05
3.卵巢浆液性癌组织中p16、CD1P表达与腹水、癌瘤播散及淋巴结转移3项指标的关系：p16、CD1P阳性表达，淋巴结转移者和无淋巴结转移者比较，差异均有显著性(P<0.05);有腹水和无腹水比较，差异均无显著性(P>0.05);癌瘤播散和无播散者p16阳性表达，差异也有显著性(P<0.05),而CD1P阳性表达，差异则无显著性(P>0.05)。见表3。
表3 卵巢浆液性癌p16、CD1P表达与腹水、癌瘤播散及淋巴结转移的关系 类别
标本
总数
, 百拇医药
p16阳性
CD1P阳性
标本数
百分率(%)
P值
标本数
百分率(%)
P值
腹水
有
17
6
35.3
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>0.05
8
47.1
>0.05
无
16
8
50.0
7
43.8
癌瘤播散
有
25
, http://www.100md.com 7
28.0
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13
52.0
>0.05
无
8
7
7/8△
2/8△
25.0
淋巴结转移
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有
8
0
0/8△
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7
7/8△
<0.05
无
25
14
56.0
8
, 百拇医药
32.0
4.p16和CD1P协同表达情况：33例卵巢浆液性癌中,p16和CD1P均异常表达即协同表达12例,占36.4%。其中7例淋巴结转移,11例癌瘤播散,7例腹水,均为晚期癌及中、低分化癌。p16和CD1P均无异常表达11例,占33.3%。均无淋巴结转移,其中6例癌瘤播散,7例腹水,晚期癌7例。中、低分化癌6例。两组淋巴结转移率,1级与2、3级比较，差异均有显著性(P<0.05)。
三、讨论
p16基因又称多肿瘤抑制基因1,CD1P由CyclinD1基因(又称CND1,BCL1,PRAD1或D11S128基因)编码,促进细胞生长和分裂。因此,无论是CD1P的过度表达还是p16的缺失，都将促使细胞恶变。
1.p16、CD1P在卵巢上皮性浆液性肿瘤组织中的表达及意义：本研究根据p16、CD1P阳性表达及阴性表达，分别与卵巢浆液性癌的临床分期、病理分级、腹水、癌瘤播散及淋巴结转移多因素进行比较、分析,结果与杨红等[2]和Ichikawa等[3]在p16基因表达的研究结论一致。即p16基因表达的量与细胞的生物学行为有关,正常组织表达较高,恶性增生的表达较低。在卵巢浆液性癌中,p16阳性表达者生物学行为较好,转移率低,而表达阴性者则相反。CD1P表达也与癌瘤的恶性程度及其生物学行为有密切关系。随恶性程度的增加、淋巴结转移的出现,其表达率也明显增加,此结果与Barbieri等[4]和Worsley等[5]的报道一致。
, 百拇医药
2.p16和CD1P协同表达及意义：现代研究证明，肿瘤的发生是多因素、多步骤、多阶段、多种癌基因和抑癌基因参与的复杂病理过程。本研究也支持上述观点，p16和CD1P在卵巢浆液性癌中的表达具有多样性。33例卵巢浆液性癌中,p16和CD1P协同异常表达者12例(36.4%),均正常表达者11例(33.3%),中、低分化癌前者12例,后者6例。提示，多种基因异常可预示卵巢浆液性癌的转移潜能和预后不良。 参考文献
1 Shimizu M,Saitch Y,Itoh H. Imm-unohistochemical staining of Ha-ras oncoge product in normal,benigh,and malignant human pancreatic tissues. Hum Pathol,1990,21:607-612.
2 杨红,郑维国,辛晓燕. 卵巢肿瘤中p16抑癌基因的表达及其意义. 第四军医大学学报,1996,17:287-288.
, 百拇医药
3 Ichikawa Y,Yoshidas S,Koyama Y,et al. Alteration of the p16 gene in differrent histological types and clinical stage of primary ovarian tumors. Int J Cancer,1996,69:466-470.
4 Barbieri F,Cagnoli M,Ragni N,et al.Expression of Cyclin D1 correlates with malignancy in human ovarian tumors. Br J Cancer,1997,75:1236-1238.
5 Worsley SD,Ponder BAJ, Davies BR. Overexpression of Cyclin D1 in epithelial ovarian cancers.Gynecol Oncol,1997,64:189-195.
(收稿：1998-05-01 修回：1999-01-09), http://www.100md.com