羊水与自体血培养后脂类介质的变化
作者：杨鉴 余艳红 潘石蕾 钟梅 周凤琴 潘志英
单位：杨鉴，余艳红，潘石蕾，钟梅，周凤琴 解放军第一军医大学南方医院妇产科 510515 广州；潘志英 从化市人民医院妇产科
关键词：
中华妇产科杂志990816 羊水栓塞 (AFE) 是产科最严重的并发症之一，死亡率高达80%[1]。其发病机理仍不十分清楚。近年来，不少学者提出AFE的发生与花生四烯酸的代谢产物前列腺素、白三烯等脂类介质有密切联系[2，3]，但对人羊水能否刺激自体产生这类脂类介质及其量化关系尚无报道。本实验通过对羊水与自体血液进行培养，探讨脂类介质与AFE发病间的关系。
一、资料与方法
1.研究对象：选择1997年12月至1998年2月在我科和从化市人民医院进行剖宫产术的产妇13例，年龄24～35岁，孕周36～43周，未破膜，剖宫产指征分别是：6例瘢痕子宫，3例胎位不正，3例双胎妊娠，1例高龄初产。在剖宫产前抽取产妇静脉血12 ml，加肝素抗凝；剖宫产时，切开宫壁暴露胎膜，拭净血液，用20 ml注射器穿刺抽取羊水，所取羊水均无血液和胎粪污染。
, 百拇医药
2.实验方法：在无菌条件下，取羊水1 ml加入自体肝素抗凝血10 ml，置于37℃培养箱培养30分钟，然后在4℃下3000r/min离心30分钟，取上清液，-70℃冷冻保存待测。用放射免疫法检测血栓烷A2和前列环素的代谢产物血栓烷B2及6-酮前列腺素(6-Keto-PGF1α)，放射免疫试剂盒购自苏州医学院，γ计数仪由南方医院放射免疫中心提供，检测时严格按照说明进行操作。用酶联免疫法测定白三烯C4，试剂盒购于Cayman化学试剂公司，检测前首先进行样本纯化，去除有机杂质。用SPSS统计软件包处理标准品数据，得出计算样本的线性回归方程为：
X=e8.172-0.025OD+12.0。
3.统计学方法：本实验采用配对t检验，数据采用均数±标准差表示。
二、结果
检测发现，妊娠38～41周产妇剖宫产前静脉血中6-Keto-PGF1α值为(27.4±11.6)ng/L，加羊水进行培养后，其浓度有轻微增加为(33.9±10.7)ng/L；而加入羊水培养后静脉血中的血栓烷B2和白三烯C4含量增高明显，分别由培养前的(63.5±52)ng/L、(40.1±39.2)ng/L增加到培养后的(189.1±103)ng/L、(293.5±206.1)ng/L，差异有极显著性(P<0.01)。
, http://www.100md.com
三、讨论
1.AFE的临床表现：AFE发病急骤，典型的症状是突发性呼吸困难，紧接着出现低血氧、低血压、休克、肺水肿等心肺功能衰竭征象，甚至死亡，急性阶段之后的幸存者有40%发生DIC[2]。其临床表现与过敏性休克有许多相似之处，现认为在AFE的发病过程中前列腺素，白三烯等脂类介质起了重要作用。
2.脂类介质的病理生理作用：近年来国内外有学者提出，在AFE的发生发展过程中不饱和脂肪酸的代谢物前列腺素、白三烯、血栓烷等脂质因子起了重要作用[3]。花生四烯酸是从细胞膜磷脂中释放出来，通过脂氧酶代谢途径生成白三烯类物质。白三烯是过敏反应的重要介质，当机体受到各种刺激如抗原抗体反应时其释放增加，可导致毛细血管通透性增加、支气管平滑肌强烈收缩等过敏性休克或过敏性哮喘症状。血栓素A2及其衍生物能引起强烈的血管、支气管收缩，血小板聚集和血栓形成；前列环素可使血管和气管平滑肌舒张，生理状况下它们维持在平衡状态。当机体受各种生理、病理的刺激时可引起平衡失常，它们的平衡失常可造成机体组织器官功能和形态的严重异常。
, http://www.100md.com
3.脂类介质与AFE：已有一些动物实验证实，前列腺素和白三烯能引起或加重羊水栓塞[4，5]，但这些实验是用异体羊水，不能排除异体反应。本实验用自体羊水与血培养，发现培养后血中白三烯和血栓烷浓度明显上升，而前列环素的代谢产物6-Keto-PGF1α仅有轻微升高，白三烯升高一方面强烈收缩支气管，引起呼吸道阻力增高，另一方面收缩血管，使血管壁的通透性增加，导致肺动脉高压；因此，有理由认为羊水进入血循环刺激机体产生的脂类介质样生物活性物质，可引起AFE时的病理生理变化，在AFE的发病中起了重要作用。
本课题受国家自然基金资助(基金编号：39270690)
参考文献
1 Clark SL. New concepts of amniotic fluid embolism: a review. Obstet Gynecol Sur, 1990, 45:360-367.
, 百拇医药
2 Clark SL, Hankins G, Dudley DA,et al. Amniotic fluid embolism: analysis of the national registry. Am J Obstet Gynecol, 1995, 172:1158-1169.
3 Clark SL. Arachidonic acid metabolites and the pathophysiology of amniotic fluid embolism. Semin. Rep Endoc, 1985, 3: 253-257.
4 余艳红，金志魁.羊水栓塞样血浆对离体肺循环的影响.中华妇产科杂志， 1997，32：134-137.
5 Azegami M, Mori M. Amniotic fluid embolism and leukotrines. Am J Obstet Gynecol, 1986,155:1119-1123.
(收稿：1998-09-14 修回：1999-05-27), http://www.100md.com
单位：杨鉴，余艳红，潘石蕾，钟梅，周凤琴 解放军第一军医大学南方医院妇产科 510515 广州；潘志英 从化市人民医院妇产科
关键词：
中华妇产科杂志990816 羊水栓塞 (AFE) 是产科最严重的并发症之一，死亡率高达80%[1]。其发病机理仍不十分清楚。近年来，不少学者提出AFE的发生与花生四烯酸的代谢产物前列腺素、白三烯等脂类介质有密切联系[2，3]，但对人羊水能否刺激自体产生这类脂类介质及其量化关系尚无报道。本实验通过对羊水与自体血液进行培养，探讨脂类介质与AFE发病间的关系。
一、资料与方法
1.研究对象：选择1997年12月至1998年2月在我科和从化市人民医院进行剖宫产术的产妇13例，年龄24～35岁，孕周36～43周，未破膜，剖宫产指征分别是：6例瘢痕子宫，3例胎位不正，3例双胎妊娠，1例高龄初产。在剖宫产前抽取产妇静脉血12 ml，加肝素抗凝；剖宫产时，切开宫壁暴露胎膜，拭净血液，用20 ml注射器穿刺抽取羊水，所取羊水均无血液和胎粪污染。
, 百拇医药
2.实验方法：在无菌条件下，取羊水1 ml加入自体肝素抗凝血10 ml，置于37℃培养箱培养30分钟，然后在4℃下3000r/min离心30分钟，取上清液，-70℃冷冻保存待测。用放射免疫法检测血栓烷A2和前列环素的代谢产物血栓烷B2及6-酮前列腺素(6-Keto-PGF1α)，放射免疫试剂盒购自苏州医学院，γ计数仪由南方医院放射免疫中心提供，检测时严格按照说明进行操作。用酶联免疫法测定白三烯C4，试剂盒购于Cayman化学试剂公司，检测前首先进行样本纯化，去除有机杂质。用SPSS统计软件包处理标准品数据，得出计算样本的线性回归方程为：
X=e8.172-0.025OD+12.0。
3.统计学方法：本实验采用配对t检验，数据采用均数±标准差表示。
二、结果
检测发现，妊娠38～41周产妇剖宫产前静脉血中6-Keto-PGF1α值为(27.4±11.6)ng/L，加羊水进行培养后，其浓度有轻微增加为(33.9±10.7)ng/L；而加入羊水培养后静脉血中的血栓烷B2和白三烯C4含量增高明显，分别由培养前的(63.5±52)ng/L、(40.1±39.2)ng/L增加到培养后的(189.1±103)ng/L、(293.5±206.1)ng/L，差异有极显著性(P<0.01)。
, http://www.100md.com
三、讨论
1.AFE的临床表现：AFE发病急骤，典型的症状是突发性呼吸困难，紧接着出现低血氧、低血压、休克、肺水肿等心肺功能衰竭征象，甚至死亡，急性阶段之后的幸存者有40%发生DIC[2]。其临床表现与过敏性休克有许多相似之处，现认为在AFE的发病过程中前列腺素，白三烯等脂类介质起了重要作用。
2.脂类介质的病理生理作用：近年来国内外有学者提出，在AFE的发生发展过程中不饱和脂肪酸的代谢物前列腺素、白三烯、血栓烷等脂质因子起了重要作用[3]。花生四烯酸是从细胞膜磷脂中释放出来，通过脂氧酶代谢途径生成白三烯类物质。白三烯是过敏反应的重要介质，当机体受到各种刺激如抗原抗体反应时其释放增加，可导致毛细血管通透性增加、支气管平滑肌强烈收缩等过敏性休克或过敏性哮喘症状。血栓素A2及其衍生物能引起强烈的血管、支气管收缩，血小板聚集和血栓形成；前列环素可使血管和气管平滑肌舒张，生理状况下它们维持在平衡状态。当机体受各种生理、病理的刺激时可引起平衡失常，它们的平衡失常可造成机体组织器官功能和形态的严重异常。
, http://www.100md.com
3.脂类介质与AFE：已有一些动物实验证实，前列腺素和白三烯能引起或加重羊水栓塞[4，5]，但这些实验是用异体羊水，不能排除异体反应。本实验用自体羊水与血培养，发现培养后血中白三烯和血栓烷浓度明显上升，而前列环素的代谢产物6-Keto-PGF1α仅有轻微升高，白三烯升高一方面强烈收缩支气管，引起呼吸道阻力增高，另一方面收缩血管，使血管壁的通透性增加，导致肺动脉高压；因此，有理由认为羊水进入血循环刺激机体产生的脂类介质样生物活性物质，可引起AFE时的病理生理变化，在AFE的发病中起了重要作用。
本课题受国家自然基金资助(基金编号：39270690)
参考文献
1 Clark SL. New concepts of amniotic fluid embolism: a review. Obstet Gynecol Sur, 1990, 45:360-367.
, 百拇医药
2 Clark SL, Hankins G, Dudley DA,et al. Amniotic fluid embolism: analysis of the national registry. Am J Obstet Gynecol, 1995, 172:1158-1169.
3 Clark SL. Arachidonic acid metabolites and the pathophysiology of amniotic fluid embolism. Semin. Rep Endoc, 1985, 3: 253-257.
4 余艳红，金志魁.羊水栓塞样血浆对离体肺循环的影响.中华妇产科杂志， 1997，32：134-137.
5 Azegami M, Mori M. Amniotic fluid embolism and leukotrines. Am J Obstet Gynecol, 1986,155:1119-1123.
(收稿：1998-09-14 修回：1999-05-27), http://www.100md.com