豚鼠耳石器Nd:YAG激光照射对内耳功能和形态学的影响
作者：殷团芳 卢永德 杨新明 周金平 陈忠 任基浩
单位：殷团芳、卢永德、杨新明、陈忠、任基浩 长沙 湖南医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科 410011，周金平 病理科
关键词：
中华耳鼻咽喉科杂志990323 用Nd:YAG(yttrium aluminum garnet,钇铝石榴石)激光照射豚鼠耳石器，观察前庭听觉功能变化及对前庭、耳蜗的组织形态学影响，评估Nd:YAG激光应用于临床治疗致残性眩晕的可能性。
一、材料与方法
1.实验动物和仪器：耳廓反射正常的白色健康豚鼠32只，体重350～450 g。Nd:YAG激光仪(YAG 100-2型)，波长1.06 μm，光纤输出功率0～50 W连续可调，光斑直径2mm，照射时间调变。
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2.实验程序：豚鼠耳石器激光照射前、后60 d进行冰水诱发眼震电图(Electronystagmography，ENG)和耳蜗电图(Eletrocochleography，ECochG)测试。照射后立即、15 d和60 d观察前庭反应，并分别断头处死豚鼠5只、5只和22只进行颞骨火棉胶包埋连续切片光镜观察。
ENG和ECochG测试按我们已报告的方法[1]。激光照射：戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，左耳后切口打开听泡，取出镫骨，激光束尽量靠近椭圆囊和球囊而不接触，功率2W，时间1s，照射3次。镫骨复位，缝合切口。右耳同样处理但不行激光照射作为对照。
二、结果
Nd:YAG激光照射豚鼠后可观察到去迷路征，1、2 d后眼震逐渐消失，2、3 d后出现前庭代偿。照射后立即光镜观察椭圆囊斑和球囊斑的感觉细胞和支持细胞与基底膜分离，感觉细胞呈筛网状，一些支持细胞胞体破裂，胞浆浓缩，核轻度固缩，可见小空泡(图1)。照射后15 d耳石消失(图2)。60 d则整个椭圆囊斑及球囊斑均消失，耳蜗未见组织形态学损害(图3)。
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图1 激光照射后即刻球囊毛细胞和支持细胞轻度受损与基底膜分离, 耳石隆起未间断(箭头为照射方向)。 HE×400
图2 照射后15 d椭圆囊耳石消失,部分感觉细胞变性坏死(箭头)。 HE×400
图3 照射后60 d耳蜗未见组织形态学损害。 HE×100
照射后60 d，照射耳ENG眼震持续时间平均(
±s,下同)为(6.9±4.1)s，与照射前(44.2±5.9)s比较差异有显著性(t检验,t=25.5479,P<0.05)；而ECochG所测AP阈值(43.1±5.1) dB SPL与照射前(40.5±6.9) dB SPL比较，差异无显著性 (t=1.5029,P>0.05)。对照耳ENG和ECochG处理前后分别为(43.6±4.1)s、(45.2±5.1)s和(41.8±5.3)dB SPL、(42.6±4.7)dB SPL，差异均无显著性 (t=1.2698和t=0.5674,P>0.05)。
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三、讨论
Okuno等[2]证实单束氩激光照射豚鼠和猴耳石器，可破坏囊斑，而不影响其他部位，组织学示选择性损害耳石器的感觉细胞和支持细胞。Funai等[3]应用氩激光照射豚鼠的圆窗膜后测定电生理变化，仅发现少数豚鼠耳蜗功能有轻微影响，听功能得以保存，可局限性地破坏膜迷路，选择性地破坏前庭功能。
临床上药物治疗无效的少数致残性眩晕疾病需手术治疗，但迷路切除术将致听力完全丧失，应用耳毒药物化学性迷路切除术也可能损伤听力，前庭神经切除术有一定难度。激光迷路切除术相对破坏较轻，且易于施行。本组Nd:YAG激光照射豚鼠前庭耳石器后，立即出现前庭去迷路征象，组织学示囊斑感觉上皮细胞和支持细胞隆起与基底膜分开，可能系感觉细胞和支持细胞对激光能量选择吸收所致[2]。照射后60 d诱发性ENG眼震时间较照射前明显缩短，而ECochG功能无明显改变，组织学观察耳石器变性、消失，而耳蜗未见损害。因激光束未照射半规管，故未观察其组织形态学改变。Nomura等[4] 已在临床应用氩激光行迷路单管神经切除术治疗1例难治性眩晕获得成功。本实验为临床应用Nd:YAG激光迷路切除术的可能性提供实验依据。
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参考文献
1 殷团芳,卢永德,陈忠,等.透明质酸圆窗灌注对豚鼠内耳功能和形态学的影响.中华耳鼻咽喉科杂志,1997,32:92-94.
2 Okuno T,Nomura Y,Hara M.Partial labyrinthectomy with argon laser. Acta Otolaryngol Suppl,1988,456:111-116.
3 Funai H,Hara M,Nomura Y.An electrophysiological study on the effect of laser irradation of round window membrane in the guinea pig.Acta Otolaryngol Suppl,1988,456:92-97.
4 Nomura Y,Okuno T,Mizuno M. Treatment of vertigo using laser labyrinthectomy. Acta Otolaryngol,1993,113:261-262.
(收稿：1998-09-16 修回：1999-01-06), 百拇医药
单位：殷团芳、卢永德、杨新明、陈忠、任基浩 长沙 湖南医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科 410011，周金平 病理科
关键词：
中华耳鼻咽喉科杂志990323 用Nd:YAG(yttrium aluminum garnet,钇铝石榴石)激光照射豚鼠耳石器，观察前庭听觉功能变化及对前庭、耳蜗的组织形态学影响，评估Nd:YAG激光应用于临床治疗致残性眩晕的可能性。
一、材料与方法
1.实验动物和仪器：耳廓反射正常的白色健康豚鼠32只，体重350～450 g。Nd:YAG激光仪(YAG 100-2型)，波长1.06 μm，光纤输出功率0～50 W连续可调，光斑直径2mm，照射时间调变。
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2.实验程序：豚鼠耳石器激光照射前、后60 d进行冰水诱发眼震电图(Electronystagmography，ENG)和耳蜗电图(Eletrocochleography，ECochG)测试。照射后立即、15 d和60 d观察前庭反应，并分别断头处死豚鼠5只、5只和22只进行颞骨火棉胶包埋连续切片光镜观察。
ENG和ECochG测试按我们已报告的方法[1]。激光照射：戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，左耳后切口打开听泡，取出镫骨，激光束尽量靠近椭圆囊和球囊而不接触，功率2W，时间1s，照射3次。镫骨复位，缝合切口。右耳同样处理但不行激光照射作为对照。
二、结果
Nd:YAG激光照射豚鼠后可观察到去迷路征，1、2 d后眼震逐渐消失，2、3 d后出现前庭代偿。照射后立即光镜观察椭圆囊斑和球囊斑的感觉细胞和支持细胞与基底膜分离，感觉细胞呈筛网状，一些支持细胞胞体破裂，胞浆浓缩，核轻度固缩，可见小空泡(图1)。照射后15 d耳石消失(图2)。60 d则整个椭圆囊斑及球囊斑均消失，耳蜗未见组织形态学损害(图3)。
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图1 激光照射后即刻球囊毛细胞和支持细胞轻度受损与基底膜分离, 耳石隆起未间断(箭头为照射方向)。 HE×400
图2 照射后15 d椭圆囊耳石消失,部分感觉细胞变性坏死(箭头)。 HE×400
图3 照射后60 d耳蜗未见组织形态学损害。 HE×100
照射后60 d，照射耳ENG眼震持续时间平均(
±s,下同)为(6.9±4.1)s，与照射前(44.2±5.9)s比较差异有显著性(t检验,t=25.5479,P<0.05)；而ECochG所测AP阈值(43.1±5.1) dB SPL与照射前(40.5±6.9) dB SPL比较，差异无显著性 (t=1.5029,P>0.05)。对照耳ENG和ECochG处理前后分别为(43.6±4.1)s、(45.2±5.1)s和(41.8±5.3)dB SPL、(42.6±4.7)dB SPL，差异均无显著性 (t=1.2698和t=0.5674,P>0.05)。, 百拇医药
三、讨论
Okuno等[2]证实单束氩激光照射豚鼠和猴耳石器，可破坏囊斑，而不影响其他部位，组织学示选择性损害耳石器的感觉细胞和支持细胞。Funai等[3]应用氩激光照射豚鼠的圆窗膜后测定电生理变化，仅发现少数豚鼠耳蜗功能有轻微影响，听功能得以保存，可局限性地破坏膜迷路，选择性地破坏前庭功能。
临床上药物治疗无效的少数致残性眩晕疾病需手术治疗，但迷路切除术将致听力完全丧失，应用耳毒药物化学性迷路切除术也可能损伤听力，前庭神经切除术有一定难度。激光迷路切除术相对破坏较轻，且易于施行。本组Nd:YAG激光照射豚鼠前庭耳石器后，立即出现前庭去迷路征象，组织学示囊斑感觉上皮细胞和支持细胞隆起与基底膜分开，可能系感觉细胞和支持细胞对激光能量选择吸收所致[2]。照射后60 d诱发性ENG眼震时间较照射前明显缩短，而ECochG功能无明显改变，组织学观察耳石器变性、消失，而耳蜗未见损害。因激光束未照射半规管，故未观察其组织形态学改变。Nomura等[4] 已在临床应用氩激光行迷路单管神经切除术治疗1例难治性眩晕获得成功。本实验为临床应用Nd:YAG激光迷路切除术的可能性提供实验依据。
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参考文献
1 殷团芳,卢永德,陈忠,等.透明质酸圆窗灌注对豚鼠内耳功能和形态学的影响.中华耳鼻咽喉科杂志,1997,32:92-94.
2 Okuno T,Nomura Y,Hara M.Partial labyrinthectomy with argon laser. Acta Otolaryngol Suppl,1988,456:111-116.
3 Funai H,Hara M,Nomura Y.An electrophysiological study on the effect of laser irradation of round window membrane in the guinea pig.Acta Otolaryngol Suppl,1988,456:92-97.
4 Nomura Y,Okuno T,Mizuno M. Treatment of vertigo using laser labyrinthectomy. Acta Otolaryngol,1993,113:261-262.
(收稿：1998-09-16 修回：1999-01-06), 百拇医药