出疹性疾病流行中EB病毒活动感染的调查
作者：杜文慧 孙荷 欧阳小梅 杨莉莉
单位：830001 乌鲁木齐,新疆自治区儿科研究所(杜文慧、孙荷、欧阳小梅)；新疆准东油田职工医院(杨莉莉)
关键词：麻疹；风疹；疱疹病毒4型；人；疱疹病毒科感染
中华儿科杂志/990409 【摘要】 目的 查明新疆准东油田基地学校出疹性疾病暴发的病原。方法 整群抽样采集血标本共213份，经ELISA法测麻疹及风疹抗体后，剩余血209份，以免疫酶法检测抗EB病毒壳抗原(VCA)IgM、IgA、IgG抗体，此外还检测了嗜异凝集抗体。结果 证实除有风疹、麻疹流行外，还检出EB病毒活动性感染24例。集中发生在该基地第二小学，为27.0%(20/74)。结论 在出疹性疾病中除常见的麻疹、风疹外，EB病毒活动性感染也可能存在，如无相应方法检测常易漏诊。
A survey of active EB virus infection during an outbreak of exanthematous diseases DU Wenhui, SUN He, OUYANG Xiaomei, et al. Institute of Pediatrics of Xinjiang Autonomous Region, Urumqi 830001
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To clarify the role of EB virus infection in an outbreak of exanthematous diseases that had occurred in schools in the Eastern Jungur oil field base of Xinjiang. Method Physical examination was made in outpateints and 213 serum specimens were collected by cluster sampling from kindergartens, primary and middle schools. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect specific IgM and IgG antibodies against measles and rubella virus, after which there were 209 specimens. Enzyme immuno assay (EIA) was used to detect specific IgM, IgA, and IgG antibodies against virocapsid antigen (VCA) of EB virus on 209 samples. In addition, heterophil agglutinating antibody was examined as well. Results The results showed that 24 of the 209 cases had active EB virus infection which occurred mostly in the second primary school (27.0%, 20/74). Conclusion It is possible that active EB virus infection might exist in an epidemic of examthenatous diseases in addition to measles and rubella and misdiagnosis may be made without using corresponding method of examination.
, http://www.100md.com
【Key words】 Measles Rubella Herpesvirus 4, human Herpesviridea infections
准东油田基地位于新疆阜康县境内，距县城约10公里，人口约1.5万，均为油田职工及家属。1993年底，油田基地所属小学发生出疹性疾病，逐渐向中学及幼儿园蔓延。历时约两个多月，有的学生有两次出疹史。因诊断不明，1994年初对现场进行调查，为明确诊断，除在门诊对患儿进行体检外，还在中小学及幼儿园进行了与常见的出疹性疾病有关的血清检查，并采用问卷形式调查近期出疹学生数[1]，以了解其蔓延范围。
资料和方法
一、对象
在当地出疹性疾病流行的学校及幼儿园，由老师负责分别对各班级学生进行问卷调查，了解近期出疹情况，以整群抽样方法在第二小学及第三小学各采两个班；幼儿园及中学各采集一个班血标本。上述各班学生实到人数为213名。占应到人数的90.3%(213/236)。
, 百拇医药
二、材料和方法
1.用ELISA法检测血清中抗麻疹、风疹病毒特异性IgM、IgG抗体，测后血清标本仅剩209份。
2.以免疫酶法(EIA)检测血清中抗EB病毒壳抗原(VCA)IgM、IgA、IgG抗体，以嗜异凝集试验检测嗜异凝集抗体。免疫酶法的抗原片和试剂购自中国预防医学科学院病毒学研究所。血清标本用pH 7.2的磷酸缓冲液(PBS)按1∶5，1∶10，1∶20稀释后，依次加入抗原片孔内，湿盒37℃孵育40分钟，用上述PBS洗三次，晾干，再依次加入辣根过氧化物酶标记的马抗人IgM、IgA、IgG酶，湿盒37℃孵育30分钟，PBS洗三次后浸入底物液内2～5分钟，蒸馏水漂洗一次，在光镜下找到染成棕褐色的细胞判为阳性，试验设阴性，阳性对照，详细方法参见文献[2]。
结果
一、问卷调查结果
, 百拇医药
出疹性疾病正在流行的两个小学，一个中学及一个幼儿园，共计学生1 343名，有出疹史者307名，占全体学生22.8%，其中以第二小学最高为29.9%(121/404)，幼儿园最少为11.5%(34/295)。
二、检测抗EB病毒VCAIgM、IgA、IgG结果
从表1可见EB病毒VCAIgM抗体阳性者以第二小学六年级为多，同时特异性IgA阳性者也显著多于其他班级。而209名受检者特异性IgG抗体全部为阳性，说明均已100%感染过EB病毒，所以今检出特异性IgM阳性的患儿可能是潜伏感染再激活所致。
表1 各学校抽样免疫酶法检测EB病毒结果 学校
(年级)
检测
数
, 百拇医药
抗体病毒VCA抗体阳性数
IgM
IgA
IgG
第二小学
六年级
44
14
19
44
一年级
30
2
, 百拇医药
3
30
第三小学
五年级
40
1
2
40
一年级
36
1
0
36
幼儿园
, 百拇医药
大二班
21
1
3
21
中学
一年级
38
0
3
38
合计
209
19
, 百拇医药
30
209
三、血清嗜异凝集检测结果
以≥1∶32判为阳性，共检出19例阳性者，其中7例特异性IgM也为阳性，5例虽然特异性IgM为阴性，但临床有症状或体征，如发热、皮疹、淋巴结肿大，血清中异常淋巴细胞增多，所以19例中有12例有临床参考价值，其在抽样年级中出现频率见表2。可见抗EB病毒VCA IgM抗体阳性及嗜异凝集试验中在第二小学六年级，占40.9%(18/44)，其他学校和班级中为散发。
表2 EB病毒IgM抗体和嗜异凝集抗体
(≥1∶32)出现频率(例数) 学校
(年级)
检测数
, 百拇医药
IgM
(+)
嗜异
≥1∶32
IgM及嗜异
合计
频率
(%)
(+)
第二小学
六年级
44
8
, http://www.100md.com
4
6
18
40.9
一年级
30
2
0
0
2
6.6
第三小学
五年级
40
, 百拇医药
1
1
0
2
5.0
一年级
36
0
0
1
1
2.8
幼儿园
大二班
, 百拇医药
21
1
0
0
1
4.8
中学
一年级
38
0
0
0
0
0
, 百拇医药
合计
209
12
5
7
24
11.5
四、EB病毒活动感染合并麻疹、风疹感染情况
从表3可见在所检测出的17例EB病毒活动感染者中8例为亚临床型或称隐性感染，9例有症状和体征者中6例出现皮疹，其中2例伴淋巴结肿大，1例伴发热，皮疹均为斑丘疹并有搔痒感；另3例仅有颌下淋巴结肿大。单纯EB病毒活动感染者中7例进行了白细胞分类检查，1例异常淋巴细胞为0.05，其余均在0.10以上，1例高达0.54，平均0.254，按Downey分型，Ⅱ型居多，平均0.161，Ⅰ型次之，平均0.08，Ⅲ型最少，平均0.014。表3 EB病毒感染者合并其他感染情况(例数) 学校
, 百拇医药
检测数
EB病毒感染合并
单纯EB
病毒感染
小计
麻
疹
风
疹
麻风
疹疹
第二小学
74
, http://www.100md.com 4
2
1
13
20
第三小学
76
0
0
0
3
3
幼儿园
21
, 百拇医药
0
0
0
1
1
中 学
38
0
0
0
0
0
合 计
209
, 百拇医药
4
2
1
17
24
讨论
一、EB病毒感染的临床表现和流行情况
EB病毒感染是人类常见的病毒感染性疾病之一。临床表现形式多样，且常见无症状的原发感染，也可有典型的发热、咽峡炎、淋巴结及肝脾肿大，末梢血中出现大量异常淋巴细胞，成人皮疹较少见，而儿童可达30%～60%[3]，其皮疹呈多形性。在幼儿中症状轻甚至是隐性感染，临床若无血清学或病毒学检测往往漏诊。本组24例EB病毒活动感染病例中7例同时合并麻疹或风疹，另17例单纯为EB病毒活动感染，其中9例有症状者中6例有皮疹，约占35.1%(6/17)。EB病毒流行无明显季节性，但与社会经济水平及卫生条件明显相关。发展中国家3岁儿童的血清特异性抗体阳性率为80%～90%，而西德儿童仅40%[3]。本组所采集血清标本是自幼儿园5岁组至中学一年级13岁组，209份血清中特异性IgG抗体阳性率均为100%，可见自5岁开始即达100%，间接说明新疆的经济生活水平及卫生条件。国外研究经济生活条件较高的人群中EB病毒感染主要见于16～25岁；一般为散发，较少流行，但强调在军营和教育机构可发生暴发[4]。
, http://www.100md.com
二、关于EB病毒和EB病毒的再激活
EB病毒与疱疹病毒科其他病毒一样，具有潜伏、持久和周期性复活的特点[5]。特别是在免疫抑制剂应用于器官移植时，特异性抗体滴度未增加，但口咽部已出现排毒[3]。EB病毒有高度的宿主选择性，现已证明EB病毒仅侵袭B淋巴细胞。受感染的B细胞出现抗原性改变，激起不带EB病毒的T细胞发生反应，从而对含EB病毒的B细胞具有细胞毒性。感染后的B细胞可溶解释放出子病毒，也可以保持抑制状态，而处于隐性感染。在适当的时候又能被激活。众所周知患麻疹后原结核菌素阳性可以转阴，植物血凝素试验也受影响。麻疹患儿不仅细胞免疫受抑制，且从免疫抑制中恢复也较迟缓。因此考虑在此次麻疹、风疹流行的特定条件下激活了潜伏的EB病毒，这种被激活的EB病毒感染集中在某一特定人群中，是否也可称之为流行或暴发有待商榷。据同济医科大学流行病学教研室，潘小琴主编的临床流行病学中称“某一集体或固定人群中，某病在短时间内发病数突然增多称为暴发”。
, 百拇医药
三、提高EB病毒感染诊断水平的重要性
EB病毒除常见的急性传染性单核细胞增多症(IM)外，还有慢性型，且和许多肿瘤有关。有人研究[6]感染了EB病毒的志愿者，发现病毒潜伏和复制是在不同细胞内，潜伏是在B淋巴细胞而复制是在上皮细胞，二者均为EB病毒感染伴恶性变的潜在位置。近年来也常有其他系统EB病毒感染的临床报告，如IM合并肺炎，胸膜炎，噬血细胞综合征，泪囊炎等[7-9]。因此临床实践中应给予一定的关注，在提高临床诊断水平的同时，还应加强治疗和预防的研究。
参考文献
1 杜文慧，孙荷，杨莉莉，等.新疆某油田基地麻疹风疹同时暴发的调查报告.中华儿科杂志，1995，33 ：274-275.
2 黄祯祥，主编.医学病毒学基础及实验技术.北京：科学出版社，1990.215-216.
, 百拇医药
3 李祥民.儿童EB病毒感染的研究进展.国外医学流行病学传染病学分册,1986，13：154-156.
4 Edowar DK,Christine K. Comparative diagnosis of viral diseases. New York : Acad Press，1977.216-217.
5 顾方舟，曹逸云，董德祥，等译.病毒立克次体及衣原体疾病诊断技术.北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1993.333-334.
6 Schmidt CW，Misko IS. The ecology and pathology of epstein-Barr virus. Immunol Cell Biol，1995,73:489-492.
7 Takakula Y, KobayashiY，Taknhashi Y. Infectious mononucleosis with pleural effusion.Rinshoketsucki, 1996,37:719-721.
8 Okono M, Grross TG. Epstein-Barr virus associated hemophagocytic syndrome and fatal infectious mononucleosis.Am J Hematol,1996, 53:111-113.
9 Abum NS, Sullivan TJ. Infectious mononucleosis presenting with dacryoadenitis.Ophthalmology,1996,103:776-778.
(收稿：1998-05-18 修回：1998-09-30), 百拇医药
单位：830001 乌鲁木齐,新疆自治区儿科研究所(杜文慧、孙荷、欧阳小梅)；新疆准东油田职工医院(杨莉莉)
关键词：麻疹；风疹；疱疹病毒4型；人；疱疹病毒科感染
中华儿科杂志/990409 【摘要】 目的 查明新疆准东油田基地学校出疹性疾病暴发的病原。方法 整群抽样采集血标本共213份，经ELISA法测麻疹及风疹抗体后，剩余血209份，以免疫酶法检测抗EB病毒壳抗原(VCA)IgM、IgA、IgG抗体，此外还检测了嗜异凝集抗体。结果 证实除有风疹、麻疹流行外，还检出EB病毒活动性感染24例。集中发生在该基地第二小学，为27.0%(20/74)。结论 在出疹性疾病中除常见的麻疹、风疹外，EB病毒活动性感染也可能存在，如无相应方法检测常易漏诊。
A survey of active EB virus infection during an outbreak of exanthematous diseases DU Wenhui, SUN He, OUYANG Xiaomei, et al. Institute of Pediatrics of Xinjiang Autonomous Region, Urumqi 830001
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To clarify the role of EB virus infection in an outbreak of exanthematous diseases that had occurred in schools in the Eastern Jungur oil field base of Xinjiang. Method Physical examination was made in outpateints and 213 serum specimens were collected by cluster sampling from kindergartens, primary and middle schools. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect specific IgM and IgG antibodies against measles and rubella virus, after which there were 209 specimens. Enzyme immuno assay (EIA) was used to detect specific IgM, IgA, and IgG antibodies against virocapsid antigen (VCA) of EB virus on 209 samples. In addition, heterophil agglutinating antibody was examined as well. Results The results showed that 24 of the 209 cases had active EB virus infection which occurred mostly in the second primary school (27.0%, 20/74). Conclusion It is possible that active EB virus infection might exist in an epidemic of examthenatous diseases in addition to measles and rubella and misdiagnosis may be made without using corresponding method of examination.
, http://www.100md.com
【Key words】 Measles Rubella Herpesvirus 4, human Herpesviridea infections
准东油田基地位于新疆阜康县境内，距县城约10公里，人口约1.5万，均为油田职工及家属。1993年底，油田基地所属小学发生出疹性疾病，逐渐向中学及幼儿园蔓延。历时约两个多月，有的学生有两次出疹史。因诊断不明，1994年初对现场进行调查，为明确诊断，除在门诊对患儿进行体检外，还在中小学及幼儿园进行了与常见的出疹性疾病有关的血清检查，并采用问卷形式调查近期出疹学生数[1]，以了解其蔓延范围。
资料和方法
一、对象
在当地出疹性疾病流行的学校及幼儿园，由老师负责分别对各班级学生进行问卷调查，了解近期出疹情况，以整群抽样方法在第二小学及第三小学各采两个班；幼儿园及中学各采集一个班血标本。上述各班学生实到人数为213名。占应到人数的90.3%(213/236)。
, 百拇医药
二、材料和方法
1.用ELISA法检测血清中抗麻疹、风疹病毒特异性IgM、IgG抗体，测后血清标本仅剩209份。
2.以免疫酶法(EIA)检测血清中抗EB病毒壳抗原(VCA)IgM、IgA、IgG抗体，以嗜异凝集试验检测嗜异凝集抗体。免疫酶法的抗原片和试剂购自中国预防医学科学院病毒学研究所。血清标本用pH 7.2的磷酸缓冲液(PBS)按1∶5，1∶10，1∶20稀释后，依次加入抗原片孔内，湿盒37℃孵育40分钟，用上述PBS洗三次，晾干，再依次加入辣根过氧化物酶标记的马抗人IgM、IgA、IgG酶，湿盒37℃孵育30分钟，PBS洗三次后浸入底物液内2～5分钟，蒸馏水漂洗一次，在光镜下找到染成棕褐色的细胞判为阳性，试验设阴性，阳性对照，详细方法参见文献[2]。
结果
一、问卷调查结果
, 百拇医药
出疹性疾病正在流行的两个小学，一个中学及一个幼儿园，共计学生1 343名，有出疹史者307名，占全体学生22.8%，其中以第二小学最高为29.9%(121/404)，幼儿园最少为11.5%(34/295)。
二、检测抗EB病毒VCAIgM、IgA、IgG结果
从表1可见EB病毒VCAIgM抗体阳性者以第二小学六年级为多，同时特异性IgA阳性者也显著多于其他班级。而209名受检者特异性IgG抗体全部为阳性，说明均已100%感染过EB病毒，所以今检出特异性IgM阳性的患儿可能是潜伏感染再激活所致。
表1 各学校抽样免疫酶法检测EB病毒结果 学校
(年级)
检测
数
, 百拇医药
抗体病毒VCA抗体阳性数
IgM
IgA
IgG
第二小学
六年级
44
14
19
44
一年级
30
2
, 百拇医药
3
30
第三小学
五年级
40
1
2
40
一年级
36
1
0
36
幼儿园
, 百拇医药
大二班
21
1
3
21
中学
一年级
38
0
3
38
合计
209
19
, 百拇医药
30
209
三、血清嗜异凝集检测结果
以≥1∶32判为阳性，共检出19例阳性者，其中7例特异性IgM也为阳性，5例虽然特异性IgM为阴性，但临床有症状或体征，如发热、皮疹、淋巴结肿大，血清中异常淋巴细胞增多，所以19例中有12例有临床参考价值，其在抽样年级中出现频率见表2。可见抗EB病毒VCA IgM抗体阳性及嗜异凝集试验中在第二小学六年级，占40.9%(18/44)，其他学校和班级中为散发。
表2 EB病毒IgM抗体和嗜异凝集抗体
(≥1∶32)出现频率(例数) 学校
(年级)
检测数
, 百拇医药
IgM
(+)
嗜异
≥1∶32
IgM及嗜异
合计
频率
(%)
(+)
第二小学
六年级
44
8
, http://www.100md.com
4
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18
40.9
一年级
30
2
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第三小学
五年级
40
, 百拇医药
1
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一年级
36
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幼儿园
大二班
, 百拇医药
21
1
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4.8
中学
一年级
38
0
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0
0
, 百拇医药
合计
209
12
5
7
24
11.5
四、EB病毒活动感染合并麻疹、风疹感染情况
从表3可见在所检测出的17例EB病毒活动感染者中8例为亚临床型或称隐性感染，9例有症状和体征者中6例出现皮疹，其中2例伴淋巴结肿大，1例伴发热，皮疹均为斑丘疹并有搔痒感；另3例仅有颌下淋巴结肿大。单纯EB病毒活动感染者中7例进行了白细胞分类检查，1例异常淋巴细胞为0.05，其余均在0.10以上，1例高达0.54，平均0.254，按Downey分型，Ⅱ型居多，平均0.161，Ⅰ型次之，平均0.08，Ⅲ型最少，平均0.014。表3 EB病毒感染者合并其他感染情况(例数) 学校
, 百拇医药
检测数
EB病毒感染合并
单纯EB
病毒感染
小计
麻
疹
风
疹
麻风
疹疹
第二小学
74
, http://www.100md.com 4
2
1
13
20
第三小学
76
0
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幼儿园
21
, 百拇医药
0
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1
中 学
38
0
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0
0
合 计
209
, 百拇医药
4
2
1
17
24
讨论
一、EB病毒感染的临床表现和流行情况
EB病毒感染是人类常见的病毒感染性疾病之一。临床表现形式多样，且常见无症状的原发感染，也可有典型的发热、咽峡炎、淋巴结及肝脾肿大，末梢血中出现大量异常淋巴细胞，成人皮疹较少见，而儿童可达30%～60%[3]，其皮疹呈多形性。在幼儿中症状轻甚至是隐性感染，临床若无血清学或病毒学检测往往漏诊。本组24例EB病毒活动感染病例中7例同时合并麻疹或风疹，另17例单纯为EB病毒活动感染，其中9例有症状者中6例有皮疹，约占35.1%(6/17)。EB病毒流行无明显季节性，但与社会经济水平及卫生条件明显相关。发展中国家3岁儿童的血清特异性抗体阳性率为80%～90%，而西德儿童仅40%[3]。本组所采集血清标本是自幼儿园5岁组至中学一年级13岁组，209份血清中特异性IgG抗体阳性率均为100%，可见自5岁开始即达100%，间接说明新疆的经济生活水平及卫生条件。国外研究经济生活条件较高的人群中EB病毒感染主要见于16～25岁；一般为散发，较少流行，但强调在军营和教育机构可发生暴发[4]。
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二、关于EB病毒和EB病毒的再激活
EB病毒与疱疹病毒科其他病毒一样，具有潜伏、持久和周期性复活的特点[5]。特别是在免疫抑制剂应用于器官移植时，特异性抗体滴度未增加，但口咽部已出现排毒[3]。EB病毒有高度的宿主选择性，现已证明EB病毒仅侵袭B淋巴细胞。受感染的B细胞出现抗原性改变，激起不带EB病毒的T细胞发生反应，从而对含EB病毒的B细胞具有细胞毒性。感染后的B细胞可溶解释放出子病毒，也可以保持抑制状态，而处于隐性感染。在适当的时候又能被激活。众所周知患麻疹后原结核菌素阳性可以转阴，植物血凝素试验也受影响。麻疹患儿不仅细胞免疫受抑制，且从免疫抑制中恢复也较迟缓。因此考虑在此次麻疹、风疹流行的特定条件下激活了潜伏的EB病毒，这种被激活的EB病毒感染集中在某一特定人群中，是否也可称之为流行或暴发有待商榷。据同济医科大学流行病学教研室，潘小琴主编的临床流行病学中称“某一集体或固定人群中，某病在短时间内发病数突然增多称为暴发”。
, 百拇医药
三、提高EB病毒感染诊断水平的重要性
EB病毒除常见的急性传染性单核细胞增多症(IM)外，还有慢性型，且和许多肿瘤有关。有人研究[6]感染了EB病毒的志愿者，发现病毒潜伏和复制是在不同细胞内，潜伏是在B淋巴细胞而复制是在上皮细胞，二者均为EB病毒感染伴恶性变的潜在位置。近年来也常有其他系统EB病毒感染的临床报告，如IM合并肺炎，胸膜炎，噬血细胞综合征，泪囊炎等[7-9]。因此临床实践中应给予一定的关注，在提高临床诊断水平的同时，还应加强治疗和预防的研究。
参考文献
1 杜文慧，孙荷，杨莉莉，等.新疆某油田基地麻疹风疹同时暴发的调查报告.中华儿科杂志，1995，33 ：274-275.
2 黄祯祥，主编.医学病毒学基础及实验技术.北京：科学出版社，1990.215-216.
, 百拇医药
3 李祥民.儿童EB病毒感染的研究进展.国外医学流行病学传染病学分册,1986，13：154-156.
4 Edowar DK,Christine K. Comparative diagnosis of viral diseases. New York : Acad Press，1977.216-217.
5 顾方舟，曹逸云，董德祥，等译.病毒立克次体及衣原体疾病诊断技术.北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1993.333-334.
6 Schmidt CW，Misko IS. The ecology and pathology of epstein-Barr virus. Immunol Cell Biol，1995,73:489-492.
7 Takakula Y, KobayashiY，Taknhashi Y. Infectious mononucleosis with pleural effusion.Rinshoketsucki, 1996,37:719-721.
8 Okono M, Grross TG. Epstein-Barr virus associated hemophagocytic syndrome and fatal infectious mononucleosis.Am J Hematol,1996, 53:111-113.
9 Abum NS, Sullivan TJ. Infectious mononucleosis presenting with dacryoadenitis.Ophthalmology,1996,103:776-778.
(收稿：1998-05-18 修回：1998-09-30), 百拇医药