急性坏死性胰腺炎血液流变性改变的实验研究
作者：王自法 潘承恩 梁国光 刘绍诰 张 梅
单位：王自法 潘承恩 梁国光* 刘绍诰 张 梅西安医科大学第一附属医院肝胆外科 (西安710061)
关键词：胰腺炎；血液流变学
中国血液流变学杂志990203 摘 要 胰胆管注射牛磺胆酸制备大鼠急性坏死性胰腺炎模型，检测血液流变学指标、红细胞脆性，胰腺病理学检查。结果表明：急性坏死性胰腺炎大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积均显著升高；纤维蛋白原降低。红细胞脆性增加。在急性坏死性胰胰炎时，上述血液流变性改变，可能是胰腺进行性坏死，病情恶化的主要原因之一。
AN EXPERIMENTAL STUDY OF HEMORRHEOLOGIC ALTERATION
IN ACUTE NECROTIZING PANCREATITIS
, http://www.100md.com
Wang Zifa er al
(Department of Surgery,The First Affiliated Hospital,Xi′an Medical University,Xi′an 710061)
Abstract Acute pancreatitis was induced in male Wistar rats by intrapancreatic duct injection of sodium taurocholate.Blood samples were obtained for hemorrheologic parameters and erythrocyte osmotic fragility test.Pancreatic tissue was obtained for pathologic study.Results:Blood viscosity,plasma viscosity,hematocrit,erythrocyte osmotic fragility were significantly elevated,erythrocyte sedimentation rate and fibrinogen decreased significantly in acute necrotizing pancreatitis rats compared with sham group.In rats with acute necrotizing pancreatitis,hemorrheology may be one of the important factors to the deteriorion of the disease.
, 百拇医药
Keywords Pancreatitis Hemorrheology
许多疾病如感染、恶性肿瘤、休克、等都可引起血液流变性的改变，同时血液流变性的改变又可造成微循环障碍，组织缺血，使病情进一步恶化。本课题研究了急性坏死胰腺炎(Acute Necrotizing Pancreatits-ANP),时的血液流变学改变并讨论了血液流变学改变在急性坏死胰腺炎病情演进中的作用。
1 材料与方法
1.1 大鼠急性胰腺炎模型制作
雄型Wistar大鼠40只(350g-500g)，经上腹正中切口入腹，穿刺胰胆管，注射5%牛磺胆酸(Sigma公司产品)2ml/kg，制备大鼠ANP模型20只。假手术组20只动物麻醉后，翻动十二指肠。术后3小时经原腹部切口再次入腹，抽出腹水并观察腹水的量及性质，经下腔静脉穿刺抽血检测血液液变学指标，红细胞渗透脆性试验，取胰腺行光镜病理观察。
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1.2 血液流变学检测：
血液粘度测定：从大鼠下腔静脉抽血5ml，立即应用粘度计测定全血高切变率(200-1)和低切变率(10S-1)下的粘度。血浆粘度测定：血液经离心以后，取血浆应用粘度计测定血浆的粘度。红细胞沉降率测定：应用温曲勃(Wintrobe)血沉管测定。红细胞压积测定：上述红细胞沉降率测定后温曲勃血沉管置离心机3000转/分，30分钟。纤维蛋白原测定(加热凝固法)。
1.3 红细胞渗透脆性试验：测定红细胞对不同浓度低渗盐水溶液的抵抗力。
1.4 组织学检查：HE染色，光镜检查。
1.5 统计方法：应用SAS统计软件进行t检验。
2 结 果
, 百拇医药
2.1 腹水量：术后3小时，可见腹腔内有大量的血性腹水。AP组的腹水量平均为9.00±5.93ml。
2.2 血液流变学测定：ANP大鼠各组血液流变学测定值如表1所示。
表1 ANP大鼠各组血液流变学测定(
±s)
血高切粘度
(mPa.s)
血低切粘度
(mPa.s)
血浆粘度
(mPa.s)
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血 沉
(mm/h)
RBC压积
(%)
纤维蛋白原
(g/L)
假手术组
5.03±0.39
27.03±2.19
2.23±0.06
4.00±3.08
44.96±5.01
, 百拇医药
471.80±37.86
ANP组
6.86±1.53*
33.15±5.78*
2.64±0.13*
0.14±0.37*
64.14±5.65*
52.00±89.71*
注：*与假手术组相比，P<0.01。
在诱发ANP后，大鼠血液高切变率、低切变率下的血液粘度和血浆粘度显著增加，红细胞压积显著上升，血沉变慢，纤维蛋白原减少。
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2.3 红细胞渗透脆性试验：结果表明ANP大鼠的红细胞脆性显著增加，如表2所示。
表2 红细胞脆性试验结果(±s) 组 别
开始溶血(%)
完全溶血(%)
假手术组
0.43±0.08
0.37±0.06
ANP组
0.51±0.13*
0.40±0.07*
, http://www.100md.com
注：*与假手术组相比，P<0.05。
2.4 胰腺病理检查：ANP大鼠胰腺可见水肿、出血，大量的炎症细胞浸润和腺细胞坏死。胰腺组织的坏死有两种情况：一种是溶解性坏死，细胞结构消失，其周围炎症细胞很少；另一种情况是坏死伴有大量的炎症细胞浸润，周围小血管内有微血栓形成。
3 讨 论
粘度计为恒压，变速，恒切应力型粘度计。该仪器的基本原理：有限长液柱在直的内经均匀一致的圆柱型长毛细管内流动时，液柱长度始终保持不变，以此维持恒压。改变测试管的倾斜角度，调整液柱两端的压差，以改变流速。记录流动时间，输入电脑，打印出各切应力或各切变率下的粘度值。并绘出流动曲线，给出卡森方程及线性回归系数，以验证测量结果的准确性[1]。急性坏死性胰腺炎大鼠的血液流变学出现非常显著的改变，表现为血液在低切变率和高切变率下的粘度，血浆粘度升高，红细胞压积升高，血沉变慢。纤维蛋白原显著减少。在急性胰腺炎时，出现上述改变可能是由于胰酶被激活以后，胰酶和血管活性物质等使毛细血管壁通透性增加，导致大量血浆样液体从血循环渗出至腹腔或组织间隙。液体的渗出使血液浓缩，红细胞压积增高，血液粘度增高。ANP大鼠的红细胞脆性显著增加。红细胞脆性增加说明红细胞的变形能力差，红细胞易于被碎。红细胞破碎后释放出ADP等组织因子可启动凝血系统，出现弥漫性血管内凝血，从而导致大量的纤维蛋白原消耗。在ANP大鼠胰腺组织学标本中也可以看到在微血管内有微血栓形成。ANP时上述血液流变学改变又进一步使胰腺和全身各器官的血流量和微循环灌注减少，毛细血管淤血和微血栓形成，造成胰腺和全身各器官的微循环障碍，这是造成胰腺进行性坏死和多器官功能障碍的主要原因之一[2,3]。
, 百拇医药
传统的观念认为在急性胰腺炎时，胰腺组织的坏死均是由于外溢的胰酶自身消化所致。但根据我们的研究发现，胰腺组织的坏死除有溶解性坏死以外，而另一种坏死可能是由于胰腺的微循环障碍，小血管内有微血栓形成所致的缺血性坏死。而后者可能是胰腺坏死进展，病情恶化的主要原因之一，是坏死性胰腺炎的持续性损害因子。因此有效的治疗策略应当是改善微循环，保护胰腺组织的活力，而不仅是维持血液动力学的稳定[4]。
*西安医科大学第一附属医院中西医结合研究所
参考文献
[1] 梁国光.血浆是非牛顿流体.西安医科大学学报，1997,18:152
[2] Klar E,Messmer K,Warshaw AL,et al.Pancreatic ischemia in experimental acute pancreatitis:mechanism,significance and therapy.Br J Surg,1990,77:1205
[3] Knoef WT,Kollias N,Warshaw AL,et al.Pancreatic microcirculation changes in experimental pancreatitis of graded severity in the rat.Surgery,1994;116:904
[4] 王自法，潘承恩，刘绍诰.急性胰腺炎微循环障碍与治疗.中华肝胆外科杂志，1998,4:407
(1999年1月18日收稿), http://www.100md.com
单位：王自法 潘承恩 梁国光* 刘绍诰 张 梅西安医科大学第一附属医院肝胆外科 (西安710061)
关键词：胰腺炎；血液流变学
中国血液流变学杂志990203 摘 要 胰胆管注射牛磺胆酸制备大鼠急性坏死性胰腺炎模型，检测血液流变学指标、红细胞脆性，胰腺病理学检查。结果表明：急性坏死性胰腺炎大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积均显著升高；纤维蛋白原降低。红细胞脆性增加。在急性坏死性胰胰炎时，上述血液流变性改变，可能是胰腺进行性坏死，病情恶化的主要原因之一。
AN EXPERIMENTAL STUDY OF HEMORRHEOLOGIC ALTERATION
IN ACUTE NECROTIZING PANCREATITIS
, http://www.100md.com
Wang Zifa er al
(Department of Surgery,The First Affiliated Hospital,Xi′an Medical University,Xi′an 710061)
Abstract Acute pancreatitis was induced in male Wistar rats by intrapancreatic duct injection of sodium taurocholate.Blood samples were obtained for hemorrheologic parameters and erythrocyte osmotic fragility test.Pancreatic tissue was obtained for pathologic study.Results:Blood viscosity,plasma viscosity,hematocrit,erythrocyte osmotic fragility were significantly elevated,erythrocyte sedimentation rate and fibrinogen decreased significantly in acute necrotizing pancreatitis rats compared with sham group.In rats with acute necrotizing pancreatitis,hemorrheology may be one of the important factors to the deteriorion of the disease.
, 百拇医药
Keywords Pancreatitis Hemorrheology
许多疾病如感染、恶性肿瘤、休克、等都可引起血液流变性的改变，同时血液流变性的改变又可造成微循环障碍，组织缺血，使病情进一步恶化。本课题研究了急性坏死胰腺炎(Acute Necrotizing Pancreatits-ANP),时的血液流变学改变并讨论了血液流变学改变在急性坏死胰腺炎病情演进中的作用。
1 材料与方法
1.1 大鼠急性胰腺炎模型制作
雄型Wistar大鼠40只(350g-500g)，经上腹正中切口入腹，穿刺胰胆管，注射5%牛磺胆酸(Sigma公司产品)2ml/kg，制备大鼠ANP模型20只。假手术组20只动物麻醉后，翻动十二指肠。术后3小时经原腹部切口再次入腹，抽出腹水并观察腹水的量及性质，经下腔静脉穿刺抽血检测血液液变学指标，红细胞渗透脆性试验，取胰腺行光镜病理观察。
, http://www.100md.com
1.2 血液流变学检测：
血液粘度测定：从大鼠下腔静脉抽血5ml，立即应用粘度计测定全血高切变率(200-1)和低切变率(10S-1)下的粘度。血浆粘度测定：血液经离心以后，取血浆应用粘度计测定血浆的粘度。红细胞沉降率测定：应用温曲勃(Wintrobe)血沉管测定。红细胞压积测定：上述红细胞沉降率测定后温曲勃血沉管置离心机3000转/分，30分钟。纤维蛋白原测定(加热凝固法)。
1.3 红细胞渗透脆性试验：测定红细胞对不同浓度低渗盐水溶液的抵抗力。
1.4 组织学检查：HE染色，光镜检查。
1.5 统计方法：应用SAS统计软件进行t检验。
2 结 果
, 百拇医药
2.1 腹水量：术后3小时，可见腹腔内有大量的血性腹水。AP组的腹水量平均为9.00±5.93ml。
2.2 血液流变学测定：ANP大鼠各组血液流变学测定值如表1所示。
表1 ANP大鼠各组血液流变学测定(
±s)血高切粘度
(mPa.s)
血低切粘度
(mPa.s)
血浆粘度
(mPa.s)
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血 沉
(mm/h)
RBC压积
(%)
纤维蛋白原
(g/L)
假手术组
5.03±0.39
27.03±2.19
2.23±0.06
4.00±3.08
44.96±5.01
, 百拇医药
471.80±37.86
ANP组
6.86±1.53*
33.15±5.78*
2.64±0.13*
0.14±0.37*
64.14±5.65*
52.00±89.71*
注：*与假手术组相比，P<0.01。
在诱发ANP后，大鼠血液高切变率、低切变率下的血液粘度和血浆粘度显著增加，红细胞压积显著上升，血沉变慢，纤维蛋白原减少。
, http://www.100md.com
2.3 红细胞渗透脆性试验：结果表明ANP大鼠的红细胞脆性显著增加，如表2所示。
表2 红细胞脆性试验结果(
±s) 组 别开始溶血(%)
完全溶血(%)
假手术组
0.43±0.08
0.37±0.06
ANP组
0.51±0.13*
0.40±0.07*
, http://www.100md.com
注：*与假手术组相比，P<0.05。
2.4 胰腺病理检查：ANP大鼠胰腺可见水肿、出血，大量的炎症细胞浸润和腺细胞坏死。胰腺组织的坏死有两种情况：一种是溶解性坏死，细胞结构消失，其周围炎症细胞很少；另一种情况是坏死伴有大量的炎症细胞浸润，周围小血管内有微血栓形成。
3 讨 论
粘度计为恒压，变速，恒切应力型粘度计。该仪器的基本原理：有限长液柱在直的内经均匀一致的圆柱型长毛细管内流动时，液柱长度始终保持不变，以此维持恒压。改变测试管的倾斜角度，调整液柱两端的压差，以改变流速。记录流动时间，输入电脑，打印出各切应力或各切变率下的粘度值。并绘出流动曲线，给出卡森方程及线性回归系数，以验证测量结果的准确性[1]。急性坏死性胰腺炎大鼠的血液流变学出现非常显著的改变，表现为血液在低切变率和高切变率下的粘度，血浆粘度升高，红细胞压积升高，血沉变慢。纤维蛋白原显著减少。在急性胰腺炎时，出现上述改变可能是由于胰酶被激活以后，胰酶和血管活性物质等使毛细血管壁通透性增加，导致大量血浆样液体从血循环渗出至腹腔或组织间隙。液体的渗出使血液浓缩，红细胞压积增高，血液粘度增高。ANP大鼠的红细胞脆性显著增加。红细胞脆性增加说明红细胞的变形能力差，红细胞易于被碎。红细胞破碎后释放出ADP等组织因子可启动凝血系统，出现弥漫性血管内凝血，从而导致大量的纤维蛋白原消耗。在ANP大鼠胰腺组织学标本中也可以看到在微血管内有微血栓形成。ANP时上述血液流变学改变又进一步使胰腺和全身各器官的血流量和微循环灌注减少，毛细血管淤血和微血栓形成，造成胰腺和全身各器官的微循环障碍，这是造成胰腺进行性坏死和多器官功能障碍的主要原因之一[2,3]。
, 百拇医药
传统的观念认为在急性胰腺炎时，胰腺组织的坏死均是由于外溢的胰酶自身消化所致。但根据我们的研究发现，胰腺组织的坏死除有溶解性坏死以外，而另一种坏死可能是由于胰腺的微循环障碍，小血管内有微血栓形成所致的缺血性坏死。而后者可能是胰腺坏死进展，病情恶化的主要原因之一，是坏死性胰腺炎的持续性损害因子。因此有效的治疗策略应当是改善微循环，保护胰腺组织的活力，而不仅是维持血液动力学的稳定[4]。
*西安医科大学第一附属医院中西医结合研究所
参考文献
[1] 梁国光.血浆是非牛顿流体.西安医科大学学报，1997,18:152
[2] Klar E,Messmer K,Warshaw AL,et al.Pancreatic ischemia in experimental acute pancreatitis:mechanism,significance and therapy.Br J Surg,1990,77:1205
[3] Knoef WT,Kollias N,Warshaw AL,et al.Pancreatic microcirculation changes in experimental pancreatitis of graded severity in the rat.Surgery,1994;116:904
[4] 王自法，潘承恩，刘绍诰.急性胰腺炎微循环障碍与治疗.中华肝胆外科杂志，1998,4:407
(1999年1月18日收稿), http://www.100md.com