四逆汤制剂对血瘀模型大鼠血液流变性的影响
作者：唐铁军 陈建萍 吴伟康 黄河清
单位：中山医科大学中西医结合研究所 (广州510089)
关键词：四逆汤；血液流变学；血瘀证
中国血液流变学杂志990303 摘 要 采用全自动锥板粘度计，对因寒致瘀模型大鼠的全血粘度、血浆粘度等血液流变学指标进行了检测，并观察了中药四逆汤对其影响。结果提示：四逆汤能够显著降低血瘀大鼠低切变率下全血粘度，而对血浆粘度无显著影响。证明了四逆汤具有温阳化瘀的功效。
THE EFFECT OF SINI DECOCTION ON HEMORHEOLOGY
OF BLOOD STASIS MODEL OF RAT
Tang Tiejun Chen Jianping Wu Weikang Huang Heqing
, http://www.100md.com
(Institute of Integrated Traditional Chinese & Western Medicine
Sun Yat-Sen University of Medical Science.Guangzhou 510089 China.)
Abstract In this paper,we caused a blood stasis model of rat by colding and adrenaline.Some hemorheology data such as blood viscosity,plasma viscosity were detected by cone-type viscosimeter.The effect of Sini decoction was observed.The results showed that Sini decoction can decrease the blood viscosity of low shear rate(p<0.05),but it has no effect on plasma viscosity.This result approved that Sini decoction has an effect to remove the blood stasis by warming Yang.
, 百拇医药
Keywords Sini decoction hemorheology blood stasis
四逆汤是《伤寒论》名方，为少阴证之主方，其回阳救逆的功效历经千年检验。我们以往的研究提示该方有较好的抗心肌缺血作用[1-2]，临床研究发现对冠心病患者的血液流变学有改善作用[3-4]，为了进一步探讨该方的心血管药理作用机制，本文以因寒致瘀的方法造成大鼠血瘀证模型，采用全自动锥板粘度计观察四逆汤对大鼠不同切变率全血粘度、血浆粘度等血液流变学参数的影响，以期从实验研究角度了解该方对血液流变学的作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物
Wistar大鼠38只，由中山医科大学实验动物中心提供，6-7周龄，体重180-200g，雌雄各半，随机分组。
, http://www.100md.com
1.2 试剂及仪器
异丙肾上腺素：上海生化制药厂产品，批号971205；血浆纤维蛋白原测定试剂盒：宁波市慈城生化试剂厂产品，批号980723;R80A Steeliex全自动锥板粘度计：北京世帝科学仪器公司产品。
1.3 药物制备
实验药物：附子、甘草、干姜，以4∶3∶3比例混合，经水煎提纯、浓缩干燥制成胶囊剂，每粒含生药3克。由中山医科大学及广东东莞宏远集团石龙制药厂生产联合研制。(商品名：保心胶囊，批号:980621)。对照药物：地奥心血康胶囊，成都地奥集团产品，批号：971106。
1.4 动物分组、造模及实验方法
将动物随机分为以下5组：①正常组：正常大鼠；②模型组：灌服等量自来水；③对照组：灌服地奥心血康1.6g/kg体重；④四逆汤中剂量组：灌服四逆汤制剂1.6g/kg体重；⑤四逆汤高剂量组：灌服四逆汤制剂3.5g/kg体重。各组均灌胃7天，每天3ml，于第7天除正常组以外的各组大鼠均给予0.1%肾上腺素0.9mg/kg体重，皮下注射，2次/日，两次给药之间予以冰水浸泡8分钟，次日以腹主动脉放血法取血5ml，加5%EDTA抗凝，离心分离血浆，用全自动锥板粘度计测全血粘度(η)和血浆粘度，全部过程由专人操作，检测室温为20C。比色法测定血浆纤维蛋白原。
, 百拇医药
2 结果
如附表所示，在高切变率下(230S-1)血瘀模型组全血粘度与正常组比较没有变化，在较低切变率下(30S-1、5S-1、1S-1)模型组的全血粘度和血浆粘度均高于正常组；高、中两个剂量的四逆汤制剂及对照药物地奥心血康均有降低全血粘度作用(P<0.05)，三组药物之间比较无显著差异(P>0.05)，但对血浆粘度均无降低作用；红细胞压积和纤维蛋白原各组之间比较无显著差异。
附表 四逆汤对血瘀模型大鼠血液流变学参数的影响 (
±s)
正常组
n=10
模型组
, 百拇医药
n=12
对照组
n=8
中剂量
n=10
高剂量
n=8
η230S-1
3.94±0.45
4.60±0.70
3.92±0.35
4.16±0.41
, 百拇医药
4.21±0.46
mPa.30S-1
4.28±0.32
5.29±0.74#
4.47±0.39*
4.74±0.44*
4.83±0.54
S 5S-1
5.27±0.44
7.12±0.87#
, 百拇医药
5.91±0.49*
6.26±0.56*
6.45±0.77*
1S-1
9.23±0.89
11.83±1.31#
9.57±0.79*
10.10±0.91*
10.49±1.08*
血浆粘度
, 百拇医药
1.42±0.07
1.74±0.16#
1.73±0.17#
1.69±0.15#
1.68±0.14#
红细胞压积
0.42±0.03
0.43±0.02
0.44±0.03
0.43±0.05
0.43±0.04
, 百拇医药
纤维蛋白原
2.88±1.09
3.32±1.10
3.27±1.56
2.94±1.43
3.10±1.31
注：#与正常组比较P<0.05; *与模型组比较P<0.05.
3 讨论
中医理论认为血瘀与寒凝有关，早在《内经》就有“寒气入经而稽迟，泣而不行……”的论述。因寒致瘀为血瘀证的主要病机之一。四逆汤具有温阳、回阳作用，对于四肢逆冷之症状有特效，故名为“四逆汤”。因此，该方的温阳作用必有化瘀之功，对于寒凝血瘀尤为适宜，本研究结果提示：四逆汤对低切变率下的全血粘度有显著降低作用，证明了该方确有化瘀作用，这与我们临床研究的结论相似[3-4]，寒冷对机体全血粘度的影响主要表现在低切变率粘度增高[5]，四逆汤降低低切全血粘度，证明其化瘀作用来自温阳。
, 百拇医药
全血粘度主要由红细胞聚集性和变性能力所决定，大鼠的红细胞与人相同，均为无核红细胞，其聚集性与人相对接近，大鼠血浆同所有脊椎动物血浆一样都属于非牛顿流体，具有非牛顿流体的流变学特性[6]，因此，本结果与临床研究具有一定的相关性。本研究采用自动冲洗的锥板粘度计方法，在四个不同切变率下进行检测，较全面地反映了不同切变率下的全血粘度变化。
有关中药对血液流变学的影响，研究较多的是活血化瘀类药物，得出不少有意义的结论，但对温阳类药物研究较少，根据中医理论化瘀有多种变法，活血、行气、益气、温阳均是化瘀之法，只要辩证得当均可收到化瘀之功，四逆汤的研究证明了这一点。
参考文献
1 吴伟康，等.四逆汤保护缺血心肌功能的实验研究.中国中医基础医学杂志，1995,1(3):24
2 吴伟康，等.四逆汤の心筋保护作用に关すゐ实验.中西医结合,1995,6(3):68
, 百拇医药
3 苏建文，吴伟康，林曙光等.四逆汤对经皮冠状动脉成形术血液流变性的改善作用.中国中西医结合杂志，1997,17(6):345-347
4 秦鉴，罗致强，金明华.四逆加入参汤治疗冠心病心绞痛血液流变学观察.实用中医药杂志，1997,13(2):25-26
5 朱文云，金永娟.冻伤对大鼠血液流变性的影响.中国血液流变学杂志，1996,6(2):11
6 魏彬，贝念湘，刘志强.动物血液流变学的研究进展.中国血液流变学杂志，1996,6(2):51
(1999年3月29日收稿), 百拇医药
单位：中山医科大学中西医结合研究所 (广州510089)
关键词：四逆汤；血液流变学；血瘀证
中国血液流变学杂志990303 摘 要 采用全自动锥板粘度计，对因寒致瘀模型大鼠的全血粘度、血浆粘度等血液流变学指标进行了检测，并观察了中药四逆汤对其影响。结果提示：四逆汤能够显著降低血瘀大鼠低切变率下全血粘度，而对血浆粘度无显著影响。证明了四逆汤具有温阳化瘀的功效。
THE EFFECT OF SINI DECOCTION ON HEMORHEOLOGY
OF BLOOD STASIS MODEL OF RAT
Tang Tiejun Chen Jianping Wu Weikang Huang Heqing
, http://www.100md.com
(Institute of Integrated Traditional Chinese & Western Medicine
Sun Yat-Sen University of Medical Science.Guangzhou 510089 China.)
Abstract In this paper,we caused a blood stasis model of rat by colding and adrenaline.Some hemorheology data such as blood viscosity,plasma viscosity were detected by cone-type viscosimeter.The effect of Sini decoction was observed.The results showed that Sini decoction can decrease the blood viscosity of low shear rate(p<0.05),but it has no effect on plasma viscosity.This result approved that Sini decoction has an effect to remove the blood stasis by warming Yang.
, 百拇医药
Keywords Sini decoction hemorheology blood stasis
四逆汤是《伤寒论》名方，为少阴证之主方，其回阳救逆的功效历经千年检验。我们以往的研究提示该方有较好的抗心肌缺血作用[1-2]，临床研究发现对冠心病患者的血液流变学有改善作用[3-4]，为了进一步探讨该方的心血管药理作用机制，本文以因寒致瘀的方法造成大鼠血瘀证模型，采用全自动锥板粘度计观察四逆汤对大鼠不同切变率全血粘度、血浆粘度等血液流变学参数的影响，以期从实验研究角度了解该方对血液流变学的作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物
Wistar大鼠38只，由中山医科大学实验动物中心提供，6-7周龄，体重180-200g，雌雄各半，随机分组。
, http://www.100md.com
1.2 试剂及仪器
异丙肾上腺素：上海生化制药厂产品，批号971205；血浆纤维蛋白原测定试剂盒：宁波市慈城生化试剂厂产品，批号980723;R80A Steeliex全自动锥板粘度计：北京世帝科学仪器公司产品。
1.3 药物制备
实验药物：附子、甘草、干姜，以4∶3∶3比例混合，经水煎提纯、浓缩干燥制成胶囊剂，每粒含生药3克。由中山医科大学及广东东莞宏远集团石龙制药厂生产联合研制。(商品名：保心胶囊，批号:980621)。对照药物：地奥心血康胶囊，成都地奥集团产品，批号：971106。
1.4 动物分组、造模及实验方法
将动物随机分为以下5组：①正常组：正常大鼠；②模型组：灌服等量自来水；③对照组：灌服地奥心血康1.6g/kg体重；④四逆汤中剂量组：灌服四逆汤制剂1.6g/kg体重；⑤四逆汤高剂量组：灌服四逆汤制剂3.5g/kg体重。各组均灌胃7天，每天3ml，于第7天除正常组以外的各组大鼠均给予0.1%肾上腺素0.9mg/kg体重，皮下注射，2次/日，两次给药之间予以冰水浸泡8分钟，次日以腹主动脉放血法取血5ml，加5%EDTA抗凝，离心分离血浆，用全自动锥板粘度计测全血粘度(η)和血浆粘度，全部过程由专人操作，检测室温为20C。比色法测定血浆纤维蛋白原。
, 百拇医药
2 结果
如附表所示，在高切变率下(230S-1)血瘀模型组全血粘度与正常组比较没有变化，在较低切变率下(30S-1、5S-1、1S-1)模型组的全血粘度和血浆粘度均高于正常组；高、中两个剂量的四逆汤制剂及对照药物地奥心血康均有降低全血粘度作用(P<0.05)，三组药物之间比较无显著差异(P>0.05)，但对血浆粘度均无降低作用；红细胞压积和纤维蛋白原各组之间比较无显著差异。
附表 四逆汤对血瘀模型大鼠血液流变学参数的影响 (
±s)正常组
n=10
模型组
, 百拇医药
n=12
对照组
n=8
中剂量
n=10
高剂量
n=8
η230S-1
3.94±0.45
4.60±0.70
3.92±0.35
4.16±0.41
, 百拇医药
4.21±0.46
mPa.30S-1
4.28±0.32
5.29±0.74#
4.47±0.39*
4.74±0.44*
4.83±0.54
S 5S-1
5.27±0.44
7.12±0.87#
, 百拇医药
5.91±0.49*
6.26±0.56*
6.45±0.77*
1S-1
9.23±0.89
11.83±1.31#
9.57±0.79*
10.10±0.91*
10.49±1.08*
血浆粘度
, 百拇医药
1.42±0.07
1.74±0.16#
1.73±0.17#
1.69±0.15#
1.68±0.14#
红细胞压积
0.42±0.03
0.43±0.02
0.44±0.03
0.43±0.05
0.43±0.04
, 百拇医药
纤维蛋白原
2.88±1.09
3.32±1.10
3.27±1.56
2.94±1.43
3.10±1.31
注：#与正常组比较P<0.05; *与模型组比较P<0.05.
3 讨论
中医理论认为血瘀与寒凝有关，早在《内经》就有“寒气入经而稽迟，泣而不行……”的论述。因寒致瘀为血瘀证的主要病机之一。四逆汤具有温阳、回阳作用，对于四肢逆冷之症状有特效，故名为“四逆汤”。因此，该方的温阳作用必有化瘀之功，对于寒凝血瘀尤为适宜，本研究结果提示：四逆汤对低切变率下的全血粘度有显著降低作用，证明了该方确有化瘀作用，这与我们临床研究的结论相似[3-4]，寒冷对机体全血粘度的影响主要表现在低切变率粘度增高[5]，四逆汤降低低切全血粘度，证明其化瘀作用来自温阳。
, 百拇医药
全血粘度主要由红细胞聚集性和变性能力所决定，大鼠的红细胞与人相同，均为无核红细胞，其聚集性与人相对接近，大鼠血浆同所有脊椎动物血浆一样都属于非牛顿流体，具有非牛顿流体的流变学特性[6]，因此，本结果与临床研究具有一定的相关性。本研究采用自动冲洗的锥板粘度计方法，在四个不同切变率下进行检测，较全面地反映了不同切变率下的全血粘度变化。
有关中药对血液流变学的影响，研究较多的是活血化瘀类药物，得出不少有意义的结论，但对温阳类药物研究较少，根据中医理论化瘀有多种变法，活血、行气、益气、温阳均是化瘀之法，只要辩证得当均可收到化瘀之功，四逆汤的研究证明了这一点。
参考文献
1 吴伟康，等.四逆汤保护缺血心肌功能的实验研究.中国中医基础医学杂志，1995,1(3):24
2 吴伟康，等.四逆汤の心筋保护作用に关すゐ实验.中西医结合,1995,6(3):68
, 百拇医药
3 苏建文，吴伟康，林曙光等.四逆汤对经皮冠状动脉成形术血液流变性的改善作用.中国中西医结合杂志，1997,17(6):345-347
4 秦鉴，罗致强，金明华.四逆加入参汤治疗冠心病心绞痛血液流变学观察.实用中医药杂志，1997,13(2):25-26
5 朱文云，金永娟.冻伤对大鼠血液流变性的影响.中国血液流变学杂志，1996,6(2):11
6 魏彬，贝念湘，刘志强.动物血液流变学的研究进展.中国血液流变学杂志，1996,6(2):51
(1999年3月29日收稿), 百拇医药