自发性高血压大鼠组织和体液中神经肽Y含量的变化
作者：程光华 张新路 王荣鑫
单位：程光华 张新路 王荣鑫 皖南医学院弋矶山医院核医学科(241001)
关键词：
自发性高血压大鼠组织和体液中神经肽Y含量的变化
神经肽Y(neuropeptide Y，NPY)是1982年Tatemoto等首先在猪脑中发现并提纯的一种 生物活性多肽。它与去甲肾上腺素(NE)共存于交感神经的末梢内，且常与NE共同释放，两者 作用类似，NPY并能增强NE的缩血管作用 。一般认为，NPY可能是作为一种神经递质或调质 对心血管活力发挥其调节作用。为此，本文测定了8只WKY、 8只SHR血浆、脑脊液以及心、 脑、肝、肺、肾组织中NPY的含量，以探讨NPY与自发性高血压之间的关系。
对象与方法
, 百拇医药
一、对象：
动物选择：大鼠体重均为220～340 g之间，SHR(尾动脉平均压在24 kPa以上)与WKY各8只， 雌雄各半。由上海高血压病研究所动物室提供。
二、方法：
(一)脑脊液采集：用戊巴比妥钠(30 mg/kg,ip)麻醉，于前囟前0.2 mm中线右侧旁开 3mm处，用钻头钻一直径为1.5 mm的圆孔，再用1 mL注射器抽取脑脊液注入锥形试管中，4 ℃ 3 000 r/min离心10 min，取上清液，-20℃以下保存待测。
(二)血样采集：大鼠断头后取血2 mL，注入含10%EDTA二钠30 μL和抑肽酶40 μL的试 管中混匀，4℃ 3 000 r/min离心10 min分离血浆。-20 ℃以下保存待测。
(三)组织样品处理：大鼠断头后，迅速取出心、肝、脑、肺、肾，用冷生理盐水冲洗后吸 去水分称重，各取100 mg分别放入0.5 mol/L的冰醋酸溶液中，再用匀浆器略作碾磨，然后 置于100 ℃水浴中煮沸10 min，匀浆，4℃ 3 000 r/min离心15 min后，取上清液。-20℃以 下保存待测。
, 百拇医药
(四)测定结果：采用放射免疫分析法测定，试剂盒由解放军总医院东亚免疫技术研究所 提供(灵敏度<7.7 pmol/L，批间变异系数<10%，批内变异系数<15%)，严格按说明书操 作。
(五)数据处理：以B/Bo计算结合百分率，曲线采用Log-Logit回归，求出各管的含量。所 有数据用均数±标准差(
±s)表示，显著性差别的测试采用t检验。
结 果
(一)SHR血浆与CSF中NPY与WKY相比差异均无显著。详见表1。
(二)NPY在SHR各组织中的含量：心脏组织虽略低于WKY，但差异无显著；脑组织中 则显著低于WKY；而肝、肺、肾组织中则明显高于WKY。详见表2。
, http://www.100md.com
表1 大鼠血浆与脑脊液中NPY的含量
Tab 1 The neuropeptide Y levels of plasma and cerebrospinal
fluid in rats (±s， nmol/L)
Group
n
Plasma
CSF
SHR
, http://www.100md.com
8
4.19±0.76
5.09±1.11
WKY
8
4.38±0.91*
4.77±0.99*
*P>0.05,vs SHR group
表2 大鼠各组织中NPY的含量变化
Tab 2 The neuropeptide Y levels of tissues in rats (±s ,pmol/g)
, 百拇医药
Group
n
Heart
Brain
Liver
Lung
Kidney
SHR
8
182.8±135.0
1 667.7±59 5.8
94.2±31.7
, http://www.100md.com 4 263.0±2073.8
1 159.8±254.7
WKY
8
141.6±79.1
2 498.9±910.5*
63. 1±23.8*
2 442.2±1135.6*
705.3±334.5**
*P<0.05, **P<0.01, vs SHR group
, http://www.100md.com
讨 论
NPY广泛分布于哺乳动物或人的中枢神经系统、外周神经系统以及其它组织器官中 ，其 中与心血管活动有关的中枢有密集的NPY胞体和纤维；心脏各组织均含有NPY，以冠状动脉含 量最高。NPY在循环血液中也有一定的分布，其主要来源：①可能主要来源于交感神经的释 放；②贮存于血小板内NPY释放入血浆中。本文结果证实，NPY存在于SHR和WKY的血浆、脑 脊液(CSF)及心、脑等重要器官中。
本文结果显示，SHR血浆NPY水平与WKY相比，差异无显著。有报道SHR血小板中含量较 WKY高。经研究发现，SHR与WKY相比NPY-mRNA增加，而NPY受体量相同。给SHR与WKY脑室内 注射NPY能引起血管加压反应，且SHR受体结合率增高。NPY在CSF中SHR与WKY比，差异无显著 ，其原因尚不清楚。
NPY具有持续较强的收缩血管的作用，在生理情况下参与了交感神经心血管效应的调节 作用 。本研究结果表明，SHR与WKY相比心脏中NPY含量无明显变化，其机制尚不清楚。可能 是为了使心脏保持正常的血流供应所产生的一种自身保护反应。而脑组织SHR显著低于WKY， 与Maccarrone等报道相符。高血压期间，脑血流自身调节上限上移，使脑血管保持持续的血 流灌注而免于缺血性的损害；通过对易发卒中型自发性高血压大鼠的研究中发现，大脑中动 脉丧失了跨壁压升高时发生反应性的血管收缩的能力。上述两种情况可能与脑组织中NPY的 降低有关。而SHR肾脏明显高于WKY。Tong等报道SHR泌尿生殖系组织NE和NPY含量均升高 ，他们推测SHR交感神经兴奋性增高。但未见肾脏NPY含量的报道。NPY能使肾动脉钳夹致高 血压的大鼠的肾素分泌减少，因此推论，肾脏NPY含量增加可能对于防止血压再度升高起着 一定的保护作用。SHR肺、肝脏组织中NPY也显著高于WKY，目前尚未见类似报道。Lang等 曾用NPY灌注使狗动脉血含量显著升高后，肺血液动力学仅有轻微变化；用大剂量NPY灌注狗 的左下肺后，左下肺动脉和毛细血管压均无变化，推测NPY不会导致肺动脉高压及肺水肿。 因此推论，SHR肺组织中NPY含量增加可能是高血压状态下交感神经兴奋性增高，机体产生的 一种反应。肝组织中NPY含量的升高，原因仍不清楚。是不是通过减少肝血流，以保证心、 脑血流的供应而产生的保护性反应，还有待于进一步探讨。
(1998年11月10日收稿，1999年4月20日修回), http://www.100md.com
单位：程光华 张新路 王荣鑫 皖南医学院弋矶山医院核医学科(241001)
关键词：
自发性高血压大鼠组织和体液中神经肽Y含量的变化
神经肽Y(neuropeptide Y，NPY)是1982年Tatemoto等首先在猪脑中发现并提纯的一种 生物活性多肽。它与去甲肾上腺素(NE)共存于交感神经的末梢内，且常与NE共同释放，两者 作用类似，NPY并能增强NE的缩血管作用 。一般认为，NPY可能是作为一种神经递质或调质 对心血管活力发挥其调节作用。为此，本文测定了8只WKY、 8只SHR血浆、脑脊液以及心、 脑、肝、肺、肾组织中NPY的含量，以探讨NPY与自发性高血压之间的关系。
对象与方法
, 百拇医药
一、对象：
动物选择：大鼠体重均为220～340 g之间，SHR(尾动脉平均压在24 kPa以上)与WKY各8只， 雌雄各半。由上海高血压病研究所动物室提供。
二、方法：
(一)脑脊液采集：用戊巴比妥钠(30 mg/kg,ip)麻醉，于前囟前0.2 mm中线右侧旁开 3mm处，用钻头钻一直径为1.5 mm的圆孔，再用1 mL注射器抽取脑脊液注入锥形试管中，4 ℃ 3 000 r/min离心10 min，取上清液，-20℃以下保存待测。
(二)血样采集：大鼠断头后取血2 mL，注入含10%EDTA二钠30 μL和抑肽酶40 μL的试 管中混匀，4℃ 3 000 r/min离心10 min分离血浆。-20 ℃以下保存待测。
(三)组织样品处理：大鼠断头后，迅速取出心、肝、脑、肺、肾，用冷生理盐水冲洗后吸 去水分称重，各取100 mg分别放入0.5 mol/L的冰醋酸溶液中，再用匀浆器略作碾磨，然后 置于100 ℃水浴中煮沸10 min，匀浆，4℃ 3 000 r/min离心15 min后，取上清液。-20℃以 下保存待测。
, 百拇医药
(四)测定结果：采用放射免疫分析法测定，试剂盒由解放军总医院东亚免疫技术研究所 提供(灵敏度<7.7 pmol/L，批间变异系数<10%，批内变异系数<15%)，严格按说明书操 作。
(五)数据处理：以B/Bo计算结合百分率，曲线采用Log-Logit回归，求出各管的含量。所 有数据用均数±标准差(
±s)表示，显著性差别的测试采用t检验。结 果
(一)SHR血浆与CSF中NPY与WKY相比差异均无显著。详见表1。
(二)NPY在SHR各组织中的含量：心脏组织虽略低于WKY，但差异无显著；脑组织中 则显著低于WKY；而肝、肺、肾组织中则明显高于WKY。详见表2。
, http://www.100md.com
表1 大鼠血浆与脑脊液中NPY的含量
Tab 1 The neuropeptide Y levels of plasma and cerebrospinal
fluid in rats (
±s， nmol/L)Group
n
Plasma
CSF
SHR
, http://www.100md.com
8
4.19±0.76
5.09±1.11
WKY
8
4.38±0.91*
4.77±0.99*
*P>0.05,vs SHR group
表2 大鼠各组织中NPY的含量变化
Tab 2 The neuropeptide Y levels of tissues in rats (
±s ,pmol/g), 百拇医药
Group
n
Heart
Brain
Liver
Lung
Kidney
SHR
8
182.8±135.0
1 667.7±59 5.8
94.2±31.7
, http://www.100md.com 4 263.0±2073.8
1 159.8±254.7
WKY
8
141.6±79.1
2 498.9±910.5*
63. 1±23.8*
2 442.2±1135.6*
705.3±334.5**
*P<0.05, **P<0.01, vs SHR group
, http://www.100md.com
讨 论
NPY广泛分布于哺乳动物或人的中枢神经系统、外周神经系统以及其它组织器官中 ，其 中与心血管活动有关的中枢有密集的NPY胞体和纤维；心脏各组织均含有NPY，以冠状动脉含 量最高。NPY在循环血液中也有一定的分布，其主要来源：①可能主要来源于交感神经的释 放；②贮存于血小板内NPY释放入血浆中。本文结果证实，NPY存在于SHR和WKY的血浆、脑 脊液(CSF)及心、脑等重要器官中。
本文结果显示，SHR血浆NPY水平与WKY相比，差异无显著。有报道SHR血小板中含量较 WKY高。经研究发现，SHR与WKY相比NPY-mRNA增加，而NPY受体量相同。给SHR与WKY脑室内 注射NPY能引起血管加压反应，且SHR受体结合率增高。NPY在CSF中SHR与WKY比，差异无显著 ，其原因尚不清楚。
NPY具有持续较强的收缩血管的作用，在生理情况下参与了交感神经心血管效应的调节 作用 。本研究结果表明，SHR与WKY相比心脏中NPY含量无明显变化，其机制尚不清楚。可能 是为了使心脏保持正常的血流供应所产生的一种自身保护反应。而脑组织SHR显著低于WKY， 与Maccarrone等报道相符。高血压期间，脑血流自身调节上限上移，使脑血管保持持续的血 流灌注而免于缺血性的损害；通过对易发卒中型自发性高血压大鼠的研究中发现，大脑中动 脉丧失了跨壁压升高时发生反应性的血管收缩的能力。上述两种情况可能与脑组织中NPY的 降低有关。而SHR肾脏明显高于WKY。Tong等报道SHR泌尿生殖系组织NE和NPY含量均升高 ，他们推测SHR交感神经兴奋性增高。但未见肾脏NPY含量的报道。NPY能使肾动脉钳夹致高 血压的大鼠的肾素分泌减少，因此推论，肾脏NPY含量增加可能对于防止血压再度升高起着 一定的保护作用。SHR肺、肝脏组织中NPY也显著高于WKY，目前尚未见类似报道。Lang等 曾用NPY灌注使狗动脉血含量显著升高后，肺血液动力学仅有轻微变化；用大剂量NPY灌注狗 的左下肺后，左下肺动脉和毛细血管压均无变化，推测NPY不会导致肺动脉高压及肺水肿。 因此推论，SHR肺组织中NPY含量增加可能是高血压状态下交感神经兴奋性增高，机体产生的 一种反应。肝组织中NPY含量的升高，原因仍不清楚。是不是通过减少肝血流，以保证心、 脑血流的供应而产生的保护性反应，还有待于进一步探讨。
(1998年11月10日收稿，1999年4月20日修回), http://www.100md.com