抗退饮对LP性发热家兔的下丘脑Camp含量及脑腹中隔区AVP含量的影响
作者：马翔 杨雁 陈慧敏 肖玉臣
单位：解放军260医院(石家庄 050041)
关键词：医学；中国传统；发热；腺苷环一磷酸；精氨酸加压素；热原
抗退饮对LP性发热家兔的下丘脑cAMP含量及 脑腹中隔区AVP含量的影响 摘 要 目的：探讨抗退饮解热机制。方法：建立家兔LP发热模型，观察抗退饮灌胃对家兔体温的影响和用放射免疫分析法检测腹 中隔AVP含量及下丘脑cAMP含量的变化。结果：(1)抗退饮灌胃+静注LP组的△T为(0.51±0.25)℃、中隔区AVP含量为(11.95±4.52) pg/mg、下丘脑cAMP含量为(0.913±0.450) pmol/mg、分别低于NS灌胃+静注LP组的△T(1.18±0.27)℃、中隔区AVP含量(22.37±3.58) pg/mg、下丘脑cAMP含量(1.562±0.360) pmol/mg(P<0.01)。(2)中隔区AVP含量变化与体温变化呈明显正相关(r=0.782，P<0.01)。结论：抗退饮解热机制可能是通过抑制下丘脑cAMP含量升高，同时促进腹中隔AVP释放两种途径发挥作用。
, 百拇医药
The effect of anti-virus defervescent decoction on cAMP content
of hypothalamus and ventral septal area of LP feverish rabbits
MA Xiang, YANG Yan, CHEN Hui-Min, XIAO Yu-Chen
Military Hospital 260, Shijiazhuang (050041)
Abstract AIM:To explore the mechanisms of anti-virus defervescent decoction(AVDD,KTY) decreasing leucocytic pyrogen (LP) induced fever and the normal body temperature in rabbits. METHOD：The LP-induced fever model was established in rabbits. Fever response of rabbits was observed and the arginine vasopressin (AVP) content in the ventral septal area (VSA) and cAMP content in hypothalamus (HP) were determined by radioimmunoassay following stomach infusion of AVDD.RESULTS：(1)In AVDD and LP group, the △T was(0.51±0.25)℃, AVP content in VSA was (11.95±4.52) pg/mg, cAMP content in HP was (0.91±0.45) pmol/mg. In NS and LP group, they were (1.18±0.27)℃, (22.37±3.58) pg/mg and (1.56±0.36) pmol/mg, respectively. So the result of NS and LP group was superior to that of AVDD and LP group(P<0.01). (2)The AVP content in VSA paralleled with the fluctuation of temperature (r=0.782,P<0.01).CONCLUSION：The mechanisms of AVDD in decreasing fever were probably by inhibited the increasing of cAMP content in HP, and meanwhile promoted the releasing of AVP content in VSA.
, 百拇医药
MeSH Medicine, Chinese traditional; Fever; Adenosine cyclic monophosphate; Argipressin; Pyrogens
抗病毒退烧饮(抗退饮，“KTY”)对病毒所致呼吸道感染性高热退热快而稳定[1]，经200余例高热患者服用，效甚佳。为探讨其退热机制，本文观察了该方剂对白细胞致热原(leucocytic pyrogen, LP)性发热家兔的脑腹中隔区(ventral septal area, VSA)的精氨酸加压素(arginine vasopressin, AVP)含量及下丘脑cAMP含量的影响。
材料与方法
1.实验动物及其适应：选用健康封闭群新西兰白兔，雌雄不拘，体重2～3 kg，基础直肠温度38.5～39.5℃。实验前将兔置于实验环境中模拟实验操作以适应实验条件2 ，每天3～4 h，第3 d正式实验。
, 百拇医药
2.防污染措施：按文献[2]进行。
3.测温：用ZWJC-C智能生物热源分析仪测温。将兔置于固定架内，探头插入肛内7～9 cm并固定于尾根部，待兔稳定后隔10 min记温1次，取3次的均值作为基础体温，实验中每隔10 min记温1次，实验室温度控制在20～25℃。
4.LP制备：收取兔肝素化全血，按7 μg/100 mL的剂量加入精制大肠杆菌内毒素，置37～38℃水浴中振荡培养，1 h后离心去血浆、加入与血浆等量的无热原生理盐水(normal saline, NS)，继续振荡培育18 h，离心取上清液(粗制LP)、置4℃冰箱备用。
5.抗退饮制备：
(1) 方剂组成(单位：g)：双花150、生石膏150、大青叶30、板兰根30、山豆根30、射干30、连翘30、柴胡30、贯众20、重楼20、麻黄10、党参30。
, 百拇医药
(2)制法：上药加水浸泡2 h，煮沸20 min，滤出药液，同法再煎1次。合并两次药液，脱脂棉过滤，浓缩至250 mL，每毫升约含生药2.3 g，装入瓶内、铝盖封口、消毒(100℃ 30 min)后备用。
6.动物分组及给药：将40只兔随机分4组，每组10只，分批实验，每批各组相等。I.NS+LP组：NS灌胃15 mL/kg，1 h后经耳缘静脉注射粗制LP 1 mL/kg。Ⅱ.“KTY”+LP组：抗退饮灌胃15 mL/kg， 1 h后经耳缘静脉注射粗制LP 1 mL/kg。Ⅲ.“KTY”+NS组：抗退饮灌胃15 mL/kg、1 h后经耳缘静脉注射NS 1 mL/kg。Ⅳ.NS+NS组：NS灌胃15 mL/kg，1 h后经耳缘静脉注射NS 1 mL/kg。
7.样品的收集、处理及测定：于静注后1 h时断头处死开颅、立即取出全脑、快速于视交叉与灰结节间取下丘脑并迅置液氮中、再速将余脑置沸NS中煮5 min，VSA脑组织处理用HCI法，见文献[3]，AVP含量测定按AVP放射免疫测定试剂盒(第二军医大学神经生物学教研室)说明书操作。下丘脑处理用过氯酸法，按cAMP放射免疫测定试剂盒说明书作cAMP含量测定。液体闪烁计数仪用瑞典LKB-1217型。
, 百拇医药
8.观察指标及统计方法：平均体温变化曲线；最大体温上升高度(△T)；VSA的AVP含量；下丘脑cAMP含量。实验数据用均数±标准差(
±s)表示，两组均数差异的显著性检验用t检验。用直线相关分析法判断两变量间相关情况，相关系数r的假设检验用t检验。
结 果
1.各组家兔体温变化的比较：“KTY”+LP组的平均体温变化曲线明显低于NS+LP组；“KTY”+NS组与NS+NS组的平均体温变化曲线大致在同一水平。见图1。“KTY”+LP组的△T为(0.51±0.25)℃明显低于NS+LP组的△T(1.18±0.27)℃(P<0.01)；“KTY”+NS组的△T为(0.12±0.38)℃与NS+NS组的△T(0.08±0.31)无明显差异(P>0.05)。见表1。
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Fig 1 The mean curve of rectal temperature response in various groups rabbits
图1 各组家兔的平均体温变化曲线
表1 抗退饮对家兔体温及腹中隔AVP含量、下丘脑cAMP含量的影响
Tab 1 The effect of anti-virus defervescent(KTY) on temperature,AVP content in ventral septal area and cAMP content
of hypothalamus in rabbit
Group
△T℃
, 百拇医药
AVP content in the
ventral septal area
(pg/mg)
cAMP content
in hypothalamus
(pmol/mg)
NS+LP
1.18±0.27
22.37±3.58
1.562±0.360
“KTY”+LP
, 百拇医药
0.51±0.25※
11.95±4.52※
0.913±0.450※
“KTY”+NS
0.12±0.38
6.15±3.14
0.712±0.380
NS+NS
0.08±0.31
5.32±2.36
0.692±0.290
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※P<0.01，vs NS+LP group
2.各组家兔脑腹中隔区AVP含量的比较：“KTY”+LP组的AVP含量为(11.95±4.52) pg/mg，低于NS+LP组的AVP含量(22.37±3.58) pg/mg(P<0.01)；“KTY+NS组的AVP含量(6.15±3.14) pg/mg与NS+NS组的AVP含量(5.32±2.36) pg/mg无明显差异(P>0.05)。
3.各组家兔下丘脑cAMP含量的比较：“KTY”+LP组的cAMP含量为(0.913±0.450) pmol/mg，低于NS+LP组的cAMP含量(1.562±0.360) pmol/mg(P<0.01)；“KTY”+NS组的cAMP含量(0.712±0.380) pmol/mg与NS+NS组的cAMP含量(0.692±0.290) pmol/mg无明显差异(P>0.05)。
, 百拇医药 4.相关分析：腹中隔AVP含量变化与体温变化呈明显正相关(r＝0.782，P<0.01)，与报道[4]相符。本文尚未发现腹中隔AVP含量与下丘脑cAMP含量变化有明显相关。
讨 论
从“KTY”+LP组的平均体温变化曲线及△T均低于NS+LP组可知抗退饮有明显的解热作用，此与临床研究[1]相符。由于“KTY”+NS组与NS+NS组的平均体温变化曲线及△T均无明显差别，所以，抗退饮不影响正常体温。
AVP作为一种内源性解热和限热物质已被文献反复肯定。有文献表明VSA中AVP含量下降，表明AVP释放增多。刺激AVP的内源性释放可抑制发热[5]。本实验“KTY”+LP组的AVP含量明显低于NS+LP组，前组的平均体温变化曲线及△T均低于后组，说明“KTY”+LP组的AVP释放多于NS+LP组、抗退饮可能具有促进VSA中AVP释放的作用。
, 百拇医药
cAMP是接近体温调节终末环节的发热介质，大多数学者认为“Na+/Ca2+上升下丘脑内cAMP含量上升是多种致热原引起发热的共同中介环节[6]。从本实验抗退饮+LP组的cAMP含量明显低于NS+LP组可知抗退饮有抑制下丘脑cAMP含量升高的作用。可推论，抗退饮解热机制可能是通过抑制下丘脑cAMP含量升高，同时促进VSA中AVP释放两种途径发挥作用。至于抗退饮如何抑制下丘脑cAMP升高，如何促进VSA中AVP释放，有待进一步研究。
下丘脑cAMP含量变化与VSA中AVP含量变化未出现明显相关的原因可能是(1)二者相关明显，但因样本数小而难以显示。(2)二者相关原本就不明显，体温的正调节介质总和的升温效应与负调节介质总和的降温效应，其相关必然明显，但其中任意一种正调节介质(如下丘脑cAMP)量的变化与任意一种负调节介质(如VSA的AVP)量的变化的相关就未必都明显。
参考文献
, 百拇医药
1 马 翔，吴 青，杨 雁，等.抗退饮治疗呼吸道病毒感染性高热的临床研究.中西医结合杂志，1998，7：1056.
2 王华东，胡巢凤，王彦平，等.α-MSH对家兔ET性发热反应及脑腹中隔区AVP含量的影响.中国病理生理杂志， 1998， 14(2)：130.
3 王华东，程少冰，李楚杰.家兔EGTA性发热时脑腹中隔区AVP含量的变化.中国病理生理杂志， 1995， 11(6)：587.
4 胡巢凤，李楚杰，陆大祥，等.精氨酸加压素在内毒素热限形成中的作用.中国病理生理杂志， 1994， 10(3)：245.
5 Cooper KE, Kasting NW, Lederos K, et al. Evidence supporting a role for endogenous vasopressin in natural suppression of fever in the sheep. J Physiol, 1979, 295:33.
6 李楚杰.发热机制研究的新进展.中国病理生理杂志， 1990， 6(5)：379.
(1998年8月28日收稿，1999年1月11日修回), http://www.100md.com
单位：解放军260医院(石家庄 050041)
关键词：医学；中国传统；发热；腺苷环一磷酸；精氨酸加压素；热原
抗退饮对LP性发热家兔的下丘脑cAMP含量及 脑腹中隔区AVP含量的影响 摘 要 目的：探讨抗退饮解热机制。方法：建立家兔LP发热模型，观察抗退饮灌胃对家兔体温的影响和用放射免疫分析法检测腹 中隔AVP含量及下丘脑cAMP含量的变化。结果：(1)抗退饮灌胃+静注LP组的△T为(0.51±0.25)℃、中隔区AVP含量为(11.95±4.52) pg/mg、下丘脑cAMP含量为(0.913±0.450) pmol/mg、分别低于NS灌胃+静注LP组的△T(1.18±0.27)℃、中隔区AVP含量(22.37±3.58) pg/mg、下丘脑cAMP含量(1.562±0.360) pmol/mg(P<0.01)。(2)中隔区AVP含量变化与体温变化呈明显正相关(r=0.782，P<0.01)。结论：抗退饮解热机制可能是通过抑制下丘脑cAMP含量升高，同时促进腹中隔AVP释放两种途径发挥作用。
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The effect of anti-virus defervescent decoction on cAMP content
of hypothalamus and ventral septal area of LP feverish rabbits
MA Xiang, YANG Yan, CHEN Hui-Min, XIAO Yu-Chen
Military Hospital 260, Shijiazhuang (050041)
Abstract AIM:To explore the mechanisms of anti-virus defervescent decoction(AVDD,KTY) decreasing leucocytic pyrogen (LP) induced fever and the normal body temperature in rabbits. METHOD：The LP-induced fever model was established in rabbits. Fever response of rabbits was observed and the arginine vasopressin (AVP) content in the ventral septal area (VSA) and cAMP content in hypothalamus (HP) were determined by radioimmunoassay following stomach infusion of AVDD.RESULTS：(1)In AVDD and LP group, the △T was(0.51±0.25)℃, AVP content in VSA was (11.95±4.52) pg/mg, cAMP content in HP was (0.91±0.45) pmol/mg. In NS and LP group, they were (1.18±0.27)℃, (22.37±3.58) pg/mg and (1.56±0.36) pmol/mg, respectively. So the result of NS and LP group was superior to that of AVDD and LP group(P<0.01). (2)The AVP content in VSA paralleled with the fluctuation of temperature (r=0.782,P<0.01).CONCLUSION：The mechanisms of AVDD in decreasing fever were probably by inhibited the increasing of cAMP content in HP, and meanwhile promoted the releasing of AVP content in VSA.
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MeSH Medicine, Chinese traditional; Fever; Adenosine cyclic monophosphate; Argipressin; Pyrogens
抗病毒退烧饮(抗退饮，“KTY”)对病毒所致呼吸道感染性高热退热快而稳定[1]，经200余例高热患者服用，效甚佳。为探讨其退热机制，本文观察了该方剂对白细胞致热原(leucocytic pyrogen, LP)性发热家兔的脑腹中隔区(ventral septal area, VSA)的精氨酸加压素(arginine vasopressin, AVP)含量及下丘脑cAMP含量的影响。
材料与方法
1.实验动物及其适应：选用健康封闭群新西兰白兔，雌雄不拘，体重2～3 kg，基础直肠温度38.5～39.5℃。实验前将兔置于实验环境中模拟实验操作以适应实验条件2 ，每天3～4 h，第3 d正式实验。
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2.防污染措施：按文献[2]进行。
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4.LP制备：收取兔肝素化全血，按7 μg/100 mL的剂量加入精制大肠杆菌内毒素，置37～38℃水浴中振荡培养，1 h后离心去血浆、加入与血浆等量的无热原生理盐水(normal saline, NS)，继续振荡培育18 h，离心取上清液(粗制LP)、置4℃冰箱备用。
5.抗退饮制备：
(1) 方剂组成(单位：g)：双花150、生石膏150、大青叶30、板兰根30、山豆根30、射干30、连翘30、柴胡30、贯众20、重楼20、麻黄10、党参30。
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(2)制法：上药加水浸泡2 h，煮沸20 min，滤出药液，同法再煎1次。合并两次药液，脱脂棉过滤，浓缩至250 mL，每毫升约含生药2.3 g，装入瓶内、铝盖封口、消毒(100℃ 30 min)后备用。
6.动物分组及给药：将40只兔随机分4组，每组10只，分批实验，每批各组相等。I.NS+LP组：NS灌胃15 mL/kg，1 h后经耳缘静脉注射粗制LP 1 mL/kg。Ⅱ.“KTY”+LP组：抗退饮灌胃15 mL/kg， 1 h后经耳缘静脉注射粗制LP 1 mL/kg。Ⅲ.“KTY”+NS组：抗退饮灌胃15 mL/kg、1 h后经耳缘静脉注射NS 1 mL/kg。Ⅳ.NS+NS组：NS灌胃15 mL/kg，1 h后经耳缘静脉注射NS 1 mL/kg。
7.样品的收集、处理及测定：于静注后1 h时断头处死开颅、立即取出全脑、快速于视交叉与灰结节间取下丘脑并迅置液氮中、再速将余脑置沸NS中煮5 min，VSA脑组织处理用HCI法，见文献[3]，AVP含量测定按AVP放射免疫测定试剂盒(第二军医大学神经生物学教研室)说明书操作。下丘脑处理用过氯酸法，按cAMP放射免疫测定试剂盒说明书作cAMP含量测定。液体闪烁计数仪用瑞典LKB-1217型。
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8.观察指标及统计方法：平均体温变化曲线；最大体温上升高度(△T)；VSA的AVP含量；下丘脑cAMP含量。实验数据用均数±标准差(
±s)表示，两组均数差异的显著性检验用t检验。用直线相关分析法判断两变量间相关情况，相关系数r的假设检验用t检验。结 果
1.各组家兔体温变化的比较：“KTY”+LP组的平均体温变化曲线明显低于NS+LP组；“KTY”+NS组与NS+NS组的平均体温变化曲线大致在同一水平。见图1。“KTY”+LP组的△T为(0.51±0.25)℃明显低于NS+LP组的△T(1.18±0.27)℃(P<0.01)；“KTY”+NS组的△T为(0.12±0.38)℃与NS+NS组的△T(0.08±0.31)无明显差异(P>0.05)。见表1。
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Fig 1 The mean curve of rectal temperature response in various groups rabbits
图1 各组家兔的平均体温变化曲线
表1 抗退饮对家兔体温及腹中隔AVP含量、下丘脑cAMP含量的影响
Tab 1 The effect of anti-virus defervescent(KTY) on temperature,AVP content in ventral septal area and cAMP content
of hypothalamus in rabbit
Group
△T℃
, 百拇医药
AVP content in the
ventral septal area
(pg/mg)
cAMP content
in hypothalamus
(pmol/mg)
NS+LP
1.18±0.27
22.37±3.58
1.562±0.360
“KTY”+LP
, 百拇医药
0.51±0.25※
11.95±4.52※
0.913±0.450※
“KTY”+NS
0.12±0.38
6.15±3.14
0.712±0.380
NS+NS
0.08±0.31
5.32±2.36
0.692±0.290
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※P<0.01，vs NS+LP group
2.各组家兔脑腹中隔区AVP含量的比较：“KTY”+LP组的AVP含量为(11.95±4.52) pg/mg，低于NS+LP组的AVP含量(22.37±3.58) pg/mg(P<0.01)；“KTY+NS组的AVP含量(6.15±3.14) pg/mg与NS+NS组的AVP含量(5.32±2.36) pg/mg无明显差异(P>0.05)。
3.各组家兔下丘脑cAMP含量的比较：“KTY”+LP组的cAMP含量为(0.913±0.450) pmol/mg，低于NS+LP组的cAMP含量(1.562±0.360) pmol/mg(P<0.01)；“KTY”+NS组的cAMP含量(0.712±0.380) pmol/mg与NS+NS组的cAMP含量(0.692±0.290) pmol/mg无明显差异(P>0.05)。
, 百拇医药 4.相关分析：腹中隔AVP含量变化与体温变化呈明显正相关(r＝0.782，P<0.01)，与报道[4]相符。本文尚未发现腹中隔AVP含量与下丘脑cAMP含量变化有明显相关。
讨 论
从“KTY”+LP组的平均体温变化曲线及△T均低于NS+LP组可知抗退饮有明显的解热作用，此与临床研究[1]相符。由于“KTY”+NS组与NS+NS组的平均体温变化曲线及△T均无明显差别，所以，抗退饮不影响正常体温。
AVP作为一种内源性解热和限热物质已被文献反复肯定。有文献表明VSA中AVP含量下降，表明AVP释放增多。刺激AVP的内源性释放可抑制发热[5]。本实验“KTY”+LP组的AVP含量明显低于NS+LP组，前组的平均体温变化曲线及△T均低于后组，说明“KTY”+LP组的AVP释放多于NS+LP组、抗退饮可能具有促进VSA中AVP释放的作用。
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cAMP是接近体温调节终末环节的发热介质，大多数学者认为“Na+/Ca2+上升下丘脑内cAMP含量上升是多种致热原引起发热的共同中介环节[6]。从本实验抗退饮+LP组的cAMP含量明显低于NS+LP组可知抗退饮有抑制下丘脑cAMP含量升高的作用。可推论，抗退饮解热机制可能是通过抑制下丘脑cAMP含量升高，同时促进VSA中AVP释放两种途径发挥作用。至于抗退饮如何抑制下丘脑cAMP升高，如何促进VSA中AVP释放，有待进一步研究。
下丘脑cAMP含量变化与VSA中AVP含量变化未出现明显相关的原因可能是(1)二者相关明显，但因样本数小而难以显示。(2)二者相关原本就不明显，体温的正调节介质总和的升温效应与负调节介质总和的降温效应，其相关必然明显，但其中任意一种正调节介质(如下丘脑cAMP)量的变化与任意一种负调节介质(如VSA的AVP)量的变化的相关就未必都明显。
参考文献
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1 马 翔，吴 青，杨 雁，等.抗退饮治疗呼吸道病毒感染性高热的临床研究.中西医结合杂志，1998，7：1056.
2 王华东，胡巢凤，王彦平，等.α-MSH对家兔ET性发热反应及脑腹中隔区AVP含量的影响.中国病理生理杂志， 1998， 14(2)：130.
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4 胡巢凤，李楚杰，陆大祥，等.精氨酸加压素在内毒素热限形成中的作用.中国病理生理杂志， 1994， 10(3)：245.
5 Cooper KE, Kasting NW, Lederos K, et al. Evidence supporting a role for endogenous vasopressin in natural suppression of fever in the sheep. J Physiol, 1979, 295:33.
6 李楚杰.发热机制研究的新进展.中国病理生理杂志， 1990， 6(5)：379.
(1998年8月28日收稿，1999年1月11日修回), http://www.100md.com