LPS对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞HO-1表达的影响
作者：李玉明 郑新程 刘俊昌 张敏 吴立玲 时安云 伍贻经
单位：李玉明(承德医学院低温生理研究室，河北 承德 067000)；郑新程 刘俊昌 张敏 吴立玲 时安云 伍贻经(北京医科大学病理生理学教研室，北京100083)
关键词：
中国病理生理杂志0010146
脓毒血症以内毒素血症和晚期严重的低血压为特征。我们此前在应用盲肠结扎穿孔法复制的大鼠腹膜炎脓毒血症模型上发现，术后18 h主动脉HO-1 mRNA表达急剧增多、HO活性显著增强，此时血压明显降低，在应用HO活性抑制剂后血压明显回升，提示HO/CO通路可能参与脓毒血症晚期低血压的形成。但由于脓毒血症是由内毒素(LPS)诱发的、由众多炎性细胞因子参与的相当复杂的病理过程，主动脉HO-1表达增多是由LPS直接所致还是由其它继发因素所引起尚不清楚。目的和方法：采用体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)，观察LPS诱导VSMC HO-1表达的变化和规律，进一步探讨HO/CO通路介导脓毒血症晚期血管功能调节障碍的机制。分别用10 μg/mL、30 μg/mL及50 μg/mL的LPS与培养的大鼠VSMC共同孵育6 h，以及10 μg/mL LPS与VSMC共同孵育9 h和18 h。分别观察细胞MDA含量、LDH释放量及台盼蓝摄取率的变化；Northern杂交测HO-1 mRNA表达。结果:VSMC HO-1 mRNA表达随LPS浓度的增大而增加，LPS 50 μg/mL 时HO-1 mRNA表达比对照增加176.7%；10 μg/mL LPS诱导VSMC HO-1 mRNA的表达量随诱导时间的延长而增加，18 h组HO-1 mRNA的表达量比对照增加195.6%。只有当LPS浓度增加至50 μg/mL及10 μg/mL孵育18 h，细胞MDA含量、LDH释放量及台盼蓝摄取率明显增加(P<0.05)。可见，LPS对VSMC具有双重作用。一方面，LPS可引起细胞损伤；而另一方面，LPS作为一种强应激因素又可诱导VSMC HO-1 mRNA表达，其表达量在一定的LPS浓度和作用时间内随诱导剂量的增大、诱导时间的延长而增多，即LPS诱导VSMC HO-1表达具有浓度依赖性和时间依赖性。LPS对VSMC的这种作用特征可能介导了脓毒血症晚期低血压的形成。随着脓毒血症病程的延长，体内LPS不断集聚、对VSMC持续作用，导致VSMC HO-1 mRNA表达呈递进性增加，HO-1合成必将随之不断增加，催化血红素降解形成的内源性CO将会越来越多，从而产生强大的舒血管作用。LPS介导的VSMC HO-1 mRNA表达的递进性增加可能介导了脓毒血症晚期血压的持续性降低，为其难治性的重要原因之一。
国家自然科学基金资助(No.39670308), 百拇医药
单位：李玉明(承德医学院低温生理研究室，河北 承德 067000)；郑新程 刘俊昌 张敏 吴立玲 时安云 伍贻经(北京医科大学病理生理学教研室，北京100083)
关键词：
中国病理生理杂志0010146
脓毒血症以内毒素血症和晚期严重的低血压为特征。我们此前在应用盲肠结扎穿孔法复制的大鼠腹膜炎脓毒血症模型上发现，术后18 h主动脉HO-1 mRNA表达急剧增多、HO活性显著增强，此时血压明显降低，在应用HO活性抑制剂后血压明显回升，提示HO/CO通路可能参与脓毒血症晚期低血压的形成。但由于脓毒血症是由内毒素(LPS)诱发的、由众多炎性细胞因子参与的相当复杂的病理过程，主动脉HO-1表达增多是由LPS直接所致还是由其它继发因素所引起尚不清楚。目的和方法：采用体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)，观察LPS诱导VSMC HO-1表达的变化和规律，进一步探讨HO/CO通路介导脓毒血症晚期血管功能调节障碍的机制。分别用10 μg/mL、30 μg/mL及50 μg/mL的LPS与培养的大鼠VSMC共同孵育6 h，以及10 μg/mL LPS与VSMC共同孵育9 h和18 h。分别观察细胞MDA含量、LDH释放量及台盼蓝摄取率的变化；Northern杂交测HO-1 mRNA表达。结果:VSMC HO-1 mRNA表达随LPS浓度的增大而增加，LPS 50 μg/mL 时HO-1 mRNA表达比对照增加176.7%；10 μg/mL LPS诱导VSMC HO-1 mRNA的表达量随诱导时间的延长而增加，18 h组HO-1 mRNA的表达量比对照增加195.6%。只有当LPS浓度增加至50 μg/mL及10 μg/mL孵育18 h，细胞MDA含量、LDH释放量及台盼蓝摄取率明显增加(P<0.05)。可见，LPS对VSMC具有双重作用。一方面，LPS可引起细胞损伤；而另一方面，LPS作为一种强应激因素又可诱导VSMC HO-1 mRNA表达，其表达量在一定的LPS浓度和作用时间内随诱导剂量的增大、诱导时间的延长而增多，即LPS诱导VSMC HO-1表达具有浓度依赖性和时间依赖性。LPS对VSMC的这种作用特征可能介导了脓毒血症晚期低血压的形成。随着脓毒血症病程的延长，体内LPS不断集聚、对VSMC持续作用，导致VSMC HO-1 mRNA表达呈递进性增加，HO-1合成必将随之不断增加，催化血红素降解形成的内源性CO将会越来越多，从而产生强大的舒血管作用。LPS介导的VSMC HO-1 mRNA表达的递进性增加可能介导了脓毒血症晚期血压的持续性降低，为其难治性的重要原因之一。
国家自然科学基金资助(No.39670308), 百拇医药