兔关节囊自体游离移植形成软骨的实验研究
作者：许瑞江 赫荣国 朱志宏 顾章平 马承宣 刘贵麟 游联璧 石怀银
单位：许瑞江 赫荣国 朱志宏 顾章平 马承宣 刘贵麟(解放军总医院小儿外科，北京 100853)；游联璧 石怀银(解放军总医院病理科)
关键词：关节囊；自体移植；软骨形成；兔
军医进修学院学报000215 【摘要】目的：探讨兔髋关节囊移植化生软骨的可能性，为修复股骨头软骨缺损提供新材料。方法：新西兰幼兔24只，将其随机分成实验组16只，取左髋关节囊5 mm×5mm修复同侧股骨头软骨缺损4 mm×4 mm；对照组8只，仅造成左股骨头软骨缺损4 mm×4 mm。术后左髋进行持续被动活动3周。这两组的右髋手术方法同实验组，术后让其自由活动，作为亚对照组。术后6周及12周处死动物，进行大体观察及组织学检查。结果：实验组软骨形成率占87.5%(14/16)，明显优于亚对照组的29%(7/24)(χ2=13.099，P<0.001)，对照组无软骨形成。实验组及亚对照组6周时，移植区表层可见滑膜细胞，深层为软骨细胞，12周时软骨细胞逐渐增多，对照组缺损区为纤维组织。结论：兔髋关节囊移植可化生关节软骨，持续被动活动优于自由活动。关节囊游离移植在临床上的应用还需进一步研究。
, http://www.100md.com
中图号：R322.7 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)02-0126-02
The experimental study on the neochondrogenesis in free capsular autograft of rabbit
XU Rui-jiang,HE Rong-guo,ZHU Zhi-hong,GU Zhang-ping,MA Chen-xuan,LIU Gui-lin,YOU Lian-bi,SHI Huai-yin
(Department of Pediatric Surgery,PLA General Hospital,Beijing 100853,China)
【Abstract】Objective:To determine whether the neochondrogenesis may be induced in free intraarticular autografts of the hip.Methods:In 24 young rabbits.A 5mm × 5mm synovial capsule of the hip was cut and folded back on itself so that its deep (synovial) layer was facing.The grafts were transplanted to both ipsilateral femoral head which was done by completely chondrectomized articular surfaces (4mm × 4mm) of femoral head except 8 left hips (control group).The left hip of each rabbit was then placed in the continuous passive motion (CPM) apparatus for 3 weeks.The right hip regarded as subcontrol group was kept freely motion.Results:At the time of death (6 weeks and 12 weeks postoperatively),some degree of neochondrogenesis was more evident in 87.5% (14/16) of the grafts in the group with CPM than in 29% (7/24) of the grafts in the group without CPM (χ2=13.099,P<0.001),and was not available in the control group.Cartilage cells was presented in 12 week more than in 6 week.Conclusion:This investigation showed that the chondrogenic potential of free capsular grafts was better under the stimulating effect of CPM than free motion.
, 百拇医药
Key words:cupsule;autograft;neochondrogenesis;rabbit
近年来利用自体骨膜移植修复关节软骨缺损，已获得了较好的效果[1~3]，但必须寻找供区，使手术创伤增加。为寻找修复股骨头软骨缺损提供新材料，本研究采取兔的髋关节囊移植，修复股骨头软骨缺损，在持续被动活动条件下，探讨移植关节囊化生软骨的可能性。
1 材料和方法
1.1 实验对象 新西兰兔 24 只，雌雄不限，兔龄 6～7 周，体重 1.0～1.2 kg。将兔随机分成两组，其中 16 只作为实验组，左髋关节囊移植修复左侧股骨头软骨缺损，术后左髋持续被动活动； 8 只作为对照组，左股骨头造成软骨缺损，术后左髋持续被动活动。这两组的右髋均采取关节囊移植修复股骨头软骨缺损，术后让其自由活动，作为亚对照组。
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1.2 手术方法 采用复合氯胺酮肌肉注射 (10 mg/kg)，麻醉生效后，取髋关节后外侧切口，在实验组和亚对照组中，显露髋关节囊后，切取关节囊约 5 mm × 5 mm，用自动小拉钩进一步显露髋关节，使股骨头充分显露，保留圆韧带，在股骨头的前外侧形成 4 mm × 4 mm 关节软骨全厚缺损，深达股骨头骨骺组织。将关节囊覆盖于软骨缺损区表面，关节囊滑膜面朝向关节腔，用 5-0 丝线将关节囊与软骨边缘间断缝合 4 针。对照组中，手术方法仅造成左股骨头软骨全厚缺损区 4 mm × 4 mm，没有进行关节囊移植。
1.3 术后处理 实验组及对照组当天进行左髋关节持续被动活动，速度为每圈 45 s，连用 3 周。 3 周后将兔放入兔笼中让其自由活动。亚对照组术后让其自由活动。分别于术后 6 周及 12 周用空气栓塞的方法处死动物，切取双侧股骨头标本进行大体观察及组织学检查。
1.4 统计处理 χ2 检验。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 大体形态观察 术后 6 周，实验组关节囊移植区呈乳白色，植入的关节囊与周围软骨愈合紧密，表面较光滑，关节内粘连较轻；对照组左股骨头软骨缺损区无软骨生长，骨组织裸露，关节内粘连明显；亚对照组可见关节囊移植区呈乳白色，但表面不平整。术后 12 周，实验组及亚对照组关节囊移植区仍为乳白色，呈类软骨改变；对照组仍然骨质裸露。实验组移植的 16 处关节囊中，形成类软骨样组织共 14 处，占 87.5%，亚对照组 24 处中，仅有 7 处形成类软骨样组织，占 29%。两组中有极显著差异 (χ2＝13.099，P<0.001)。
2.2 镜下所见 术后 6 周，实验组移植的关节囊区表层仍可见滑膜细胞，深层为软骨细胞。 12 周时软骨细胞逐渐增多，但表层仍有少量滑膜细胞(附图)。对照组只见纤维组织。亚对照组在 6 周和 12 周时镜下改变基本同实验组。
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附图 12周时关节囊移植区情况
A.正常软骨细胞；B.移植区软骨细胞；C.表层仍为滑膜细胞(HE染色×4倍)
3 讨 论
3.1 自体关节囊游离移植形成关节软骨的可能性 本实验采用兔的髋关节囊游离移植，术后髋关节进行持续被动活动，为移植关节囊化生软骨创造条件。结果表明，实验组进行持续被动活动的 16 处关节囊移植区中，有 14 处关节囊移植区发生类软骨样改变，占 87.5%，而亚对照组没有进行持续被动活动的 24 处关节囊移植中，仅有 7 处形成类软骨样组织，占 29%，两组之间有极显著性差异。没有进行关节囊移植的 8 处软骨缺损中未见软骨形成。说明兔的关节囊移植后可以化生为关节软骨，而且化生软骨的潜力在持续被动活动条件下明显优于自由活动。
3.2 髋关节囊移植修复软骨缺损的应用前景 本研究初步表明，兔髋关节囊游离移植在持续被动活动条件下，可化生为类软骨样组织。临床上，对于大年龄儿童先天性髋关节脱位，术中经常遇到股骨头软骨部分剥脱，如果没有进行软骨缺损的修复，将会出现关节僵硬，甚至关节强直。如果术中在胫骨切取骨膜进行游离移植，将增加手术创伤。如果术中利用多余的关节囊组织进行修复，则可避免切取骨膜所增加的手术创伤。但在临床上应用还有许多问题需要解决，如新生的软骨是否随时间的延长而出现退化，如何进一步促进其转化为符合生理要求的透明软骨，这些问题均有待于深入研究。
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基金项目：军队留学回国人员启动基金资助项目(1994-157)
作者简介：许瑞江，男，1955-09-13生，广东省揭阳市人，汉族，1988年军医进修学院硕士毕业，解放军总医院小儿外科主任医师、教授；研究方向：先天性髋脱位的治疗；发表论文23篇。电话：(010)66939872
参考文献
1，Ritsitä VA,Santavirta S.Alhopuro S et al.Periosteal and Perichondral grafting in reconstructive surgery[J].Clin Orthop,1994,302:259-265.
2，Delaney JP,O′Driscoll SW,Salter RB.Neochondrogenesis in free intraarticular periosteal autografts in an immobilized and paralyzed limb[J].Clin Orthop,1989,248:278-282.
3，Moran ME,Kim HW,Salter RB.Biological resurfacing of full-thickness deffects in patellar articular cartilage of the rabbit[J].J Bone Joint Surg,1992,74B(5):659-667.
收稿日期：1999-10-26
修回日期：1999-11-28, http://www.100md.com
单位：许瑞江 赫荣国 朱志宏 顾章平 马承宣 刘贵麟(解放军总医院小儿外科，北京 100853)；游联璧 石怀银(解放军总医院病理科)
关键词：关节囊；自体移植；软骨形成；兔
军医进修学院学报000215 【摘要】目的：探讨兔髋关节囊移植化生软骨的可能性，为修复股骨头软骨缺损提供新材料。方法：新西兰幼兔24只，将其随机分成实验组16只，取左髋关节囊5 mm×5mm修复同侧股骨头软骨缺损4 mm×4 mm；对照组8只，仅造成左股骨头软骨缺损4 mm×4 mm。术后左髋进行持续被动活动3周。这两组的右髋手术方法同实验组，术后让其自由活动，作为亚对照组。术后6周及12周处死动物，进行大体观察及组织学检查。结果：实验组软骨形成率占87.5%(14/16)，明显优于亚对照组的29%(7/24)(χ2=13.099，P<0.001)，对照组无软骨形成。实验组及亚对照组6周时，移植区表层可见滑膜细胞，深层为软骨细胞，12周时软骨细胞逐渐增多，对照组缺损区为纤维组织。结论：兔髋关节囊移植可化生关节软骨，持续被动活动优于自由活动。关节囊游离移植在临床上的应用还需进一步研究。
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中图号：R322.7 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)02-0126-02
The experimental study on the neochondrogenesis in free capsular autograft of rabbit
XU Rui-jiang,HE Rong-guo,ZHU Zhi-hong,GU Zhang-ping,MA Chen-xuan,LIU Gui-lin,YOU Lian-bi,SHI Huai-yin
(Department of Pediatric Surgery,PLA General Hospital,Beijing 100853,China)
【Abstract】Objective:To determine whether the neochondrogenesis may be induced in free intraarticular autografts of the hip.Methods:In 24 young rabbits.A 5mm × 5mm synovial capsule of the hip was cut and folded back on itself so that its deep (synovial) layer was facing.The grafts were transplanted to both ipsilateral femoral head which was done by completely chondrectomized articular surfaces (4mm × 4mm) of femoral head except 8 left hips (control group).The left hip of each rabbit was then placed in the continuous passive motion (CPM) apparatus for 3 weeks.The right hip regarded as subcontrol group was kept freely motion.Results:At the time of death (6 weeks and 12 weeks postoperatively),some degree of neochondrogenesis was more evident in 87.5% (14/16) of the grafts in the group with CPM than in 29% (7/24) of the grafts in the group without CPM (χ2=13.099,P<0.001),and was not available in the control group.Cartilage cells was presented in 12 week more than in 6 week.Conclusion:This investigation showed that the chondrogenic potential of free capsular grafts was better under the stimulating effect of CPM than free motion.
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Key words:cupsule;autograft;neochondrogenesis;rabbit
近年来利用自体骨膜移植修复关节软骨缺损，已获得了较好的效果[1~3]，但必须寻找供区，使手术创伤增加。为寻找修复股骨头软骨缺损提供新材料，本研究采取兔的髋关节囊移植，修复股骨头软骨缺损，在持续被动活动条件下，探讨移植关节囊化生软骨的可能性。
1 材料和方法
1.1 实验对象 新西兰兔 24 只，雌雄不限，兔龄 6～7 周，体重 1.0～1.2 kg。将兔随机分成两组，其中 16 只作为实验组，左髋关节囊移植修复左侧股骨头软骨缺损，术后左髋持续被动活动； 8 只作为对照组，左股骨头造成软骨缺损，术后左髋持续被动活动。这两组的右髋均采取关节囊移植修复股骨头软骨缺损，术后让其自由活动，作为亚对照组。
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1.2 手术方法 采用复合氯胺酮肌肉注射 (10 mg/kg)，麻醉生效后，取髋关节后外侧切口，在实验组和亚对照组中，显露髋关节囊后，切取关节囊约 5 mm × 5 mm，用自动小拉钩进一步显露髋关节，使股骨头充分显露，保留圆韧带，在股骨头的前外侧形成 4 mm × 4 mm 关节软骨全厚缺损，深达股骨头骨骺组织。将关节囊覆盖于软骨缺损区表面，关节囊滑膜面朝向关节腔，用 5-0 丝线将关节囊与软骨边缘间断缝合 4 针。对照组中，手术方法仅造成左股骨头软骨全厚缺损区 4 mm × 4 mm，没有进行关节囊移植。
1.3 术后处理 实验组及对照组当天进行左髋关节持续被动活动，速度为每圈 45 s，连用 3 周。 3 周后将兔放入兔笼中让其自由活动。亚对照组术后让其自由活动。分别于术后 6 周及 12 周用空气栓塞的方法处死动物，切取双侧股骨头标本进行大体观察及组织学检查。
1.4 统计处理 χ2 检验。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 大体形态观察 术后 6 周，实验组关节囊移植区呈乳白色，植入的关节囊与周围软骨愈合紧密，表面较光滑，关节内粘连较轻；对照组左股骨头软骨缺损区无软骨生长，骨组织裸露，关节内粘连明显；亚对照组可见关节囊移植区呈乳白色，但表面不平整。术后 12 周，实验组及亚对照组关节囊移植区仍为乳白色，呈类软骨改变；对照组仍然骨质裸露。实验组移植的 16 处关节囊中，形成类软骨样组织共 14 处，占 87.5%，亚对照组 24 处中，仅有 7 处形成类软骨样组织，占 29%。两组中有极显著差异 (χ2＝13.099，P<0.001)。
2.2 镜下所见 术后 6 周，实验组移植的关节囊区表层仍可见滑膜细胞，深层为软骨细胞。 12 周时软骨细胞逐渐增多，但表层仍有少量滑膜细胞(附图)。对照组只见纤维组织。亚对照组在 6 周和 12 周时镜下改变基本同实验组。
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附图 12周时关节囊移植区情况
A.正常软骨细胞；B.移植区软骨细胞；C.表层仍为滑膜细胞(HE染色×4倍)
3 讨 论
3.1 自体关节囊游离移植形成关节软骨的可能性 本实验采用兔的髋关节囊游离移植，术后髋关节进行持续被动活动，为移植关节囊化生软骨创造条件。结果表明，实验组进行持续被动活动的 16 处关节囊移植区中，有 14 处关节囊移植区发生类软骨样改变，占 87.5%，而亚对照组没有进行持续被动活动的 24 处关节囊移植中，仅有 7 处形成类软骨样组织，占 29%，两组之间有极显著性差异。没有进行关节囊移植的 8 处软骨缺损中未见软骨形成。说明兔的关节囊移植后可以化生为关节软骨，而且化生软骨的潜力在持续被动活动条件下明显优于自由活动。
3.2 髋关节囊移植修复软骨缺损的应用前景 本研究初步表明，兔髋关节囊游离移植在持续被动活动条件下，可化生为类软骨样组织。临床上，对于大年龄儿童先天性髋关节脱位，术中经常遇到股骨头软骨部分剥脱，如果没有进行软骨缺损的修复，将会出现关节僵硬，甚至关节强直。如果术中在胫骨切取骨膜进行游离移植，将增加手术创伤。如果术中利用多余的关节囊组织进行修复，则可避免切取骨膜所增加的手术创伤。但在临床上应用还有许多问题需要解决，如新生的软骨是否随时间的延长而出现退化，如何进一步促进其转化为符合生理要求的透明软骨，这些问题均有待于深入研究。
, http://www.100md.com
基金项目：军队留学回国人员启动基金资助项目(1994-157)
作者简介：许瑞江，男，1955-09-13生，广东省揭阳市人，汉族，1988年军医进修学院硕士毕业，解放军总医院小儿外科主任医师、教授；研究方向：先天性髋脱位的治疗；发表论文23篇。电话：(010)66939872
参考文献
1，Ritsitä VA,Santavirta S.Alhopuro S et al.Periosteal and Perichondral grafting in reconstructive surgery[J].Clin Orthop,1994,302:259-265.
2，Delaney JP,O′Driscoll SW,Salter RB.Neochondrogenesis in free intraarticular periosteal autografts in an immobilized and paralyzed limb[J].Clin Orthop,1989,248:278-282.
3，Moran ME,Kim HW,Salter RB.Biological resurfacing of full-thickness deffects in patellar articular cartilage of the rabbit[J].J Bone Joint Surg,1992,74B(5):659-667.
收稿日期：1999-10-26
修回日期：1999-11-28, http://www.100md.com