大鼠腹腔-肠系膜上神经节内交感节前神经纤维的来源、走行和分布
作者：佟晓杰 于频 野条良彰
单位：佟晓杰(中国医科大学基础医学院人体解剖学教研室，沈阳 110001)；于频(中国医科大学基础医学院人体解剖学教研室，沈阳 110001)；野条良彰(日本国福井医科大学第一解剖教室)
关键词：腹腔-肠系膜上神经节；交感节前纤维；菜豆白血球凝集素；大鼠
中国医科大学学报000203 摘要 目的：探讨大鼠腹腔-肠系膜上神经节内交感节前神经纤维的来源、走行及分布。方法：用嗜神经追踪剂菜豆白血球凝集素(phaseolus vulgavis leucoagglutinin，PHA-L)顺行性追踪，行PHA-L免疫组化反应ABC法。结果：分布到腹腔-肠系膜上神经节的交感节前神经纤维，来自胸8～10脊髓节段侧柱，随内脏大神经走行，在内脏大神经进入腹腔-肠系膜上神经节时，标记纤维集中成束，进入节后则立即分散分布。在节内腹侧部只见少量的标记纤维，节的中间部有大量互相交织成网状和树枝状集中分布的标记纤维，节的背侧部也只见有少量的标记纤维。节的吻侧端的标记纤维多于尾侧端。结论: 来自胸8～10脊髓节段侧柱中间外侧核的交感节前神经纤维随内脏大神经走行，进入腹腔-肠系膜上神经节，在节内呈广泛型分布。
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Origin, Run and Distribution of Preganglionic Nerve Fibers in
Celiac-Superior Mesenteric Ganglion of the Rat
Tong Xiaojie, Yu Pin，Yoshiaki Nojyo
(Department of Anatomy, College of Basic Medical Sciences, China Medical University, Shenyang，110001)
ABSTRACT Objective:To investigate the origin, run and distribution of preganglionic nerve fibers of celiac-superior mesenteric ganglion in the rat. Methods:Anterogradetrace with phaseolus vulgaris leucoagglutinin(PHA-L) immunohistochemical technique was used.Results:There were tract of labelled nerve fibers travelling through the greater splanchnic nerve into the celiac-superior mensenteric ganglion. In the ganglion the labelled nerve fibers spreaded and fibers or terminals of various type were observed in the ventrodorsal or intermidiate part of celiac-superior mesenteric ganglion.Conclusion: Preganglionic nerve fibers of celiac-superior mesenteric ganglion originate from T8～T10 spinal segment intermediolateral nucleus, run with splanchnic nerve to enter into and spread in various type in celiac superior mesenteric ganglion.
, 百拇医药
KEY WORDS celiac-superior mesenteric ganglion; PHA-L; sympathetic preganglionic fiber; rat
腹腔-肠系膜上神经节是交感节后神经元的聚合体，源于外胚层的神经嵴，在调节内脏器官的活动中起着重要作用。许多学者采用电生理细胞内记录，神经纤维追踪，共聚焦显微镜观察以及免疫组织化学等方法，对腹腔-肠系膜上神经节内细胞的形态学特征，细胞和细胞间质间的特点以及节内所含的神经肽类物质进行了研究[1～5]。然而，对腹腔-肠系膜上神经节内交感神经节前神经纤维的来源、走行以及分布和终末的形态，仍缺乏直接的形态学证明。作者用PHA-L顺行追踪法，对上述问题进行研究。
1 材料与方法
用体重200～250 g的Wistar大鼠，雌雄不限，戊巴比妥钠腹腔麻醉(40 mg/kg体重)。腹卧位固定，在背部胸7～12棘突之间切口,逐层分离,切除椎板,暴露脊髓，剪开硬脊膜，将玻璃微电板充以2% PHA-L5 μl，在胸8～10节段分三点刺入脊髓侧柱,以5 μA～7 μA电流每12 s 通7 s的脉冲间断电泳10 min,电泳后将微电极持续留置组织内5 min后取后，并缝合切口。动物饲养10 d后，深麻醉下经心脏灌流。生理盐水150 ml～200 ml快速冲洗；0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH 6.5)新配制的2%多聚甲醛液150 ml滴注；0.05 mol/L硼酸盐缓冲液(配制的2%多聚甲醛和0.1%戊二醛200 ml滴注)。固定后立即取注射区的脊髓节段、内脏大神经、腹腔-肠系膜上神经节。将所取材料放入20%蔗糖缓冲液中，4℃冰箱内过夜,明胶包埋，恒冷箱切片机连续切片，片厚45 μm，行ABC法PHA-L免疫组化反应,以正常免疫血清前处理 40℃ 1 h，紧接入抗PHA-L羊血清4℃冰箱内过夜；洗净后室温下以新混合的AB混合液浸放1 h，充分水洗后行DAB呈色反应，磷酸缓冲液漂洗，脱水，透明，封片，光镜下观察。
, 百拇医药
2 结果
2.1 腹腔-肠系膜上神经节显微解剖观察
传统的解剖学记载，腹腔神经节和肠系膜上神经节是两个分别位于同名动脉根部各自独立的交感神经节。我们在解剖显微镜下解剖暴露出大鼠的腹腔神经节和肠系膜上神经节，见到围绕腹腔干和肠系膜上动脉根部的腹腔神经节和肠系膜上神经节乃是互相融合为一的(图1)。因此，在本实验中我们称此二节为腹腔-肠系膜上神经节。
图1 腹腔-肠系膜上神经节的解剖↑：腹腔-肠系膜上神经节，镊尖：内脏大神经，☆：肾上腺
Figure 1 Anatomy of celiac-superior mesenteric ganglion. ↑:celiac-superior mesenteric ganglion; apex of tweezers:greater splanchnic nerve; ☆: suprarenal gland
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图2 脊髓胸8～10节段侧柱PHA-L注射区(↑)，免疫组化ABC法(下同)
Figure 2 Injected region of PHA-L of T8～T10 segment of spinal cord intermediolateral nucleus.↑Region of immunoreactive of PHA-L. ABC method (the same as follows)×100
图3 内脏大神经中的PHA-L标记的纤维小束(↑) ×100
Figure 3 Tract of labeled nerve fibers of PHA-L in greater splanchnic nerve(↑) ×100
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图4 腹腔-肠系膜上节腹侧部的PHA-L标记的纤维(↑) ×400
Figure 4 Labeled nerve fibers of PHA-L of ventral part in celiac-superior mesenteric ganglion(↑) ×400
图5，6 腹腔-肠系膜上节中间部呈树枝状和网状标记纤维(↑) ×400
Figure 5，6 Labeled nerve fibers of net and twig of PHA-L of medial part in celiac-superior mesenteric ganglion(↑) ×400
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图7，8 腹腔-肠系膜上节内带有许多膨体的PHA-L标记纤维及其终末(↑) ×400
Figure 7，8 Labeled nerve fibers and terminals of various types bearing the varicosities in celiac-superior mesenteric ganglion(↑) ×400
2.2 腹腔-肠系膜上神经节内交感神经纤维的来源走行和分布
镜下观察可见注射区脊髓胸8～10节段侧柱的中间带外侧核及邻近白质呈PHA-L阳性反应(图2)。通过观察内脏大神经连续切片，见到起自中间带外侧核的交感节前神经纤维随内脏大神经下行，进入腹腔后分出进入肾上腺的分支(图1)。然后进入腹腔-肠系膜上神经节。在内脏大神经内可见成束反应的PHA-L阳性纤维(图3)。内脏大神经进入腹腔-肠系膜上神经节后，节前纤维则分散走行。其分布特点是，在节的腹侧部只见到少量呈竹节状标记的纤维(图4)；在节的中间部阳性标记纤维多，分布密集，而且互相交织呈网状和树枝状(图5，6)；而靠近节的背侧部标记纤维又渐次减少，在节的吻侧端，标记纤维多于尾侧端。节内呈网状分布的标记纤维以带有许多膨体的树枝状终末分布在节细胞周围，此外，也见有带更多膨体的丛状分支(图7，8)。
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3 讨论
3.1 腹腔-肠系膜上神经节内交感节前纤维的来源和走行途径，长期以来很多学者对腹腔-肠系膜上神经节，肠系膜下神经节调节腹腔内脏器官的反射活动的研究表明[2，3，6，7]，腹腔-肠系膜上神经节和肠系膜下神经节在调节其支配的靶器官的反射活动中，通过整合来自中枢和周围的突触传入，进而调节交感传出以达到内脏反射活动的协调统一。然而，关于传导来自中枢突触冲动的交感节前纤维的来源、走行途径，尚无直接的形态学证据。本实验用PHA-L顺行追踪，观察到腹腔-肠系膜上神经节的交感节前纤维主要来源于脊髓胸8～10节段灰质中间带外侧核；通过连续追踪观察表明，被PHA-L标记的交感节前纤维，随内脏大神经走行，于腹腔-肠系膜上神经节的上部进入该节，并于节内呈广泛分布。
3.2 腹腔-肠系膜上神经节内交感节前纤维的分布特征
在以前的研究中我们较集中地观察了支配不同器官的交感节后神经元在腹腔-肠系膜上神经节和肠系膜下神经节内各自占据不同的位置(局部定位)[8～10]；以及各器官向腹腔-肠系膜上神经节和肠系膜下神经节的传入纤维投射。Miller等[5]研究指出,肠系膜上神经节内有投射到颅侧和尾侧的两种神经元，两种神经元在节内占不同的位置，而且两种神经元对来自胃肠道的刺激反应也不同，据此他们认为神经节内有形态不同和节前突触传入不同的细胞。但是，上述研究并没有提出节前纤维传入的形态学证据。本实验观察了交感节前纤维在腹腔-肠系膜上神经节内分布特征，结果表明，来自胸8～10节段灰质侧柱的交感节前纤维,随内脏大神经走行，进入腹腔-肠系膜上神经节后分成多个小束，进入腹腔-肠系膜上神经节。节前纤维在节内分布的模式是，在节的吻侧端多于尾侧端，在节的腹侧和背侧部仅见有少量的标记纤维，而节的中间部却见有大量的纤维密集分布，互相交织成网状和树枝状的纤维和终末。作者认为，交感节前纤维在腹腔-肠系膜上节的不同部位分布的数量和形态上的差异，是与该节做为腹部内脏器官反射中枢的复杂机能和形态结构密切相关的。
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参考文献
1，Decktor DL, Weems WA. An intraclleular characterization of neurons neural connexions within the left coeliac ganglion of cats. J Physiol (Lond), 1983, 341(8):197-211
2，Lindh B, Hokfelt T, Elfvin LG. Distribution and origin of peptide-containing nerve fibers in the celiac superior mesenteric ganglion of guinea-pig. Neuroscience, 1988,26:1037-1071
3，Hamaji M, Kawai Y, Kawashima Y, et al. Projections of bombesin-like immunoreactive fibers from the rat stomach to the celiac ganglion revealed by a double-labelling technique. Brain Res, 1987,416:192-194
, 百拇医药
4，Mascorro JA, Brcaux TF, Yates RD. Morphological observations of small granule-containing(chromaffin) cells in the celiac ganglion of the guinea-pig, with emphasis on cell contacts. Microsc Res Tech, 1994,29(2):169-176
5，Miller SM, Hanani M, Kuntz SM, et al. Light, electron and confocal microscopic study of the mouse superior mesenterie ganglion. J Comp Neurol, 1996, 365(3): 427-444
6，Kuramoto H, Furness JB. Distribution of enteric nerve cells that project from the small intestine to the coeliac ganglion in the guinea pig. J Auto Nerv Syst,1989, 27: (241-248)
, http://www.100md.com
7，Szurszewski JH, Miller SM. Physiology of prevertebral ganglia. In L R Johnson (ed):Physiology of the Gastrointestinal Tract, 3 rd ed. New York: Raven Press, 1994, 795-877
8，朱凤仪. 佟晓杰. 猫空回肠交感节后神经元和副交感节前神经元的局部定位. 解剖科学进展, 1996, 2(2):185～188
9，佟晓杰. 于频.猫十二指肠的植物神经支配. 解剖学杂志, 1990,13(2):100～104
10，Messenger JP, Furnes JB. Distribution of enteric nerve cells projecting to the superior and inferior mesenteric ganglia of the guinea-pig. Cell Tissue Res, 1993, 271 :333-339
(1999-12-09收稿), 百拇医药
单位：佟晓杰(中国医科大学基础医学院人体解剖学教研室，沈阳 110001)；于频(中国医科大学基础医学院人体解剖学教研室，沈阳 110001)；野条良彰(日本国福井医科大学第一解剖教室)
关键词：腹腔-肠系膜上神经节；交感节前纤维；菜豆白血球凝集素；大鼠
中国医科大学学报000203 摘要 目的：探讨大鼠腹腔-肠系膜上神经节内交感节前神经纤维的来源、走行及分布。方法：用嗜神经追踪剂菜豆白血球凝集素(phaseolus vulgavis leucoagglutinin，PHA-L)顺行性追踪，行PHA-L免疫组化反应ABC法。结果：分布到腹腔-肠系膜上神经节的交感节前神经纤维，来自胸8～10脊髓节段侧柱，随内脏大神经走行，在内脏大神经进入腹腔-肠系膜上神经节时，标记纤维集中成束，进入节后则立即分散分布。在节内腹侧部只见少量的标记纤维，节的中间部有大量互相交织成网状和树枝状集中分布的标记纤维，节的背侧部也只见有少量的标记纤维。节的吻侧端的标记纤维多于尾侧端。结论: 来自胸8～10脊髓节段侧柱中间外侧核的交感节前神经纤维随内脏大神经走行，进入腹腔-肠系膜上神经节，在节内呈广泛型分布。
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Origin, Run and Distribution of Preganglionic Nerve Fibers in
Celiac-Superior Mesenteric Ganglion of the Rat
Tong Xiaojie, Yu Pin，Yoshiaki Nojyo
(Department of Anatomy, College of Basic Medical Sciences, China Medical University, Shenyang，110001)
ABSTRACT Objective:To investigate the origin, run and distribution of preganglionic nerve fibers of celiac-superior mesenteric ganglion in the rat. Methods:Anterogradetrace with phaseolus vulgaris leucoagglutinin(PHA-L) immunohistochemical technique was used.Results:There were tract of labelled nerve fibers travelling through the greater splanchnic nerve into the celiac-superior mensenteric ganglion. In the ganglion the labelled nerve fibers spreaded and fibers or terminals of various type were observed in the ventrodorsal or intermidiate part of celiac-superior mesenteric ganglion.Conclusion: Preganglionic nerve fibers of celiac-superior mesenteric ganglion originate from T8～T10 spinal segment intermediolateral nucleus, run with splanchnic nerve to enter into and spread in various type in celiac superior mesenteric ganglion.
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KEY WORDS celiac-superior mesenteric ganglion; PHA-L; sympathetic preganglionic fiber; rat
腹腔-肠系膜上神经节是交感节后神经元的聚合体，源于外胚层的神经嵴，在调节内脏器官的活动中起着重要作用。许多学者采用电生理细胞内记录，神经纤维追踪，共聚焦显微镜观察以及免疫组织化学等方法，对腹腔-肠系膜上神经节内细胞的形态学特征，细胞和细胞间质间的特点以及节内所含的神经肽类物质进行了研究[1～5]。然而，对腹腔-肠系膜上神经节内交感神经节前神经纤维的来源、走行以及分布和终末的形态，仍缺乏直接的形态学证明。作者用PHA-L顺行追踪法，对上述问题进行研究。
1 材料与方法
用体重200～250 g的Wistar大鼠，雌雄不限，戊巴比妥钠腹腔麻醉(40 mg/kg体重)。腹卧位固定，在背部胸7～12棘突之间切口,逐层分离,切除椎板,暴露脊髓，剪开硬脊膜，将玻璃微电板充以2% PHA-L5 μl，在胸8～10节段分三点刺入脊髓侧柱,以5 μA～7 μA电流每12 s 通7 s的脉冲间断电泳10 min,电泳后将微电极持续留置组织内5 min后取后，并缝合切口。动物饲养10 d后，深麻醉下经心脏灌流。生理盐水150 ml～200 ml快速冲洗；0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH 6.5)新配制的2%多聚甲醛液150 ml滴注；0.05 mol/L硼酸盐缓冲液(配制的2%多聚甲醛和0.1%戊二醛200 ml滴注)。固定后立即取注射区的脊髓节段、内脏大神经、腹腔-肠系膜上神经节。将所取材料放入20%蔗糖缓冲液中，4℃冰箱内过夜,明胶包埋，恒冷箱切片机连续切片，片厚45 μm，行ABC法PHA-L免疫组化反应,以正常免疫血清前处理 40℃ 1 h，紧接入抗PHA-L羊血清4℃冰箱内过夜；洗净后室温下以新混合的AB混合液浸放1 h，充分水洗后行DAB呈色反应，磷酸缓冲液漂洗，脱水，透明，封片，光镜下观察。
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2 结果
2.1 腹腔-肠系膜上神经节显微解剖观察
传统的解剖学记载，腹腔神经节和肠系膜上神经节是两个分别位于同名动脉根部各自独立的交感神经节。我们在解剖显微镜下解剖暴露出大鼠的腹腔神经节和肠系膜上神经节，见到围绕腹腔干和肠系膜上动脉根部的腹腔神经节和肠系膜上神经节乃是互相融合为一的(图1)。因此，在本实验中我们称此二节为腹腔-肠系膜上神经节。
图1 腹腔-肠系膜上神经节的解剖↑：腹腔-肠系膜上神经节，镊尖：内脏大神经，☆：肾上腺
Figure 1 Anatomy of celiac-superior mesenteric ganglion. ↑:celiac-superior mesenteric ganglion; apex of tweezers:greater splanchnic nerve; ☆: suprarenal gland
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图2 脊髓胸8～10节段侧柱PHA-L注射区(↑)，免疫组化ABC法(下同)
Figure 2 Injected region of PHA-L of T8～T10 segment of spinal cord intermediolateral nucleus.↑Region of immunoreactive of PHA-L. ABC method (the same as follows)×100
图3 内脏大神经中的PHA-L标记的纤维小束(↑) ×100
Figure 3 Tract of labeled nerve fibers of PHA-L in greater splanchnic nerve(↑) ×100
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图4 腹腔-肠系膜上节腹侧部的PHA-L标记的纤维(↑) ×400
Figure 4 Labeled nerve fibers of PHA-L of ventral part in celiac-superior mesenteric ganglion(↑) ×400
图5，6 腹腔-肠系膜上节中间部呈树枝状和网状标记纤维(↑) ×400
Figure 5，6 Labeled nerve fibers of net and twig of PHA-L of medial part in celiac-superior mesenteric ganglion(↑) ×400
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图7，8 腹腔-肠系膜上节内带有许多膨体的PHA-L标记纤维及其终末(↑) ×400
Figure 7，8 Labeled nerve fibers and terminals of various types bearing the varicosities in celiac-superior mesenteric ganglion(↑) ×400
2.2 腹腔-肠系膜上神经节内交感神经纤维的来源走行和分布
镜下观察可见注射区脊髓胸8～10节段侧柱的中间带外侧核及邻近白质呈PHA-L阳性反应(图2)。通过观察内脏大神经连续切片，见到起自中间带外侧核的交感节前神经纤维随内脏大神经下行，进入腹腔后分出进入肾上腺的分支(图1)。然后进入腹腔-肠系膜上神经节。在内脏大神经内可见成束反应的PHA-L阳性纤维(图3)。内脏大神经进入腹腔-肠系膜上神经节后，节前纤维则分散走行。其分布特点是，在节的腹侧部只见到少量呈竹节状标记的纤维(图4)；在节的中间部阳性标记纤维多，分布密集，而且互相交织呈网状和树枝状(图5，6)；而靠近节的背侧部标记纤维又渐次减少，在节的吻侧端，标记纤维多于尾侧端。节内呈网状分布的标记纤维以带有许多膨体的树枝状终末分布在节细胞周围，此外，也见有带更多膨体的丛状分支(图7，8)。
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3 讨论
3.1 腹腔-肠系膜上神经节内交感节前纤维的来源和走行途径，长期以来很多学者对腹腔-肠系膜上神经节，肠系膜下神经节调节腹腔内脏器官的反射活动的研究表明[2，3，6，7]，腹腔-肠系膜上神经节和肠系膜下神经节在调节其支配的靶器官的反射活动中，通过整合来自中枢和周围的突触传入，进而调节交感传出以达到内脏反射活动的协调统一。然而，关于传导来自中枢突触冲动的交感节前纤维的来源、走行途径，尚无直接的形态学证据。本实验用PHA-L顺行追踪，观察到腹腔-肠系膜上神经节的交感节前纤维主要来源于脊髓胸8～10节段灰质中间带外侧核；通过连续追踪观察表明，被PHA-L标记的交感节前纤维，随内脏大神经走行，于腹腔-肠系膜上神经节的上部进入该节，并于节内呈广泛分布。
3.2 腹腔-肠系膜上神经节内交感节前纤维的分布特征
在以前的研究中我们较集中地观察了支配不同器官的交感节后神经元在腹腔-肠系膜上神经节和肠系膜下神经节内各自占据不同的位置(局部定位)[8～10]；以及各器官向腹腔-肠系膜上神经节和肠系膜下神经节的传入纤维投射。Miller等[5]研究指出,肠系膜上神经节内有投射到颅侧和尾侧的两种神经元，两种神经元在节内占不同的位置，而且两种神经元对来自胃肠道的刺激反应也不同，据此他们认为神经节内有形态不同和节前突触传入不同的细胞。但是，上述研究并没有提出节前纤维传入的形态学证据。本实验观察了交感节前纤维在腹腔-肠系膜上神经节内分布特征，结果表明，来自胸8～10节段灰质侧柱的交感节前纤维,随内脏大神经走行，进入腹腔-肠系膜上神经节后分成多个小束，进入腹腔-肠系膜上神经节。节前纤维在节内分布的模式是，在节的吻侧端多于尾侧端，在节的腹侧和背侧部仅见有少量的标记纤维，而节的中间部却见有大量的纤维密集分布，互相交织成网状和树枝状的纤维和终末。作者认为，交感节前纤维在腹腔-肠系膜上节的不同部位分布的数量和形态上的差异，是与该节做为腹部内脏器官反射中枢的复杂机能和形态结构密切相关的。
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1，Decktor DL, Weems WA. An intraclleular characterization of neurons neural connexions within the left coeliac ganglion of cats. J Physiol (Lond), 1983, 341(8):197-211
2，Lindh B, Hokfelt T, Elfvin LG. Distribution and origin of peptide-containing nerve fibers in the celiac superior mesenteric ganglion of guinea-pig. Neuroscience, 1988,26:1037-1071
3，Hamaji M, Kawai Y, Kawashima Y, et al. Projections of bombesin-like immunoreactive fibers from the rat stomach to the celiac ganglion revealed by a double-labelling technique. Brain Res, 1987,416:192-194
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4，Mascorro JA, Brcaux TF, Yates RD. Morphological observations of small granule-containing(chromaffin) cells in the celiac ganglion of the guinea-pig, with emphasis on cell contacts. Microsc Res Tech, 1994,29(2):169-176
5，Miller SM, Hanani M, Kuntz SM, et al. Light, electron and confocal microscopic study of the mouse superior mesenterie ganglion. J Comp Neurol, 1996, 365(3): 427-444
6，Kuramoto H, Furness JB. Distribution of enteric nerve cells that project from the small intestine to the coeliac ganglion in the guinea pig. J Auto Nerv Syst,1989, 27: (241-248)
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7，Szurszewski JH, Miller SM. Physiology of prevertebral ganglia. In L R Johnson (ed):Physiology of the Gastrointestinal Tract, 3 rd ed. New York: Raven Press, 1994, 795-877
8，朱凤仪. 佟晓杰. 猫空回肠交感节后神经元和副交感节前神经元的局部定位. 解剖科学进展, 1996, 2(2):185～188
9，佟晓杰. 于频.猫十二指肠的植物神经支配. 解剖学杂志, 1990,13(2):100～104
10，Messenger JP, Furnes JB. Distribution of enteric nerve cells projecting to the superior and inferior mesenteric ganglia of the guinea-pig. Cell Tissue Res, 1993, 271 :333-339
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