HPLC法测定卡瓦胡椒中不同部位卡瓦内酯的含量
作者：曾建国 宋云飞 侯团章 陈玉秀
单位：曾建国 湖南华湘宏生药业发展公司 长沙 40007；宋云飞 湖南宏生堂制药有限公司；侯团章 陈玉秀 湖南宏生药物研究所
关键词：
中草药990916 卡瓦胡椒Piper methysticum是一种生长于热带及亚热带地区的低矮灌木，广泛分布于南太平洋群岛，具有镇静、催眠、抗菌、止痛等多方面的药理作用，在欧美等地广泛应用于营养补充剂和草药制剂等。我们采用HPLC的方法对不同部位的药材卡瓦内酯(kavalactones)含量进行监控，用以指导原药材的进口采购。
1 材料与仪器
材料：卡瓦胡椒购自斐济，均已晒干，其中包括茎、茎结节、根、根与茎的结节。Perkin-Elrmer高效液相色谱仪(美国)，包括：Serries-200高压泵，785A检测器，Turbo色谱工作站。
, http://www.100md.com
甲醇、磷酸为分析纯，乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，kavain对照品购自美国。
2 实验方法
2.1 色谱条件：色谱柱：Hypersil ODS(4.6 mm×250 mm)5 μ；流动相：甲醇-乙腈-水-磷酸(150∶150∶200∶0.2)，流速：0.8 mL/min;检测波长：256 nm；柱温为室温。
2.2 对照品溶液的制备：精密称取kavain标准品10 mg置100 mL的容量瓶中，加少量甲醇溶解，然后定容至刻度，配成浓度为0.1 mg/mL的溶液。
2.3 供试品溶液的制备：卡瓦胡椒原药材打粉(过80目筛)，混合均匀，精密称取原药材粉末0.2 g，置50 mL的圆底烧瓶中，加入25 mL氯仿50℃回流提取3h，过滤，滤液减压浓缩至干，残留物用少许甲醇溶解，并转移至25 mL的容量瓶中，定容，摇匀。取少许用0.45 μm的微孔滤膜过滤。
, 百拇医药
2.4 测定：取对照品溶液和供试品溶液各5μL注入液相色谱仪进行分析(见图1)。
1～6 化合物见表1
图1 卡瓦胡椒药材HPLC图
除kavain外，其余峰位置的确认及其换算因子均系参考文献[3，4]而得。总内酯含量按下式计算：
Ai:为某一种内酯的峰面积；As:为标准品峰面积；Cs:为标准品的浓度(mg/mL)；V:为样品定容的体积(mL)；W样:为样品的称样量(g)；fi：为相关因子。
表1 各成分的fi 编号
, 百拇医药
1
2
3
4
5
6
成分名称
methylsticin
dihydromethylsticin
kavain
dihydrokavain
demethoxyyangonin
, 百拇医药
yangonin
换算因子(fi)
2.04
2.38
1
3.33
1.89
2.78
3 结果与讨论
3.1 对同一株原植物不同部位分别进行含量分析，每个样品分析5次，结果见表2。
表2 同株植物不同部位的总
内酯含量分析结果(%) 植株部位
, 百拇医药
总内酯含量
RSD(%)
枝皮
3.25
3.37
3.45
3.52
3.28
3.37
3.36
茎
2.56
, 百拇医药
2.59
2.88
2.73
2.65
2.68
4.78
茎结节
4.15
4.12
4.23
4.09
4.15
4.15
, http://www.100md.com
1.26
茎与根的结节
5.95
6.02
6.14
6.21
6.08
6.08
1.67
根
8.58
8.75
8.66
, http://www.100md.com
8.87
8.52
8.68
1.60
表2表明，该株卡瓦胡椒中卡瓦内酯以根的含量最高，其次为根与茎的结节，茎的含量最低。
3.2 对随机抽取的三支根的不同部位进行含量分析，其结果见表3。
表3 三支根的不同部位含量分析结果(%) 编号
茎与根的结节
主根
侧根
1
, 百拇医药
7.45
11.29
12.70
2
5.73
6.11
8.12
3
5.11
7.33
8.35
6.10
8.24
9.72
S
1.21
2.71
2.58
方差分析表明，根的三个部位之间的含量有显著性差异(0.01
收稿日期：1998-11-30, http://www.100md.com
单位：曾建国 湖南华湘宏生药业发展公司 长沙 40007；宋云飞 湖南宏生堂制药有限公司；侯团章 陈玉秀 湖南宏生药物研究所
关键词：
中草药990916 卡瓦胡椒Piper methysticum是一种生长于热带及亚热带地区的低矮灌木，广泛分布于南太平洋群岛，具有镇静、催眠、抗菌、止痛等多方面的药理作用，在欧美等地广泛应用于营养补充剂和草药制剂等。我们采用HPLC的方法对不同部位的药材卡瓦内酯(kavalactones)含量进行监控，用以指导原药材的进口采购。
1 材料与仪器
材料：卡瓦胡椒购自斐济，均已晒干，其中包括茎、茎结节、根、根与茎的结节。Perkin-Elrmer高效液相色谱仪(美国)，包括：Serries-200高压泵，785A检测器，Turbo色谱工作站。
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甲醇、磷酸为分析纯，乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，kavain对照品购自美国。
2 实验方法
2.1 色谱条件：色谱柱：Hypersil ODS(4.6 mm×250 mm)5 μ；流动相：甲醇-乙腈-水-磷酸(150∶150∶200∶0.2)，流速：0.8 mL/min;检测波长：256 nm；柱温为室温。
2.2 对照品溶液的制备：精密称取kavain标准品10 mg置100 mL的容量瓶中，加少量甲醇溶解，然后定容至刻度，配成浓度为0.1 mg/mL的溶液。
2.3 供试品溶液的制备：卡瓦胡椒原药材打粉(过80目筛)，混合均匀，精密称取原药材粉末0.2 g，置50 mL的圆底烧瓶中，加入25 mL氯仿50℃回流提取3h，过滤，滤液减压浓缩至干，残留物用少许甲醇溶解，并转移至25 mL的容量瓶中，定容，摇匀。取少许用0.45 μm的微孔滤膜过滤。
, 百拇医药
2.4 测定：取对照品溶液和供试品溶液各5μL注入液相色谱仪进行分析(见图1)。
1～6 化合物见表1
图1 卡瓦胡椒药材HPLC图
除kavain外，其余峰位置的确认及其换算因子均系参考文献[3，4]而得。总内酯含量按下式计算：
Ai:为某一种内酯的峰面积；As:为标准品峰面积；Cs:为标准品的浓度(mg/mL)；V:为样品定容的体积(mL)；W样:为样品的称样量(g)；fi：为相关因子。
表1 各成分的fi 编号
, 百拇医药
1
2
3
4
5
6
成分名称
methylsticin
dihydromethylsticin
kavain
dihydrokavain
demethoxyyangonin
, 百拇医药
yangonin
换算因子(fi)
2.04
2.38
1
3.33
1.89
2.78
3 结果与讨论
3.1 对同一株原植物不同部位分别进行含量分析，每个样品分析5次，结果见表2。
表2 同株植物不同部位的总
内酯含量分析结果(%) 植株部位
, 百拇医药
总内酯含量
RSD(%)
枝皮
3.25
3.37
3.45
3.52
3.28
3.37
3.36
茎
2.56
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2.59
2.88
2.73
2.65
2.68
4.78
茎结节
4.15
4.12
4.23
4.09
4.15
4.15
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1.26
茎与根的结节
5.95
6.02
6.14
6.21
6.08
6.08
1.67
根
8.58
8.75
8.66
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8.87
8.52
8.68
1.60
表2表明，该株卡瓦胡椒中卡瓦内酯以根的含量最高，其次为根与茎的结节，茎的含量最低。
3.2 对随机抽取的三支根的不同部位进行含量分析，其结果见表3。
表3 三支根的不同部位含量分析结果(%) 编号
茎与根的结节
主根
侧根
1
, 百拇医药
7.45
11.29
12.70
2
5.73
6.11
8.12
3
5.11
7.33
8.35
6.10
8.24
9.72
S
1.21
2.71
2.58
方差分析表明，根的三个部位之间的含量有显著性差异(0.01
收稿日期：1998-11-30, http://www.100md.com