皮肤恶性黑素瘤的免疫组化研究
作者：赵政龙 孟 刚 唐鸿珊 高银花 卫广英 胡 白
单位：赵政龙 唐鸿珊 高银花 卫广英 胡 白 安徽医科大学医学二系皮肤病学教研室，合肥 230001；孟 刚 安徽医科大学病理学教研室，合肥 230032
关键词：黑色素瘤；免疫组织化学
安徽医科大学学报990416 摘要：目的 探讨S-100蛋白和HMB45单克隆抗体在恶性黑素瘤诊断中的价值。方法 以痣细胞痣、乳腺癌、卵巢癌作为对照病例，对58例恶性黑素瘤进行SP免疫组化染色。结果 58例恶性黑素瘤中HMB45阳性56例(96.6%)，对照组有3例阳性；S-100蛋白染色有55例阳性(94.8%)，对照组中，痣细胞痣100%阳性，乳腺癌、卵巢癌中偶见阳性病例。结论 S-100蛋白和HMB45单克隆抗体对恶性黑素瘤的诊断敏感性均较高，但S-100蛋白的特异性较HMB45差，两者联合应用有助于恶性黑素瘤的诊断。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号：R739.5；R392.31
Immunohistochemistry about cutaneous malignant melanomas
Zhao Zhenglong, Meng Gang, Tang Hongshan et al
(Department of Dermatology, The Second Department of Medicine,Anhui Medical University, Hefei 230001)
Abstract Objective To investigate the effects of S-100 protein and HMB45 monoclonal antibodies in the diagnosis of malignant melanomas. Methods With a group case-control study on nevocellular nevi, breast cancers, ovary cancers, 58 cases of malignant melanomas were stained with SP method of immunohistochemistry. Results Among 58 cases of malignant melanomas, 56 cases are HMB45 positive (96.6%). There were only 3 positive cases in the controls. 55 cases were S-100 protein positive (94.8%). In the controls, all nevocellular nevi were positive (100%). In the cases of breast cancers and ovary cancers, there was few positive. Conclusion S-100 protein and HMB45 are higher sensitive in the diagnosis of malignant melanomas, but the specificity of S-100 protein is lower than that of HMB45. The combination of S-100 protein and HMB45 helps to the diagnosis of malignant melanomas.
, 百拇医药
MeSH melanoma; immunohistochemistry
恶性黑素瘤是一种好发于皮肤的高度恶性肿瘤，目前在病理诊断和鉴别诊断中还存在一些困难，特别是转移性恶性黑素瘤和无色素性恶性黑素瘤。近年来S-100蛋白和HMB45单克隆抗体被广泛地应用于恶性黑素瘤的诊断中，但在实际诊断中却遇到阴性结果与光镜、电镜的恶性黑素瘤诊断相矛盾〔1〕。为此，我们应用S-100蛋白和HMB45两种抗体，以痣细胞痣、乳腺癌、卵巢癌为对照病例，检测一组恶性黑素瘤，比较它们对恶性黑素瘤的特异性和敏感性，进一步评价S-100蛋白和HMB45在恶性黑素瘤诊断中的价值。
1 资料和方法
选取安徽医科大学第一附属医院病理科1985年至1998年存档标本，明确诊断的恶性黑素瘤58例(原发于皮肤44例，淋巴结转移性14例，其中色素性46例，无色素性12例)。痣细胞痣33例(皮内痣12例，交界痣10例，混合痣11例)，乳腺癌12例，卵巢癌10例。S-100蛋白和HMB45单克隆抗体试剂盒均购自福州迈新试剂公司。免疫组化技术采用SP法。阳性结果为瘤细胞浆内或核浆内呈棕黄色颗粒，根据染色深浅为弱阳性(+)，中度阳性(
)和强阳性(
)。
, 百拇医药
2 结果
S-100蛋白染色阳性反应颗粒出现在细胞浆和细胞核内，倾向弥漫整个细胞内。58例恶性黑素瘤中阳性55例(94.8%)，其中原发于皮肤44例中阳性42例(95.5%)，转移性14例中阳性13例(92.9%)，色素性恶性黑素瘤46例中阳性45例(97.8%)，无色素性恶性黑素瘤12例中阳性10例(83.3%)。33例痣细胞痣均呈阳性反应。12例乳腺癌和10例卵巢癌中各有1例呈阳性反应，其阳性率分别为8.3%和10%。详见表1。
表1 S-100蛋白免疫组化染色结果 类 型
例数
反应强度
阳性例数(%)
-
, 百拇医药
+
原发性恶性黑素瘤
44
2
8
19
15
42(95.5)
转移性恶性黑素瘤
14
1
, http://www.100md.com
4
7
2
13(92.9)
皮内痣
12
0
7
3
2
12(100.0)
交界痣
10
, 百拇医药 0
4
5
1
10(100.0)
混合痣
11
0
6
4
1
11(100.0)
乳腺癌
12
, 百拇医药
11
1
0
0
1(8.3)
卵巢癌
10
9
1
0
0
1(10.0)
HMB45染色阳性反应颗粒仅出现在细胞浆内，58例恶性黑素瘤中阳性56例(96.6%)，其中原发于皮肤44例中阳性43例(97.7%)，转移性14例中阳性13例(92.9%)，色素性46例中阳性45例(97.8%)，无色素性12例中阳性11例(91.7%)。33例痣细胞痣中仅交界痣和混合痣中各有1例呈阳性反应，12例乳腺癌中有1例呈阳性反应(S-100蛋白染色阴性病例)，阳性率为8.3%，10例卵巢癌中均呈阴性。详见表2。
, 百拇医药
表2 HMB45免疫组化染色结果 类 型
例数
反应强度
阳性例数(%)
-
+
原发性恶性黑素瘤
44
1
2
, 百拇医药
16
25
43(97.7)
转移性恶性黑素瘤
14
1
1
4
8
13(92.9)
皮内痣
12
12
, 百拇医药
0
0
0
0(0)
交界痣
10
9
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0
0
1(10.0)
混合痣
11
10
, 百拇医药
1
0
0
1(9.1)
乳腺癌
12
11
1
0
0
1(8.3)
卵巢癌
10
10
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0
0
0
0(0)
3 讨论
S-100蛋白的出现，使恶性黑素瘤的病理诊断有了可靠的手段〔2，3〕，不同实验室可以得出不同的阳性结果，并非100%阳性〔1，4〕。本组58例恶性黑素瘤中有55例呈阳性反应，占94.8%，痣细胞痣100%阳性，在乳腺癌和卵巢癌中各有1例呈阳性反应，这表明S-100蛋白对痣细胞来源的黑素痣、黑素瘤敏感性高，而特异性较低。因此，在病理诊断中受到一定的限制。HMB45是一种抗恶性黑素瘤的单克隆抗体，能识别前黑素小体球蛋白，可与不成熟的黑素细胞及黑素瘤细胞起反应，在恶性黑素瘤的诊断中具有较高的敏感性和特异性〔5〕。也有作者提出HMB45在恶性黑素瘤的表达有很强的限制性，即对表皮的恶性黑素瘤细胞呈强阳性，对真皮、软组织及淋巴结内恶性黑素瘤细胞具有较高的弱阳性或阴性率〔1〕。本组58例恶性黑素瘤中HMB45染色阳性率为96.6%，其中原发性、转移性、色素性和无色素性恶性黑素瘤中均见有HMB45反应阴性病例。这一方面可能因为少部分恶性黑素瘤不表达HMB45，另一方面可能为部分转移性恶性黑素瘤HMB45仅为灶性阳性反应〔6〕。因此，为了提高阳性率，在取材时应选择瘤细胞较丰富的组织，尽量多块、多处取材观察。目前关于交界痣与恶性黑素瘤的关系难以评价，一般认为生长活跃的非典型交界痣属恶性黑素瘤的癌前期状态。本组有交界痣和混合痣2例与HMB45呈弱阳性反应，而皮内痣均呈阴性反应，这提示HMB45与黑素细胞分化可能有关，这些病例值得进一步密切随访观察。
, http://www.100md.com
在非黑素细胞来源的对照组中，S-100蛋白染色在乳腺癌和卵巢癌中各有1例呈阳性反应；而HMB45染色在乳腺癌组有1例呈弱阳性反应(非S-100蛋白染色阳性病例)。在已有浅表淋巴结转移(如腋窝淋巴结、腹股沟淋巴结转移)的恶性肿瘤中，而无明确原发灶的非典型病例，在病理诊断时，单用S-100蛋白染色鉴别是恶性黑素瘤还是乳腺癌或卵巢癌有困难时，联合应用HMB45染色有助于准确诊断。
(本文完成过程中得到安徽医科大学医学二系病理科王志华副主任医师的帮助，特此致谢。)
作者简介：赵政龙，男，37岁，主治医师
参考文献
1 纪小龙，李维华.三种抗黑素瘤抗体的组织学分布特点及其诊断意义.中华病理学杂志，1990；19(2)：128～129
, 百拇医药
2 Kahn HJ, Marks A, Thom H et al. Role of antibody to S-100 protein in diagnostic pathology. Am J Clin Pathol, 1983;79(3):341～347
3 Loeffel SC, Gillespie GY, Mirmiran SA et al. Cellular immunolocalization of S-100 protein within fixed tissue sections by monoclonal antibodies. Arch Pathol Lab Med, 1985;109(2):117～122
4 张 徽，米 粲，李园园等.恶性黑素瘤增殖活性及免疫组化研究.中华皮肤科杂志，1997；30(6)：192～194
5 Ordonez NG, Ji XL, Hickey RC. Comparison of HMB-45 monoclonal antibody and S-100 protein in the immunohistochemical diagnosis of melanoma. Am J Clin Pathol, 1988;90(4):385～390
6 纪小龙，施作霖主编.诊断免疫组织化学.北京：军事医学科学出版社，1997：113
1999-01-20收稿
1999-06-21修回, 百拇医药
单位：赵政龙 唐鸿珊 高银花 卫广英 胡 白 安徽医科大学医学二系皮肤病学教研室，合肥 230001；孟 刚 安徽医科大学病理学教研室，合肥 230032
关键词：黑色素瘤；免疫组织化学
安徽医科大学学报990416 摘要：目的 探讨S-100蛋白和HMB45单克隆抗体在恶性黑素瘤诊断中的价值。方法 以痣细胞痣、乳腺癌、卵巢癌作为对照病例，对58例恶性黑素瘤进行SP免疫组化染色。结果 58例恶性黑素瘤中HMB45阳性56例(96.6%)，对照组有3例阳性；S-100蛋白染色有55例阳性(94.8%)，对照组中，痣细胞痣100%阳性，乳腺癌、卵巢癌中偶见阳性病例。结论 S-100蛋白和HMB45单克隆抗体对恶性黑素瘤的诊断敏感性均较高，但S-100蛋白的特异性较HMB45差，两者联合应用有助于恶性黑素瘤的诊断。
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中国图书资料分类法分类号：R739.5；R392.31
Immunohistochemistry about cutaneous malignant melanomas
Zhao Zhenglong, Meng Gang, Tang Hongshan et al
(Department of Dermatology, The Second Department of Medicine,Anhui Medical University, Hefei 230001)
Abstract Objective To investigate the effects of S-100 protein and HMB45 monoclonal antibodies in the diagnosis of malignant melanomas. Methods With a group case-control study on nevocellular nevi, breast cancers, ovary cancers, 58 cases of malignant melanomas were stained with SP method of immunohistochemistry. Results Among 58 cases of malignant melanomas, 56 cases are HMB45 positive (96.6%). There were only 3 positive cases in the controls. 55 cases were S-100 protein positive (94.8%). In the controls, all nevocellular nevi were positive (100%). In the cases of breast cancers and ovary cancers, there was few positive. Conclusion S-100 protein and HMB45 are higher sensitive in the diagnosis of malignant melanomas, but the specificity of S-100 protein is lower than that of HMB45. The combination of S-100 protein and HMB45 helps to the diagnosis of malignant melanomas.
, 百拇医药
MeSH melanoma; immunohistochemistry
恶性黑素瘤是一种好发于皮肤的高度恶性肿瘤，目前在病理诊断和鉴别诊断中还存在一些困难，特别是转移性恶性黑素瘤和无色素性恶性黑素瘤。近年来S-100蛋白和HMB45单克隆抗体被广泛地应用于恶性黑素瘤的诊断中，但在实际诊断中却遇到阴性结果与光镜、电镜的恶性黑素瘤诊断相矛盾〔1〕。为此，我们应用S-100蛋白和HMB45两种抗体，以痣细胞痣、乳腺癌、卵巢癌为对照病例，检测一组恶性黑素瘤，比较它们对恶性黑素瘤的特异性和敏感性，进一步评价S-100蛋白和HMB45在恶性黑素瘤诊断中的价值。
1 资料和方法
选取安徽医科大学第一附属医院病理科1985年至1998年存档标本，明确诊断的恶性黑素瘤58例(原发于皮肤44例，淋巴结转移性14例，其中色素性46例，无色素性12例)。痣细胞痣33例(皮内痣12例，交界痣10例，混合痣11例)，乳腺癌12例，卵巢癌10例。S-100蛋白和HMB45单克隆抗体试剂盒均购自福州迈新试剂公司。免疫组化技术采用SP法。阳性结果为瘤细胞浆内或核浆内呈棕黄色颗粒，根据染色深浅为弱阳性(+)，中度阳性(
)和强阳性()。, 百拇医药
2 结果
S-100蛋白染色阳性反应颗粒出现在细胞浆和细胞核内，倾向弥漫整个细胞内。58例恶性黑素瘤中阳性55例(94.8%)，其中原发于皮肤44例中阳性42例(95.5%)，转移性14例中阳性13例(92.9%)，色素性恶性黑素瘤46例中阳性45例(97.8%)，无色素性恶性黑素瘤12例中阳性10例(83.3%)。33例痣细胞痣均呈阳性反应。12例乳腺癌和10例卵巢癌中各有1例呈阳性反应，其阳性率分别为8.3%和10%。详见表1。
表1 S-100蛋白免疫组化染色结果 类 型
例数
反应强度
阳性例数(%)
-
, 百拇医药
+
原发性恶性黑素瘤
44
2
8
19
15
42(95.5)
转移性恶性黑素瘤
14
1
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13(92.9)
皮内痣
12
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交界痣
10
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混合痣
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乳腺癌
12
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1(8.3)
卵巢癌
10
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HMB45染色阳性反应颗粒仅出现在细胞浆内，58例恶性黑素瘤中阳性56例(96.6%)，其中原发于皮肤44例中阳性43例(97.7%)，转移性14例中阳性13例(92.9%)，色素性46例中阳性45例(97.8%)，无色素性12例中阳性11例(91.7%)。33例痣细胞痣中仅交界痣和混合痣中各有1例呈阳性反应，12例乳腺癌中有1例呈阳性反应(S-100蛋白染色阴性病例)，阳性率为8.3%，10例卵巢癌中均呈阴性。详见表2。
, 百拇医药
表2 HMB45免疫组化染色结果 类 型
例数
反应强度
阳性例数(%)
-
+
原发性恶性黑素瘤
44
1
2
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16
25
43(97.7)
转移性恶性黑素瘤
14
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皮内痣
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交界痣
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混合痣
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乳腺癌
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1(8.3)
卵巢癌
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10
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3 讨论
S-100蛋白的出现，使恶性黑素瘤的病理诊断有了可靠的手段〔2，3〕，不同实验室可以得出不同的阳性结果，并非100%阳性〔1，4〕。本组58例恶性黑素瘤中有55例呈阳性反应，占94.8%，痣细胞痣100%阳性，在乳腺癌和卵巢癌中各有1例呈阳性反应，这表明S-100蛋白对痣细胞来源的黑素痣、黑素瘤敏感性高，而特异性较低。因此，在病理诊断中受到一定的限制。HMB45是一种抗恶性黑素瘤的单克隆抗体，能识别前黑素小体球蛋白，可与不成熟的黑素细胞及黑素瘤细胞起反应，在恶性黑素瘤的诊断中具有较高的敏感性和特异性〔5〕。也有作者提出HMB45在恶性黑素瘤的表达有很强的限制性，即对表皮的恶性黑素瘤细胞呈强阳性，对真皮、软组织及淋巴结内恶性黑素瘤细胞具有较高的弱阳性或阴性率〔1〕。本组58例恶性黑素瘤中HMB45染色阳性率为96.6%，其中原发性、转移性、色素性和无色素性恶性黑素瘤中均见有HMB45反应阴性病例。这一方面可能因为少部分恶性黑素瘤不表达HMB45，另一方面可能为部分转移性恶性黑素瘤HMB45仅为灶性阳性反应〔6〕。因此，为了提高阳性率，在取材时应选择瘤细胞较丰富的组织，尽量多块、多处取材观察。目前关于交界痣与恶性黑素瘤的关系难以评价，一般认为生长活跃的非典型交界痣属恶性黑素瘤的癌前期状态。本组有交界痣和混合痣2例与HMB45呈弱阳性反应，而皮内痣均呈阴性反应，这提示HMB45与黑素细胞分化可能有关，这些病例值得进一步密切随访观察。
, http://www.100md.com
在非黑素细胞来源的对照组中，S-100蛋白染色在乳腺癌和卵巢癌中各有1例呈阳性反应；而HMB45染色在乳腺癌组有1例呈弱阳性反应(非S-100蛋白染色阳性病例)。在已有浅表淋巴结转移(如腋窝淋巴结、腹股沟淋巴结转移)的恶性肿瘤中，而无明确原发灶的非典型病例，在病理诊断时，单用S-100蛋白染色鉴别是恶性黑素瘤还是乳腺癌或卵巢癌有困难时，联合应用HMB45染色有助于准确诊断。
(本文完成过程中得到安徽医科大学医学二系病理科王志华副主任医师的帮助，特此致谢。)
作者简介：赵政龙，男，37岁，主治医师
参考文献
1 纪小龙，李维华.三种抗黑素瘤抗体的组织学分布特点及其诊断意义.中华病理学杂志，1990；19(2)：128～129
, 百拇医药
2 Kahn HJ, Marks A, Thom H et al. Role of antibody to S-100 protein in diagnostic pathology. Am J Clin Pathol, 1983;79(3):341～347
3 Loeffel SC, Gillespie GY, Mirmiran SA et al. Cellular immunolocalization of S-100 protein within fixed tissue sections by monoclonal antibodies. Arch Pathol Lab Med, 1985;109(2):117～122
4 张 徽，米 粲，李园园等.恶性黑素瘤增殖活性及免疫组化研究.中华皮肤科杂志，1997；30(6)：192～194
5 Ordonez NG, Ji XL, Hickey RC. Comparison of HMB-45 monoclonal antibody and S-100 protein in the immunohistochemical diagnosis of melanoma. Am J Clin Pathol, 1988;90(4):385～390
6 纪小龙，施作霖主编.诊断免疫组织化学.北京：军事医学科学出版社，1997：113
1999-01-20收稿
1999-06-21修回, 百拇医药