SLE患者血清Glus和Gals测定
作者：李利 东云华 周光平 熊琳
单位：李利 周光平 熊琳 华西医科大学附属第一医院皮肤科; 东云华 华西医科大学公共卫生学院医检科
关键词：SLE；氨基葡萄糖；氨基半乳糖；二阶导数分光光度法
华西医学990122 摘要：采用二阶导数分光光度法，对19例女性SLE患者血清氨基葡萄糖(Glucosamine Glus.)和氨基半乳糖(Galactosamine Gals.)进行检测。发现SLE患者血清Glus.为2.047±0.661mg/ml，明显高于正常人组0.900±0.240mg/ml(P<0.001)；患者血清Gals.为0.205±0.144mg/ml，明显低于正常人组0.330±0.130mg/ml(P<0.001)。对SLE的病因和发病机制作了初步探讨。
〔中图分类号〕R593.24+1；R446.9
, http://www.100md.com
〔文献标识码〕A
Determination of Serum Glucosamine and Galactosamine in Patients
with Systemic Lupus Erythematosus
LI Li，DONG Yun-hua，ZhOU Guang-ping，et al
Department of Dermatology，First University Hospital，WCUMS.Chengdu，610041.
Abstract：The level of serum glucosamine and galactosamine were determined in 19 female patients with systemic lupus erythematosus by the second derivative spectrophotometry method.The results showed that the level of serum glucosamine in the patients was 2.047±0.661mg/ml，while in the healthy control group was 0.900±0.240mg/ml.The level of serum glucosamine in patients was markedly increased in comparison with that of the healthy control group.(P<0.001).The level of serum galactosamine in the patients was markedly decrcased in comparison with that of the healthy control group(P<0.001)，0.205±0.144mg/ml in the patients and 0.330±0.130mg/ml in healthy control group.The pathogenesis of systemic lupus erythematosus was discussed.
, 百拇医药
Key words：Systemic lupus erythematosus；Glucosamine；Galactosamine；The second derivative spectrophotometry.
系统性红斑狼疮(SLE)病因不清，基本病理改变为结缔组织的粘液样水肿、纤维蛋白样变性和坏死性血管炎。近年来，许多学者从免疫学方面进行深入研究，并取得重大进展。本文采用二阶导数分光光度法，对SLE患者血清中氨基葡萄糖(Glucusamine.Glus.)和氨基半乳糖(Galactosamine Gals.)进行测定，从另一角度探讨SLE的病因和发病机制。
1 资料和方法
1.1 全部病例均来自我院皮肤科门诊和住院病人，共19例，均为女性，年龄23～60岁，病期15～17年，符合1982年美国风湿病协会SLE诊断标准。对照组为健康献血员40例，均为女性。
, http://www.100md.com
1.2 仪器：岛津UV-260自动记分光度计(P/N204-03900)。试剂：4.0mol/L HCI，3.5%乙酰丙酮，欧立区试剂(1.6g对二甲氨基苯甲醛溶于15ml浓盐酸中，用异丙醇稀释至105ml)。标准品：氨基葡萄糖盐酸盐(上海生物化学试剂厂生产)。氨基半乳糖盐酸盐(美国Siemz公司生产)。
1.3 实验方法：取受试者空腹静脉血2ml，24小时内分离血清。取血清0.1ml置于10ml试管中，加1.0ml的4.0mol/L HCl溶液，加塞密闭，在110℃石蜡中水解4小时，取出冷后，用适量浓度NaOH液调pH至7.0±2，用水稀释至25.0ml，取水解液0.8ml，入具塞试管，空白用0.8ml DH2O于每管中加3.5%乙酰丙酮0.6ml，置沸水中45分钟，取出冷后加欧立区试剂2ml，置37℃水浴40分钟。标准系列同水解液处理。在岛津VU-260分光光度计上测定零阶导数在528.8nm和534.8nm处的吸收光度值和二阶导数在520.4nm和555.6nm处的导数值。由ΔD Gals.和ΔD Glus.从标准曲线求得Gals和Gals.值。
, 百拇医药
2 结果
本组19例女性SLE患者血清Glus.为2.047±0.661mg/ml，对照组为0.900±0.240mg/ml，两组相比，患者血清Glus.明显高于正常对照(T＝7.546 P<0.001)。患者血清Gals.测定值为0.205±0.144mg/ml，对照组为0.330±0.130mg/ml。两组相比，患者血清Gals明显低于正常对照(T＝3.784 P<0.001)。
3 讨论
蛋白多糖是结缔组织主要成份之一。它由蛋白质和糖氨多糖通过共价键而结合的。而糖氨多糖又是由氨基葡萄糖和氨基半乳糖通过不同糖苷键与已糖醛酸结合构成。糖氨多糖种类较多，含有氨基葡萄糖的有透明质酸、硫酸角质素、硫酸类肝素和肝素；含有氨基半乳糖的有4-硫酸软骨素、6-硫酸软骨素和硫酸皮肤素。这些物质与蛋白质结合而形成蛋白多糖，具有活跃的生物学作用。主动参与和影响细胞的各种行为，对机体的生理和病理过程发生重要作用〔1〕。可见，检测Glus.和Gals.可以了解结缔组织变化机制。由于Glus.和Gals.在同一实验条件下呈色相同，吸收峰很接近，相互干扰，用一般比色法难以鉴别。因此，对结缔组结病的研究主要是对总的糖氨多糖测定。如对系统性硬皮病的研究〔2，3〕。近年来，组合导数分光光度法有了很大改进〔4〕。本文就是采用二阶导数分光光度法，圆满地解决了在同一实验条件下对Glus.和Gals.的测定。并用于对SLE的研究。国内外尚未见同类报道。结果发现，患者血清中Glus.为2.047±0.661mg/ml，明显高于正常人群0.900±0.240mg/ml。其中4例抗核抗体≥1∶80患者，血清Glus.为2.5±0.795mg/ml，高于其它15例抗核抗体低于1∶80患者：1.926±0.594mg/ml。据此推测，SLE患者中含有Glus.的各种糖氨多糖比正常人高，其中透明质酸增加，可造成粘液性水肿。当疾病活跃，血清中Glus.增加更明显。Gals.则与之相反，SLE患者血清浓度为0.205±0.144mg/ml，明显低于正常对照0.330±0.130mg/ml，推测在SLE患者中，含有Gals.的糖氨多糖如4-硫酸软骨素、6-硫酸软骨素和硫酸皮肤素的代谢受到抑制。
, http://www.100md.com
综上所述，Glus.和Gals.为糖氨多糖的基本组成成份，参与结缔组织的构成。SLE患者血清Glus.水平升高，而Gals.血清水平降低，以上变化在SLE的发病机制和病理变化中有一定作用，其临床意义有待进一步探讨。
参考文献
1.李玉瑞主编：细胞外间质的生物化学及研究方法。人民卫生出版社 1988；131。
2.Kucharz EJ：Metabolism of the connective tissue in generalized cleroderma.Postepy Hig Med Dosw.1989；43∶93.
3.Whiteside TL，et al：Soluble mediators from mononuclear cells mcresae the synthesis of glycosaminoglycn by dermal fibroblast cultures derived from normal subjects and progressive systemic sclerosis patients，Arthritis Rheum.1985；28∶188.
4.李金和等：组合导数分光光度法研究。分析化学；1989；17∶217。
(Received date：1997-09-22)
(1997-09-22收稿), http://www.100md.com
单位：李利 周光平 熊琳 华西医科大学附属第一医院皮肤科; 东云华 华西医科大学公共卫生学院医检科
关键词：SLE；氨基葡萄糖；氨基半乳糖；二阶导数分光光度法
华西医学990122 摘要：采用二阶导数分光光度法，对19例女性SLE患者血清氨基葡萄糖(Glucosamine Glus.)和氨基半乳糖(Galactosamine Gals.)进行检测。发现SLE患者血清Glus.为2.047±0.661mg/ml，明显高于正常人组0.900±0.240mg/ml(P<0.001)；患者血清Gals.为0.205±0.144mg/ml，明显低于正常人组0.330±0.130mg/ml(P<0.001)。对SLE的病因和发病机制作了初步探讨。
〔中图分类号〕R593.24+1；R446.9
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〔文献标识码〕A
Determination of Serum Glucosamine and Galactosamine in Patients
with Systemic Lupus Erythematosus
LI Li，DONG Yun-hua，ZhOU Guang-ping，et al
Department of Dermatology，First University Hospital，WCUMS.Chengdu，610041.
Abstract：The level of serum glucosamine and galactosamine were determined in 19 female patients with systemic lupus erythematosus by the second derivative spectrophotometry method.The results showed that the level of serum glucosamine in the patients was 2.047±0.661mg/ml，while in the healthy control group was 0.900±0.240mg/ml.The level of serum glucosamine in patients was markedly increased in comparison with that of the healthy control group.(P<0.001).The level of serum galactosamine in the patients was markedly decrcased in comparison with that of the healthy control group(P<0.001)，0.205±0.144mg/ml in the patients and 0.330±0.130mg/ml in healthy control group.The pathogenesis of systemic lupus erythematosus was discussed.
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Key words：Systemic lupus erythematosus；Glucosamine；Galactosamine；The second derivative spectrophotometry.
系统性红斑狼疮(SLE)病因不清，基本病理改变为结缔组织的粘液样水肿、纤维蛋白样变性和坏死性血管炎。近年来，许多学者从免疫学方面进行深入研究，并取得重大进展。本文采用二阶导数分光光度法，对SLE患者血清中氨基葡萄糖(Glucusamine.Glus.)和氨基半乳糖(Galactosamine Gals.)进行测定，从另一角度探讨SLE的病因和发病机制。
1 资料和方法
1.1 全部病例均来自我院皮肤科门诊和住院病人，共19例，均为女性，年龄23～60岁，病期15～17年，符合1982年美国风湿病协会SLE诊断标准。对照组为健康献血员40例，均为女性。
, http://www.100md.com
1.2 仪器：岛津UV-260自动记分光度计(P/N204-03900)。试剂：4.0mol/L HCI，3.5%乙酰丙酮，欧立区试剂(1.6g对二甲氨基苯甲醛溶于15ml浓盐酸中，用异丙醇稀释至105ml)。标准品：氨基葡萄糖盐酸盐(上海生物化学试剂厂生产)。氨基半乳糖盐酸盐(美国Siemz公司生产)。
1.3 实验方法：取受试者空腹静脉血2ml，24小时内分离血清。取血清0.1ml置于10ml试管中，加1.0ml的4.0mol/L HCl溶液，加塞密闭，在110℃石蜡中水解4小时，取出冷后，用适量浓度NaOH液调pH至7.0±2，用水稀释至25.0ml，取水解液0.8ml，入具塞试管，空白用0.8ml DH2O于每管中加3.5%乙酰丙酮0.6ml，置沸水中45分钟，取出冷后加欧立区试剂2ml，置37℃水浴40分钟。标准系列同水解液处理。在岛津VU-260分光光度计上测定零阶导数在528.8nm和534.8nm处的吸收光度值和二阶导数在520.4nm和555.6nm处的导数值。由ΔD Gals.和ΔD Glus.从标准曲线求得Gals和Gals.值。
, 百拇医药
2 结果
本组19例女性SLE患者血清Glus.为2.047±0.661mg/ml，对照组为0.900±0.240mg/ml，两组相比，患者血清Glus.明显高于正常对照(T＝7.546 P<0.001)。患者血清Gals.测定值为0.205±0.144mg/ml，对照组为0.330±0.130mg/ml。两组相比，患者血清Gals明显低于正常对照(T＝3.784 P<0.001)。
3 讨论
蛋白多糖是结缔组织主要成份之一。它由蛋白质和糖氨多糖通过共价键而结合的。而糖氨多糖又是由氨基葡萄糖和氨基半乳糖通过不同糖苷键与已糖醛酸结合构成。糖氨多糖种类较多，含有氨基葡萄糖的有透明质酸、硫酸角质素、硫酸类肝素和肝素；含有氨基半乳糖的有4-硫酸软骨素、6-硫酸软骨素和硫酸皮肤素。这些物质与蛋白质结合而形成蛋白多糖，具有活跃的生物学作用。主动参与和影响细胞的各种行为，对机体的生理和病理过程发生重要作用〔1〕。可见，检测Glus.和Gals.可以了解结缔组织变化机制。由于Glus.和Gals.在同一实验条件下呈色相同，吸收峰很接近，相互干扰，用一般比色法难以鉴别。因此，对结缔组结病的研究主要是对总的糖氨多糖测定。如对系统性硬皮病的研究〔2，3〕。近年来，组合导数分光光度法有了很大改进〔4〕。本文就是采用二阶导数分光光度法，圆满地解决了在同一实验条件下对Glus.和Gals.的测定。并用于对SLE的研究。国内外尚未见同类报道。结果发现，患者血清中Glus.为2.047±0.661mg/ml，明显高于正常人群0.900±0.240mg/ml。其中4例抗核抗体≥1∶80患者，血清Glus.为2.5±0.795mg/ml，高于其它15例抗核抗体低于1∶80患者：1.926±0.594mg/ml。据此推测，SLE患者中含有Glus.的各种糖氨多糖比正常人高，其中透明质酸增加，可造成粘液性水肿。当疾病活跃，血清中Glus.增加更明显。Gals.则与之相反，SLE患者血清浓度为0.205±0.144mg/ml，明显低于正常对照0.330±0.130mg/ml，推测在SLE患者中，含有Gals.的糖氨多糖如4-硫酸软骨素、6-硫酸软骨素和硫酸皮肤素的代谢受到抑制。
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综上所述，Glus.和Gals.为糖氨多糖的基本组成成份，参与结缔组织的构成。SLE患者血清Glus.水平升高，而Gals.血清水平降低，以上变化在SLE的发病机制和病理变化中有一定作用，其临床意义有待进一步探讨。
参考文献
1.李玉瑞主编：细胞外间质的生物化学及研究方法。人民卫生出版社 1988；131。
2.Kucharz EJ：Metabolism of the connective tissue in generalized cleroderma.Postepy Hig Med Dosw.1989；43∶93.
3.Whiteside TL，et al：Soluble mediators from mononuclear cells mcresae the synthesis of glycosaminoglycn by dermal fibroblast cultures derived from normal subjects and progressive systemic sclerosis patients，Arthritis Rheum.1985；28∶188.
4.李金和等：组合导数分光光度法研究。分析化学；1989；17∶217。
(Received date：1997-09-22)
(1997-09-22收稿), http://www.100md.com