八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导大鼠肺组织NF-κB活性增高的抑制作用
作者：丛斌 凌亦凌 谷振勇 王俊霞 姚玉霞
单位：河北医科大学病理生理教研室，河北 石家庄 050017
关键词：
中国病理生理杂志0010109
目的和方法：研究证实，内毒素激活核转录因子κB(nuclear transcription factor kappa B, NF-κΒ)，进而诱导前炎性因子大量生成，是内毒素休克和急性肺损伤的关键发病学环节。防止NF-κB激活或抑制其活性已成为治疗急性肺损伤和内毒素休克的新途径。我们以往的研究发现，脑肠肽八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide, CCK-8)具有明显的抗内毒素休克效应，可提高平均动脉压，降低肺动脉高压，减轻肺组织的病理变化，对抗脂多糖(lipopolysacchride, LPS)导致的离体肺动脉异常反应性变化。然而，CCK-8的作用机制迄今尚未完全阐明。已知氧化应激是NF-κB激活的重要途径，而CCK-8可提高血液超氧化物酶歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性，具有抗氧化效应。我们新近还发现，抑制NF-κB活性可改善LPS孵育所致离体肺动脉的反应性变化。可以推测，CCK-8可能通过抑制NF-κB而发挥保护作用。为探讨CCK-8防治内毒素引起急性肺损伤的分子作用机制，本实验用电泳迁移率变动分析技术(electrophoretic motility shift assay, EMSA),观察CCK-8对内毒素血症大鼠肺组织NF-κB活性的影响，用光密度扫描电泳带峰面积积分值表示NF-κB活性，观察肺脏的病理变化。结果：(1)LPS入血可以明显引起大鼠肺组织的NF-κB活性增高，由对照组的593.56±89.34增至1639.92±198.63(P<0.001)，此作用为预先静脉注入CCK-8部分翻转，NF-κB活性降低至823.91±97.32(P<0.001)；(2)用非标记的NF-κB与DNA结合探针或抗P50、P65多克隆抗体分别先与核蛋白提取物结合，结果未见放射自显影条带出现，说明NF-κB的检出结果可靠。(3)预先静脉注入CCK-8可以明显减轻LPS入血引起的肺脏病理变化。结论：CCK-8对LPS激活肺组织NF-κB活性有抑制作用，这可能为CCK-8的保护作用机制之一。
国家自然科学基金资助(39570304), 百拇医药
单位：河北医科大学病理生理教研室，河北 石家庄 050017
关键词：
中国病理生理杂志0010109
目的和方法：研究证实，内毒素激活核转录因子κB(nuclear transcription factor kappa B, NF-κΒ)，进而诱导前炎性因子大量生成，是内毒素休克和急性肺损伤的关键发病学环节。防止NF-κB激活或抑制其活性已成为治疗急性肺损伤和内毒素休克的新途径。我们以往的研究发现，脑肠肽八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide, CCK-8)具有明显的抗内毒素休克效应，可提高平均动脉压，降低肺动脉高压，减轻肺组织的病理变化，对抗脂多糖(lipopolysacchride, LPS)导致的离体肺动脉异常反应性变化。然而，CCK-8的作用机制迄今尚未完全阐明。已知氧化应激是NF-κB激活的重要途径，而CCK-8可提高血液超氧化物酶歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性，具有抗氧化效应。我们新近还发现，抑制NF-κB活性可改善LPS孵育所致离体肺动脉的反应性变化。可以推测，CCK-8可能通过抑制NF-κB而发挥保护作用。为探讨CCK-8防治内毒素引起急性肺损伤的分子作用机制，本实验用电泳迁移率变动分析技术(electrophoretic motility shift assay, EMSA),观察CCK-8对内毒素血症大鼠肺组织NF-κB活性的影响，用光密度扫描电泳带峰面积积分值表示NF-κB活性，观察肺脏的病理变化。结果：(1)LPS入血可以明显引起大鼠肺组织的NF-κB活性增高，由对照组的593.56±89.34增至1639.92±198.63(P<0.001)，此作用为预先静脉注入CCK-8部分翻转，NF-κB活性降低至823.91±97.32(P<0.001)；(2)用非标记的NF-κB与DNA结合探针或抗P50、P65多克隆抗体分别先与核蛋白提取物结合，结果未见放射自显影条带出现，说明NF-κB的检出结果可靠。(3)预先静脉注入CCK-8可以明显减轻LPS入血引起的肺脏病理变化。结论：CCK-8对LPS激活肺组织NF-κB活性有抑制作用，这可能为CCK-8的保护作用机制之一。
国家自然科学基金资助(39570304), 百拇医药