骨髓小粒拉片与骨髓涂片的细胞学比较观察
作者：史青
单位：华西医科大学附属第一医院血液科检验室 成都 610041
关键词：
华西医学00370
[中图分类号]R446.14 [文献标识码]D
[文章编号]1002-0179(2000)03-0367-01
骨髓组织学和细胞学检查都是血液系统疾病的诊断方法，包括骨髓涂片、骨髓小粒拉片和组织切片等。其中骨髓小粒拉片的检查是国外血液学专著〔1，2〕经常提及的骨髓形态学检查方法之一，但国内文献中尚少见有关报道。为了解骨髓小粒拉片的特点及其在血液疾病诊断中的作用，作者在近年的实验室工作中，将骨髓小粒拉片与骨髓涂片做了初步的自身配对细胞学比较观察，现就两种检查方法在骨髓细胞增生程度、巨核细胞计数、细胞分类之间的异同点总结报告如下。
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1 纳入对象 1995年7月～1997年5月在我院血液科门诊就诊并同时制作骨髓涂片和骨髓小粒拉片的患者共130例，其中男52例，女78例。81例为初次检查并经骨髓涂片诊断的血液病患者，29例为以前骨髓涂片诊断为血液病，在治疗过程中复查的患者，20例为疑诊血液疾病，但骨髓涂片检查正常的患者。
1.2 取材与处理 从髂后上嵴抽吸骨髓液，用常规方法制备涂片。用巴氏吸管从骨髓液中吸取骨髓小粒置于玻片上，用第二张玻片覆盖，然后轻轻同时将两玻片向反方向拉开即成。骨髓涂片和骨髓小粒拉片均用Wright-Giemsa染色。
1.3 诊断分组 按骨髓涂片诊断分为5组，即：白血病组、增生性贫血组、其他血液病组、多发性骨髓瘤组和正常骨髓组。
1.4 观察内容 包括细胞增生程度、巨核细胞计数及细胞分类。细胞增生程度：骨髓涂片用有核细胞与红细胞之比判定增生程度，骨髓小粒拉片按有核细胞与脂肪组织巨核细胞的数量来评定〔1〕，将骨髓细胞增生程度分为5级，计Ⅰ.增生极度低下、Ⅱ.增生低下、Ⅲ.增生活跃、Ⅳ.增生明显活跃、Ⅴ.增生极度活跃。巨核细胞计数：在低倍镜下逐个视野浏览计数全片巨核细胞数量。细胞分类：将粒细胞系统嗜酸、嗜碱细胞的各阶段分别合并为一组。淋巴细胞系统和浆细胞系统的各阶段细胞也分别合并为一组。在对骨髓小粒拉片进行细胞分类时，选小粒旁细胞完整、细胞分布均匀且见各类细胞的区域进行计数，共计数500个细胞。对骨髓涂片的细胞分类是从涂片体尾交界处开始，按一定顺序向尾部迂回渐进，计数各类有核细胞200个。
, 百拇医药
1.5 统计学分析 通过计算Kappa值评价两种方法诊断的一致性程度，对计量资料用中位数、95%可信限进行描述，组间比较时先将数据对数转换再行t检验。
2 结果
骨髓小粒拉片与骨髓涂片对细胞增生程度分级完全相同者73例，Kappa值0.35，两种方法的诊断一致性尚好，其余均为骨髓小粒拉片比骨髓涂片诊断分级的序次提高，提示骨髓小粒拉片更易显示骨髓增生程度。骨髓小粒拉片均可检出巨核细胞，而骨髓涂片有4.6%为阴性；骨髓小粒拉片对巨核细胞的计数显著高于涂片(P<0.05)。骨髓小粒拉片对粒细胞系统中的原始粒细胞的检出率、对浆细胞、网状细胞、组织嗜碱细胞的检出率均高于骨髓涂片。
3 讨论
骨髓小粒拉片比骨髓涂片更易显示骨髓细胞的增生程度，巨核细胞的计数明显高于涂片。在细胞分类中，骨髓小粒拉片对粒细胞系、红细胞系的分类和涂片基本类似，然而一些在涂片中较少见的细胞如浆细胞、网状细胞、组织嗜碱细胞等，易在骨髓小粒拉片上发现。这对血液疾病的诊断和鉴别是十分有利的。其原因在于骨髓小粒拉片是用骨髓抽取物中肉眼可见的颗粒制片，这些颗粒多系骨髓的实质组织，含有丰富的骨髓细胞成份等。而对涂片来说，尽管其对个别细胞的辨认较好，但易受血液稀释、细胞分散不好及细胞大小的影响〔2〕。
, http://www.100md.com
Pasquale〔3〕等曾将骨髓小粒拉片与骨髓印片、骨髓活检切片作了对照研究，发现骨髓小粒拉片与组织切片一样，能较真实的反映骨髓内细胞分布的实际情况，对于细胞形态和细胞的区别计数而言，以骨髓小粒拉片和印片更准确。
4 结论
骨髓小粒拉片在反映骨髓细胞增生程度，巨核细胞计数等方面比骨髓涂片优越，应和骨髓涂片一样，成为一种常规方法，以进一步提高骨髓诊断的准确率。
骨髓小粒拉片由于采用骨髓颗粒制片，操作要求较高，细胞易破碎，染色时间也较长。初学者常感制片困难。但作者认为，只要反复练习，细心体会，就能制备良好的骨髓小粒拉片。
致谢：本研究得到邓长安教授悉心指导，骨髓涂片的诊断由黄维帮、吴世敏老师作出，在此表示感谢。
参考文献
, 百拇医药
1，Minnich V.Microscopic examination of the bone marrow.1st ed.Chicago∶American Society of Clinical Pathologists Press，1982；3～8.
2，Jandl JH.Blood-Textbook of hematology，1st ed.Boston：Little，Brown Co，1987；26～28
3，Pasquale D，Chikkappa G.Comparative evaluation of bone marrow aspirate particle smears，biopsy imprints，and biopsy sections.Am J Hematol 1986；22∶381～389.
(收稿日期：2000-02-22), http://www.100md.com
单位：华西医科大学附属第一医院血液科检验室 成都 610041
关键词：
华西医学00370
[中图分类号]R446.14 [文献标识码]D
[文章编号]1002-0179(2000)03-0367-01
骨髓组织学和细胞学检查都是血液系统疾病的诊断方法，包括骨髓涂片、骨髓小粒拉片和组织切片等。其中骨髓小粒拉片的检查是国外血液学专著〔1，2〕经常提及的骨髓形态学检查方法之一，但国内文献中尚少见有关报道。为了解骨髓小粒拉片的特点及其在血液疾病诊断中的作用，作者在近年的实验室工作中，将骨髓小粒拉片与骨髓涂片做了初步的自身配对细胞学比较观察，现就两种检查方法在骨髓细胞增生程度、巨核细胞计数、细胞分类之间的异同点总结报告如下。
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1 材料和方法
1.1 纳入对象 1995年7月～1997年5月在我院血液科门诊就诊并同时制作骨髓涂片和骨髓小粒拉片的患者共130例，其中男52例，女78例。81例为初次检查并经骨髓涂片诊断的血液病患者，29例为以前骨髓涂片诊断为血液病，在治疗过程中复查的患者，20例为疑诊血液疾病，但骨髓涂片检查正常的患者。
1.2 取材与处理 从髂后上嵴抽吸骨髓液，用常规方法制备涂片。用巴氏吸管从骨髓液中吸取骨髓小粒置于玻片上，用第二张玻片覆盖，然后轻轻同时将两玻片向反方向拉开即成。骨髓涂片和骨髓小粒拉片均用Wright-Giemsa染色。
1.3 诊断分组 按骨髓涂片诊断分为5组，即：白血病组、增生性贫血组、其他血液病组、多发性骨髓瘤组和正常骨髓组。
1.4 观察内容 包括细胞增生程度、巨核细胞计数及细胞分类。细胞增生程度：骨髓涂片用有核细胞与红细胞之比判定增生程度，骨髓小粒拉片按有核细胞与脂肪组织巨核细胞的数量来评定〔1〕，将骨髓细胞增生程度分为5级，计Ⅰ.增生极度低下、Ⅱ.增生低下、Ⅲ.增生活跃、Ⅳ.增生明显活跃、Ⅴ.增生极度活跃。巨核细胞计数：在低倍镜下逐个视野浏览计数全片巨核细胞数量。细胞分类：将粒细胞系统嗜酸、嗜碱细胞的各阶段分别合并为一组。淋巴细胞系统和浆细胞系统的各阶段细胞也分别合并为一组。在对骨髓小粒拉片进行细胞分类时，选小粒旁细胞完整、细胞分布均匀且见各类细胞的区域进行计数，共计数500个细胞。对骨髓涂片的细胞分类是从涂片体尾交界处开始，按一定顺序向尾部迂回渐进，计数各类有核细胞200个。
, 百拇医药
1.5 统计学分析 通过计算Kappa值评价两种方法诊断的一致性程度，对计量资料用中位数、95%可信限进行描述，组间比较时先将数据对数转换再行t检验。
2 结果
骨髓小粒拉片与骨髓涂片对细胞增生程度分级完全相同者73例，Kappa值0.35，两种方法的诊断一致性尚好，其余均为骨髓小粒拉片比骨髓涂片诊断分级的序次提高，提示骨髓小粒拉片更易显示骨髓增生程度。骨髓小粒拉片均可检出巨核细胞，而骨髓涂片有4.6%为阴性；骨髓小粒拉片对巨核细胞的计数显著高于涂片(P<0.05)。骨髓小粒拉片对粒细胞系统中的原始粒细胞的检出率、对浆细胞、网状细胞、组织嗜碱细胞的检出率均高于骨髓涂片。
3 讨论
骨髓小粒拉片比骨髓涂片更易显示骨髓细胞的增生程度，巨核细胞的计数明显高于涂片。在细胞分类中，骨髓小粒拉片对粒细胞系、红细胞系的分类和涂片基本类似，然而一些在涂片中较少见的细胞如浆细胞、网状细胞、组织嗜碱细胞等，易在骨髓小粒拉片上发现。这对血液疾病的诊断和鉴别是十分有利的。其原因在于骨髓小粒拉片是用骨髓抽取物中肉眼可见的颗粒制片，这些颗粒多系骨髓的实质组织，含有丰富的骨髓细胞成份等。而对涂片来说，尽管其对个别细胞的辨认较好，但易受血液稀释、细胞分散不好及细胞大小的影响〔2〕。
, http://www.100md.com
Pasquale〔3〕等曾将骨髓小粒拉片与骨髓印片、骨髓活检切片作了对照研究，发现骨髓小粒拉片与组织切片一样，能较真实的反映骨髓内细胞分布的实际情况，对于细胞形态和细胞的区别计数而言，以骨髓小粒拉片和印片更准确。
4 结论
骨髓小粒拉片在反映骨髓细胞增生程度，巨核细胞计数等方面比骨髓涂片优越，应和骨髓涂片一样，成为一种常规方法，以进一步提高骨髓诊断的准确率。
骨髓小粒拉片由于采用骨髓颗粒制片，操作要求较高，细胞易破碎，染色时间也较长。初学者常感制片困难。但作者认为，只要反复练习，细心体会，就能制备良好的骨髓小粒拉片。
致谢：本研究得到邓长安教授悉心指导，骨髓涂片的诊断由黄维帮、吴世敏老师作出，在此表示感谢。
参考文献
, 百拇医药
1，Minnich V.Microscopic examination of the bone marrow.1st ed.Chicago∶American Society of Clinical Pathologists Press，1982；3～8.
2，Jandl JH.Blood-Textbook of hematology，1st ed.Boston：Little，Brown Co，1987；26～28
3，Pasquale D，Chikkappa G.Comparative evaluation of bone marrow aspirate particle smears，biopsy imprints，and biopsy sections.Am J Hematol 1986；22∶381～389.
(收稿日期：2000-02-22), http://www.100md.com