薄层扫描法测定复方苦参注射液中苦参碱的含量
作者：宋茹 张晓席 袁继民 于连生 邓春光
单位：中国人民解放军济南军区药品检验所 济南 250022
关键词：薄层扫描法；苦参碱；复方苦参注射液
解放军药学学报990617 摘 要 目的：用薄层扫描法对复方苦参注射液中苦参碱进行了含量测定。方法：以甲苯-丙酮-乙醇-氨水(10∶10∶1∶0.1)为展开剂，在CS-9000飞点薄层扫描仪上以反射式锯齿扫描方式进行测定，λ=515nm。结果：样品含量在2.16～7.56μg范围内呈良好线性关系，r=0.999 2(n=6)，平均回收率99.0%，RSD=0.61%。结论：本法简便、快速、精确，重现性好，可作为复方苦参注射液的质量控制标准。
中图分类号 R272.2
DETERMINATION OF MATRINE IN COMPOUND RADIX SOPHORAE FLAVESCENTIS INJECTION BY TLCS
, http://www.100md.com
Song Ru，Zhang Xiaoxi，Yuan Jiming
(Institute for Drug Control of the Ji’nan Military Region,Ji’nan 250022)
Abstract AIM A method of the quantitative determination of matrine in compound radix sophorae flavescentis injection by TLCS.METHODS The mobile phase was toluene:acetone:ethanol:ammonia water(10∶10∶1∶0.1).The scanning method was dual wavelegth and zigzag with CS-9000 scanner.The detection wavelength was 515nm.RESULTS It showed a good linearity between 2.16-7.56μg with the correlation coefficient 0.999 2.The average recovery was 99.0%,RSD=0.61%.CONCLUSIONS The method is easy,rapid,accurate and reproducible.It can be a quality control standard of compound radix sophorae flavescentis injection.
, 百拇医药
Key words TLCS;Matrine;Compound radix sophorae flavescentis injection
复方苦参注射液系由苦参、当归等纯天然药材，经适宜的加工、提取，制剂而成。具有清热燥湿、解毒活血等功效，临床上用于治疗疥疮、牛皮癣等皮肤病，疗效确切，毒副作用小。苦参碱是苦参中的有效成分，苦参碱的测定方法文献报道有薄层扫描法[1]、高效液相色谱法[2]、高效毛细管电泳法[3]、气相色谱法[4]等。我们在开发研究复方苦参注射液的同时，建立了苦参碱的薄层扫描含量测定方法，用以控制该制剂的内在质量。
1 仪器与试药
CS-9000型飞点薄层扫描仪(日本岛津制作所)；定量毛细管(美国Drummond)；硅胶G预制薄层板(军事医学科学院)；苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所)；复方苦参注射液及缺被测药材的阴性对照溶液(自制，批号 970416、980921、9811008和981206)；化学试剂均为分析纯。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 精密称取苦参碱对照品适量，加乙醇溶解制成1mg.ml-1苦参碱的溶液。
2.2 薄层层析条件及扫描参数的选定 硅胶G预制薄层板，展开剂：甲苯-丙酮-乙醇-氨水(10∶10∶1∶0.1)，稀碘化铋钾溶液喷雾显色。
扫描参数的选定 将层析显色后的斑点于CS-9000型薄层扫描仪上在可见光区进行光谱扫描，选定λS=515nm,λR=650nm，反射法锯齿扫描，背景补偿，SX7，△Y=0.1mm。
2.3 线性关系考察 精密吸取苦参碱对照品溶液2、3、4、5、6、7μl分别点于同一薄层板上，上行展开，显色，作锯齿形扫描，以点样量与峰面积进行线性回归，得回归方程为
, 百拇医药
Y=73 162-127 392X,r=0.999 2(n=6)。
表明含量在2.16～7.56μg范围内呈良好线性关系。
2.4 空白干扰的考察 取复方苦参注射液、阴性对照溶液和苦参碱对照品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，显色，扫描。在扫描图中，供试品与对照品在相应位置有相应的吸收峰，而阴性对照液在相应位置上无吸收峰，说明样品中无干扰苦参碱测定的成分，方法专属性高(见图1)。
图1 苦参碱测定薄层扫描图
1 复方苦参注射液 2 苦参碱对照品 3 阴性对照
2.5 精密度实验 同一薄层板上同一斑点连续扫描5次，测得峰面积值的RSD=0.78%。测定同一薄层板上的5个相同量的对照品斑点峰面积值的RSD=1.04%。测定5块不同薄层板上的相同量的对照品斑点峰面积值的RSD=1.36%。表明精密度良好。
, 百拇医药
2.6 稳定性实验 精密吸取苦参碱对照品溶液5μl点于薄层板上，于显色后每隔20min扫描1次，结果表明苦参碱显色后在2h内稳定性良好，RSD=1.84%(n=5)。
2.7 重现性实验 取同一批号的复方苦参注射液，依法测定5次，结果RSD=0.82%(n=5)。
2.8 回收率实验 精密吸取一定量的复方苦参注射液，定量加入苦参碱对照品，以未加苦参碱对照品的复方苦参注射液为对照，按样品测定的方法测定苦参碱的含量，结果见表1。
表1 复方苦参注射液加样回收率实验结果 加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
, 百拇医药
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
2.16
2.14
99.1
2.16
2.12
98.1
2.16
2.15
, 百拇医药
99.5
99.0
0.61
2.16
2.13
98.6
2.16
2.15
99.5
2.9 样品含量测定 精密吸取复方苦参注射液10μl点于薄层板上，按标准曲线制备方法进行测定，用外标法计算含量。结果见表2。表2 复方苦参注射液样品含量测定结果(n=3) 批 号
含量(mg.ml-1)
, 百拇医药
RSD(%)
970416
0.38
0.84
980921
0.28
1.05
981108
0.32
1.10
981206
0.36
0.92
, http://www.100md.com
3 讨 论
3.1 本文选用的薄层扫描法，操作简便，样品不需任何预处理可直接点样，且灵敏度较高，重现性好，结果准确，可作为复方苦参注射液的定量控制标准。
3.2 复方苦参注射液由多种中药组成，成分复杂，经反复试验，确定上述展开系统。该系统分离效果良好，阴性对照无干扰。苦参碱在薄层展开后，要充分阴干，显色后应立即盖上同样大小的薄层板，在2h内完成扫描测定，以保证测定结果的准确性。
3.3 不同批号的复方苦参注射液中苦参碱的含量差别较大，可能与药材中苦参的产地、采集季节和生长期有关，建议制剂投料前先将药材进行含量测定。作者简介：宋茹，女，副主任药师。
参考文献：
1 王兆华，张大军，张艳秋等.喘咳平气雾剂中苦参碱的含量测定.中成药，1991；13(5)：14
2 金莉霞，崔燕岩，章观德.苦参生物碱的高效液相法测定.药学学报，1993；28(2)：136
3 罗明，贺平，吴孟超等.高效毛细管电泳法测定苦参碱和氧化苦参碱.中草药，1999；30(4)：261
4 刘从盛，刘文英，盛龙生.毛细管气相色谱法测定苦参及其制剂中苦参碱的含量.中草药，1993；24(8)：405
收稿日期：1999-10-26
修改日期：1999-11-19, 百拇医药
单位：中国人民解放军济南军区药品检验所 济南 250022
关键词：薄层扫描法；苦参碱；复方苦参注射液
解放军药学学报990617 摘 要 目的：用薄层扫描法对复方苦参注射液中苦参碱进行了含量测定。方法：以甲苯-丙酮-乙醇-氨水(10∶10∶1∶0.1)为展开剂，在CS-9000飞点薄层扫描仪上以反射式锯齿扫描方式进行测定，λ=515nm。结果：样品含量在2.16～7.56μg范围内呈良好线性关系，r=0.999 2(n=6)，平均回收率99.0%，RSD=0.61%。结论：本法简便、快速、精确，重现性好，可作为复方苦参注射液的质量控制标准。
中图分类号 R272.2
DETERMINATION OF MATRINE IN COMPOUND RADIX SOPHORAE FLAVESCENTIS INJECTION BY TLCS
, http://www.100md.com
Song Ru，Zhang Xiaoxi，Yuan Jiming
(Institute for Drug Control of the Ji’nan Military Region,Ji’nan 250022)
Abstract AIM A method of the quantitative determination of matrine in compound radix sophorae flavescentis injection by TLCS.METHODS The mobile phase was toluene:acetone:ethanol:ammonia water(10∶10∶1∶0.1).The scanning method was dual wavelegth and zigzag with CS-9000 scanner.The detection wavelength was 515nm.RESULTS It showed a good linearity between 2.16-7.56μg with the correlation coefficient 0.999 2.The average recovery was 99.0%,RSD=0.61%.CONCLUSIONS The method is easy,rapid,accurate and reproducible.It can be a quality control standard of compound radix sophorae flavescentis injection.
, 百拇医药
Key words TLCS;Matrine;Compound radix sophorae flavescentis injection
复方苦参注射液系由苦参、当归等纯天然药材，经适宜的加工、提取，制剂而成。具有清热燥湿、解毒活血等功效，临床上用于治疗疥疮、牛皮癣等皮肤病，疗效确切，毒副作用小。苦参碱是苦参中的有效成分，苦参碱的测定方法文献报道有薄层扫描法[1]、高效液相色谱法[2]、高效毛细管电泳法[3]、气相色谱法[4]等。我们在开发研究复方苦参注射液的同时，建立了苦参碱的薄层扫描含量测定方法，用以控制该制剂的内在质量。
1 仪器与试药
CS-9000型飞点薄层扫描仪(日本岛津制作所)；定量毛细管(美国Drummond)；硅胶G预制薄层板(军事医学科学院)；苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所)；复方苦参注射液及缺被测药材的阴性对照溶液(自制，批号 970416、980921、9811008和981206)；化学试剂均为分析纯。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 精密称取苦参碱对照品适量，加乙醇溶解制成1mg.ml-1苦参碱的溶液。
2.2 薄层层析条件及扫描参数的选定 硅胶G预制薄层板，展开剂：甲苯-丙酮-乙醇-氨水(10∶10∶1∶0.1)，稀碘化铋钾溶液喷雾显色。
扫描参数的选定 将层析显色后的斑点于CS-9000型薄层扫描仪上在可见光区进行光谱扫描，选定λS=515nm,λR=650nm，反射法锯齿扫描，背景补偿，SX7，△Y=0.1mm。
2.3 线性关系考察 精密吸取苦参碱对照品溶液2、3、4、5、6、7μl分别点于同一薄层板上，上行展开，显色，作锯齿形扫描，以点样量与峰面积进行线性回归，得回归方程为
, 百拇医药
Y=73 162-127 392X,r=0.999 2(n=6)。
表明含量在2.16～7.56μg范围内呈良好线性关系。
2.4 空白干扰的考察 取复方苦参注射液、阴性对照溶液和苦参碱对照品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，显色，扫描。在扫描图中，供试品与对照品在相应位置有相应的吸收峰，而阴性对照液在相应位置上无吸收峰，说明样品中无干扰苦参碱测定的成分，方法专属性高(见图1)。
图1 苦参碱测定薄层扫描图
1 复方苦参注射液 2 苦参碱对照品 3 阴性对照
2.5 精密度实验 同一薄层板上同一斑点连续扫描5次，测得峰面积值的RSD=0.78%。测定同一薄层板上的5个相同量的对照品斑点峰面积值的RSD=1.04%。测定5块不同薄层板上的相同量的对照品斑点峰面积值的RSD=1.36%。表明精密度良好。
, 百拇医药
2.6 稳定性实验 精密吸取苦参碱对照品溶液5μl点于薄层板上，于显色后每隔20min扫描1次，结果表明苦参碱显色后在2h内稳定性良好，RSD=1.84%(n=5)。
2.7 重现性实验 取同一批号的复方苦参注射液，依法测定5次，结果RSD=0.82%(n=5)。
2.8 回收率实验 精密吸取一定量的复方苦参注射液，定量加入苦参碱对照品，以未加苦参碱对照品的复方苦参注射液为对照，按样品测定的方法测定苦参碱的含量，结果见表1。
表1 复方苦参注射液加样回收率实验结果 加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
, 百拇医药
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
2.16
2.14
99.1
2.16
2.12
98.1
2.16
2.15
, 百拇医药
99.5
99.0
0.61
2.16
2.13
98.6
2.16
2.15
99.5
2.9 样品含量测定 精密吸取复方苦参注射液10μl点于薄层板上，按标准曲线制备方法进行测定，用外标法计算含量。结果见表2。表2 复方苦参注射液样品含量测定结果(n=3) 批 号
含量(mg.ml-1)
, 百拇医药
RSD(%)
970416
0.38
0.84
980921
0.28
1.05
981108
0.32
1.10
981206
0.36
0.92
, http://www.100md.com
3 讨 论
3.1 本文选用的薄层扫描法，操作简便，样品不需任何预处理可直接点样，且灵敏度较高，重现性好，结果准确，可作为复方苦参注射液的定量控制标准。
3.2 复方苦参注射液由多种中药组成，成分复杂，经反复试验，确定上述展开系统。该系统分离效果良好，阴性对照无干扰。苦参碱在薄层展开后，要充分阴干，显色后应立即盖上同样大小的薄层板，在2h内完成扫描测定，以保证测定结果的准确性。
3.3 不同批号的复方苦参注射液中苦参碱的含量差别较大，可能与药材中苦参的产地、采集季节和生长期有关，建议制剂投料前先将药材进行含量测定。作者简介：宋茹，女，副主任药师。
参考文献：
1 王兆华，张大军，张艳秋等.喘咳平气雾剂中苦参碱的含量测定.中成药，1991；13(5)：14
2 金莉霞，崔燕岩，章观德.苦参生物碱的高效液相法测定.药学学报，1993；28(2)：136
3 罗明，贺平，吴孟超等.高效毛细管电泳法测定苦参碱和氧化苦参碱.中草药，1999；30(4)：261
4 刘从盛，刘文英，盛龙生.毛细管气相色谱法测定苦参及其制剂中苦参碱的含量.中草药，1993；24(8)：405
收稿日期：1999-10-26
修改日期：1999-11-19, 百拇医药
参见：首页 > 药学版 > 药物手册 > 中成药 > 内科用药 > 其它内科药 > 复方苦参注射液