口腔扁平苔藓与HLA的相关性研究
作者：唐国瑶 许国祺 张工梁 郑素琴 稽川华
单位：上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科(唐国瑶 许国祺 200011)；上海市血液中心(张工梁 郑素琴 稽川华)
关键词：口腔；扁平苔癣；HLA抗原
实用口腔医学杂志990305
〔摘要〕 目的：探讨口腔扁平苔藓与人类白细胞抗原的相关性。方法：应用微量淋巴细胞毒试验，检测19 例上海汉族人口腔扁平苔藓外周血的人类白细胞抗原(HLA-A、-B、-DR、-DQ)的抗原频率。结果：患者组HLA-DR1抗原频率(36.84%)较正常对照组(1.08%)显著增高(P<0.001)。结论：HLA-DR1 与口腔扁平苔藓明显相关。带有HLA-DRl 相关基因的个体对口腔扁平苔藓具有遗传易感性。
Analysis of HLA antigens in patients with oral lichen planus
, 百拇医药
Tang Guoyao, Xu Guoqi, Zhang Gongliang, et al. Department of Oral Medicine, Ninth Peoples Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200011
〔Abstract〕Objective: To study the possible role of human leucocyte antigen(HLA) in the patients with oral lichen planus(OLP).Methods:The frequencies of HLA-A, -B,-DR, -DQ were determined in 19 patients with OLP of Hannationality in Shanghai by microdrop lymphcyte cytotoxicity method.Result:HLA-DRl was present in 36.84% of the patients with OLP, compared with that in 1.08%of healthy control(P<0.001).Conclusion:The finding strongly suggest that HLA-DRl may be a genetic predisposition or susceptibility to the development of OLP.
, 百拇医药
Key words Mouth; Lichen planus; HLA antigens
人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA) 是人类的主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex)， HLA 定位于6号染色体短臂上，这是迄今所知最为复杂的一个人类遗传多态性系统。使用HLA 作为遗传标记，如果发现某病与HLA 抗原关联，一般表明该疾病的易感性中带有遗传因素[1]。许多资料表明，口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP) 与遗传因素有关。在OLP 与HLA 关联性研究方面，国外虽有一些报道[3～7]，但结论不一致。国内报道仅限于中国台湾[8]。为此，本文对上海地区OLP 患者进行HLA-A、-B、-DR、-DQ 抗原测定与分析，以探讨OLP 与HLA 的相关性。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 病例选择
随机选择本院口腔粘膜病专科门诊的OLP 患者19 例，其中男6 例，女13 例，年龄36～65 岁，平均年龄48.1 岁。随机选择健康人396 名对其中211 名进行HLA-A、-B 分型，185 例进行HLA-DR、-DQ 分型。为使实验结果可靠，限定以上两组检测对象均为生活在上海地区的沪籍汉族人，且无血缘关系。
1.2 HLA分型血清
由上海市输血研究所免疫遗传研究室提供。
1.3 实验方法
采用国际通用的美国国立卫生院推荐的微量淋巴细胞毒试验[1]分析HLA-A、-B、-DR、-DQ 抗原。
1.4 统计学方法[1，6]
, 百拇医药
1.4.1 相对危险率(relative risk,RR) 表示具有某种HLA 抗原的个体患某种疾病的危险性是无此抗原的个体多少倍。使用Woolf 公式计算：RR=(P+.C-)/(P-.C-)/(P-.C+)。式中P+、P- 分别表示疾病组某种HLA 抗原的阳性、阴性例数，C+、C- 分别表示对照组的相应例数。
1.4.2 RR 的显著性检验 使用Yates 校正式χ2 检验求出χ2 值，查χ2 表求相应P 值。按下述公式对P 值进行校正：校正P 值(PC)=P 值× 被测试的HLA 抗原数，如果PC<0.05 方认为该HLA 抗原与疾病具有显著性关联。
, 百拇医药
1.4.3 病因分数(etiology fraction, EF) 用于评价HLA 与疾病关联的强度。EF 计算公式如下：
2 结 果
在19例OLP 患者中，共鉴定出6 个A 位点抗原，8 个B 位点抗原，10 个DR 位点抗原，4 个DQ 位点抗原。OLP 与正常对照组HLA 抗原频率比较见表1、2。两表显示，仅HLA-DRl 抗原的RR 值(36.84%) 比正常对照组的1.08% 显著升高，P<0.001 ，校正值PC<0.002 8 ，有显著意义，表明OLP 患者与HLA-DRl 位点相关，但EF=0.36 ，说明OLP 仅部分与HLA-DRl 相关，因为EF=1 表示全相关。
表1 OLP 与正常对照组HLA-A、B抗原频率比较 HLA
, 百拇医药
抗原
对照组
OLP
RR
χ2
P
PC
阳性数(%)
阳性数(%)
A1
8 (3.78)
1 (5.26)
1.41
, 百拇医药
0.09
NS①
NS
A2
107(50.71)
13(68.42)
2.11
1.14
NS
NS
A3
4(1.89)
1(5.26)
, 百拇医药
2.88
0.02
NS
NS
A9
51(24.12)
4(21.05)
0.84
0.0006
NS
NS
A10
16(7.59)
, 百拇医药
2(10.53)
1.51
0.0008
NS
NS
A19
69(32.71)
7(36.84)
1.20
0.0003
NS
NS
B5
, http://www.100md.com
33(15.82)
4(21.05)
1.44
0.084
NS
NS
B7
5(2.37)
2(10.53)
12.12
1.65
NS
NS
, 百拇医药
B12
14(6.64)
1(5.26)
0.78
0.064
NS
NS
B13
37(17.54)
6(31.58)
2.17
1.43
NS
, 百拇医药
NS
B15
51(24.17)
4(21.05)
0.84
0.006
NS
NS
B17
32(15.16)
3(15.79)
1.05
0.068
, 百拇医药
NS
NS
B22
25(11.73)
1(5.26)
0.41
0.24
NS
NS
B40
65(30.88)
9(47.37)
2.02
, http://www.100md.com
1.37
NS
NS
PC：校正P 值 ① NS：差别无显著性，下同表2 OLP 与正常对照组HLA-DR、DQ抗原频率比较 HLA
抗原
对照组
OLP
RR
χ2
P
PC
阳性数(%)
, 百拇医药
阳性数(%)
DR1
2(1.08)
7(36.84)
53.38
44.12
<0.001
<0.002 8
DR2
53(28.65)
3(15.79)
0.47
, 百拇医药 0.0042
NS①
-
DR3
20(10.81)
3(15.79)
1.55
0.0004
NS
-
DR4
32(17.30)
1(5.26)
, http://www.100md.com
0.27
1.06
NS
-
DR5
68(36.76)
4(21.05)
0.46
1.24
NS
-
DR6
40(21.62)
, 百拇医药
1(5.26)
0.20
1.94
NS
-
DR7
30(16.22)
7(36.84)
3.01
3.65
NS
-
DR9
, 百拇医药
53(28.65)
1(5.26)
0.14
2.77
NS
-
DR10
4(2.16)
2(10.53)
5.32
1.80
NS
-
, http://www.100md.com
DR13
32(17.30)
1(5.26)
0.27
2.83
NS
-
DQ2
49(26.49)
4(21.05)
0.74
0.0012
NS
, 百拇医药
-
DQ5
23(12.43)
4(21.05)
1.88
0.0024
NS
-
DQ6
78(42.16)
4(21.05)
0.37
2.38
, 百拇医药
NS
-
DQ7
76(41.08)
3(15.79)
0.27
3.64
NS
-
3 讨 论3.1 OPL 与HLA-DRl 相关
本文发现OLP 患者HLA-DRl 抗原频率显著增高，与美国人[3]和意大利[6]的检出结果一样，但不同于同属东方人的日本人[4] 和中国台湾人[8]的检测所见。这可能是由于：① HLA 具有种族、地区差异[1]；② 不同种族对OLP 的易感性存在差异[8]；③ OLP 并非由单一遗传因素引起，而是一种由多种发病因素引起的疾病实体[3，5]。本文HLA-DRl 与OLP 相关联的强度即病因分数为0.36 ，证实HLA-DR1 相关基因仅部分与OLP 易感性有关，故提示在研究OLP 的病因时，应注意探索其它致病因子的启动作用或协同作用[7]。
, 百拇医药
3.2 HLA-DR 抗原在OLP 发病机理中的作用
根据本文结果，有理由推测HLA-DR1 在OLP 的发病机理中起着一定的作用。已知免疫反应基因与HLA-DR1 位点密切相关，正常情况下HLA-DR 抗原通过位于上皮内的郎格罕细胞(Langhans cell,LC) 表面的抗原表达出来[3]。近年来越来越多的研究结果支持OLP 是一种由T 淋巴细胞介导的免疫反应。当口腔粘膜遭受某种致病因素刺激，发生上皮抗原性改变时，首先是LC 识别这些改变的抗原，并递呈T 淋巴细胞，从而使T 细胞处于活化状态。LC 与T 淋巴细胞之间的作用过程受HLA-DR 抗原的限制；接着，活化的TH 细胞释放多种淋巴因子如IFN-γ、TNF 等。这些淋巴因子协同作用，诱导角朊细胞、成纤维细胞及黑色素细胞合成并表达HLA-DR 抗原。上述细胞表面HLA-DR 的“异常”表达可促使更多的TH 产生IFN-r 与TNF ，由这些淋巴因子实施对HLA-DR 阳性细胞攻击。这种链锁反应最终导致上皮细胞损伤。由此可见，在OLP 上皮细胞损伤的各个环节，HLA-DR 抗原的正常与异常表达均起到重要作用[9]。
, 百拇医药
基于本研究结果，无关群体的OLP 患者与HLA-DR1 相关联，有必要对家族性OLP 患者开展HLA 调查，这将有助于进一步明确HLA-DR1 是否为OLP 的一种遗传性状。
本课题由卫生部青年科学研究基金资助(92-222)
参考文献
1 赵桐茂(主编).HLA 型原理和应用.上海:上海科学技术出版社，1984.123～280
2 Scully C,El-Kom M.Lichen plunus:review and update on pathogenesis. J Oral Pathol,1985,14:431
3 Powell FC,Rogers RS, Dickson ER,et al .An association between HLA-DR1 and lichen planus. Br J Dermatol,1986,114:473
, 百拇医药
4 Watananbe T, Ohishi M,Tanaka K ,et al. Analysis of HLA antigens in Japanese with oral lichen planus and lichenoid reactions.J Oral Pathol,1986,15:529
5 Jontell M,Stahlblad PA, Rosdanl I,et al. HLA-DR3 antigens in erosive oral lichen planus,cutaneous lichen planus,and lichenoid reactions. Acta Odontol Scand,1987,45:309
6 Valsecchi R,Bontempelli M,Rossi A,et al.HLA-DR and DQ antigens in lichen planus.Acta Derm Venereol,1988,68:77
, 百拇医药
7 Porter K,Scully C,Porter S. Class I and class II HLA antigens in British patients with oral lichen planus. Oral Surg Oral Med Oral Pathol, 1993,75:176
8 Lin SC,Sun A. HLA-DR and DQ antigens in Chinese patients with oral lichen planus. J Oral Pathol Med,1990,19:298
9 Shiohara T,Moriya N,Nagashima M. The lichenoid tissue reaction: A new concept of pathogenesis. Int J Dematol,1988,27:365
(收稿：1999-08-14 修回：1998-11-20), http://www.100md.com
单位：上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科(唐国瑶 许国祺 200011)；上海市血液中心(张工梁 郑素琴 稽川华)
关键词：口腔；扁平苔癣；HLA抗原
实用口腔医学杂志990305
〔摘要〕 目的：探讨口腔扁平苔藓与人类白细胞抗原的相关性。方法：应用微量淋巴细胞毒试验，检测19 例上海汉族人口腔扁平苔藓外周血的人类白细胞抗原(HLA-A、-B、-DR、-DQ)的抗原频率。结果：患者组HLA-DR1抗原频率(36.84%)较正常对照组(1.08%)显著增高(P<0.001)。结论：HLA-DR1 与口腔扁平苔藓明显相关。带有HLA-DRl 相关基因的个体对口腔扁平苔藓具有遗传易感性。
Analysis of HLA antigens in patients with oral lichen planus
, 百拇医药
Tang Guoyao, Xu Guoqi, Zhang Gongliang, et al. Department of Oral Medicine, Ninth Peoples Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200011
〔Abstract〕Objective: To study the possible role of human leucocyte antigen(HLA) in the patients with oral lichen planus(OLP).Methods:The frequencies of HLA-A, -B,-DR, -DQ were determined in 19 patients with OLP of Hannationality in Shanghai by microdrop lymphcyte cytotoxicity method.Result:HLA-DRl was present in 36.84% of the patients with OLP, compared with that in 1.08%of healthy control(P<0.001).Conclusion:The finding strongly suggest that HLA-DRl may be a genetic predisposition or susceptibility to the development of OLP.
, 百拇医药
Key words Mouth; Lichen planus; HLA antigens
人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA) 是人类的主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex)， HLA 定位于6号染色体短臂上，这是迄今所知最为复杂的一个人类遗传多态性系统。使用HLA 作为遗传标记，如果发现某病与HLA 抗原关联，一般表明该疾病的易感性中带有遗传因素[1]。许多资料表明，口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP) 与遗传因素有关。在OLP 与HLA 关联性研究方面，国外虽有一些报道[3～7]，但结论不一致。国内报道仅限于中国台湾[8]。为此，本文对上海地区OLP 患者进行HLA-A、-B、-DR、-DQ 抗原测定与分析，以探讨OLP 与HLA 的相关性。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 病例选择
随机选择本院口腔粘膜病专科门诊的OLP 患者19 例，其中男6 例，女13 例，年龄36～65 岁，平均年龄48.1 岁。随机选择健康人396 名对其中211 名进行HLA-A、-B 分型，185 例进行HLA-DR、-DQ 分型。为使实验结果可靠，限定以上两组检测对象均为生活在上海地区的沪籍汉族人，且无血缘关系。
1.2 HLA分型血清
由上海市输血研究所免疫遗传研究室提供。
1.3 实验方法
采用国际通用的美国国立卫生院推荐的微量淋巴细胞毒试验[1]分析HLA-A、-B、-DR、-DQ 抗原。
1.4 统计学方法[1，6]
, 百拇医药
1.4.1 相对危险率(relative risk,RR) 表示具有某种HLA 抗原的个体患某种疾病的危险性是无此抗原的个体多少倍。使用Woolf 公式计算：RR=(P+.C-)/(P-.C-)/(P-.C+)。式中P+、P- 分别表示疾病组某种HLA 抗原的阳性、阴性例数，C+、C- 分别表示对照组的相应例数。
1.4.2 RR 的显著性检验 使用Yates 校正式χ2 检验求出χ2 值，查χ2 表求相应P 值。按下述公式对P 值进行校正：校正P 值(PC)=P 值× 被测试的HLA 抗原数，如果PC<0.05 方认为该HLA 抗原与疾病具有显著性关联。
, 百拇医药
1.4.3 病因分数(etiology fraction, EF) 用于评价HLA 与疾病关联的强度。EF 计算公式如下：
2 结 果
在19例OLP 患者中，共鉴定出6 个A 位点抗原，8 个B 位点抗原，10 个DR 位点抗原，4 个DQ 位点抗原。OLP 与正常对照组HLA 抗原频率比较见表1、2。两表显示，仅HLA-DRl 抗原的RR 值(36.84%) 比正常对照组的1.08% 显著升高，P<0.001 ，校正值PC<0.002 8 ，有显著意义，表明OLP 患者与HLA-DRl 位点相关，但EF=0.36 ，说明OLP 仅部分与HLA-DRl 相关，因为EF=1 表示全相关。
表1 OLP 与正常对照组HLA-A、B抗原频率比较 HLA
, 百拇医药
抗原
对照组
OLP
RR
χ2
P
PC
阳性数(%)
阳性数(%)
A1
8 (3.78)
1 (5.26)
1.41
, 百拇医药
0.09
NS①
NS
A2
107(50.71)
13(68.42)
2.11
1.14
NS
NS
A3
4(1.89)
1(5.26)
, 百拇医药
2.88
0.02
NS
NS
A9
51(24.12)
4(21.05)
0.84
0.0006
NS
NS
A10
16(7.59)
, 百拇医药
2(10.53)
1.51
0.0008
NS
NS
A19
69(32.71)
7(36.84)
1.20
0.0003
NS
NS
B5
, http://www.100md.com
33(15.82)
4(21.05)
1.44
0.084
NS
NS
B7
5(2.37)
2(10.53)
12.12
1.65
NS
NS
, 百拇医药
B12
14(6.64)
1(5.26)
0.78
0.064
NS
NS
B13
37(17.54)
6(31.58)
2.17
1.43
NS
, 百拇医药
NS
B15
51(24.17)
4(21.05)
0.84
0.006
NS
NS
B17
32(15.16)
3(15.79)
1.05
0.068
, 百拇医药
NS
NS
B22
25(11.73)
1(5.26)
0.41
0.24
NS
NS
B40
65(30.88)
9(47.37)
2.02
, http://www.100md.com
1.37
NS
NS
PC：校正P 值 ① NS：差别无显著性，下同表2 OLP 与正常对照组HLA-DR、DQ抗原频率比较 HLA
抗原
对照组
OLP
RR
χ2
P
PC
阳性数(%)
, 百拇医药
阳性数(%)
DR1
2(1.08)
7(36.84)
53.38
44.12
<0.001
<0.002 8
DR2
53(28.65)
3(15.79)
0.47
, 百拇医药 0.0042
NS①
-
DR3
20(10.81)
3(15.79)
1.55
0.0004
NS
-
DR4
32(17.30)
1(5.26)
, http://www.100md.com
0.27
1.06
NS
-
DR5
68(36.76)
4(21.05)
0.46
1.24
NS
-
DR6
40(21.62)
, 百拇医药
1(5.26)
0.20
1.94
NS
-
DR7
30(16.22)
7(36.84)
3.01
3.65
NS
-
DR9
, 百拇医药
53(28.65)
1(5.26)
0.14
2.77
NS
-
DR10
4(2.16)
2(10.53)
5.32
1.80
NS
-
, http://www.100md.com
DR13
32(17.30)
1(5.26)
0.27
2.83
NS
-
DQ2
49(26.49)
4(21.05)
0.74
0.0012
NS
, 百拇医药
-
DQ5
23(12.43)
4(21.05)
1.88
0.0024
NS
-
DQ6
78(42.16)
4(21.05)
0.37
2.38
, 百拇医药
NS
-
DQ7
76(41.08)
3(15.79)
0.27
3.64
NS
-
3 讨 论3.1 OPL 与HLA-DRl 相关
本文发现OLP 患者HLA-DRl 抗原频率显著增高，与美国人[3]和意大利[6]的检出结果一样，但不同于同属东方人的日本人[4] 和中国台湾人[8]的检测所见。这可能是由于：① HLA 具有种族、地区差异[1]；② 不同种族对OLP 的易感性存在差异[8]；③ OLP 并非由单一遗传因素引起，而是一种由多种发病因素引起的疾病实体[3，5]。本文HLA-DRl 与OLP 相关联的强度即病因分数为0.36 ，证实HLA-DR1 相关基因仅部分与OLP 易感性有关，故提示在研究OLP 的病因时，应注意探索其它致病因子的启动作用或协同作用[7]。
, 百拇医药
3.2 HLA-DR 抗原在OLP 发病机理中的作用
根据本文结果，有理由推测HLA-DR1 在OLP 的发病机理中起着一定的作用。已知免疫反应基因与HLA-DR1 位点密切相关，正常情况下HLA-DR 抗原通过位于上皮内的郎格罕细胞(Langhans cell,LC) 表面的抗原表达出来[3]。近年来越来越多的研究结果支持OLP 是一种由T 淋巴细胞介导的免疫反应。当口腔粘膜遭受某种致病因素刺激，发生上皮抗原性改变时，首先是LC 识别这些改变的抗原，并递呈T 淋巴细胞，从而使T 细胞处于活化状态。LC 与T 淋巴细胞之间的作用过程受HLA-DR 抗原的限制；接着，活化的TH 细胞释放多种淋巴因子如IFN-γ、TNF 等。这些淋巴因子协同作用，诱导角朊细胞、成纤维细胞及黑色素细胞合成并表达HLA-DR 抗原。上述细胞表面HLA-DR 的“异常”表达可促使更多的TH 产生IFN-r 与TNF ，由这些淋巴因子实施对HLA-DR 阳性细胞攻击。这种链锁反应最终导致上皮细胞损伤。由此可见，在OLP 上皮细胞损伤的各个环节，HLA-DR 抗原的正常与异常表达均起到重要作用[9]。
, 百拇医药
基于本研究结果，无关群体的OLP 患者与HLA-DR1 相关联，有必要对家族性OLP 患者开展HLA 调查，这将有助于进一步明确HLA-DR1 是否为OLP 的一种遗传性状。
本课题由卫生部青年科学研究基金资助(92-222)
参考文献
1 赵桐茂(主编).HLA 型原理和应用.上海:上海科学技术出版社，1984.123～280
2 Scully C,El-Kom M.Lichen plunus:review and update on pathogenesis. J Oral Pathol,1985,14:431
3 Powell FC,Rogers RS, Dickson ER,et al .An association between HLA-DR1 and lichen planus. Br J Dermatol,1986,114:473
, 百拇医药
4 Watananbe T, Ohishi M,Tanaka K ,et al. Analysis of HLA antigens in Japanese with oral lichen planus and lichenoid reactions.J Oral Pathol,1986,15:529
5 Jontell M,Stahlblad PA, Rosdanl I,et al. HLA-DR3 antigens in erosive oral lichen planus,cutaneous lichen planus,and lichenoid reactions. Acta Odontol Scand,1987,45:309
6 Valsecchi R,Bontempelli M,Rossi A,et al.HLA-DR and DQ antigens in lichen planus.Acta Derm Venereol,1988,68:77
, 百拇医药
7 Porter K,Scully C,Porter S. Class I and class II HLA antigens in British patients with oral lichen planus. Oral Surg Oral Med Oral Pathol, 1993,75:176
8 Lin SC,Sun A. HLA-DR and DQ antigens in Chinese patients with oral lichen planus. J Oral Pathol Med,1990,19:298
9 Shiohara T,Moriya N,Nagashima M. The lichenoid tissue reaction: A new concept of pathogenesis. Int J Dematol,1988,27:365
(收稿：1999-08-14 修回：1998-11-20), http://www.100md.com