痤疮患者外周血白细胞雄激素受体的测定
作者：曾燕 蒋艳霞 郑金锋 王兴友 胡维诚
单位：曾燕 蒋艳霞 郑金锋 王兴友 250022 解放军济南医学高等专科学校病理教研室；胡维诚 山东医科大学病理生理教研室
关键词：
中华皮肤科杂志990232 寻常性痤疮是青春期常见的慢性毛囊皮脂腺炎症，好发于面部。多数学者认为痤疮在青春期的高发率与此期肾上腺功能活跃、雄激素分泌增多有关[1，2]。已证明雄激素受体(AR)是介导雄激素作用的关键大分子，AR的量及功能是雄激素发挥作用的必要条件[3]。我们采用放射免疫法，放射配体结合法，检测了痤疮患者外周血雄激素水平及白细胞AR的含量，以探讨雄激素及其受体对痤疮发生的影响。
一、材料与方法
(一)研究对象：实验组为在校青年学员40例，男20例，女20例；年龄17～22岁；面部有明显的痤疮(根据Pillsbury分类法为中度痤疮)。对照组40例，男20例，女20例。正常无痤疮学员体检的血液标本，年龄17～22岁。男学员的血样采集在早上6～7时之间，女学员的血样采集在月经期后4～6天。
, http://www.100md.com
(二)实验方法：
1.用血清睾酮放射免疫测定试剂盒(RIA KIT)测定两组的血清睾酮水平(天津九鼎医学生物工程公司)。
2.用放射配体方法测定两组白细胞AR的水平。
(1)主要试剂：17-α甲基3H三烯醇酮(3H-methyltrienolone,简称3H-R1881,美国Dupont公司出品)，放射比度87Ci/mmol，放射纯度100%，放射浓度1mCi/mL；R1881(美国Dupont公司出品)；闪烁液：POPOP 0.4g，PPO 4g，二甲苯800mL，乙二醇乙醚200mL。仪器：美国Beckman LS-5000CE液闪仪计数。
(2)白细胞分离[4]：将肝素抗凝静脉血离心(600r/min 10min)，弃血浆，用3%～5%葡聚糖T500使红细胞聚集沉淀，然后用Tris-NH4Cl溶液37℃水温溶解残存的红细胞，用Hanks液洗2遍，可获得较为纯净的白细胞。
, 百拇医药
(3)白细胞AR的测定：用pH值7.35的Hanks液将白细胞调至(1～3)×107个细胞/mL，于每0.5mL细胞悬液内加入一定量的3H-R1881(1nmol/L)，此为总结合管，用加等量的3H-R1881及大于其浓度500倍的R1881平行管为非特异结合管。在37℃温育45min后，迅速放入冰浴并加2mL冷PBS终止反应，1000r/min离心3min，弃上清液，细胞再用冷PBS洗3遍，以去除游离激素。于细胞沉渣中加入0.1mL甲酸，在100℃沸水中消化后液闪计数。总结合管与非特异结合管计数的差值为白细胞3H-R1881的特异结合量。按公式求出每个白细胞3H-R1881特异结合位点，即受体数。
二、结果
(一)20例男性痤疮患者，血浆睾酮轻度升高，与正常对照组相比较无统计学意义，但其外周血白细胞AR的水平与对照组相比显著升高(P< 0.05)。我们还检测了12例轻度、6例重度男性痤疮患者，其外周血白细胞AR水平与正常对照组相比也有明显升高，但血浆睾酮水平没有明显的变化。因收集的患者例数尚少，未进行统计学处理。
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(二)20例女性痤疮患者，血浆睾酮水平及外周血白细胞AR水平与对照组相比均显著升高(P<0.01)。我们还检测了10例轻度、5例重度女性痤疮患者，其中轻度痤疮患者血浆睾酮及外周血白细胞AR水平无明显变化，而重度患者血浆睾酮及白细胞AR水平明显升高，由于病例数较少，未进行统计学处理。见表1。
表1 座疮患者与正常人血浆睾酮及细胞AR的比较 组 别
例 数
血浆睾酮(ng/dL)
雄激素受体(受体数/每细胞)
±s
t值±s
, 百拇医药
t值
男性
对照组
20
496±78
-
624±37
-
座疮组
20
527.3±96
0.86
718±79
, http://www.100md.com
2.06*
女性
对照组
20
38.9±12.8
-
587±41
-
座疮组
20
97.5±25.6
2.83**
, http://www.100md.com 725±64
2.16**
注：t值为同性别患者组与对照组比较.*P<0.05,**P<0.01
三、讨论
自从Hamilton首次提出“男性激素物质”参与了痤疮的发病以来，雄激素与痤疮的关系是皮肤科专家关注的热点。本实验结果表明男性痤疮患者血清睾酮水平无明显升高，但白细胞AR水平与对照组相比显著升高。而女性青年痤疮患者(除轻度外)血清睾酮及白细胞AR的水平均显著高于对照组，说明雄激素及其受体含量增高在女性痤疮的发病中起着更重要的作用。
参考文献
1 Lucky AW, Biro FM, Huster GA, et al. Acne vulgaris in premenarchal girls: an early sign of puberty associated with rising levels of dehydroepiandrosterone. Arch Dermatol, 1994,130:308-314.
, 百拇医药
2 Lucky AW, Brio FM, Huster GA, et al. Acne vulgaris in early adolescent boys: correlations with pubertal maturation and age. Arch Dermatol, 1991,127:210-216.
3 曾燕，卢建，张金山，等.雄激素对正常男性及一睾丸女性化综合征患者外阴部皮肤成纤维细胞雄激素受体的调节. 中国病理生理杂志, 1994,10:276-279.
4 赵瑛，刘志民，邵福源，等.人外周血白细胞雄激素受体的鉴定及意义. 中华核医学杂志, 1995,15:51-52.
(收稿：1997-11-11 修回：1998-09-21), 百拇医药
单位：曾燕 蒋艳霞 郑金锋 王兴友 250022 解放军济南医学高等专科学校病理教研室；胡维诚 山东医科大学病理生理教研室
关键词：
中华皮肤科杂志990232 寻常性痤疮是青春期常见的慢性毛囊皮脂腺炎症，好发于面部。多数学者认为痤疮在青春期的高发率与此期肾上腺功能活跃、雄激素分泌增多有关[1，2]。已证明雄激素受体(AR)是介导雄激素作用的关键大分子，AR的量及功能是雄激素发挥作用的必要条件[3]。我们采用放射免疫法，放射配体结合法，检测了痤疮患者外周血雄激素水平及白细胞AR的含量，以探讨雄激素及其受体对痤疮发生的影响。
一、材料与方法
(一)研究对象：实验组为在校青年学员40例，男20例，女20例；年龄17～22岁；面部有明显的痤疮(根据Pillsbury分类法为中度痤疮)。对照组40例，男20例，女20例。正常无痤疮学员体检的血液标本，年龄17～22岁。男学员的血样采集在早上6～7时之间，女学员的血样采集在月经期后4～6天。
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(二)实验方法：
1.用血清睾酮放射免疫测定试剂盒(RIA KIT)测定两组的血清睾酮水平(天津九鼎医学生物工程公司)。
2.用放射配体方法测定两组白细胞AR的水平。
(1)主要试剂：17-α甲基3H三烯醇酮(3H-methyltrienolone,简称3H-R1881,美国Dupont公司出品)，放射比度87Ci/mmol，放射纯度100%，放射浓度1mCi/mL；R1881(美国Dupont公司出品)；闪烁液：POPOP 0.4g，PPO 4g，二甲苯800mL，乙二醇乙醚200mL。仪器：美国Beckman LS-5000CE液闪仪计数。
(2)白细胞分离[4]：将肝素抗凝静脉血离心(600r/min 10min)，弃血浆，用3%～5%葡聚糖T500使红细胞聚集沉淀，然后用Tris-NH4Cl溶液37℃水温溶解残存的红细胞，用Hanks液洗2遍，可获得较为纯净的白细胞。
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(3)白细胞AR的测定：用pH值7.35的Hanks液将白细胞调至(1～3)×107个细胞/mL，于每0.5mL细胞悬液内加入一定量的3H-R1881(1nmol/L)，此为总结合管，用加等量的3H-R1881及大于其浓度500倍的R1881平行管为非特异结合管。在37℃温育45min后，迅速放入冰浴并加2mL冷PBS终止反应，1000r/min离心3min，弃上清液，细胞再用冷PBS洗3遍，以去除游离激素。于细胞沉渣中加入0.1mL甲酸，在100℃沸水中消化后液闪计数。总结合管与非特异结合管计数的差值为白细胞3H-R1881的特异结合量。按公式求出每个白细胞3H-R1881特异结合位点，即受体数。
二、结果
(一)20例男性痤疮患者，血浆睾酮轻度升高，与正常对照组相比较无统计学意义，但其外周血白细胞AR的水平与对照组相比显著升高(P< 0.05)。我们还检测了12例轻度、6例重度男性痤疮患者，其外周血白细胞AR水平与正常对照组相比也有明显升高，但血浆睾酮水平没有明显的变化。因收集的患者例数尚少，未进行统计学处理。
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(二)20例女性痤疮患者，血浆睾酮水平及外周血白细胞AR水平与对照组相比均显著升高(P<0.01)。我们还检测了10例轻度、5例重度女性痤疮患者，其中轻度痤疮患者血浆睾酮及外周血白细胞AR水平无明显变化，而重度患者血浆睾酮及白细胞AR水平明显升高，由于病例数较少，未进行统计学处理。见表1。
表1 座疮患者与正常人血浆睾酮及细胞AR的比较 组 别
例 数
血浆睾酮(ng/dL)
雄激素受体(受体数/每细胞)
±st值
±s, 百拇医药
t值
男性
对照组
20
496±78
-
624±37
-
座疮组
20
527.3±96
0.86
718±79
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2.06*
女性
对照组
20
38.9±12.8
-
587±41
-
座疮组
20
97.5±25.6
2.83**
, http://www.100md.com 725±64
2.16**
注：t值为同性别患者组与对照组比较.*P<0.05,**P<0.01
三、讨论
自从Hamilton首次提出“男性激素物质”参与了痤疮的发病以来，雄激素与痤疮的关系是皮肤科专家关注的热点。本实验结果表明男性痤疮患者血清睾酮水平无明显升高，但白细胞AR水平与对照组相比显著升高。而女性青年痤疮患者(除轻度外)血清睾酮及白细胞AR的水平均显著高于对照组，说明雄激素及其受体含量增高在女性痤疮的发病中起着更重要的作用。
参考文献
1 Lucky AW, Biro FM, Huster GA, et al. Acne vulgaris in premenarchal girls: an early sign of puberty associated with rising levels of dehydroepiandrosterone. Arch Dermatol, 1994,130:308-314.
, 百拇医药
2 Lucky AW, Brio FM, Huster GA, et al. Acne vulgaris in early adolescent boys: correlations with pubertal maturation and age. Arch Dermatol, 1991,127:210-216.
3 曾燕，卢建，张金山，等.雄激素对正常男性及一睾丸女性化综合征患者外阴部皮肤成纤维细胞雄激素受体的调节. 中国病理生理杂志, 1994,10:276-279.
4 赵瑛，刘志民，邵福源，等.人外周血白细胞雄激素受体的鉴定及意义. 中华核医学杂志, 1995,15:51-52.
(收稿：1997-11-11 修回：1998-09-21), 百拇医药