风湿性心脏病心肌组织fas基因的表达意义
作者：刘金成 杨景学
单位：刘金成(第四军医大学西京医院心血管外科中心,陕西 西安 710033)；杨景学(第四军医大学西京医院心血管外科中心,陕西 西安 710033)
关键词：fas；风湿性心脏病；凋亡；免疫组织化学；心功能不全
第四军医大学学报000554 中图号：R541.23;R392.31 文献标识码：A
文章编号：1000-2790(2000)05-0620-01
0 引言
fas基因是Ⅰ型膜蛋白，属TNF受体家族成员，许多细胞表达fas，而fas配体(fasL)只在激活的T淋巴细胞表达，fasL是Ⅱ型膜蛋白，属TNF受体家族成员，当fasL与fas结合时，fas可向细胞传递“死亡信号”，数小时内细胞凋亡[1]，我们运用免疫组织化学方法检测对fas基因在风湿性心脏病中的表达情况进行了研究.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 风湿性心脏病心肌组织30例和先天性心脏病心功能不全心肌组织20例取自于我科手术患者病检标本. 其中风湿性心脏病患者6例术前检查抗ASO>500，血沉平均35 mm.h-1，视为风湿活动期患者. 余24例为风湿活动静止期患者，正常对照标本20例取自死于非心脏病患者病检标本.兔抗人fas多克隆抗体为美国Santa Cruz Biotechnology Inc产品. 抗体工作浓度为1∶100. SABC试剂盒为武汉博士德公司产品.
1.2 方法 标本经100 mL.L-1福尔马林固定，常规石蜡包埋，连续切片，厚5 μm.采用链酶亲和素-生物素-过氧化物酶法(SABC法)进行免疫组织化学染色.染色中阳性对照采用肝癌组织阳性切片，同时设相同稀释度兔血清及PBS做替代对照.
, 百拇医药 结果 Fas蛋白阳性物质呈棕黄色颗粒状，主要位于阳性标本的心肌细胞胞质中. 风湿性心脏病心肌组织30例阳性24例，阳性率80%，其中6例风湿活动期患者心肌组织均呈强阳性，心肌细胞间大量淋巴细胞侵润. 先天性心脏病心功能不全心肌组织20例阳性10例，阳性率50%；用于对照的20例正常心肌组织中阳性4例，阳性率20%；Fas的表达在风湿性心脏病心肌组织与先天性心脏病心功能不全组和正常对照心肌组织比较均有显著差异(P<0.05)；先天性心脏病心功能不全组和正常对照心肌组织比较也有统计学差异(P<0.05). 在风湿性心脏病组24例风湿活动静止期患者Fas表达阳性18例，与先天性心脏病心功能不全组20例患者10例阳性比较无差异.
3 讨论
实验表明fas基因在正常心肌组织中亦有表达，约20%左右. 在风湿性心脏病心肌组织fas基因呈过表达，两者间差距有显著统计学意义.6例风湿性心脏病活动期患者心肌组织fas基因均呈强阳性，弥漫性分布为主，心肌组织间大量淋巴细胞侵润，与静止期心肌反应明显不同，提示在风湿性心脏病活动期，致病因子引起心肌细胞fas基因表达，与淋巴细胞fasL结合介导细胞凋亡这一途径增强.而在风湿性心脏病静止期与先天性心脏病心功能不全组fas基因表达基本一致，主要在心肌纤维化及心肌细胞明显肥大部位表达显著增强，提示可能与缺血缺氧和心肌负荷增强有关.本实验说明风湿性心脏病发病病理机制中有fas基因介导的细胞凋亡机制参与，风湿活动期这一机制显著增强.从一个侧面可以作为解释风湿性心脏病活动期手术后心功能不稳定的原因. 风湿性心脏病静止期与先天性心脏病心功能不全组fas基因表达基本一致，可能与缺氧和心肌负荷增强有关. 由于凋亡是一个非常复杂的过程且有一组广泛的基因产物参与这一过程的所有阶段，进一步作其他相关凋亡基因的检测是必要的，详细阐明凋亡基因在风湿性心脏病中的表达及意义对理论研究和临床治疗均有重要意义.
作者简介：刘金成(1969-)， 男(汉族)， 内蒙古满洲里市. 硕士. Tel.(029)25331022
参考文献:
[1] 卫立辛， 钱其军， 吴梦超. fas介导的免疫学研究进展[J]. 国外医学病理科学与临床分册，1997;17(4)：289-291.
收稿日期：2000-01-19； 修回日期：2000-01-31, 百拇医药
单位：刘金成(第四军医大学西京医院心血管外科中心,陕西 西安 710033)；杨景学(第四军医大学西京医院心血管外科中心,陕西 西安 710033)
关键词：fas；风湿性心脏病；凋亡；免疫组织化学；心功能不全
第四军医大学学报000554 中图号：R541.23;R392.31 文献标识码：A
文章编号：1000-2790(2000)05-0620-01
0 引言
fas基因是Ⅰ型膜蛋白，属TNF受体家族成员，许多细胞表达fas，而fas配体(fasL)只在激活的T淋巴细胞表达，fasL是Ⅱ型膜蛋白，属TNF受体家族成员，当fasL与fas结合时，fas可向细胞传递“死亡信号”，数小时内细胞凋亡[1]，我们运用免疫组织化学方法检测对fas基因在风湿性心脏病中的表达情况进行了研究.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 风湿性心脏病心肌组织30例和先天性心脏病心功能不全心肌组织20例取自于我科手术患者病检标本. 其中风湿性心脏病患者6例术前检查抗ASO>500，血沉平均35 mm.h-1，视为风湿活动期患者. 余24例为风湿活动静止期患者，正常对照标本20例取自死于非心脏病患者病检标本.兔抗人fas多克隆抗体为美国Santa Cruz Biotechnology Inc产品. 抗体工作浓度为1∶100. SABC试剂盒为武汉博士德公司产品.
1.2 方法 标本经100 mL.L-1福尔马林固定，常规石蜡包埋，连续切片，厚5 μm.采用链酶亲和素-生物素-过氧化物酶法(SABC法)进行免疫组织化学染色.染色中阳性对照采用肝癌组织阳性切片，同时设相同稀释度兔血清及PBS做替代对照.
, 百拇医药 结果 Fas蛋白阳性物质呈棕黄色颗粒状，主要位于阳性标本的心肌细胞胞质中. 风湿性心脏病心肌组织30例阳性24例，阳性率80%，其中6例风湿活动期患者心肌组织均呈强阳性，心肌细胞间大量淋巴细胞侵润. 先天性心脏病心功能不全心肌组织20例阳性10例，阳性率50%；用于对照的20例正常心肌组织中阳性4例，阳性率20%；Fas的表达在风湿性心脏病心肌组织与先天性心脏病心功能不全组和正常对照心肌组织比较均有显著差异(P<0.05)；先天性心脏病心功能不全组和正常对照心肌组织比较也有统计学差异(P<0.05). 在风湿性心脏病组24例风湿活动静止期患者Fas表达阳性18例，与先天性心脏病心功能不全组20例患者10例阳性比较无差异.
3 讨论
实验表明fas基因在正常心肌组织中亦有表达，约20%左右. 在风湿性心脏病心肌组织fas基因呈过表达，两者间差距有显著统计学意义.6例风湿性心脏病活动期患者心肌组织fas基因均呈强阳性，弥漫性分布为主，心肌组织间大量淋巴细胞侵润，与静止期心肌反应明显不同，提示在风湿性心脏病活动期，致病因子引起心肌细胞fas基因表达，与淋巴细胞fasL结合介导细胞凋亡这一途径增强.而在风湿性心脏病静止期与先天性心脏病心功能不全组fas基因表达基本一致，主要在心肌纤维化及心肌细胞明显肥大部位表达显著增强，提示可能与缺血缺氧和心肌负荷增强有关.本实验说明风湿性心脏病发病病理机制中有fas基因介导的细胞凋亡机制参与，风湿活动期这一机制显著增强.从一个侧面可以作为解释风湿性心脏病活动期手术后心功能不稳定的原因. 风湿性心脏病静止期与先天性心脏病心功能不全组fas基因表达基本一致，可能与缺氧和心肌负荷增强有关. 由于凋亡是一个非常复杂的过程且有一组广泛的基因产物参与这一过程的所有阶段，进一步作其他相关凋亡基因的检测是必要的，详细阐明凋亡基因在风湿性心脏病中的表达及意义对理论研究和临床治疗均有重要意义.
作者简介：刘金成(1969-)， 男(汉族)， 内蒙古满洲里市. 硕士. Tel.(029)25331022
参考文献:
[1] 卫立辛， 钱其军， 吴梦超. fas介导的免疫学研究进展[J]. 国外医学病理科学与临床分册，1997;17(4)：289-291.
收稿日期：2000-01-19； 修回日期：2000-01-31, 百拇医药