ADA、IFN-r测定对结核性和癌性胸液鉴别诊断的研究*
作者：朱晓平 张 锦 张建荣 潘月英 郑西卫 吴振裘 许德风 李秀忠 周 玮
单位：朱晓平 张 锦 郑西卫 吴振裘 许德风 李秀忠 周 玮(宁夏医学院附属医院呼吸内科 750004)；张建荣 潘月英(宁夏医学院附属医院中心实验室 750004)
关键词：结核性；胸液；癌性；胸液；诊断；鉴别
宁夏医学杂志990702 【摘要】 目的 探讨ADA、IFN-r测定对诊断结核性、癌性胸液的价值。方法 对67例各种胸液病人同步测定血清、胸水ADA(腺苷脱氨酶)IFN-r(干扰素-r)水平；ADA采用改进的Giusti法，IFN-r采用双抗体夹心Elisa法。结果 结核性胸液组PADA、P/SADA、PIFN-r与癌性胸液组有极显著性差异(P<0.001)；三项指标对诊断结核性胸膜炎的敏感度分别是88%、92%、96%，特异度分别是85.71%、88.09%、98%；三项指标联合测定对诊断结核性胸液的特异度是99.61%。结论 IFN-r对诊断结核性胸液是一个很有价值的生化指标，若联合ADA测定则诊断结核性、癌性胸液意义更大。
, 百拇医药
The study of detecting adenosine deaminase interferon gamma in
differentiating tuberculous pleural effusion
and neoplastic pleural effusion
Zhu Xiaoping，Zhang Jin，Wu Zhenqui，et al.
(Affiliated Hosp.，Ningxia.Coll.)
【Abstract】 Objectives To study the roles of adenosine deaminase (ADA) and interferon Gamma (IFN-r) for diagnosis of tuberculous and neoplastic exudates.Methods The activity of ADA and IFN-r in the serum and the pleural fluid of from 67 patients were detected Using the method of Giusti and of a solid-phase enzymeimmunoassay employing the multiple antibody sandwich principle respectively.Results The mean ADA and IFN-r concentration of the tuberculous exudates differed significantly from those of the neoplastic exudates (P<0.001).The mean pleural serum ADA ratio (P/S ADA) of the tubercuclous exudates differed significantly from those of the neoplastic exudates.ADA (With a diagnostic threshold of 40U/L1)IFN-r (140pg/ml) and P/SADA (1.5) had sensitivities for tuberculousis of 88%、92% and 96% respectively，Specificites of 85.71%、88.09% and 98%.These three paremeters Combined had specificites for tuberculous exudates of 99.61%.Conclusions IFN-r is a useful paremeters for diagnosis of tuberculous exudates.It shows important significance to combine ADA with IFN-r for diagnosis of the tuberculous and neoplastic exudates
, 百拇医药
【Key words】 Tubercuclous exudates；Neoplastic exudates；Diagnosis，differential
结核和肿瘤是胸腔积液的两大常见原因，但当缺乏病理学依据时，二者的鉴别困难，临床上20～30%的胸腔积液不能确定其因〔1〕。近年来有作者报道腺苷脱氨酶(ADA)、溶菌酶(LYS)、干扰素-r(IFN-r)对早期诊断结核性胸液的价值〔2〕，但国内对ADA、IFN-r联合测定报道的文献较少。我们自1997年7月～1998年5月，同步测定了67例胸腔积液患者的血清(S)、胸液(P)ADA和IFN-r的水平，以探讨二者在诊断结核性胸液、癌性胸液中的价值，及指标之间的相关性。
1 对象和方法
1.1 病例选择：恶性胸液组：共33例，男18例，女15例；年龄23～79岁，平均56.51±13.18。肺癌30例，其中腺癌17例，鳞癌6例，小细胞未分化癌5例，低分化未定型2例；胸膜间皮瘤3例。所有病例均经胸水脱落细胞、痰检、胸膜活检和纤支镜等病理证实。
, 百拇医药
结核性胸液组：共25例，男14例，女11例；年龄20～77岁，平均44.18±18.32岁。其中16例伴乏力、盗汗、发热；10例胸片、胸部CT有肺部结核病灶；1例痰结核菌阳性。25例抗结核及穿刺抽液治疗5～19日胸水吸收。
其它胸液组：共9例，漏出液4例(包括心功能不全，肝硬化，缩窄性心包炎等)、脓胸2例、类风湿性关节炎1例、肺部感染2例。
正常对照组：20例，年龄20～60岁。
1.2 测定方法：同步采集每例患者双份血清及胸水标本各2.7ml，加入去内毒素、去热源的试管中，同时加入EDTA*2Na 0.3ml于3000转/分离心10分钟，取上清液依序编号贮于-20.0℃待检。
ADA测定严格按照试剂盒提供的氨试剂法，试剂盒由温州伊利康公司提供。IFN-r的测定亦为试剂盒提供的双抗体夹心Elisa法，试剂盒由深圳晶美生物工程公司提供。
, 百拇医药
1.3 统计学方法：数据值以平均值±标准差(
±s)表示。样本均数的比较用t检验，方差分析。率的检验用χ2检验，诊断指数间的比较用u检验，二个变量间的关系计算相关系数为r。
2 结果
2.1 各组外周血清ADA、IFN-r水平(见表1)
表1 各组外周血清ADA、IFN-r水平的比较
正常人
恶性胸液组
结核性胸液组
其它组
, http://www.100md.com SADA(U/L)
13.22±7.61
17.91±11.04
22.08±11.86
20.47±8.43
SIFN-r(pg/ml)
22.71±19.96
34.46±19.06
47.44±16.35
30.06±12.45
经方差分析，FADA=0.65，FINF-r=1.489，F均<0.05；四组病人外周血清ADA、IFNr水平无显著差异。
, http://www.100md.com
2.2 恶性胸液组、结核性胸液组PADA、P/SADA、PIFN-r水平(见表2)
表2 两组PADA、P/S ADA、IFN-r水平的比较
例数
PADA(U/L)
P/S ADA
IFN-r(pg/ml)
恶性胸液组
33
16.56±8.20
0.87±0.29
33.95±23.96
, http://www.100md.com
结核性胸液组
25
54.71±9.46
2.65±0.82
306.81±117.96
P
<0.001
<0.001
<0.001
2.3 三组病人PADA、PIFN-r测定值(见附图)
三组患者ADA测定水平(u/l)
三组患者IFN-Γ测定水平
, 百拇医药
附图 三组病人PADA、PIFN-r的测定值
图中显示，25例结核性胸液有22例PADA>40U/L，33例恶性胸液中30例及4例漏出液、2例肺部感染者PADA水平均小于此值，而2例脓胸、1例类风湿关节炎则远高于此值。24例结核性胸液PIFN-r>140pg/ml、32例恶性胸液、其它组胸液测定值均小于此值。
2.4 参照Luis Valdes〔2〕所提出，IFN-r以≥140pg/ml、ADA≥40U/L、P/s ADA1.5阳性界值。由此计算出三者对诊断结核性胸液灵敏度，特异度及诊断指数见表3。
表3 三项指标对结核性胸液的灵敏度、诊断指数、特异度、诊断指数的比较 项目
截断值
阳性数
, 百拇医药
灵敏度%
特异度%
诊断指数%
PADA
≥40U/L
32
88
85.71
79
P/SADA
≥1.5
23
92
, http://www.100md.com
88.09
81.17
PIFN-r
≥140pg/ml
24
96
98
92.97
PADA+P/SADA+PIFN-r(串联实验)
84.48
99.61
经t、u检验，PIFN-r对诊断结核性胸液的特异度、诊断指数都优于ADA。各指标间相关性分析：PADA和SADA间相关系数r=0.7038，P<0.05，二者间存在显著相关关系；PADA和IFN-r间相关系数r=0.1397，P>0.05，二者间无相关关系。
, http://www.100md.com
3 讨论
ADA是嘌呤代谢中的重要酶类，在人体的多数组织中发现，以淋巴细胞中活性最高，T淋巴细胞比B淋巴细胞更高。结核性胸膜炎是胸膜对结核杆菌这种外来抗原产生的强烈细胞免疫反应的结果。其中T淋巴细胞在免疫应答中起重要作用，ADA则被认为与T淋巴细胞的分化增殖密切相关〔2〕。自从Paris最先提出ADA对诊断结核性胸液的价值后，国内外很多研究证实了这一点〔3～5〕。也有作者将ADA与LYS进行比较研究，认为其诊断价值优于后者〔6〕。我们的研究表明了以PADA≥40.0U/L为阳性界值，则诊断结核性胸液的敏感性和特异性分别为88.5%和85.71%。我们体会，ADA实验方法简单、快捷、价廉，是诊断结核性胸液的一个很实用的指标。
IFN-r由辅助T细胞产生，结核性胸液中的淋巴细胞受结核菌细胞壁蛋白刺激产生IFN-r，IFN-r激活巨噬细胞并增强对细菌细胞的杀伤力。在局部抗分支杆菌感染的防御机制中起重要作用。我们研究显示大多数外周血中IFN-r水平很低，而结核性胸液中呈现高水平，较宽的范围。相反，在恶性胸液中呈低水平。这与近年来的研究结论一致〔2，7〕。此参数较PADA有更高的特异性(为97.61%，较PADA诊断结核性胸液的特异度85.71%，经χ2检验有显著差异)，且与ADA相比，它与癌性胸液有较少重叠。本次研究3例脓胸，1例类风湿显示高水平的ADA，而IFN-r呈现低水平，表明IFN-r对此有鉴别诊断价值。这一点仍然在继续研究中，包括对淋巴瘤胸液两指标的观察。
, 百拇医药
有报道〔8〕，PIFN-r活性测定较PADA更有助于恶性胸膜间皮瘤的诊断。本资料中3例胸膜间皮瘤ADA和IFN-r均呈低水平，结果与上述作者观察不同，我们仍在观察研究中。
迄今为止研究认为，在所有的诊断结核性胸液的参数中，尚未发现有优于ADA、IFN-r这两项指标。我们在实验研究中，以及临床上对良、恶性胸液很难鉴别的个别病例追踪中发现，若以ADA、P/SADA、PIFN-r三项指标联合测定，对诊断结核性胸液，帮助诊断癌性胸液的意义更大。
(本文承蒙北京医科大学何权嬴教授指导，特此诚挚感谢!)
*宁夏自治区卫生厅科研基金赞助项目
参考文献
1 Leslie WK，Kinasewitz G.Clinical characteristics of patient with nonspecific pleuritis.Chest，1988，94：603～8
, 百拇医药
2 Luis Valdes，Esther San Jos′e，David Alvarez，et al.Diagnosis of Tuberculous pleurisy Using the Biologic Parameters Adenosine Deaminase，Lysozyme，and Interferon Gamma.Chest，1993，103：458～465
3 Jos′e Z.Banales，Pedro R.Pineda，J.Mark Fitzgerald，et al.Adenosine Deaminase in the Diagnosis of Tuberculons Plenral Effnsions.Chest，1991，99：355～357
4 黄信刚，周淮英，张宇，等.结核、癌性胸膜炎胸水中SIL-2R、ADA水平及相关性研究.中国免疫学杂志，1994，10(6)：369～370
, 百拇医药
5 王昆润摘.测定胸腔积液的ADA辅助诊断结核性胸膜炎.国外医学呼吸分册，1995，15(4)：215
6 San Jos′e E，Alvarez D，Valle JM，et al.Acomparative Evaluation of Neopterin；Lysozyme and Adenosine Deaminase in Pleural Fluid as Markers of Tuberculous Pleurisy.Chest，1996，110：515
7 Ynh-min Chen，Wen-kuang Yang，jacqueline Whang-peng，et al.Elevation of Interleuki-10 leves in Malignant Plental Effusion.Chest，1996，110：433
8 李为民，林震勋.胸液中r-干扰素的测定及诱生能力观察.中华结核和呼吸杂志，1995，18(2)：95
责编：杨自革
(收稿：1998—11—06), 百拇医药
单位：朱晓平 张 锦 郑西卫 吴振裘 许德风 李秀忠 周 玮(宁夏医学院附属医院呼吸内科 750004)；张建荣 潘月英(宁夏医学院附属医院中心实验室 750004)
关键词：结核性；胸液；癌性；胸液；诊断；鉴别
宁夏医学杂志990702 【摘要】 目的 探讨ADA、IFN-r测定对诊断结核性、癌性胸液的价值。方法 对67例各种胸液病人同步测定血清、胸水ADA(腺苷脱氨酶)IFN-r(干扰素-r)水平；ADA采用改进的Giusti法，IFN-r采用双抗体夹心Elisa法。结果 结核性胸液组PADA、P/SADA、PIFN-r与癌性胸液组有极显著性差异(P<0.001)；三项指标对诊断结核性胸膜炎的敏感度分别是88%、92%、96%，特异度分别是85.71%、88.09%、98%；三项指标联合测定对诊断结核性胸液的特异度是99.61%。结论 IFN-r对诊断结核性胸液是一个很有价值的生化指标，若联合ADA测定则诊断结核性、癌性胸液意义更大。
, 百拇医药
The study of detecting adenosine deaminase interferon gamma in
differentiating tuberculous pleural effusion
and neoplastic pleural effusion
Zhu Xiaoping，Zhang Jin，Wu Zhenqui，et al.
(Affiliated Hosp.，Ningxia.Coll.)
【Abstract】 Objectives To study the roles of adenosine deaminase (ADA) and interferon Gamma (IFN-r) for diagnosis of tuberculous and neoplastic exudates.Methods The activity of ADA and IFN-r in the serum and the pleural fluid of from 67 patients were detected Using the method of Giusti and of a solid-phase enzymeimmunoassay employing the multiple antibody sandwich principle respectively.Results The mean ADA and IFN-r concentration of the tuberculous exudates differed significantly from those of the neoplastic exudates (P<0.001).The mean pleural serum ADA ratio (P/S ADA) of the tubercuclous exudates differed significantly from those of the neoplastic exudates.ADA (With a diagnostic threshold of 40U/L1)IFN-r (140pg/ml) and P/SADA (1.5) had sensitivities for tuberculousis of 88%、92% and 96% respectively，Specificites of 85.71%、88.09% and 98%.These three paremeters Combined had specificites for tuberculous exudates of 99.61%.Conclusions IFN-r is a useful paremeters for diagnosis of tuberculous exudates.It shows important significance to combine ADA with IFN-r for diagnosis of the tuberculous and neoplastic exudates
, 百拇医药
【Key words】 Tubercuclous exudates；Neoplastic exudates；Diagnosis，differential
结核和肿瘤是胸腔积液的两大常见原因，但当缺乏病理学依据时，二者的鉴别困难，临床上20～30%的胸腔积液不能确定其因〔1〕。近年来有作者报道腺苷脱氨酶(ADA)、溶菌酶(LYS)、干扰素-r(IFN-r)对早期诊断结核性胸液的价值〔2〕，但国内对ADA、IFN-r联合测定报道的文献较少。我们自1997年7月～1998年5月，同步测定了67例胸腔积液患者的血清(S)、胸液(P)ADA和IFN-r的水平，以探讨二者在诊断结核性胸液、癌性胸液中的价值，及指标之间的相关性。
1 对象和方法
1.1 病例选择：恶性胸液组：共33例，男18例，女15例；年龄23～79岁，平均56.51±13.18。肺癌30例，其中腺癌17例，鳞癌6例，小细胞未分化癌5例，低分化未定型2例；胸膜间皮瘤3例。所有病例均经胸水脱落细胞、痰检、胸膜活检和纤支镜等病理证实。
, 百拇医药
结核性胸液组：共25例，男14例，女11例；年龄20～77岁，平均44.18±18.32岁。其中16例伴乏力、盗汗、发热；10例胸片、胸部CT有肺部结核病灶；1例痰结核菌阳性。25例抗结核及穿刺抽液治疗5～19日胸水吸收。
其它胸液组：共9例，漏出液4例(包括心功能不全，肝硬化，缩窄性心包炎等)、脓胸2例、类风湿性关节炎1例、肺部感染2例。
正常对照组：20例，年龄20～60岁。
1.2 测定方法：同步采集每例患者双份血清及胸水标本各2.7ml，加入去内毒素、去热源的试管中，同时加入EDTA*2Na 0.3ml于3000转/分离心10分钟，取上清液依序编号贮于-20.0℃待检。
ADA测定严格按照试剂盒提供的氨试剂法，试剂盒由温州伊利康公司提供。IFN-r的测定亦为试剂盒提供的双抗体夹心Elisa法，试剂盒由深圳晶美生物工程公司提供。
, 百拇医药
1.3 统计学方法：数据值以平均值±标准差(
±s)表示。样本均数的比较用t检验，方差分析。率的检验用χ2检验，诊断指数间的比较用u检验，二个变量间的关系计算相关系数为r。2 结果
2.1 各组外周血清ADA、IFN-r水平(见表1)
表1 各组外周血清ADA、IFN-r水平的比较
正常人
恶性胸液组
结核性胸液组
其它组
, http://www.100md.com SADA(U/L)
13.22±7.61
17.91±11.04
22.08±11.86
20.47±8.43
SIFN-r(pg/ml)
22.71±19.96
34.46±19.06
47.44±16.35
30.06±12.45
经方差分析，FADA=0.65，FINF-r=1.489，F均<0.05；四组病人外周血清ADA、IFNr水平无显著差异。
, http://www.100md.com
2.2 恶性胸液组、结核性胸液组PADA、P/SADA、PIFN-r水平(见表2)
表2 两组PADA、P/S ADA、IFN-r水平的比较
例数
PADA(U/L)
P/S ADA
IFN-r(pg/ml)
恶性胸液组
33
16.56±8.20
0.87±0.29
33.95±23.96
, http://www.100md.com
结核性胸液组
25
54.71±9.46
2.65±0.82
306.81±117.96
P
<0.001
<0.001
<0.001
2.3 三组病人PADA、PIFN-r测定值(见附图)
三组患者ADA测定水平(u/l)三组患者IFN-Γ测定水平, 百拇医药
附图 三组病人PADA、PIFN-r的测定值
图中显示，25例结核性胸液有22例PADA>40U/L，33例恶性胸液中30例及4例漏出液、2例肺部感染者PADA水平均小于此值，而2例脓胸、1例类风湿关节炎则远高于此值。24例结核性胸液PIFN-r>140pg/ml、32例恶性胸液、其它组胸液测定值均小于此值。
2.4 参照Luis Valdes〔2〕所提出，IFN-r以≥140pg/ml、ADA≥40U/L、P/s ADA1.5阳性界值。由此计算出三者对诊断结核性胸液灵敏度，特异度及诊断指数见表3。
表3 三项指标对结核性胸液的灵敏度、诊断指数、特异度、诊断指数的比较 项目
截断值
阳性数
, 百拇医药
灵敏度%
特异度%
诊断指数%
PADA
≥40U/L
32
88
85.71
79
P/SADA
≥1.5
23
92
, http://www.100md.com
88.09
81.17
PIFN-r
≥140pg/ml
24
96
98
92.97
PADA+P/SADA+PIFN-r(串联实验)
84.48
99.61
经t、u检验，PIFN-r对诊断结核性胸液的特异度、诊断指数都优于ADA。各指标间相关性分析：PADA和SADA间相关系数r=0.7038，P<0.05，二者间存在显著相关关系；PADA和IFN-r间相关系数r=0.1397，P>0.05，二者间无相关关系。
, http://www.100md.com
3 讨论
ADA是嘌呤代谢中的重要酶类，在人体的多数组织中发现，以淋巴细胞中活性最高，T淋巴细胞比B淋巴细胞更高。结核性胸膜炎是胸膜对结核杆菌这种外来抗原产生的强烈细胞免疫反应的结果。其中T淋巴细胞在免疫应答中起重要作用，ADA则被认为与T淋巴细胞的分化增殖密切相关〔2〕。自从Paris最先提出ADA对诊断结核性胸液的价值后，国内外很多研究证实了这一点〔3～5〕。也有作者将ADA与LYS进行比较研究，认为其诊断价值优于后者〔6〕。我们的研究表明了以PADA≥40.0U/L为阳性界值，则诊断结核性胸液的敏感性和特异性分别为88.5%和85.71%。我们体会，ADA实验方法简单、快捷、价廉，是诊断结核性胸液的一个很实用的指标。
IFN-r由辅助T细胞产生，结核性胸液中的淋巴细胞受结核菌细胞壁蛋白刺激产生IFN-r，IFN-r激活巨噬细胞并增强对细菌细胞的杀伤力。在局部抗分支杆菌感染的防御机制中起重要作用。我们研究显示大多数外周血中IFN-r水平很低，而结核性胸液中呈现高水平，较宽的范围。相反，在恶性胸液中呈低水平。这与近年来的研究结论一致〔2，7〕。此参数较PADA有更高的特异性(为97.61%，较PADA诊断结核性胸液的特异度85.71%，经χ2检验有显著差异)，且与ADA相比，它与癌性胸液有较少重叠。本次研究3例脓胸，1例类风湿显示高水平的ADA，而IFN-r呈现低水平，表明IFN-r对此有鉴别诊断价值。这一点仍然在继续研究中，包括对淋巴瘤胸液两指标的观察。
, 百拇医药
有报道〔8〕，PIFN-r活性测定较PADA更有助于恶性胸膜间皮瘤的诊断。本资料中3例胸膜间皮瘤ADA和IFN-r均呈低水平，结果与上述作者观察不同，我们仍在观察研究中。
迄今为止研究认为，在所有的诊断结核性胸液的参数中，尚未发现有优于ADA、IFN-r这两项指标。我们在实验研究中，以及临床上对良、恶性胸液很难鉴别的个别病例追踪中发现，若以ADA、P/SADA、PIFN-r三项指标联合测定，对诊断结核性胸液，帮助诊断癌性胸液的意义更大。
(本文承蒙北京医科大学何权嬴教授指导，特此诚挚感谢!)
*宁夏自治区卫生厅科研基金赞助项目
参考文献
1 Leslie WK，Kinasewitz G.Clinical characteristics of patient with nonspecific pleuritis.Chest，1988，94：603～8
, 百拇医药
2 Luis Valdes，Esther San Jos′e，David Alvarez，et al.Diagnosis of Tuberculous pleurisy Using the Biologic Parameters Adenosine Deaminase，Lysozyme，and Interferon Gamma.Chest，1993，103：458～465
3 Jos′e Z.Banales，Pedro R.Pineda，J.Mark Fitzgerald，et al.Adenosine Deaminase in the Diagnosis of Tuberculons Plenral Effnsions.Chest，1991，99：355～357
4 黄信刚，周淮英，张宇，等.结核、癌性胸膜炎胸水中SIL-2R、ADA水平及相关性研究.中国免疫学杂志，1994，10(6)：369～370
, 百拇医药
5 王昆润摘.测定胸腔积液的ADA辅助诊断结核性胸膜炎.国外医学呼吸分册，1995，15(4)：215
6 San Jos′e E，Alvarez D，Valle JM，et al.Acomparative Evaluation of Neopterin；Lysozyme and Adenosine Deaminase in Pleural Fluid as Markers of Tuberculous Pleurisy.Chest，1996，110：515
7 Ynh-min Chen，Wen-kuang Yang，jacqueline Whang-peng，et al.Elevation of Interleuki-10 leves in Malignant Plental Effusion.Chest，1996，110：433
8 李为民，林震勋.胸液中r-干扰素的测定及诱生能力观察.中华结核和呼吸杂志，1995，18(2)：95
责编：杨自革
(收稿：1998—11—06), 百拇医药